家畜傳染病學(xué)共患病瘋牛病即傳染性海綿狀腦病

家畜傳染病學(xué)共患病瘋牛病即傳染性海綿狀腦病第1頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/111傳染性海綿狀腦病(TransmissibleSpongiformencephalopathies,TSE)

是由朊病毒引起的人和動物的一組具有共同特征的亞急性、漸進(jìn)性、致死性中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，又稱朊病毒病。朊病毒（virino）人和哺乳動物的亞急性海綿樣腦病的致病本質(zhì)，一直是神經(jīng)生物學(xué)和分子病毒學(xué)領(lǐng)域研究的熱點，可導(dǎo)致神經(jīng)元進(jìn)行性退化變性、膠質(zhì)細(xì)胞增生及細(xì)胞內(nèi)朊病毒的自身累積。第2頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/112定義

是一種不同于細(xì)菌、病毒或類病毒的在分類上尚示定論的病原因子。其本質(zhì)為由正常宿主細(xì)胞基因編碼的、構(gòu)象異常的蛋白質(zhì)，稱為朊蛋白(prionprotein,PrP)，目前尚未檢出任何核酸成分，是人和動物的傳染性海綿狀腦病的病原體。第3頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/113性狀病毒Prion感染性++核酸+-形態(tài)學(xué)鑒定（電鏡）+-福爾馬林滅活+-電離輻射、紫外線照射敏感

不敏感CPE+-性狀病毒Prion蛋白特性:蛋白酶K敏感（某些）

不敏感蛋白特性:加熱80℃變性

穩(wěn)定潛伏期根據(jù)病毒而不同長誘發(fā)免疫應(yīng)答+-誘導(dǎo)產(chǎn)生干擾素+-引起炎癥反應(yīng)+-病毒與prion的比較第4頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/114羊癢病牛海綿狀腦?。ǒ偱２?/p>

BSE）(Bovine

Spongiforn

Encephalopathy)貂傳染性腦病人：克-雅氏病格-斯氏綜合征庫魯病第5頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/115共同特征：

1、潛伏期長(幾個月至幾十年)；發(fā)病率低;

2、機體感染后不發(fā)熱、不產(chǎn)生炎癥、無特異性免疫應(yīng)答；

3、表現(xiàn)進(jìn)行性共濟失調(diào)、震顫、姿勢不穩(wěn)、知覺過敏、癡呆和行為反常等神經(jīng)癥狀、病程發(fā)展緩慢，但全部以死亡告終；

4、組織病理學(xué)變化局限于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，以神經(jīng)元空泡化、腦灰質(zhì)海綿狀病變等為特征。第6頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/116第7頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/117起源于英國凡有瘋牛病出現(xiàn)的地方，即是羊癢病(Scrapie)多發(fā)地。260年歷史。用羊癢病下腳料或肉骨粉等長期喂牛，增加了羊癢病傳播給牛的機會牛感染BSE潛伏期2.5-8年，有的長達(dá)10年。平均病程1-2個月第8頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/118牛傳染性海綿腦病，1985年在英國奶牛中首次發(fā)現(xiàn)，因其可致本性溫和的奶牛富于攻擊性而命名。瘋牛病于1986年首先在英國被確認(rèn)。1993年，瘋牛病和“克雅氏癥”在英國達(dá)到發(fā)病高峰，平均每周都有1000個新病例上報。但直到1996年，英國官方才承認(rèn)瘋牛病可能感染人類，因食用牛肉而傳播給人。到目前為止，全球共有153人死于這一病癥，其中英國為143人，而其余10人均曾到過英國。引起全世界的廣泛關(guān)注和不安。第9頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/119英國自1985年發(fā)現(xiàn)瘋牛病到1996年，已確診有16142頭?；疾?，英國將瘋牛病疫區(qū)的1100多萬頭牛屠宰處理，撲殺、焚燒、處理，造成了約300億美元的損失，并引起了全球?qū)τＨ獾目只?。英國連續(xù)出現(xiàn)12個青年患新型克-雅氏?。╪ewvariantcreutzfeldt-JakobdiseasenvCJD），懷疑該病是食用患瘋牛病的牛肉引起的，在歐洲引起了極大的恐慌，瘋牛病已成為歐洲嚴(yán)重的經(jīng)濟和政治問題。第10頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1110中國已經(jīng)研制出三種抗體可檢測，但因其主要感染大腦，不發(fā)病無法檢測，一旦發(fā)病為時已晚。所以瘋牛病(變異型克雅氏癥)很可能是21世紀(jì)醫(yī)學(xué)界最棘手的問題。瘋牛病在人的傳播，一是醫(yī)源性感染，比如輸血、醫(yī)療器械、腦的手術(shù)、器官移植、生物制品感染等。用于治療侏儒癥的腦下垂體生長激素都是從大量尸體中提取的，美、英、法、澳已經(jīng)出現(xiàn)上百病例。二是牛源性藥物，患病的牛腦、脊髓、牛血、牛骨膠制成的藥物和化妝品都有傳染瘋牛病的可能性。第11頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1111影響我們的生活胎盤素：用于抗皺美白產(chǎn)品。動物羊水：用于保濕用品、洗發(fā)水、護發(fā)素等。膠原蛋白：存在于動物皮膚、韌帶和軟骨結(jié)締組織中的纖維蛋白，可令皮膚表面飽滿。腦糖：據(jù)稱能促進(jìn)皮膚組織的新陳代謝，留住皮膚水分。實驗室里面廣泛使用的牛血清。

