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檢驗(yàn)結(jié)果解讀第1頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月理想的方法的靈敏度、特異性和符合率都應(yīng)是100%,然而這樣的方法在現(xiàn)實(shí)中幾乎是不存在的,所有的實(shí)驗(yàn)診斷方法都在努力追求靈敏度和特異性之間的最佳結(jié)合。一、方法上的局限性和統(tǒng)計(jì)學(xué)規(guī)律靈敏度=真陽(yáng)性/(真陽(yáng)性+假陰性)×100%反映方法發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性病例的能力特異性=真陰性/(真陰性+假陽(yáng)性)×100%反映方法可靠性程度這也正是臨床醫(yī)生不能將實(shí)驗(yàn)檢查指標(biāo)作為疾病診斷的唯一依據(jù)的重要原因所在第2頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月

由于統(tǒng)計(jì)學(xué)上分布規(guī)律和方法學(xué)上的局限性,在客觀存在上檢驗(yàn)方法灰區(qū)是存在的,而臨醫(yī)生往往要求發(fā)出“是”或“否”的明確結(jié)論,這種現(xiàn)象在檢驗(yàn)和病理診斷實(shí)踐中普遍存在。

最典型的例子是熒光PCR方法檢測(cè)核酸和細(xì)菌血培養(yǎng)。臨床檢驗(yàn)的數(shù)據(jù)分析絕大多數(shù)是基于正態(tài)分布理論的,然而低濃度或稀薄物質(zhì)服從泊松分布卻很少被人關(guān)注。參見(jiàn)作者文《中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》2003;26(3)

如果臨床醫(yī)生欠缺這方面知識(shí),是質(zhì)疑檢驗(yàn)人員或引發(fā)醫(yī)患(特別是針對(duì)檢驗(yàn)人員)糾紛的直接原因。第3頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月正常參考值附近結(jié)果的解釋尤其重要,如果處理不當(dāng),會(huì)使兩次本來(lái)無(wú)實(shí)質(zhì)性差別的檢驗(yàn)結(jié)果,以截然相反的信息在醫(yī)醫(yī)/醫(yī)患之間傳遞。如轉(zhuǎn)氨酶(正常參考0-40u/L)分別為35u/L和45u/L兩次檢驗(yàn)結(jié)果,易被當(dāng)作“一次正常”和“一次異?!边M(jìn)行信息傳遞。第4頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月二、生理因素年齡白細(xì)胞總數(shù):新生兒15-30×109,3-4天10×109,3月后逐漸降到成人水平。白細(xì)胞分類:新生兒中性為主,6-9天中性與淋巴相當(dāng),此后淋巴細(xì)胞逐步增加,整個(gè)嬰兒期淋巴較高可達(dá)70%,2-3歲后淋巴細(xì)胞又開(kāi)始下降中性上升,至4-5歲二者相當(dāng),到青春期后與成人相同。第5頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月性別男性比女性高的常見(jiàn)生化指標(biāo):TRIG、ATP、BILI、ALT、AST、CREAT、UA、UN、HB、ACP、ALP、CHE、GLU、TP、CHOL女性比男性高的常見(jiàn)生化指標(biāo):CU2+、肌酸、網(wǎng)織紅細(xì)胞等第6頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月妊娠和分娩妊娠期由于胎兒生長(zhǎng)發(fā)育的需要,在胎盤產(chǎn)生的激素作用下,母體各系統(tǒng)發(fā)生一系列適應(yīng)性生理變化。白細(xì)胞常輕度增加,分娩時(shí)可達(dá)34×109。

