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三十八動物細(xì)胞工程(30分鐘100分)一、選擇題:本題共8小題,每小題5分,共40分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求。1.(2020·天津等級考)在克隆哺乳動物過程中,通常作為核移植受體細(xì)胞的是去核的(
)A.卵原細(xì)胞 B.初級卵母細(xì)胞C.次級卵母細(xì)胞 D.卵細(xì)胞【解析】選C。本題主要考查胚胎工程。在哺乳動物的受精過程中,獲能的精子與處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞結(jié)合,形成受精卵。在克隆哺乳動物過程中,作為核移植受體的細(xì)胞是處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞,應(yīng)為次級卵母細(xì)胞。2.下列屬于動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)區(qū)別的是(
)A.動物細(xì)胞培養(yǎng)基與植物細(xì)胞培養(yǎng)基的成分有所不同B.動物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行C.動物細(xì)胞培養(yǎng)可發(fā)生遺傳物質(zhì)改變,而植物組織培養(yǎng)不能D.植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)都體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性【解析】選A。動物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分不同,如培養(yǎng)動物細(xì)胞的培養(yǎng)基需加入血清,而植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基則不需加入血清,A正確;動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)都需要在無菌、人工控制的條件下進(jìn)行,B錯(cuò)誤;動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)過程中都可發(fā)生遺傳物質(zhì)的改變,C錯(cuò)誤;植物組織培養(yǎng)最終能夠形成完整的植物體,能體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性,動物細(xì)胞培養(yǎng)最終不能被培養(yǎng)成新的個(gè)體,不能體現(xiàn)動物細(xì)胞的全能性,D錯(cuò)誤。3.(2021·哈爾濱模擬)如圖為動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖,相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(
)
A.容器A中放置的一般是幼齡動物的器官或組織,需要用胰蛋白酶將組織分散單個(gè)細(xì)胞B.在D瓶中極少數(shù)細(xì)胞存活,是因?yàn)榇婊畹募?xì)胞獲得不死性,其遺傳物質(zhì)不發(fā)生改變C.為保證培養(yǎng)條件無菌,除進(jìn)行滅菌外,所有操作都需在無菌條件下完成D.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需通入5%CO2,其主要作用是維持培養(yǎng)液的pH【解析】選B。容器A中放置的一般是幼齡動物的器官或組織,需要用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞,A正確;在D瓶中正常培養(yǎng)一段時(shí)間后,發(fā)現(xiàn)有許多細(xì)胞衰老死亡,只有極少數(shù)細(xì)胞存活,這是因?yàn)榇婊畹募?xì)胞發(fā)生了突變,遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,可無限增殖,B錯(cuò)誤;為保證培養(yǎng)條件無菌,所有操作都需在無菌條件下完成,C正確;細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需通入95%的空氣和5%CO2,其中5%CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH,D正確。4.(2021·北京模擬)下列關(guān)于細(xì)胞工程操作流程的表述,不正確的是(
)A.動物組織細(xì)胞懸液→原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)B.高產(chǎn)奶牛體細(xì)胞去核的牛卵母細(xì)胞重組細(xì)胞淋巴細(xì)胞和瘤細(xì)胞融合細(xì)胞單克隆抗體D.胡蘿卜根切斷切成1cm2小塊愈傷組織植株【解析】選D。胰蛋白酶能將組織細(xì)胞分散開來,進(jìn)行原代培養(yǎng),由于存在接觸抑制,再用胰蛋白酶能將組織細(xì)胞分散開來,進(jìn)行傳代培養(yǎng),A正確;高產(chǎn)奶牛體細(xì)胞的整個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞核移植到去核的牛卵母細(xì)胞,電刺激形成重組細(xì)胞,B正確;用滅活的病毒將B淋巴細(xì)胞和瘤細(xì)胞融合,經(jīng)過兩次篩選,第一次用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,第二次用抗體抗原雜交,篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,再經(jīng)過培養(yǎng)獲得單克隆抗體,C正確;將胡蘿卜根削皮切段,用自來水洗凈,在無菌操作臺上將胡蘿卜段用酒精消毒30s后,立即用無菌水清洗2~3次,再用次氯酸鈉溶液處理30min,立即用無菌水清洗2~3次,接種到培養(yǎng)基中形成愈傷組織和完整植株,D錯(cuò)誤。5.科學(xué)家培育克隆羊時(shí),使用了三種供體細(xì)胞的細(xì)胞核,分別將這些細(xì)胞核移入去核卵母細(xì)胞中,形成重組細(xì)胞,發(fā)育成重組胚胎,這些重組胚胎的發(fā)育情況如下。下列相關(guān)分析不正確的是(