第12頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1112朊病毒危害性迄今，潛在感染人數(shù)估計超過50萬。大腦皮層的神經(jīng)原細(xì)胞退化。空泡形成、死亡、被星狀細(xì)胞取而代之，因而形成海綿狀態(tài)，大腦皮層（灰質(zhì)）變薄而白質(zhì)相對明顯。臨床上相應(yīng)地出現(xiàn)癡呆、共濟失調(diào)和震顫等癥狀。第13頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1113感受信號，調(diào)節(jié)運動，與智力有關(guān)第14頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1114

第15頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11瘋牛病蔓延整個歐洲英國、愛爾蘭、瑞士、法國、比利時、盧森堡、荷蘭、德國、葡萄牙、丹麥、意大利、加拿大、阿曼、斯洛伐克、西班牙、芬蘭、奧地利；日本、韓國2000年第16頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1116第17頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1117逼近中國邊境

與中國內(nèi)蒙古自治區(qū)接壤的蒙古西部發(fā)生了瘋牛病病例，離我國邊境僅幾十公里。第18頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1118朊病毒的傳播途徑食物傳播:ThisisALongLongTimePeriod!第19頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1119美國對瘋牛病的預(yù)防措施自1989年，美國農(nóng)業(yè)部禁止從英國進(jìn)口活牛和牛產(chǎn)品。后來把禁令擴大到整個歐洲和日本。1997年，F(xiàn)DA禁止使用由反芻動物飼料喂養(yǎng)哺乳動物的大多數(shù)蛋白。03年底，美國也出現(xiàn)了瘋牛病。1000億美元，出口約30億。第20頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1120歐盟對此高度重視，決定暫時禁止英國向歐盟國家和其他國出口活牛、牛肉和牛肉制品，并要求所有年齡在30個月以上的肉牛要全部殺掉和安全銷毀，不能用這些牛制造任何食品和飼料，也不得制造化妝品。歐盟委員會將承擔(dān)收購瘋牛費用的70％，英國承擔(dān)30％，銷毀瘋牛的費用全部由英國承擔(dān)。實地監(jiān)督病牛的處理工作。

第21頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1121CJD病人英國117法國5愛爾蘭1意大利1

我國自1984年至1994年10年間，共報告43例克雅病—海綿狀腦病。第22頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1122————————————————————————————————————————————————————————————————————————————第23頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1123又稱“驢跑病”、“搔癢病”是成年綿羊偶爾發(fā)生于山羊的一種緩慢發(fā)展的傳染性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。特征——

潛伏期長、劇癢、肌肉震顫、衰弱、萎頓、進(jìn)行性運動失調(diào)最后癱瘓死亡。一、癢病(Scrapie)

第24頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1124我國還未發(fā)現(xiàn)瘋牛病和癢病，但曾在英國進(jìn)口綿羊中檢出癢病，也發(fā)現(xiàn)了人的克雅二氏病。由于朊病毒的特殊傳播方式和發(fā)病率低等原因，人們大可不必恐慌。1990年我國農(nóng)業(yè)部即禁止從英國及其它發(fā)生BSE的國家進(jìn)口牛、牛精液、牛胚胎、牛肉及其肉骨粉。農(nóng)業(yè)部將瘋牛病列入一類病。

