胺類藥物分析

關于胺類藥物分析第1頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三分類按化學結構可分為：

*脂肪胺類：*芳胺類:氨基直接與苯環(huán)相連.包括酰胺類、對氨基苯甲酸酯類。*芳烴胺類:指氨基在烴基側鏈上，包括苯乙胺類.芳氧丙醇胺類季銨鹽類磺酰胺類第2頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三一、對氨基苯甲酸酯類具有對氨基苯甲酸酯基本結構。具有游離的芳伯氨基。1．結構特點：第一節(jié)芳胺類藥物的分析第3頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三代表藥物有：

鹽酸普魯卡因苯佐卡因鹽酸丁卡因第4頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三2．性質：①

具有芳香第一胺結構，發(fā)生重氮化或重氮化-偶合反應，或與芳醛縮和；生成希夫堿；易氧化變色的特性（鹽酸丁卡因除外）②

堿性具有脂烴胺側鏈為叔胺氮原子—弱堿性（非水溶劑滴定），能與生物堿沉淀試劑發(fā)生反應。第5頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三③

具有酯的結構，容易水解。④

紫外吸收具有苯環(huán)結構，有紫外吸收。第6頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三1.結構特點：

苯胺酰基衍生物，酰胺基鄰位或對位有取代基。二、酰胺類第7頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三代表藥物有：

對乙酰氨基酚鹽酸利多卡因第8頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三2．性質：※利多卡因，酰胺基鄰位上有兩個甲基，有很大空間位阻，水解較為困難。（利多卡因在80%的硫酸溶液中加熱才能水解）①

水解后可發(fā)生重氮化反應具有酰胺結構—共性。水解成芳伯氨基，發(fā)生重氮化偶合反應。第9頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三③

堿性利多卡因側鏈中具有叔氨N原子，顯弱堿性，能與酸成鹽，且能與生物堿沉淀試劑或重金屬離子反應。②

與FeCl3反應具有酚羥基或水解后能產生酚羥基（對乙酰氨基酚），可與FeCl3作用呈色。④

紫外吸收具有苯環(huán)結構，有紫外吸收。第10頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三三、鑒別反應(一)、重氮化-偶合反應具有芳伯氨基藥物，如鹽酸普魯卡因等，在酸性溶液中與NaNO2發(fā)生重氮化反應，再與堿性-萘酚偶合產生紅色偶氮化合物。具有潛在芳伯氨基，如對乙酰氨基酚，水解后可得芳伯氨基，能發(fā)生類似反應。第11頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三※鹽酸丁卡因（芳香第二胺結構）與NaNO2作用生成乳白色N-亞硝基化合物沉淀。第12頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三(二)、三氯化鐵反應具有酚羥基（如對乙酰氨基酚），可與FeCl3作用顯藍紫色。第13頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三(三)、與重金屬離子反應(1)．與銅離子的反應(2)．與鈷鹽反應第14頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三(3)．羥肟酸鐵的反應具有酰胺結構，被H2O2氧化成羥肟酸，羥肟酸與FeCl3反應生成紫紅色羥肟酸鐵，隨即變?yōu)榘底厣磷睾谏Ｈ琨}酸普魯卡因胺。具有酰胺結構的藥物羥肟酸羥肟酸鐵第15頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三(四)、水解產物的反應（對氨基苯甲酸酯類）(1)．苯佐卡因的鑒別試驗(4)與汞離子反應:鹽酸利多卡因+硝酸汞黃色；對氨基苯甲酸酯顯紅色或橙黃色，以區(qū)別第16頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三(2).鹽酸普魯卡因的鑒別試驗

第17頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三(五)紫外特征吸收光譜(六)紅外吸收光譜第18頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三四.特殊雜質檢查(一)對乙酰氨基酚中的特殊雜質檢查

對乙酰氨基酚中除檢查酸度、氯化物、硫酸鹽、重金屬、水分、熾灼殘渣等一般雜質外，還需要檢查：乙醇溶液的澄清度與顏色、有關物質（對氯乙酰苯胺）、對氨基酚等特殊雜質。第19頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三對乙酰氨基酚以對硝基氯苯為原料合成。第20頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三(1)．乙醇溶液的澄清度與顏色對乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有顏色，則說明有雜質存在。生產工藝用鐵粉作還原劑，如帶入成品，則導致對乙酰氨基酚乙醇溶液產生渾濁。中間體對氨基酚有色氧化物在乙醇中顯橙紅色或棕色。第21頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三（2）有關物質（對氯乙酰苯胺）副反應副副反應對硝基氯苯為原料合成對乙酰氨基酚時，如發(fā)生這樣的副反應就能夠引入對氯乙酰苯胺。副反應第22頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三TLC法①

