食品微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專

一、簡(jiǎn)答題（15460分而革蘭氏菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在與碘復(fù)合物的溶出，因此通過(guò)乙醇脫色后仍呈無(wú)色，再經(jīng)沙黃等紅色復(fù)染，就使革蘭氏菌呈紅色。操作中應(yīng)注意的問(wèn)題：革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴(yán)格掌握脫色程度，如脫色過(guò)度則陽(yáng)性菌可被誤染為菌而脫色不夠時(shí)菌可被誤染為陽(yáng)性菌。此外，菌齡也影響染色結(jié)果，如陽(yáng)性菌培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，或已及部分菌自行溶解了，都常呈反應(yīng)。（天然培養(yǎng)基：適合配制用的各種基本培養(yǎng)基及大生產(chǎn)中的半組合培養(yǎng)基（semi-definedmedium）（二）液體培養(yǎng)基：在中主要作各種生理、代謝研究和獲得大量菌體之用；在生產(chǎn)實(shí)踐上，絕大多數(shù)發(fā)酵培養(yǎng)基都采用液體培養(yǎng)基。（三）二、論述題（20240分答：1樣品的稀釋25mL225mL無(wú)菌錐形瓶(瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無(wú)菌玻璃珠)1：10的樣品1mL1：101mL，沿管壁緩慢9ml稀釋液的無(wú)菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面)，振1：100的樣品勻液。按6.4.1.2操作程序，10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，1mL無(wú)菌吸管或吸頭。2個(gè)～3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液(液15mL～20mL46℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基(4mL)6.4.2.1條件進(jìn)行30CFU～300CFU30CFU300的可記錄為多不可計(jì)。每檢樣25ml樣品+225ml稀釋液，均質(zhì)10倍系列稀釋選擇2個(gè)～3個(gè)適宜1mL15mL～20mL平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，混勻計(jì)算菌落總數(shù)報(bào)告36℃±1℃48h±2h培養(yǎng)計(jì)算各平2，代表一個(gè)平板菌落數(shù)。答（一）微生物樣 微生物樣 應(yīng)具有代表性，否則檢驗(yàn)結(jié)45℃下不超過(guò)15min2℃～518h。30min，同時(shí)超凈工作臺(tái)也30min需用肥皂或液洗手，然后在緩沖間更換工作服、帽子、、鞋，用75%再次擦拭雙手或戴上手套，方可進(jìn)入操作。菌落總數(shù)測(cè)定時(shí)，要根據(jù)樣品狀況選擇2～3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液進(jìn)行充分搖勻，同時(shí)應(yīng)更換吸管或微量移液槍吸頭。平板計(jì)數(shù)瓊脂應(yīng)在46℃水浴鍋15mL～20mL較為適宜，平板過(guò)厚影響觀察，太薄易于干裂。傾注時(shí)，培基底部沉淀物，應(yīng)將底部棄去，以免與菌落而影響計(jì)數(shù)宜超過(guò)15min，以防止細(xì)菌有所或繁殖；還有就是細(xì)菌容易吸附在玻璃平皿上，造成片狀菌落。有些食品，如肉制品中的微小顆粒易與細(xì)菌菌落發(fā)生，4℃環(huán)境中放置，以便計(jì)數(shù)時(shí)作對(duì)照養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，用于傾注的孟加拉紅培養(yǎng)基量應(yīng)稍多，約為20mL，以保證培養(yǎng)時(shí)長(zhǎng)，有助于計(jì)數(shù)，但其對(duì)光敏感，易分解成一種黃色的對(duì)細(xì)胞作用的物質(zhì)，所以孟加拉紅培養(yǎng)基應(yīng)用不透光的容器裝好或袋子包好，在4℃冰箱中。已 將霉菌培養(yǎng)物滅菌外，還要對(duì)培養(yǎng)箱、培養(yǎng)室進(jìn)