也不應(yīng)在動物飼料中使用任何哺乳動物肉骨粉。

第25頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1125

癢病的病原屬于亞病毒因子中的朊病毒（Prion），有人譯為朊?；螂玫鞍住ｋ貌《臼且环N特殊傳染因子，它不同于一般病毒，也不同于類病毒，它沒有核酸，而是一種特殊的糖蛋白。

許多種正常動物和人的腦細(xì)胞及其他細(xì)胞也有這類朊蛋白。1、病原第26頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1126Prion：蛋白性感染顆粒（Proteinaceousinfectiousparticle）。這個成份中只含一種蛋白質(zhì)，稱為朊病毒蛋白（prionprotein,PrP），并命名為朊病毒（Virino）。這種蛋白質(zhì)的基因，不但在染病動物腦中存在，亦在正常動物腦中找到，而且表達(dá)得一樣多。

第27頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11271972年，由于Prusiner的一位病人死于克雅氏病，促使他開始研究這類疾病。經(jīng)過10年努力，Prusiner終于在1982年從倉鼠腦中濃縮了羊搔癢病病原成分。其濃縮成分的活性可被蛋白酶K，二乙酰焦碳酸、尿素、酚和SDS等失活，但不能被核酸酶E或紫外線照射破壞。所以Prusiner稱之為Prion,意為蛋白性感染顆粒。第28頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1128PrP基因與朊病毒蛋白的合成PrP基因及其編碼產(chǎn)物第29頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11PrP有兩類：一類是正常細(xì)胞具有的，易被蛋白酶消化降解，存在于細(xì)胞表面，無感染性，PrPc；當(dāng)結(jié)構(gòu)異常時，就成為另一類有致病性PrP，對蛋白酶K有一定抵抗力，用PrPsc代表?？梢栽隗w內(nèi)聚集。兩者在mRNA和氨基酸水平無任何差異，但生物學(xué)特性和立體結(jié)構(gòu)不同。第30頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1130一級結(jié)構(gòu)二級結(jié)構(gòu)多肽鏈本身折疊或盤曲所形成的局部空間構(gòu)象三級結(jié)構(gòu)四級結(jié)構(gòu)α－螺旋β－折疊第31頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11二級結(jié)構(gòu)出現(xiàn)→轉(zhuǎn)換，PrPc螺旋含量達(dá)到42%，片層僅占3%；PrPsc螺旋含量降到30%，片層達(dá)到45%；片層含量增加后聚合成淀粉樣原纖維。變構(gòu)異常蛋白會凝聚在一起，沉積在大腦中，引起神經(jīng)細(xì)胞退行性病變。同時，異常PrP可以結(jié)合正常的PrPC蛋白，使之發(fā)生相同的結(jié)構(gòu)改變，從而復(fù)制傳染。這兩種蛋白質(zhì)具有相同的氨基酸順序，由同一基因編碼，但三維結(jié)構(gòu)卻差異很大，因此這種病原引起的疾病稱為構(gòu)象病。第32頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1132prion的兩種形式，正常（左）和變異（右）第33頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1133確知Prion是一種既有蛋白質(zhì)后(由神經(jīng)細(xì)胞制造，而非入侵的病毒制造)，就可以從這種蛋白質(zhì)倒推回制造它的RNA，然后從RNA回到DNA。1986年就解開了老鼠、倉鼠、人類制造普利子蛋白的DNA序列——基因——密碼，而且發(fā)現(xiàn)它們基本一致，在分子的層次上證實了加德賽克的先見之明：所有傳染性海綿質(zhì)腦病變基本上是同一種疾病。這些DNA序列可作為探討這種疾病的不同形式之間奇異的工具。

第34頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1134PrPsc(致病性朊病毒)分子大小為27～30KD