妊娠期主要血漿變化指標(biāo)及其機(jī)制機(jī)制變化血漿運(yùn)輸?shù)鞍自黾友合♂尨x增加凝血機(jī)能亢進(jìn)需要增加急性時(shí)相蛋白增加甲狀腺素、脂類、銅、銅藍(lán)蛋白升高總蛋白、白蛋白濃度下降腎小球?yàn)V過(guò)率、肌酐清除率上升凝血因了活性增強(qiáng)、PT、APTT縮短鐵、轉(zhuǎn)鐵蛋白減少紅細(xì)胞沉降率升高第7頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月飲食多數(shù)試驗(yàn)要求禁食12小時(shí)。食后2小時(shí)血糖明顯升高,ALP、UN、UA、BILI、Na亦升高。禁食時(shí)間過(guò)長(zhǎng)補(bǔ)體C3、前白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白下降。在測(cè)血肌酐時(shí)應(yīng)禁肉食三天,并不能飲咖啡、茶等。刺激物和成癮性刺激物和成癮性藥物通過(guò)各種復(fù)雜機(jī)制對(duì)人體產(chǎn)生多種影響,表現(xiàn)為多種實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的升高或降低。比如咖啡因可使血糖、兒茶酚胺等升高,吸煙產(chǎn)生一氧化碳結(jié)合血紅蛋白而使血紅蛋白的檢測(cè)結(jié)果增高,酒精可使乳酸、尿酸升高,血糖減低等。因此醫(yī)生應(yīng)囑咐病人采血前4小時(shí)勿喝茶或咖啡、勿吸煙飲酒;盡量了解病人對(duì)刺激物和成癮性藥物的接觸史,以供評(píng)價(jià)檢驗(yàn)結(jié)果參考。第8頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月運(yùn)動(dòng)劇烈運(yùn)動(dòng)可使ALT、CK、LDH、AST、GLU等測(cè)定值升高;較長(zhǎng)時(shí)間激烈運(yùn)動(dòng)可引起尿中蛋白質(zhì)和紅細(xì)胞增加。40米慢跑對(duì)部分生化項(xiàng)目的影響項(xiàng)目肌酐尿素鉀磷增加程度%45312365田徑運(yùn)動(dòng)前后白細(xì)胞總數(shù)(×109)變化項(xiàng)目性別例數(shù)運(yùn)動(dòng)前運(yùn)動(dòng)后100米女206.28±1.0112.60±0.69100米男2010.20±0.5611.96±0.201500米男326.88±0.5613.75±0.8110000米男246.68±0.4511.89±0.68第9頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月生物周期

生理周期指季節(jié)更替,月經(jīng)周期和晝夜節(jié)律。一般季節(jié)更替對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響可忽略不計(jì),后兩者影響較大。月經(jīng)周期由于雌激素的更替變化,膽固醇在經(jīng)前最高,排卵時(shí)期最低;纖維蛋白在經(jīng)前期升高,血漿蛋白在排卵期最低;而酶與電解質(zhì)則無(wú)多大變化。第10頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月部分檢驗(yàn)指標(biāo)的晝夜變化檢驗(yàn)指標(biāo)峰值期(小時(shí))低值期(小時(shí))增加幅度% 睪酮2-420-2430-50促腎上腺皮質(zhì)激素6-100-4150-180腎上腺皮質(zhì)激素5-821-3180-200促甲狀腺素20-27-135-15甲狀腺素8-1223-310-20催乳素5-710-1280-100醛固酮2-412-1460-80血管緊強(qiáng)素0-610-12120-140腎上腺素9-122-530-50去甲腎上腺素9-122-550-120血紅蛋白6-1822-248-15嗜酸細(xì)胞4-618-2030-40鐵14-182-450-70鉀14-1623-15-10磷酸鹽2-48-1230-40第11頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月三、疾病進(jìn)程

在疾病的進(jìn)程中,其生理生化指標(biāo)不是一成不變的,有時(shí)甚至出現(xiàn)與疾病的臨床表現(xiàn)不相符合的情形,所以醫(yī)師在解釋檢驗(yàn)結(jié)果時(shí)必須具備相當(dāng)?shù)闹R(shí)。用于疾病的診斷時(shí),臨床醫(yī)師必須對(duì)實(shí)驗(yàn)的方法學(xué)原理、臨床診斷意義及干擾實(shí)驗(yàn)的生理、病理、藥物等因素有較深入的了解。第12頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月例如參考書籍在介紹診斷心肌梗塞時(shí)有肌紅蛋白、肌鈣蛋白和磷酸肌酸激酶三項(xiàng)實(shí)驗(yàn),但實(shí)際上三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)在不同的病程所得結(jié)果是不同的。肌紅蛋白多在發(fā)病的6-12h出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果,而肌鈣蛋白和磷酸肌酸激酶分別在發(fā)病的12-32h和20多-70h陽(yáng)性率最高。如果不了解試驗(yàn)的窗口期選擇實(shí)驗(yàn),不斷給患者造成不必要有負(fù)擔(dān),還會(huì)做出錯(cuò)誤的判斷。第13頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月當(dāng)前科學(xué)的發(fā)展越來(lái)越快,知識(shí)的“半衰期”越來(lái)越短。技術(shù)分工越來(lái)越細(xì),臨床醫(yī)生很難對(duì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)有全方位、深刻的了解,這就要求檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)工作者與臨床醫(yī)生一起不斷進(jìn)行檢驗(yàn)方法學(xué)的研究和實(shí)驗(yàn)臨床價(jià)值的探討。第14頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月四、參考值存在的問(wèn)題

