動物組織基因組DNA提取試劑盒說明書

磁珠法?自動化：為生命科學(xué)提供自動化磁納米捕獲方案磁珠法?自動化：為生命科學(xué)提供自動化磁納米捕獲方案#磁珠法?自動化：為生命科學(xué)提供自動化磁納米捕獲方案磁珠法?自動化：為生命科學(xué)提供自動化磁納米捕獲方案樣本孔位1、72、83、94、105、116、12試劑磁珠懸浮液裂解液2200X清洗液80%乙醇80%乙醇洗脫液200X異丙醇300譏600譏600譏600譏100X注：1）每次吸取磁珠懸浮液前盡量搖晃均勻；2）為提高效率建議使用排槍。樣本前處理組織樣本：取適量組織樣本，液氮研磨至粉末狀。盡可能轉(zhuǎn)移至2.0mL離心管中，加入400裂解液1，渦旋振蕩1~3min，至組織粉末呈云霧狀；注：針對毛發(fā)樣本，可剪除毛發(fā)根部，毛干部分剪成1~5mm長度。細胞樣本：用離心管收集組織細胞（細胞個數(shù)： 5*10=5*107）,PBS清洗2次，向收集好的細胞中加入400Z裂解液1重懸細胞，渦旋振蕩1~3min。樣本裂解將離心管置于65C水浴鍋中溫浴15min，每隔5min顛倒混勻一次。結(jié)束后將離心管12000rpm室溫（勿低于15C）離心5min，待用。注：如需去除RNA，請額外加入5卩LRNaseA。上機提取將裂解完畢離心管中所有上清液轉(zhuǎn)移至準備好的96孔板第2、8列孔位，然后將96孔板放入ETP-300型核酸提取儀中，插入磁棒套，打開儀器操作軟件，調(diào)用“動物組織DNA提取實驗方法”程序，單擊“運行”執(zhí)行程序。核酸轉(zhuǎn)移程序運行完畢，取下96孔板，將洗脫液轉(zhuǎn)移至干凈的離心管或者PCR板中，做好標記，-20C保存?zhèn)溆?，此時可以棄去96孔板?！皠游锝M織DNA提取實驗方法”程序各參數(shù)設(shè)置如下，如果原程序不慎丟失，可自行設(shè)定:步驟編號孔位運行類型振蕩時間（秒）分離時間（秒）揮發(fā)時間（秒）振蕩幅度振蕩強度一組溫度「C）二組溫度（C）三組溫度（C）四組溫度（C）11磁珠轉(zhuǎn)移5502強000022DNA結(jié)合180504中000033清洗1120505強000042DNA結(jié)合480504中000053清洗1240505強000064清洗2120505強000075清洗212053005強000086洗脫3602002中5656565693棄磁珠15005強0000

【手動版操作步驟】樣本前處理參考【儀器自動版操作步驟】步驟2操作。樣本裂解參考【儀器自動版操作步驟】步驟3操作。核酸結(jié)合將裂解完畢離心管中所有上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管中，加入 200^L磁珠懸浮液以及300^1異丙醇，顛倒混勻，渦旋振蕩6min，靜置2min。磁性分離將離心管置于磁力架上靜置20s至磁珠吸附完全；如果離心管內(nèi)蓋有磁珠，可保持離心管在磁力架上，整體上下顛倒2~3次至磁珠被完全吸附。保持離心管固定于磁力架上，用移液槍吸棄上清液，期間避免接觸磁珠。清洗1） 將離心管從磁力架上取下，加入600 清洗液，高速渦旋振蕩1min，重新置于磁力架上磁性分離（參考步驟4操作）。2） 使用600 80%乙醇，參考步驟5（1）操作2遍。除醇將除盡上清液后的離心管置于磁力架上，連同磁力架一起放入45C真空干燥箱中，干燥約10min至無明顯乙醇味。注：亦可置于通風(fēng)櫥通風(fēng)或電風(fēng)扇直吹約10min,具體時間以磁珠干透無乙醇味為準。洗脫取出離心管，加入100^L洗脫液，用移液槍吹散磁珠，65C溫浴10min，每隔3min渦旋振蕩30s，確保磁珠與核酸洗脫完全。核酸轉(zhuǎn)移洗脫完畢后，將離心管置于磁力架上靜置20s至磁珠吸附完全，用移液槍將洗脫液轉(zhuǎn)移至另一干凈離心管中，做好標記，-20C保存?zhèn)溆?，此時可以棄去磁珠V201