與正常機體細(xì)胞膜成分結(jié)合在一起，不易為機體免疫系統(tǒng)所識別（機體自身物質(zhì)），不能激發(fā)機體產(chǎn)生抗體。第35頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1135PrPsc抵抗力很強，對熱、輻射、酸堿和常規(guī)消毒劑有很強的抗性。病畜腦組織勻漿經(jīng)134～138℃高溫1h，對實驗動物仍有感染力；用含有PrPsc的組織制成的飼料(肉骨粉)或用于人類食品或化妝品的添加劑，干熱180℃1h仍有部分感染力。病畜組織在10%～20%福爾馬林中幾個月仍有感染力，還能耐受2mol/L的氫氧化鈉達(dá)2h。第36頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11361997年諾貝爾醫(yī)學(xué)或生理學(xué)獎Prusiner第37頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1137Prion概念的提出，引起軒然大波。許多人問：沒有核酸，這個病原物如何增殖？如何復(fù)制本身的遺傳信息。

許多人懷疑：可能還是存在核酸，只是未能檢測出來。第38頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1138

“諾貝爾獎的授予可能窒息不同觀點的深入探討?！?/p>

“諾獎委員會應(yīng)等到確實證明僅僅是蛋白質(zhì)本身在感染中起作用，沒有其他因子參與，再授獎才合適?！?/p>

美國媒體報道標(biāo)題：

“美國科學(xué)家因一項有爭議的研究獲諾貝爾醫(yī)學(xué)獎”爭論還在繼續(xù)第39頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1139DNA→RNA→肽鏈→蛋白質(zhì)挑戰(zhàn)中心法則？DNA的自我復(fù)制RNA病毒逆轉(zhuǎn)錄病毒朊病毒？？？第40頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1140朊病毒的發(fā)現(xiàn)與思考1）蛋白質(zhì)是否可以作為遺傳物質(zhì)？

prion是生命的一個特例？還是僅僅為表達(dá)調(diào)控的一種形式？2）蛋白質(zhì)折疊與功能的關(guān)系，是否存在折疊密碼？

(第二遺傳密碼）第41頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1141傳播途徑主要是食入被朊病毒污染的食物，如反芻動物肉骨粉，含有羊瘙癢病原。1981年前后，英國動物飼料加工業(yè)改變了加工方法，取消了兩個關(guān)鍵步驟：一是取消使用有機溶劑；二是取消了長時間的高溫蒸氣消毒。動物食用這些飼料后，經(jīng)過幾年的潛伏期而發(fā)病。英國政府已采取了一系列措施控制瘋牛病的蔓延，包括1988年7月開始停止喂養(yǎng)肉骨粉飼料，屠殺消滅患病的瘋牛，另外，腦內(nèi)接種和輸血感染也可能引起傳染。

第42頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1142PrPsc單個無侵襲力，3個相結(jié)合后才具有侵襲力，在腦組織中大約1000個PrPsc可形成100～200nm大小的纖維狀物，即癢病相關(guān)纖維在電鏡下可檢出。(Scrapieassociatedfibrils,SAF),第43頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1143第44頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1144第45頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1145

SAF發(fā)現(xiàn)于自然感染和人工感染癢病的綿羊腦組織內(nèi)，也見于牛海綿狀腦病和人類克-雅氏病的腦組織內(nèi).

因其具有一定的特異性——

作為各種海綿狀腦病的病理學(xué)診斷指標(biāo)。第46頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1146

PrPsc在感染動物的各種組織中的含量不同，按感染滴度大小，以腦為最高，脊髓次之，其它淋巴結(jié)、骨骼、肺、心、腎、肌肉等的感染滴度均甚低。第47頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11472.流行病學(xué)

不同性別、不同品種的羊均可發(fā)生癢病，但品種間的易感性顯然有很大差異。在品種內(nèi)某些受感染的譜系發(fā)病率高，可能與垂直傳播有關(guān)。一般發(fā)生于2～4歲的羊。第48頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1148

綿羊與山羊間可以接觸傳播。關(guān)于癢病的傳播途徑，還不完全清楚，但已知可垂直和水平傳播。已證實感染母羊的胎膜和胎盤內(nèi)含有癢病病毒，可從母羊垂直傳染胎羊和羔羊。第49頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1149