)A.早期胚胎細(xì)胞作為供體細(xì)胞時(shí),妊娠成功率最高B.克隆羊的遺傳信息與供體細(xì)胞完全相同C.體細(xì)胞核移植難度高于胚胎細(xì)胞核移植D.重組細(xì)胞的發(fā)育與去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)有關(guān)【解析】選B。分析表格數(shù)據(jù)可知,早期胚胎細(xì)胞作為供體細(xì)胞時(shí),妊娠成功率最高,A正確;克隆羊的絕大部分DNA來自供體細(xì)胞核,但去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中也有少量DNA,故克隆羊的遺傳信息并非與供體細(xì)胞完全相同,B錯(cuò)誤;對比表格中的數(shù)據(jù)可知,體細(xì)胞核移植難度高于胚胎細(xì)胞核移植,C正確;重組細(xì)胞的發(fā)育與去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)有關(guān),D正確?!局R總結(jié)】克隆動物的遺傳特點(diǎn)
克隆動物的親本有三個(gè),即體細(xì)胞核供體、卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體和代孕母體。
(1)克隆動物細(xì)胞核基因來自體細(xì)胞核供體,因此,克隆動物的性狀與體細(xì)胞核供體基本相同。
(2)克隆動物的細(xì)胞質(zhì)基因來自卵母細(xì)胞,因此,克隆動物的性狀與卵母細(xì)胞供體部分相同。
(3)代孕母體沒有為克隆動物提供遺傳物質(zhì),因此,克隆動物的性狀與代孕母體沒有直接關(guān)系?!炯庸逃?xùn)練】
如圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程。下列有關(guān)敘述正確的是(
)A.實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲能與抗胃癌單克隆抗體特異結(jié)合
B.與骨髓瘤細(xì)胞相比,B淋巴細(xì)胞中代謝更旺盛
C.利用滅活的病毒、農(nóng)桿菌等可誘導(dǎo)細(xì)胞融合以獲得乙
D.兩次篩選應(yīng)用的主要原理相同,但丙中含有不能分泌抗體的細(xì)胞【解析】選A。實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲為抗原,能與抗胃癌單克隆抗體特異結(jié)合,A正確;骨髓瘤細(xì)胞具有無限增殖的特性,B淋巴細(xì)胞沒有增殖能力,因此與骨髓瘤細(xì)胞相比,B淋巴細(xì)胞中代謝較弱,B錯(cuò)誤;利用滅活的病毒等可誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合,進(jìn)而獲得乙,但農(nóng)桿菌不能用于動物細(xì)胞融合,C錯(cuò)誤;兩次篩選應(yīng)用的主要原理不同,首次篩選是用特定的選擇培養(yǎng)基,將融合的雜交瘤細(xì)胞篩選出來,二次篩選是通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,將分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來,丙中的細(xì)胞都能分泌抗體,D錯(cuò)誤。6.動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí),通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。從該圖提供的信息不能獲得的結(jié)論是(
)A.有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響不同B.培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)C.正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同D.培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大【解析】選C。據(jù)圖可知,在相同的時(shí)間,無血清情況下的正常細(xì)胞數(shù)目比有血清的正常細(xì)胞數(shù)目少,說明了有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)有不同的影響,A正確;在相同的時(shí)間內(nèi),有血清情況下的正常細(xì)胞數(shù)目多于無血清的情況,所以培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng),B正確;據(jù)圖可知,在有血清的情況,培養(yǎng)后期,癌細(xì)胞的數(shù)目明顯多于正常細(xì)胞數(shù)目;無血清的情況下,將癌細(xì)胞和正常細(xì)胞培養(yǎng)相同的時(shí)間,癌細(xì)胞的數(shù)目明顯多于正常細(xì)胞數(shù)目,說明正常細(xì)胞的增殖速率小于癌細(xì)胞的增殖速率,C錯(cuò)誤;據(jù)圖可知,培養(yǎng)癌細(xì)胞相同的時(shí)間,有血清和無血清的情況下,癌細(xì)胞的數(shù)目無明顯的區(qū)別,說明血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大,D正確。7.無論是植物細(xì)胞,還是動物細(xì)胞,都可以利用一定的方法誘導(dǎo)融合,可用模型圖表示細(xì)胞融合技術(shù)的部分過程,有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(
)
A.若該過程表示植物原生質(zhì)體的融合,則甲、乙細(xì)胞可用酶解法處理B.若該過程表示動物細(xì)胞融合,可用滅活的病毒誘導(dǎo)C.若該過程表示制備單克隆抗體,則丙細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞D.該過程體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性【解析】選D。植物細(xì)胞需要用酶解法除去細(xì)胞壁,制備原生質(zhì)體,再誘導(dǎo)細(xì)胞融合,A正確;誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合可以用滅活的病毒,B正確;制備單克隆抗體過程中,丙是由已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞雜交形成的雜交瘤細(xì)胞,其既能無限增殖,又能產(chǎn)生特異性抗體,C正確;該過程結(jié)果形成丙細(xì)胞,沒有形成新個(gè)體,不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性,D錯(cuò)誤。8.(2021·南通模擬)為研究治療性克隆技術(shù)能否用于帕金森病的治療,科研人員利用人帕金森病模型鼠進(jìn)行如圖實(shí)驗(yàn),相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(
