藥物分析維生素類藥物的分析

藥物分析維生素類藥物的分析第1頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

維生素類藥物維生素又稱為維他命（Vitamin），從結(jié)構(gòu)上看，維生素類藥物沒有很強(qiáng)的共性特征，不同的維生素有不同的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。按溶解度來說，維生素可以分為脂溶性維生素和水溶性維生素。前者常在油狀物中存在，如魚肝油中富含豐富的維生素A和E。本章主要講述維生素A、維生素E、維生素B1、維生素C。第2頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月維生素類藥物脂溶性維生素維生素A維生素D維生素E維生素K水溶性維生素維生素B維生素C維生素B1維生素B2維生素B4維生素B6維生素B12第3頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

1.

結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)環(huán)己烷共軛多烯醇（四）支鏈全反式維生素A（天然）根據(jù)雙鍵的順反VA

的立體異構(gòu)體應(yīng)有16種，但由于空間位阻實(shí)際上只有6種存在。維生素A的分析醋酸酯棕櫚酸酯醇㈠6種立體異構(gòu)體第4頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月6種立體異構(gòu)體第5頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月第6頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月2.官能團(tuán)與分析方法SbCl3（SbCl5）＋（RCOOSbCl5）CHCL3中618～620有強(qiáng)吸收，可用于鑒別、含測(cè)（無水，<＋1℃，10秒內(nèi)測(cè)定）定性，定量。Ｐ.245共軛雙鍵的紫外吸收無水乙醇中有一個(gè)單峰，當(dāng)在酸催化下脫水生成脫水VA,增加一個(gè)雙鍵，吸收紅移，同時(shí)在350～390出現(xiàn)三個(gè)峰。亮藍(lán)色紫紅色第一次測(cè)定

第二次測(cè)定第7頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月第8頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月3含量測(cè)定

各國藥典均采用UV法，相對(duì)簡(jiǎn)單、可靠。但VA原料、制劑中含有相當(dāng)量的VA2、VA3、VA醛、VA酸、中間體、稀釋用油等，對(duì)其構(gòu)成干擾。研究中發(fā)現(xiàn)干擾成分的吸收在316、328、340成一直線，所以建立了三點(diǎn)校正法。λ２λ１λ３Ａ１Ａ３Ａ２A328(校正)=3.52×（2A328－A316－A340）第9頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）測(cè)定Ai

和計(jì)算Ai/A2

（328）將Ai/A2

與藥典規(guī)(5波長)定值進(jìn)行比較(P.249)，如果差值：①均不超過±0.02,不用校正,直接用A2

計(jì)算含量或標(biāo)示量％②有一個(gè)波長處Ai/A2超過±0.02者,則計(jì)算誤差然后用下一原則.分析原則為：

誤差

-15％-3％03％用第二法測(cè)定用A328(校正)計(jì)算

用A328計(jì)算用第二法測(cè)定誤差％=A328(校正)－A328A328×100％A328(校正)=3.52×（2A328－A316－A340）第10頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）樣品含量及標(biāo)示量％的計(jì)算樣品的含量是以效價(jià)（IU/g）表示效價(jià)-每g樣品中所含維生素A的國際單位數(shù)第11頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

換算因子==

已知:1IU=0.300ug全反VA醇;1IU=0.344ug全反VA醋酸酯全反VA醇E1%(異丙醇)325nm=1820;

全反VA醋酸酯E1%(環(huán)己烷)328nm=1530

1000,000ug

所以：VA醋酸酯的換算因子=0.344ug=1900②效價(jià)（IU/g)E1CM1％1530效價(jià)（IU/g）單位E1%相當(dāng)?shù)男r(jià)第12頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月則樣品的含量（以IU/g

表示）P（IU/g）VA醋酸酯=E1%（328）×1900E1%（328）=

A328（校正）100×W×L×D×100是將樣品濃度由g/ml換成g/100ml見P.248樣品的標(biāo)示量%=含量/標(biāo)示量×100%對(duì)樣品進(jìn)行皂化，提純后再測(cè)定。（提取物為VA醇，溶劑為異丙醇，）其A315（校正）=6.815×A325－2.555A310－4.260×A334