取病羊血液和血清接種易感綿羊，可使之發(fā)病。病羊的腦脊髓懸浮液經(jīng)腦內(nèi)甚至皮下注射，均能在易感綿羊復(fù)制本病。將感染的腦組織非經(jīng)腸注射(或經(jīng)口服)于小鼠、大鼠、倉鼠、水貂和猴都能引起實驗性的癢病。第50頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/113.發(fā)病機理？？？綿羊感染本病后，特別是實驗接種后，病毒進(jìn)入血液并定位于脾和淋巴結(jié)中，后來可發(fā)現(xiàn)于唾液腺、胸腺、肺、骨髓、肝、腎、膀胱和腸道。在這些器官中，病毒緩慢地繁殖和繼續(xù)存留于整個病程中。第51頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1151

幾個月后，病毒進(jìn)入脊髓最后達(dá)到大腦，病毒在靶細(xì)胞(神經(jīng)細(xì)胞)中增加，12～14周后神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)空泡形成和膠質(zhì)細(xì)胞開始肥大，DNA酶、β-葡萄糖酸酶和N-乙酰-β-氨基葡萄糖酶的活性增加，19周以后出現(xiàn)臨診癥狀?？赡苡捎谏窠?jīng)系統(tǒng)的機能遭受破壞而死亡。第52頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11524、癥狀及病變

自然感染的潛伏期為1～5a更長，因此，1歲半以下的羊極少出現(xiàn)臨診癥狀。經(jīng)過潛伏期后，神經(jīng)癥狀逐漸發(fā)展并漸加劇。病初病羊表現(xiàn)沉郁和敏感，易驚，有癲癇癥狀。抓提病羊時，這些癥狀更易發(fā)生，表現(xiàn)劇烈。第53頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1153

或表現(xiàn)過度興奮、抬頭、豎耳、眼凝視，一種特征的高抬腿的姿勢跑步(似驢跑的僵硬步態(tài))；驅(qū)趕時常反復(fù)跌倒；隨著病的進(jìn)展，運動時共濟失調(diào)逐漸嚴(yán)重；隨意肌，特別在頭頸部發(fā)生震顫，在興奮時肌肉震顫加重，減輕。第54頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1154

在發(fā)展期，病羊靠著柵欄、樹干和器具不斷摩擦其背部、體側(cè)、臀部和頭部，一些患羊還用其后肢搔抓胸側(cè)、腹側(cè)和頭部，并自咬其體側(cè)和臀部皮膚。頸部、體側(cè)、背部和薦部大面積的皮膚表面出現(xiàn)禿毛區(qū)。第55頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1155第56頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1156第57頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1157

觸摸發(fā)癢的皮膚，可能反射地刺激病羊伸頸、擺頭、咬唇和舔舌。當(dāng)視力喪失時：撞擊柵欄和器具。后期，機體衰弱，出現(xiàn)昏睡或昏迷，臥地不起。整個患病期間，體溫并不升高，食欲雖仍保持，但體重下降。病程從幾周到幾個月，甚至一年以上，所有病羊終歸死亡。第58頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11585、剖檢變化除摩擦和啃咬引起的羊毛脫落及皮膚創(chuàng)傷和消瘦外，內(nèi)臟常無肉眼可見的病變。病理組織學(xué)變化：特征——

腦干和脊髓的神經(jīng)元發(fā)生空泡變性與皺縮，灰質(zhì)的海綿狀疏松，星形膠質(zhì)細(xì)胞增生等。第59頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1159

神經(jīng)元的空泡形成表現(xiàn)為單個或多個的空泡出現(xiàn)在胞質(zhì)內(nèi)。典型的空泡呈圓形或卵圓形，界限明顯，它代表液化的胞質(zhì)團塊。海綿狀疏松是神經(jīng)基質(zhì)的空泡化，使基質(zhì)纖維分解而形成許多小孔。沒有發(fā)現(xiàn)病毒性腦炎的病變。第60頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1160．神經(jīng)原細(xì)胞出現(xiàn)空泡↖↖↖↗第61頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1161丘腦神經(jīng)細(xì)胞出現(xiàn)空泡↖↖↖↗第62頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1162