)A.過程①中選擇MⅡ期的卵母細(xì)胞有利于細(xì)胞核全能性恢復(fù)B.過程②重組細(xì)胞培養(yǎng)依次經(jīng)歷了卵裂、桑葚胚、原腸胚和囊胚等過程C.過程③的關(guān)鍵是利用特定條件誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)D.過程④對受體小鼠無需注射免疫抑制劑以抑制其細(xì)胞免疫功能【解析】選B。卵母細(xì)胞中含激發(fā)細(xì)胞核全能性的物質(zhì),核移植過程中選擇MⅡ期的卵母細(xì)胞有利于細(xì)胞核全能性恢復(fù),A正確;過程②重組細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)歷了卵裂、桑葚胚、囊胚和原腸胚等過程,B錯(cuò)誤;過程③是誘導(dǎo)分化過程,其關(guān)鍵是利用特定條件誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá),C正確;過程④移植的神經(jīng)元細(xì)胞是取自該小鼠自身細(xì)胞誘導(dǎo)分化而來,不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng),D正確。二、選擇題:本題共3小題,每小題6分,共18分。每小題有一個(gè)或多個(gè)選項(xiàng)符合題目要求。9.小鼠的某種上皮細(xì)胞與某種淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞周期基本相同,但上皮細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí),呈現(xiàn)扁平不規(guī)則多角形,且貼附在培養(yǎng)瓶內(nèi)壁上,而該淋巴細(xì)胞則常常懸浮在培養(yǎng)液中。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(
)A.使用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)動物細(xì)胞通常不添加天然成分B.培養(yǎng)液需要定期更換C.培養(yǎng)消化道上皮細(xì)胞更易觀察判斷細(xì)胞是否具有接觸抑制現(xiàn)象D.相同次數(shù)分瓶培養(yǎng)所獲得的兩者細(xì)胞數(shù)目完全相同【解析】選A、B、D。使用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)動物細(xì)胞通常添加天然成分血清,A錯(cuò)誤;定期更換培養(yǎng)液,以便清除代謝物,阻止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害,B錯(cuò)誤;上皮細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí),呈現(xiàn)扁平不規(guī)則多角形,且貼附在培養(yǎng)瓶內(nèi)壁上,如存在接觸抑制,則細(xì)胞在瓶壁上只有一層,C正確;上皮細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)貼附在培養(yǎng)瓶內(nèi)壁上,淋巴細(xì)胞則常常懸浮在培養(yǎng)液中,則相同次數(shù)分瓶培養(yǎng)所獲得的淋巴細(xì)胞數(shù)目多,D錯(cuò)誤。10.(2021·臨沂模擬)人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白,制備抗HCG的單克隆抗體可用于早孕診斷。人工制備抗HCG單克隆抗體的大致流程如圖,下列敘述錯(cuò)誤的是(
)A.①過程中促融劑常用滅活的病毒,不可用聚乙二醇B.②過程篩選出的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生抗HCG抗體C.③過程專一抗體檢測利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理D.④過程的培養(yǎng)液中需要添加動物血清等物質(zhì)【解析】選A、B。①過程促融劑常用滅活的病毒,也可用聚乙二醇,A錯(cuò)誤;②過程中篩選出的雜交瘤細(xì)胞不一定能產(chǎn)生抗HCG抗體,還需通過抗體檢測,B錯(cuò)誤;③過程中利用了抗原和抗體特異性結(jié)合的原理,C正確;過程④為動物細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)液中需要添加動物血清等物質(zhì),D正確?!就卣寡由臁繙缁畹牟《菊T導(dǎo)細(xì)胞融合原理:
病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝聚,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合。這一過程既能反映出糖蛋白在細(xì)胞識別中的重要作用,又能反映出細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)具有一定流動性的特點(diǎn)。11.(創(chuàng)新性·白藜蘆醇對人內(nèi)皮細(xì)胞衰老凋亡的影響)SIRT1基因被稱為長壽基因,SIRT1蛋白對于延緩內(nèi)皮細(xì)胞衰老,改善因衰老而引起的內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙方面具有重要作用。科學(xué)家研究了白藜蘆醇對人內(nèi)皮細(xì)胞衰老凋亡、SIRT1基因表達(dá)的影響,部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖。其中P1~P35是指體外培養(yǎng)的人內(nèi)皮細(xì)胞的傳代次數(shù)。下列說法正確的是(