現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)研究對(duì)象是群體,是否診斷為有病是拿個(gè)人的檢驗(yàn)資料與大多數(shù)人(通常95%)的資料(正常參考范圍)相比而得來(lái)。實(shí)質(zhì)上具體到某一個(gè)體,檢驗(yàn)結(jié)果落在正常參考范圍內(nèi)并不一定無(wú)病,相反超出這一范圍也不一定有病。舉一個(gè)最簡(jiǎn)單的例子:如果某人的基礎(chǔ)血象為4.0×109/L,某次檢查結(jié)果為7.5×109/L,如果沒(méi)有基礎(chǔ)血象作參考就不能判定有感染有存在。第15頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月當(dāng)前我國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)屆尚未完全解決的問(wèn)題是:提供每個(gè)實(shí)驗(yàn)的參考值、臨床值及危及生命值,這有待于臨床和檢驗(yàn)的密切合作。目前國(guó)內(nèi)多數(shù)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展了許多新項(xiàng)目,但無(wú)自己實(shí)驗(yàn)室的參考值,為臨床提供參考值是廠家制定的,再溯源這些值是來(lái)自國(guó)外,是白種人的、黑種人的,就是沒(méi)有中國(guó)人的。第16頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月

除了大體征和性別特異激素的差異外、性別差異還可表現(xiàn)在多種血液學(xué)和生化指標(biāo)上。因?yàn)槟行缘募∪饨M織比例都比女性高,所以其與肌肉組織有關(guān)的指標(biāo)都比女性高如:TG、膽紅素、轉(zhuǎn)氨酶、肌酐、肌紅蛋白、尿酸、氨、血紅蛋白、酸性磷酸酶、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、氨基酸、堿性堿酸酶、膽堿脂酶、鐵、葡萄糖、低密膽固醇、銅和網(wǎng)織紅細(xì)胞。不同圍產(chǎn)期的孕婦許多指標(biāo)發(fā)生生理性的變化。正常女性纖維蛋白原含量不能超過(guò)0.4g/L,而產(chǎn)前孕婦達(dá)0.8g/L仍屬正常之列。第17頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月五、干擾物藥物

藥物對(duì)生檢驗(yàn)的影響是錯(cuò)綜復(fù)雜的。藥物及其代謝產(chǎn)物通過(guò)生理途徑改變分析物質(zhì)在血液中的濃度,或者直接參與分析物檢測(cè)時(shí)的生化反應(yīng)產(chǎn)生影響。一種藥物可影響多項(xiàng)生化檢驗(yàn)結(jié)果;不同藥物可對(duì)同一項(xiàng)生化檢驗(yàn)產(chǎn)生同樣的影響;更有同一種藥物在不同的疾病中,對(duì)同一項(xiàng)生化檢驗(yàn)產(chǎn)生截然不相反的影響,例如消膽胺作為降血脂藥是可降低甘油三酯的,但用于糖尿病時(shí)反見(jiàn)甘油三酯升高;又如阿司匹林能增加吸收及其釋放類固醇、抑制三羧酸循環(huán),使血糖升高,但在糖尿病人和中毒劑量時(shí),可見(jiàn)血糖降低;也有同一種藥物在用藥期間,前后產(chǎn)生不同的影響,例如在開(kāi)始使用腎上腺素時(shí),因其促使肝中鉀釋放,使血鉀呈暫時(shí)性升高,繼而血鉀降低。第18頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月藥物影響生化檢驗(yàn)的機(jī)理可有以下幾種情況:藥理學(xué)特性藥物特異性反應(yīng)藥物的生物向性藥物的相互作用藥物的雜質(zhì)藥物的毒性作分析前分析中乳劑或呈色劑藥物本身是被測(cè)物藥物對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)的抑制作用第19頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月血清內(nèi)源性物質(zhì)(黃疸、溶血和脂血)請(qǐng)參見(jiàn)作者文《國(guó)外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè)》2004;25(5)

《中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》2004;27(2)第20頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月六、標(biāo)本的采集及貯存

標(biāo)本采集過(guò)程是保證標(biāo)本質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié),整個(gè)過(guò)程包括采集時(shí)間、采血姿勢(shì)、止血帶的使用、采集與收集標(biāo)本容器的要求、采集樣本量及抗凝劑或防腐劑的應(yīng)用等。