6、診斷

根據(jù)典型的癥狀和組織病理學(xué)變化，診斷并不困難。潛伏期很長雙親中有癢病的病史不斷擦癢反射性咬唇舔舌和運動性共濟失調(diào)。第63頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1163組織病理學(xué)檢查在丘腦和延腦可發(fā)現(xiàn)特征性病變。但在新疫區(qū)或新發(fā)病群，為確診還必須進(jìn)行有關(guān)的實驗室診斷，如動物感染試驗、PrP(上)sc的免疫學(xué)檢測和癢病相關(guān)纖維(SAF)檢查等。第64頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1164（1）病毒的生物學(xué)測定法至今尚無可供檢測朊病毒的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)，只能使用動物作生物學(xué)測定，小鼠和倉鼠是最常用的實驗動物。將被檢標(biāo)本(腦、脊髓、脾等)勻漿作10倍稀釋(8～10)個稀釋度(，每稀釋度通常腦內(nèi)接種6只小鼠(各30μl)或倉鼠(50μl)。第65頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1165

接種動物每3d檢查一次，瀕死撲殺取腦作組織病理學(xué)檢查。原代分離觀察期小鼠為一年或更久，倉鼠7～8個月。最后根據(jù)動物發(fā)病和死亡數(shù)計算終點滴度(ID(下)50和LD(下)50)。腦勻漿的終點滴度一般為每克腦組織105～1011LD50。第66頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1166（2）PrPsc的免疫學(xué)檢測

PrPsc只見于人和動物的傳染性海綿狀腦病。健康和患其它疾病的人和動物細(xì)胞中的PrPsc可被蛋白酶消化消除，不會干擾PrPsc的檢測。因此，PrPsc是TSEs的特異診斷方法，最近已被WHOTSEs專家會議所確認(rèn)。第67頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1167

它不僅可用于死后的組織病理學(xué)檢查，還可用于活檢(腦、扁桃體)作生前診斷。

PrPsc雖不能使感染宿主產(chǎn)生特異抗體，但作為非易感動物的兔卻可產(chǎn)生他種動物PrPsc的抗體，以此抗體對被檢材料(腦組織)作Southernblotting（固相膜斑點試驗），可檢測其中的PrPsc

。第68頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1168

（3）癢病相關(guān)纖維(SAF)檢查

SAF檢查也是TSEs的特異診斷方法，在被檢材不適合作組織病理學(xué)檢查時尤為重要。通常以冰凍保存的腦和脊髓作被檢材料。第69頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11691～10g被檢材料

10%(W/V)↓（表面活性劑）勻漿超速離心22000g/10min540000g/20min↓沉淀物以蛋白酶K處理(PK10μg/ml37℃/h)↓

重懸于50μl蒸餾水↓負(fù)染作電鏡檢查第70頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1170（4）單克隆抗體在朊病毒病診斷上已廣泛應(yīng)用，應(yīng)用各種特異的單克隆抗體可以區(qū)分小鼠、倉鼠和人的PrPsc。最近又制備了只和各種動物PrPsc共有位點而不和PrPsc反應(yīng)的特異單克隆抗體，應(yīng)用此單克隆抗體時，標(biāo)本無需蛋白酶K處理即可檢測。第71頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11717、防制由于本病的特殊性(潛伏期長，發(fā)展緩慢，無免疫應(yīng)答)，一般的防制措施無效。在沒有發(fā)生過本病的國家和地區(qū)，如輸入種羊后發(fā)現(xiàn)本病，有必要全部淘汰銷毀(焚化和深埋)。如有的種羊已分至另一些羊群，應(yīng)將這些羊群封鎖隔離，觀察三年半，觀察期間如發(fā)現(xiàn)病羊，可作同樣處理。羊舍消毒可用次氯酸鈉，有效氯濃度應(yīng)不低于5×10-4，作用時間不少于1h。第72頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1172

綿羊癢病病羊骨肉粉飼喂牛和水貂等動物可使發(fā)生傳染性海綿狀腦病。癢病病毒還可能使人致病。在國外一些研究癢病的人員中曾發(fā)現(xiàn)一種稱為多發(fā)性腦脊髓硬化病。將死于此病的人腦組織接種冰島綿羊，發(fā)生一種與癢病無法區(qū)別的疾病。第73頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1173

二、牛海綿狀腦病

(Bovinespongiformencephalopathy;BSE)

亦稱“瘋牛病”。特征——

潛伏期長，病情逐漸加重，主要表現(xiàn)行為反常、運動失調(diào)、輕癱、體重減輕、腦灰質(zhì)海綿狀水腫和神經(jīng)元形成空泡。病牛終歸死亡。第74頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1174