樣品液②

對照液對氯乙酰苯胺乙醚溶液（50g/ml）③

分離系統(tǒng)硅膠GF254氯仿-丙酮-甲苯（13∶5∶2）第23頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三⑥

限量:④點樣量樣品液：200l點于硅膠GF254薄層板上對照液：40l⑤

判斷在254nm波長紫外燈下觀察，供試品與對照品主斑點Rf值相同的斑點比較,不得超過其大小與顏色。第24頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三(3)．對氨基酚制備中乙?；煌耆蛸A存不當發(fā)生水解都能引入對氨基酚☆檢查原理：對氨基酚在堿性條件下，與亞硝基鐵氰化鈉作用，生成藍色絡合物，與對照液比較判斷對氨基酚的限量。第25頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三檢查方法：限量：0.005%(二)鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查第26頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三(二)鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查方法：TLC

色譜條件：固定相：硅膠H展開劑：苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1:1:4）顯色劑：對二甲氨基苯甲醛第27頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三五、含量測定1．亞硝酸鈉滴定法①

原理具有芳伯氨基藥物，在酸性條件下與NaNO2反應生成重氮鹽，根據消耗NaNO2量，計算出含量。潛在芳伯氨基藥物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或還原，得芳伯氨基后，再進行測定。第28頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三第29頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三②

操作中的主要條件＊重氮化反應屬于分子反應＊滴定液NaNO2及反應生成的重氮鹽都不穩(wěn)定＊反應速度受多種因素影響第30頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三第一步反應速度比較慢，而后兩步反應速度則比較快。?。磻俣扰c藥物結構的關系重氮化反應機制：第31頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三a.當苯環(huán)上特別是氨基鄰位或對位上有吸電基時,如吸電基通過誘導效應使氨基上電子云密度降低，從而堿性降低，游離芳伯胺濃度增大，所以反應速度就快。等可使氨基的堿性降低，重氮化反應速度加快。第32頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三b.

當在苯環(huán)上有供電基時，則使反應速度降低。如等。供電基能使氨基堿性增強，這樣氨基成鹽的機會就增大，游離芳伯胺的濃度就減小，所以反應速度就慢。第33頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三ⅱ．反應速度與酸及酸度的關系a.

酸的種類重氮化反應在HBr、HCl、H2SO4中反應速度是HBr＞HCl＞H2SO4

K1比K2大300倍

第34頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三用HBr時，生成NOBr量大，反應速度快。但HBr價格貴，用鹽酸代替，為加快反應速度，需加入KBr（催化劑）。產生HBr與HNO2反應，可生成大量NOBr，加快反應速度。第35頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三b.

鹽酸的用量理論上:芳胺∶鹽酸＝1∶2mol

實際上:芳胺∶鹽酸＝1∶2.5~6mol原因：＊強酸性可加速反應＊重氮鹽在酸性下穩(wěn)定＊酸性下避免副反應發(fā)生。

第36頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三如鹽酸量增加，則反應向左進行。如鹽酸濃度太大，反到會使游離芳伯氨的量減?。ǔ甥}），而影響重氮化反應速度，使反應速度減慢。如酸度不足則沒反應的芳胺與生成的重氮鹽產生偶氮氨基化合物，而影響測定結果。第37頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三ⅲ．反應速度與滴定時溫度的關系一般，溫度升高反應速度加快。但重氮化反應所生成的重氮鹽不穩(wěn)定，溫度升高重氮鹽分解速度也加快。另外，溫度高時，滴定液亞硝酸鈉也容易分解逸失，而影響測定結果。所以，重氮化反應應在低溫條件下進行。第38頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三中國藥典規(guī)定：在30C以下，把滴定管尖端插入液面下處進行滴定。在滴定時一邊攪拌一邊加入大部分標準溶液。到近終點時把滴定管提出液面，用水沖洗后再繼續(xù)滴定至終點。標準溶液在液面下加入，可避免NaNO2揮發(fā)。第39頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三ⅳ．反應速度與滴定速度的關系重氮化反應屬分子反應，反應速度比較慢，滴定速度不能過快。尤其是近終點時，更要慢慢地滴定。近終點時，游離芳伯胺濃度非常低，反應速度就更慢了。所以，每加一滴標準液后，要攪拌1~5分鐘后再判斷終點。第40頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三③