IU/g

=

E1%×1830（3）第二法

稀釋體積第13頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月第14頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月第15頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

其

A315（校正）=6.815×A325－2.555A310－4.260×A334

IU/g

=E1%×1830第16頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

維生素B1的分析１.結(jié)構(gòu)

嘧啶亞甲基噻唑連成的季銨鹽化合物白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，吸水性強(qiáng)，易溶于水?！さ?7頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月２.官能團(tuán)與分析方法··HCl二個(gè)堿性基團(tuán)可與多數(shù)生物堿沉淀劑三硝基酚K2HgI4I2生成組成恒定的沉淀可用于鑒別和含量測(cè)定?？捎梅撬畨A量法進(jìn)行含量測(cè)定。硫化鉛反應(yīng)硫色素反應(yīng)樣品NaOH開環(huán)-H2OK[Fe(CN)6]合環(huán)[O]硫色素藍(lán)色熒光，加H＋熒光消失加OH－熒光又出現(xiàn)。用于鑒別和含量測(cè)定。P.258Na2SPb(Ac)2PbS黑鑒別-2HNaOH共熱第18頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月K[Fe(CN)6]第19頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月非水滴定法（ChP所用方法）3.含量測(cè)定第20頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

硅鎢酸重量法

硫色素?zé)晒夥?/p>

紫外分光光度法246nm第21頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

維生素C的分析1.化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：

六碳五員環(huán)內(nèi)酯(四羥基烯醇)，分子中具有2個(gè)手性C原子，具有4種光學(xué)異構(gòu)體。其中生理活性最強(qiáng)的是L（+）-抗壞血酸第22頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月D(-)-異抗壞血酸L(+)-異抗壞血酸L(+)-抗壞血酸D(-)-抗壞血酸第23頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月２.官能團(tuán)與分析方法

內(nèi)酯結(jié)構(gòu),堿性水解。

烯二醇結(jié)構(gòu)—酸性。▲C3-OH，pKa=4.17(共軛效應(yīng))▲C2-OH，pKa=11.57(鄰位羰基)

一元酸.能與Na2CO3作用生成鈉鹽。還原性去氫抗壞血酸L-二酮古羅糖酸VC的結(jié)構(gòu)很象糖結(jié)構(gòu)，具有糖的反應(yīng)藍(lán)色熒光鄰苯二胺去氫抗壞血酸鑒別CP第24頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

反應(yīng)的摩爾比是1∶13.含量測(cè)定

a.碘量法第25頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月操作

終點(diǎn)顏色：無色→藍(lán)色1ml0.05mol/L碘液1ml8.806mgC6H8O6第26頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

酸性，使VC在空氣中氧化速度減慢。溶劑新沸放冷的水，減少水中溶解氧的影響。還原性物質(zhì)的影響及排除，注射液中常加有亞硫酸鹽如NaHSO3作為抗氧劑.

排除：加入丙酮或甲醛。反應(yīng)條件+→第27頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

在酸性下2,6-二氯吲哚酚氧化型是紅色的;還原型是無色的酸性下直接用2,6-二氯吲哚酚滴定，用滴定劑自身的顏色變化指示終點(diǎn)，不需要另外的指示劑。b.

2,6-二氯吲哚酚滴定法++氧化型（紅色）還原型（無色）終點(diǎn)的顏色是溶液由無色變?yōu)榧t色。第28頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

維生素E的分析一.結(jié)構(gòu)苯并二氫吡喃醇醋酸酯十三烷旋光性：天然VE為右旋體，合成VE為消旋體。性狀：黃色透明的黏稠液，溶于有機(jī)溶劑，不溶于水。紫外吸收：苯環(huán)的共軛結(jié)構(gòu)。易水解及氧化變色（酚羥基）。α—生育酚第29頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月二.官能團(tuán)與分析方法Ar-OHH＋HNO3生育紅KOH△75℃Fe3＋＋Fe2＋Fe〔〕〔〕32＋UV血紅色VE的0.01%無水乙醇液：λmax=284nmΛmin=254nmCP性狀對(duì)生育醌生育酚

cp鑒別Ce(SO4)2Fe3紫紅色第30頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月維生素E的鑒別第31頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月檢查游離生育酚:ChP2000P.798取0.1g樣品，按鈰量法用Ce(SO4)2(0.01mol/L)滴定，以二苯胺為指示劑，消耗Ce(SO4)2液不得超過1.0ml。亮黃→灰紫反應(yīng)式，計(jì)算