英國BSE的流行最嚴(yán)重，至1997年累計確診達(dá)168578例，涉及33000多個牛群。第75頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1175第76頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1176

初步認(rèn)為是牛吃食了污染綿羊癢病或牛海綿狀腦病的骨肉粉(高蛋白補充飼料)而發(fā)病的。同時還發(fā)現(xiàn)了一些懷疑由于吃食了病牛肉奶產(chǎn)品而被感染的人類海綿狀腦病(新型克-雅氏病)患者。歐盟國家以及美、亞、非洲等包括我國在內(nèi)的三十多個國家已先后禁止英國牛及其產(chǎn)品的進(jìn)口。第77頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11771、病原本病病原為與癢病病毒相類似的一種朊病毒。一般認(rèn)為，BSE是因“癢病相似病原”跨越了種屬屏障引起牛感染所致。第78頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11781986年Well首次從BSE病牛腦乳劑中分離出癢病相關(guān)纖維(SAF)，經(jīng)過發(fā)病牛的SAF的氨基酸分析，確認(rèn)其與癢病羊的PrPsc相同。

BSE朊病毒在病牛體內(nèi)的分布僅局限于病牛腦、頸部脊髓、脊髓末端和視網(wǎng)膜等處。第79頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11792、流行病學(xué)無論自然感染還是實驗感染其宿主范圍均較廣。BSE可傳至貓和多種野生動物人也易感傳染源——

患癢病的綿羊、種牛及感染牛傳播途徑——

食入混有癢病病羊或病牛尸體加工成的骨肉粉而經(jīng)消化道感染。第80頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1180BSE的平均潛伏期約為5a，發(fā)病牛齡為3～11歲，但多集中于4～6歲青壯年牛，2歲以下和10歲以上的牛很少發(fā)生。大多數(shù)肉用牛于2～3歲即被屠宰食用，故實際感染BSE的牛數(shù)應(yīng)遠(yuǎn)多于臨診病例數(shù)。據(jù)估計1985-1995年有70多萬頭潛伏期BSE病牛進(jìn)入人的食物鏈，這構(gòu)成了嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。第81頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11813、癥狀病程一般為14～180d，其臨診癥狀不盡相同，多數(shù)病例表現(xiàn)出中樞神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀。常見病牛煩躁不安，行為反常，對聲音和觸摸過分敏感。第82頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1182

常由于恐懼、狂躁而表現(xiàn)出攻擊性，共濟失調(diào)，步態(tài)不穩(wěn)，常亂踢亂蹬以致摔倒。站立姿勢異常；少數(shù)病?？梢婎^部和肩部肌肉顫拌和抽搐。后期出現(xiàn)強直性痙攣，泌乳減少。病牛食欲正常，糞便堅硬，體溫偏高，呼吸頻率增加，最后常極度消瘦而死亡。第83頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1183第84頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11844、病變?nèi)庋圩兓幻黠@。組織學(xué)檢查主要的病理變化是腦組織呈海綿樣外觀(腦組織的空泡化)。

腦干灰質(zhì)發(fā)生雙側(cè)對稱性海綿狀變性，在神經(jīng)纖維網(wǎng)和神經(jīng)細(xì)胞中含有數(shù)量不等的空泡，無任何炎癥反應(yīng)。第85頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1185神經(jīng)纖維網(wǎng)空泡第86頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1186第87頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11875、診斷根據(jù)特征的臨診癥狀和流行病學(xué)特征可以作出BSE的初步診斷。本病既無炎癥反應(yīng)，又不產(chǎn)生免疫應(yīng)答，迄今尚難以進(jìn)行血清學(xué)診斷。所以定性診斷目前以大腦組織病理學(xué)檢查為主。第88頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1188

國家外來動物疫病診斷中心（國家牛海綿狀腦病參考實驗室）地址：山東省青島市南京路369號農(nóng)業(yè)部動物檢疫所郵編：266032聯(lián)系人；王志亮電話7839779第89頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1189