指示終點的方法重氮化滴定法指示終點的方法有:永停法電位法外指示劑法內指示劑法我國藥典主要采用永停滴定法指示終點第41頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三ⅰ．永停法原理：在被測溶液中插入兩個相同鉑電極，在兩個電極間加10~200mV電壓，并且在回路中串聯(lián)一個靈敏的檢流計（10A－9/格）。當用NaNO2滴定時，在終點前回路中沒有電流，電流計指針指零。當到達滴定終點時，由于溶液中有微過量的NaNO2，使得在兩個電極上發(fā)生氧化還原反應第42頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三陽極:導致在兩電極間有電子流動，從而回路中有電流產生，使得電流計指針發(fā)生偏轉并且不再返回零點。陰極：第43頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三ⅱ．電位法在被測溶液中插入甘汞-鉑電極，到達滴定終點時，溶液中稍過量的NaNO2使電位產生突躍，從而指示終點。USP采用這個方法指示終點。第44頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三ⅲ．外指示劑法淀粉-KI糊劑或試紙原理：當達到滴定終點時，溶液中稍過量的NaNO2在酸性條件下氧化KI析出I2，I2遇淀粉顯藍色。第45頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三使用方法：滴定時，把淀粉-KI試液滴在白磁板上，用玻璃棒蘸取少量被滴定的溶液，在白磁板上劃，如果立即出現藍色即已到滴定終點。第46頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三外指示劑法的缺點：由于滴定的溶液是強酸性，KI遇光能被空氣氧化析出碘，所以，在沒有達到終點時，就有可能呈現藍色，而造成誤判。由于經常蘸取溶液進行試驗，可造成滴定液的損失而帶來誤差。方法難掌握。第47頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三ⅳ．內指示劑法內指示劑法指示終點，操作簡便，但生成重氮鹽一般都帶有顏色，干擾指示劑顏色變化的觀察，尤其是顏色很深時，更是這樣。在重氮化滴定法中，內指示劑法應用不是很廣泛。第48頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三(二)非水溶液滴定法（鹽酸丁卡因、鹽酸利多卡因的含量測定(三)分光光度法（對乙酰氨基酚的測定，吸收系數法）(四)高效液相色譜法（鹽酸普魯卡因注射液主成分及其降解產物的測定）第49頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三第二節(jié)苯乙胺類藥物分析一．結構特點具有烴胺側鏈，屬于芳烴胺類藥物。多數在苯環(huán)上有1~2個羥基取代基。如在苯環(huán)3、4位上有羥基取代，則為兒茶酚胺類藥物。第50頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三代表藥物

腎上腺素去甲腎上腺素第51頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三二．性質：1.

易被氧化鄰苯二酚或苯酚結構，易被氧化呈色。3.

具有旋光性具有手性碳原子，具有光學活性。2.

顯堿性具有烴胺側鏈，顯弱堿性。能與酸成鹽。第52頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三三．鑒別試驗1.氧化反應區(qū)別腎上腺素和去甲腎上腺素。第53頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三2、

三氯化鐵反應：酚羥基+Fe3+顯色（綠色）+Fe3+堿性紫色或紫紅色

例：腎上腺素在0.1mol/L鹽酸中與Fe3+顯翠綠色，加氨試液后，顯紫色或紫紅色3、與甲醛-硫酸反應:

生成醌式結構顯色（紅色）4、紫外與紅外吸收光譜:5、與亞硝基鐵氰化鈉反應重酒石酸間羥胺（伯氨基）+亞硝基鐵氰化鈉試液+丙酮+碳酸氫鈉加熱顯紅紫色第54頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三四、特殊雜質檢查（一）酮體檢查雜質引入：酮體氫化不完全檢查方法：紫外分光光度法原理：利用腎上腺素等藥物在310nm處無紫外吸收，而酮體在310nm處有吸收的特點，通過控制藥物在310nm處的吸收度來控制藥物中酮體的含量。第55頁，講稿共60頁，2023年5月2日，星期三（二）有關物質檢查鹽酸去氧腎上腺素、硫酸沙丁胺醇檢查方法：