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文檔簡介
標準曲線制作和應(yīng)用一.相關(guān)名稱簡介1
分光光度法分光光度法是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸光度或發(fā)光強度,對該物質(zhì)進行定性和定量分析的方法。光區(qū)包括:紫外光區(qū)(200~400nm)、可見光區(qū)(400~760nm)、紅外光區(qū)(0.8-100um)。一.相關(guān)名稱簡介2
標準曲線定義標準曲線是標準物質(zhì)的物理/化學屬性跟儀器響應(yīng)之間的函數(shù)關(guān)系。建立標準曲線的目的是推導(dǎo)待測物質(zhì)的理化屬性。在分析化學實驗中,常用標準曲線進行定量分析,通常情況下的標準工作曲線是一條直線。一.相關(guān)名稱簡介3
坐標標準曲線的橫坐標(X)表示可以精確測量的變量(如標準溶液的濃度),稱為普通變量,縱坐標(Y)表示儀器的響應(yīng)值(也稱測量值,如吸光度、電極電位等),稱為隨機變量。當X取值為X1,X2,…Xn時,儀器測得的Y值分別為Y1,Y2,…Yn。一.相關(guān)名稱簡介
將這些測量點Xi,Yi描繪在坐標系中,用直尺繪出一條表示X與Y之間的直線線性關(guān)系,這就是常用的標準曲線制作方法。用作繪制標準曲線的標準物質(zhì),它的含量范圍應(yīng)包括試樣中被測物質(zhì)的含量,制作標準曲線實驗點7個較好,不能任意延長。一.相關(guān)名稱簡介4
點分布從不確定度理論推算樣本的不確定度時,有二個重要的結(jié)論:一、標準曲線的重心點處,所查出來的樣品不確定度最小。二、標準的點數(shù)越多,樣品的不確定度越小。基于這兩個結(jié)論的標準曲線的做法應(yīng)該是:在樣品濃度的附近盡量的多布標準點。二.標準曲線的制作1標準曲線的表達式標準曲線應(yīng)是一條通過原點的直線,如果坐標上各濃度點基本在一條直線上可不進行回歸處理,但在實驗中不可避免地存在測定誤差,往往會有一、二點偏離直線,此時可用最小二乘法進行回歸分析,
然后繪制曲線,通常稱為回歸直線,而代表回二.標準曲線的制作歸直線方程叫回歸方程,表達式為:y=kx+b(式中:k為直線斜率,b為y軸上的截距,x為被測溶液的濃度,y為吸光度,是多次測定結(jié)果的平均值)。2
標準曲線的參數(shù)標準曲線有3個參數(shù),即相關(guān)系數(shù)r,斜率k和截距b。二.標準曲線的制作2.1
相關(guān)系數(shù)(r):相關(guān)系數(shù)是表示變量x與y之間的線性關(guān)系的密切程度。如果r=1則所有點都落在一條直線上,y與x完全呈現(xiàn)線性關(guān)系,在分析中總存在隨機誤差,一般,r≥0.999。2.2斜率(k):某種分析方法的斜率在實驗條件基本一致的情況下是相對穩(wěn)定的,斜率是檢驗分析方法靈敏度的,因此當斜二.標準曲線的制作率出現(xiàn)異常數(shù)據(jù)(超過相當偏差的2.5%)時,就要尋找原因。2.3截距(b):截距是評價標準曲線準確度的,是實驗誤差在y軸上(或x軸上)的反映,當用扣除空白值吸光度的數(shù)值為y值進行回歸時,理論上b值應(yīng)為零,但實際上截距等于零的情況是很罕見的,當系統(tǒng)誤差減至允許程度后,隨機誤差總是存二.標準曲線的制作在的,因此截距一般不為零。3影響標準曲線線性關(guān)系的因素(1)分析法自身的精密度(2)測定用儀器的精密度(3)易揮發(fā)的溶劑所引起的測定溶液濃度的改變(4)污染(5)分析人員操作的影響二.標準曲線的制作
玉米漿中溶磷標準曲線二.標準曲線的制作玉米漿中溶磷標準曲線三.相關(guān)曲線及應(yīng)用
總砷標準曲線制作三.相關(guān)曲線及應(yīng)用
總砷標準曲線應(yīng)用表格三.相關(guān)曲線及應(yīng)用1實用性這是做標準曲線的重要前提,這個問題實際很簡單,就是這樣一個問題:我的樣品的儀器響應(yīng)能否用我們所建立的標準曲線來推導(dǎo)其理化屬性?答案建立在儀器響應(yīng)的特異性和標準系列和樣品的匹配性上面。一方面我們總是力求儀器三.相關(guān)曲線及應(yīng)用1實用性的響應(yīng)對于標準和樣品是一視同仁;同時我們也要求我的樣本跟標準基體匹配。所以最好的標準是基體匹配標準,最好的標準曲線是工作曲線。三.相關(guān)曲線及應(yīng)用2現(xiàn)實現(xiàn)有方法趨向于標準曲線適用于較寬的樣品濃度范圍。在較寬的濃度跨度和有限的標準點的情況下,均勻的分布濃度點是最佳選擇,這樣對該標準曲線覆蓋的濃度范圍內(nèi),對于所有的濃度所提供的信息量都是相同的。奇數(shù)點的設(shè)置來三.相關(guān)曲線及應(yīng)用源于相關(guān)信息,在已知該濃度范圍先確定中間點,然后在中間點左右分布對稱的標
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