)A.人內(nèi)皮細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí),需使用胰蛋白酶處理貼壁生長的內(nèi)皮細(xì)胞B.隨傳代次數(shù)增加,人內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)自由基減少,SIRT1表達(dá)水平降低C.對照組應(yīng)使用等量清水處理人內(nèi)皮細(xì)胞,溫度等與實(shí)驗(yàn)組保持一致D.適當(dāng)濃度的白藜蘆醇可以降低體外培養(yǎng)的人內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡率【解析】選A、D。傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的內(nèi)皮細(xì)胞,然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng),讓細(xì)胞繼續(xù)增殖,A正確;據(jù)圖示可知,隨傳代次數(shù)增加,細(xì)胞的凋亡率逐漸增大,說明人內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)自由基增多,SIRT1基因相對表達(dá)水平先增大(P1~P5)后減小(P5~P35),B錯(cuò)誤;對照組應(yīng)使用等量的溶解白藜蘆醇的溶劑處理人內(nèi)皮細(xì)胞,溫度等條件與實(shí)驗(yàn)組保持一致,C錯(cuò)誤;由圖3可知,適當(dāng)濃度的白藜蘆醇可促進(jìn)SIRT1基因表達(dá),從而降低體外培養(yǎng)的人內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡率,D正確。三、非選擇題:本題共2小題,共42分。12.(20分)(2018·全國卷Ⅲ)2018年《細(xì)胞》期刊報(bào)道,中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對非人靈長類動物進(jìn)行克隆,獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”。回答下列問題:(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程,核移植是指__________。通過核移植方法獲得的克隆猴,與核供體相比,克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目________(填“減半”“加倍”或“不變”)。
(2)哺乳動物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動物的難度________(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植,其原因是______________________________。
(3)在哺乳動物核移植的過程中,若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體,通常,所得到的兩個(gè)克隆動物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目________(填“相同”或“不相同”),性染色體組合________(填“相同”或“不相同”)。
【解析】(1)核移植是指將動物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)胚胎最后發(fā)育為動物個(gè)體;通過核移植方法獲得的克隆猴的細(xì)胞核來自供體,因此克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目和核供體一致。(2)胚胎細(xì)胞核移植的難度小于體細(xì)胞核移植,原因是動物胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)其全能性相對容易。(3)哺乳動物雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞染色體中的常染色體相同,性染色體前者是XX,后者是XY,因此分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體,通常所得到的兩個(gè)克隆動物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目相同,性染色體組合不相同。答案:(1)將動物的一個(gè)細(xì)胞核,移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中不變(2)小于胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性相對容易(3)相同不相同13.(22分)到目前為止,單克隆抗體技術(shù)是動物細(xì)胞融合技術(shù)中最具應(yīng)用價(jià)值的研究方向之一。制備單克隆抗體過程中,需要從眾多融合和未融合的細(xì)胞中篩選出雜交瘤細(xì)胞,到底怎樣篩選呢?請分析資料,回答下列問題:資料1細(xì)胞內(nèi)DNA合成一般有兩條途徑,即起始合成途徑和中間合成途徑,其中起始合成途徑需要葉酸作為一種必需的輔酶參與。資料2氨基蝶呤是葉酸的拮抗劑,可以阻斷葉酸的形成。融合實(shí)驗(yàn)中使用的骨髓瘤細(xì)胞是中間合成途徑缺失株,只有起始合成途徑。漿細(xì)胞雖不增殖,但有兩條DNA合成途徑。(1)根據(jù)上述資料分析,需要向經(jīng)過促融處理后的各種細(xì)胞混合培養(yǎng)物中加入________,可使______________________不能分裂,從而篩選出唯一能增殖的____。
(2)上述篩選到的細(xì)胞要置于多孔細(xì)胞培養(yǎng)板的每一個(gè)孔中進(jìn)行隨后的培養(yǎng)。轉(zhuǎn)移前,通常要將培養(yǎng)細(xì)胞稀釋到7~10個(gè)/mL,每孔中加入0.1mL,這樣做的目的是______________________。必要時(shí)可重復(fù)上述過程,目的是
______________________。
(3)
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