腦干區(qū)的空泡變化，特別是延髓孤束核和三叉神經(jīng)脊束核的空泡變化，診斷BSE的準(zhǔn)確率高達(dá)99.6%。腦干神經(jīng)原及神經(jīng)纖維網(wǎng)空泡化具有證病性意義。確診需進(jìn)行的實驗室診斷，如動物感染試驗，PrPsc的免疫學(xué)檢測和SAF檢查等詳見癢病中所述。第90頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11906、防制為了控制本病，英國規(guī)定捕殺和銷毀患牛；禁止在飼料中添加反芻動物蛋白(肉骨粉等)；嚴(yán)禁病牛屠宰后供食用，禁止銷售病牛肉。近年來已有不少國家(包括我國)禁止從英國進(jìn)口牛、牛精液、胚胎和任何肉骨粉等，以防止該病傳入國內(nèi)。第91頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1191

我國尚未發(fā)現(xiàn)瘋牛病，但仍有從境外傳入的可能，為此，要加強口岸檢疫和郵檢工作，嚴(yán)禁攜帶和郵寄牛肉及其產(chǎn)品入境。建立瘋牛病監(jiān)測系統(tǒng)，對瘋牛病采取強制性檢疫和報告制度。第92頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1192

一旦發(fā)現(xiàn)可疑病例，應(yīng)即屠宰；取腦各部位組織作神經(jīng)病理學(xué)檢查，如符合瘋牛病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，對其接觸牛群亦應(yīng)全部處理，尸體焚毀。第93頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1193

三、水貂傳染性腦病(Transmissibleminkencephalopathy,TME)

水貂傳染性腦病是一種亞急性的腦海綿樣變性的疾病，無炎癥變化，病死率幾乎100%。病原因子的特性與癢病朊病毒相似，以癢病病料接種水貂，引起的癥狀和腦組織學(xué)變化與自然發(fā)生的水貂腦病不能區(qū)別。第94頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1194

取病貂腦組織乳劑作皮下或腹腔接種，可使水貂、雪貂、臭鼬、浣熊、倉鼠、山羊、綿羊和猴引起感染。

水貂口服感染的潛伏期約為1a，病初癥狀不明顯。一般表現(xiàn)食欲不振，日漸消瘦和衰弱，皮毛變粗，由后肢開始發(fā)生運動障礙，尾向上彎于背上。繼而嗜眠，最后不能行動和喪失定位能力。經(jīng)4～6周衰竭而亡。診斷和防制措施參照癢病。第95頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1195巴不亞-新幾內(nèi)亞的美麗海岸

我吃你，好嗎？

第96頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1196四、庫魯病(Kuru)

又稱震顫病，是人的一種以小腦變性為特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。病原因子與癢病朊病毒一樣，在感染腦組織中能長期存在。第97頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1197

取病死者的腦組織乳劑經(jīng)腦內(nèi)或非神經(jīng)途徑注射，可使很多種靈長類、水貂和白鼬感染發(fā)病(潛伏期10個月以上)，實驗動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的基本病理變化與病人相同。第98頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1198

人感染后潛伏期長約4～20a，主要癥狀是運動失調(diào)、震顫、步態(tài)不穩(wěn)、說話含糊不清、發(fā)音和吞咽困難，3～9個月內(nèi)死亡。神經(jīng)系統(tǒng)病變與癢病相同，中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)原空泡化，星狀膠質(zhì)細(xì)胞增多，腦灰質(zhì)呈海綿狀，以小腦、橋腦和紋狀體最明顯。第99頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1199q

淀粉樣蛋白斑第100頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/11100該病僅發(fā)生于大洋洲巴布亞新幾內(nèi)亞東部高地福爾人聚居地，1956年以來已記錄病例2600個。其發(fā)生和傳播是食用死亡親屬腦組織所致。美國醫(yī)學(xué)家蓋杜賽克在該地區(qū)20年，探明該病的發(fā)生與當(dāng)?shù)厝耸秤萌巳獾募漓敕绞矫芮嘘P(guān)聯(lián)，并提出了預(yù)防措施。最初的庫魯病可能是食用克-雅氏病病人腦組織引起的，革除此陋習(xí)后，發(fā)病數(shù)迅速下降，現(xiàn)已接近消滅。第101頁，課件共112頁，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/111011968年停止該儀式后該病得到控制，從而拯救了一個部落的人群，蓋杜賽克為此獲得了1976年諾貝爾醫(yī)學(xué)獎。

中國第一個瘋牛病實驗室———北京檢驗檢疫局瘋牛病