第21頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月

用于血培養(yǎng)的血液應(yīng)在估計(jì)寒戰(zhàn)或體溫高峰到來(lái)之前采集,因?yàn)榧?xì)菌進(jìn)入血流與寒戰(zhàn)發(fā)作通常間隔1小時(shí)。但無(wú)論何時(shí)采集,血培養(yǎng)應(yīng)在抗生素使用之前。選擇性尿蛋白的腎炎患者,多使用青霉素治療,注入的青霉素90%以上通過(guò)腎臟排泄,而這些青霉素可干擾尿蛋白的檢驗(yàn)(干化學(xué)法假陰性、磺基水楊酸法假陽(yáng)性)。有人曾作如下研究:靜脈給藥青霉素240萬(wàn)單位、320萬(wàn)單位和480萬(wàn)單位的患者只有分別在給藥2小時(shí)、3小時(shí)和5小時(shí)后才會(huì)對(duì)尿蛋白檢測(cè)無(wú)干擾。

一次靜脈推入2克維生素C在6小時(shí)內(nèi)或日口服9片(分3次),第二天清晨排出尿的維生素C均可使尿潛血、尿糖、尿酮體、尿硝酸鹽出現(xiàn)假陰性反應(yīng)。第22頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月

坐、立位與臥位相比,靜脈滲透壓增加,一部分水從心血管系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到間質(zhì)中去。正常人直立位時(shí)血漿總量比臥位減少12%左右。血液中體積>4nm的成分不能通過(guò)血管壁轉(zhuǎn)移到間質(zhì)中去,使其血漿總量升高5-15%。常見(jiàn)的指標(biāo)有:血紅素、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血細(xì)胞比積、總鈣,天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、甲狀腺素、IgG、IgA、白蛋白、總蛋白、載脂蛋白B、膽固醇、低密度脂蛋白-膽固醇、甘油三脂、載脂蛋白AI。靜脈壓的改變又進(jìn)一步導(dǎo)致血管活性物質(zhì)的釋放,直立位時(shí),醛固酮、腎上腺素、血管緊張素和去甲腎上腺素都有7%-70%多少不等的升高。第23頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月采血量對(duì)于某些實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目要求嚴(yán)格,特別是進(jìn)行凝血因子檢查時(shí)。血液比例過(guò)高時(shí),由于抗凝劑相對(duì)不足,血漿中出現(xiàn)微血凝塊的可能性增加。微血凝塊可能阻塞檢測(cè)儀器,影響一些檢驗(yàn)指標(biāo)。血液比例過(guò)低,抗凝劑相對(duì)過(guò)剩,對(duì)很多檢驗(yàn)會(huì)造成嚴(yán)重影響。對(duì)于血液凝固實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō),當(dāng)血液和0.129M或0.105M枸櫞酸鈉的比例由9:1降至7:1時(shí),APTT試驗(yàn)的結(jié)果就會(huì)有顯著的延長(zhǎng);降至4.5:1時(shí),PT試驗(yàn)結(jié)果就會(huì)有顯著改變。第24頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月

用含有EDTA的管子采血后,血細(xì)胞的形態(tài)會(huì)發(fā)生改變,這種改變與時(shí)間及EDTA的濃度有關(guān)。EDTA的最佳濃度是1.5毫克/毫升,如果血少,EDTA的濃度達(dá)到2.5毫克/毫升,中性粒細(xì)胞腫脹,分葉核消失,血小板腫脹,崩解、產(chǎn)生正常血小板大小的碎片,這些改變都會(huì)時(shí)血常規(guī)檢驗(yàn)血細(xì)胞計(jì)數(shù)得出錯(cuò)誤結(jié)果。這一點(diǎn)在用血細(xì)胞自動(dòng)分析儀時(shí)尤為重要。對(duì)于血培養(yǎng)而言,采血過(guò)少可降低培養(yǎng)的陽(yáng)性率。文獻(xiàn)報(bào)告當(dāng)培養(yǎng)的血量從2毫升到20毫升時(shí),血培養(yǎng)的陽(yáng)性率增加30-50%,因此培養(yǎng)量每增加1毫升,陽(yáng)性率增加3-5%。第25頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月

采血完成后,應(yīng)盡量減少運(yùn)輸和儲(chǔ)存時(shí)間,盡快處理、盡快檢測(cè),時(shí)間耽擱越少,檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性就越高。