P.2753.雜質(zhì)檢查第32頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月a.鈰量法

原理：

VE用硫酸加熱回流，水解成生育酚，用硫酸鈰定量地氧化為對(duì)一生育醌，過量的硫酸鈰氧化二苯胺指示劑而指示滴定終點(diǎn)。終點(diǎn)：亮黃→灰紫空白試驗(yàn)

反應(yīng)的摩爾比是1∶2

4.含量測(cè)定第33頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

反應(yīng)條件：⑴

VE在H2SO4酸性條件下水解為宜，堿性溶液中游離生育酚易被氧化。Ce(SO4)2液滴定在酸性溶液中進(jìn)行,如在堿性中會(huì)生成堿式鹽而影響測(cè)定。⑵

Ce(SO4)2溶于酸水溶液，不溶于醇,α—生育酚溶于醇而不溶于水,滴定過程中應(yīng)有一定濃度的乙醇。

⑶

本法適用于純度高的VE供試品。第34頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月b.氣相色譜法：Chp2000色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)色譜柱：2m×4mmI.D.硼硅玻璃柱，內(nèi)裝硅藻土（80~100目）固定相：硅酮（OV-17）涂布濃度2%載氣：N2，流速:含2%固定相：以18~20分鐘為宜；含5%固定相：以30~32分鐘為宜第35頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月柱溫：265℃內(nèi)標(biāo)：正三十二烷檢測(cè)器：FID（氫火焰離子化檢測(cè)器）性能要求：理論塔板數(shù)按VE峰計(jì)算應(yīng)不低于500，VE峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于2。

溶液配制：內(nèi)標(biāo)溶液：正三十二烷的環(huán)己烷溶液（1.0mg/ml）第36頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月對(duì)照溶液：對(duì)照品溶解于內(nèi)標(biāo)溶液中(1mg/ml)供試品溶液：供試品約50mg，用內(nèi)標(biāo)溶液，溶解并稀釋至50ml4、供試品測(cè)定。

mg=F×Ax×Ms/As

Ax：供試品峰面積

F：校正因子

As：內(nèi)標(biāo)物的峰面積特點(diǎn)：簡(jiǎn)便快速、專屬性強(qiáng)，適用于VE、VE制劑及多種維生素制劑中VE的測(cè)定。

第37頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月第38頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

電位滴定法

１．原理和方法：電位滴定的儀器裝置如圖．在化學(xué)反應(yīng)計(jì)量點(diǎn)（附近）,離子濃度發(fā)生根本的變化,引起指示電極電位發(fā)生相應(yīng)的突變．如用AgNO3滴定Cl－,化學(xué)反應(yīng)計(jì)量點(diǎn)前,過剩的是Cl－或者Cl－為主體離子,計(jì)量點(diǎn)時(shí)CCl-≈CAg+（KspAgCl）,計(jì)量點(diǎn)后Ag+為主體離子,溶液的性質(zhì)發(fā)生了改變,電極電位也發(fā)生質(zhì)的變化.電位滴定法是在滴定過程中,借助指示電極的電位突變從而確定終點(diǎn)的分析方法．－間接電位法－．第39頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月每加入0.1mL~0.2ml，測(cè)量一次電動(dòng)勢(shì)

電位滴定法的基本原理及裝置第40頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月5.00622310.02.315.0085225.004.420.00107162.008.022.00123151.001523.0013880.501623.50146150.305023.80161130.206524.0017490.109024.10183110.1011024.20194390.1039024.30233830.1083024.40316240.1024024.50340