因標(biāo)本儲(chǔ)存時(shí),血細(xì)胞的代謝活動(dòng)、蒸發(fā)作用和升華作用、化學(xué)反應(yīng)、微生物降解、滲透作用、光學(xué)作用、氣體擴(kuò)散等等,直接影響標(biāo)本的質(zhì)量。比如凝血因子Ⅴ和Ⅷ極不穩(wěn)定,隨著時(shí)間的延長(zhǎng)、溫度的升高其活性逐漸消失。有研究發(fā)現(xiàn),在32℃保存的血漿,2h、6h和24h因子活性分別消失52%、41%和95%。即使在4℃,活性也分別消失5%、55%和71%。接種的血培養(yǎng)瓶不要冷藏,若不能立即送往實(shí)驗(yàn)室應(yīng)放置室溫。第26頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月七、不同指標(biāo)所反映疾病的層面機(jī)體器官組織細(xì)胞化學(xué)成分DNARNA蛋白質(zhì)逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄翻譯問(wèn)診功能檢查影像學(xué)病理學(xué)生化檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)分子診斷第27頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月肝炎的實(shí)驗(yàn)室診斷有生化、免疫和分子生物學(xué)指標(biāo):生化指標(biāo)反映肝臟功能受損的程度,是機(jī)體與病原雙方斗爭(zhēng)的結(jié)果。免疫學(xué)指標(biāo)反映了病原的致敏性及機(jī)體的反應(yīng)能力。核酸則反應(yīng)了病原的存在與否以及存在的多少。第28頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月多重指標(biāo)的聯(lián)合應(yīng)用才是正確判斷疾病的存在與否及其所處階段的正確方法;而當(dāng)這些指標(biāo)出現(xiàn)貌似矛盾的現(xiàn)象時(shí),我們應(yīng)考慮到它們反映的是不同層面。如在乙肝感染早期DNA陽(yáng)性,而表面抗原可能還處在窗口期;一旦發(fā)生整合,免疫學(xué)指標(biāo)陽(yáng)性,而DNA卻可能在血清中檢測(cè)不到。第29頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月八、基因突變與耐藥HBV/HCV的基因變異時(shí)客觀存在的,其檢測(cè)對(duì)分子流行病學(xué)調(diào)查很有實(shí)用價(jià)值,用某些藥物治療也可促進(jìn)變異發(fā)生,甚至變異后會(huì)產(chǎn)生抗藥性。目前抗病毒藥物的應(yīng)用臨床上種類不多,持續(xù)用藥時(shí)間也不長(zhǎng),有待進(jìn)行更多、更長(zhǎng)、更廣泛的研究,才能得出有價(jià)值的結(jié)論。例如用拉米夫定治療慢性乙肝,會(huì)產(chǎn)生一定的YMDD等的基因變異,但有不少研究認(rèn)為在用藥前也有少數(shù)患者已經(jīng)存在變異,與用藥有無(wú)關(guān)系不好定論,一定要通過(guò)大樣本的深入長(zhǎng)期研究,才能指導(dǎo)臨床。第30頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月

細(xì)菌耐藥性愈演愈烈,如何采取有效對(duì)策,將是21世紀(jì)困擾醫(yī)學(xué)界的重大難題之一。第31頁(yè),課件共36頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月九、遺傳多態(tài)性與個(gè)性化醫(yī)療

各種不同的人種、人群、個(gè)體由于有相同的遺傳學(xué)背景,而對(duì)某些藥品產(chǎn)生了不同的反應(yīng)性,據(jù)美國(guó)1994年的報(bào)告,因藥物副作用而入院患者達(dá)二百萬(wàn)人,因藥物副作用而死亡的人數(shù)達(dá)10萬(wàn)人,占死亡原因的第四位,比因交通事故死亡人數(shù)多得多。因此,在投入某種藥物之前,進(jìn)行個(gè)體基因型的分析,是預(yù)防藥物副作用,提高療效的關(guān)鍵,這種以基因型為基礎(chǔ)的醫(yī)療將隨著后基因組時(shí)代的到來(lái)而向我們一天天走近。以往的治療原則是因病施治,對(duì)癥下藥。將來(lái)應(yīng)是因人因病施治,慎重下藥。即中醫(yī)的思想,西醫(yī)的技術(shù)。也許將來(lái)的醫(yī)學(xué)是為每個(gè)人建立一套各種生理指標(biāo)的參考

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