立克次體病的血清學(xué)檢驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容

立克次體病的血清學(xué)檢驗(yàn)精品資料立克次體病的血清學(xué)試驗(yàn)參考范圍：補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CF)<1:40微量凝集試驗(yàn) <1:40間接血凝試驗(yàn)(PHA) <1:100間接免疫熒光試驗(yàn)(IFA) <1:16臨床評(píng)價(jià)：1．立克次體病是由節(jié)肢動(dòng)物如蜱、虱、蚤、螨等媒介傳播的一類急性傳染病，病原微生物為立克次體科的立克次體屬、柯克體屬、羅卡利馬體屬等。立克次體屬可分為斑疹傷寒、斑點(diǎn)熱和恙蟲病三個(gè)群，所引起的疾病主要有流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、落磯山斑疹傷寒、蜱媒立克次體病、恙蟲病、立克次體病等?？驴梭w屬中的貝氏柯克體可引起 Q熱。羅卡利馬體屬是戰(zhàn)壕熱的病原體。立克次體屬的抗原分為兩種，一為可溶性抗原，與細(xì)胞壁表面的粘液有關(guān)，具有群特異性。另一種為顆粒性抗原，屬外膜抗原，具有種特異性?？驴梭w屬的病原體有兩種抗原相，第 1相含較多的內(nèi)毒素樣脂多糖和完整抗原組分，毒力較強(qiáng)。第Ⅱ相毒力弱，已失去 I相中的表面抗原。人體感染立克次體后，血清中可產(chǎn)生特異性抗體。利用各種血清學(xué)試驗(yàn)方法檢測(cè)患者的血清抗體，對(duì)立克次體病具有診斷價(jià)值。2．檢測(cè)特異性抗體的血清學(xué)試驗(yàn)，具有特異性高、敏感性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，可根據(jù)不同的立克次體病選用幾種試驗(yàn)，對(duì)疾病作出診斷。僅供學(xué)習(xí)與交流，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除 謝謝2精品資料(1)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)是最常用的一種方法?？贵w效價(jià) >1：40，且恢復(fù)期血清滴度高于急性期4倍以上有診斷價(jià)值。一般補(bǔ)體結(jié)合抗體在病程第 1周內(nèi)即可出現(xiàn)，以后抗體效價(jià)逐漸上升，至 2～3周達(dá)最高峰，其抗體主要為 IgM．然后逐漸下降至低滴度，此時(shí)主要是 IgG，低效價(jià)水平(1：l0～1：40)可維持?jǐn)?shù)年甚至數(shù)十年不退。故可用于流行病學(xué)調(diào)查。 CF試驗(yàn)所用抗原是具有種特異性的顆?？乖士捎靡詤^(qū)別流行性斑疹傷寒和地方性斑疹傷寒。復(fù)發(fā)型斑疹傷寒抗體出現(xiàn)早(發(fā)病第4天)，效價(jià)上升快，8～10天達(dá)高峰，其組成以 IgG為主。恙蟲病立克次體因各株間抗原性差別顯著。故宜采用多價(jià)抗原或當(dāng)?shù)卮碇昕乖?。Q熱患者血清中最早出現(xiàn)Ⅱ相抗體，發(fā)病數(shù)周后才出現(xiàn) I相抗體，而且Ⅱ相抗體水平大多始終高于 I相，Ⅱ相抗體逐漸上升，對(duì) Q熱具有診斷價(jià)值。伴心內(nèi)膜炎時(shí)可出現(xiàn)較高效價(jià)的 I相和Ⅱ相補(bǔ)體結(jié)合抗體。慢性感染往往表現(xiàn)為持續(xù)較高水平的I相抗體。(2)微量凝集試驗(yàn)所用抗原為可溶性抗原，具有群特異性， Q熱的診斷采用Ⅱ相抗原，可用于區(qū)別斑疹傷寒、恙蟲病、各種斑點(diǎn)熱、 Q熱等疾病。此試驗(yàn)特異性高、操作簡(jiǎn)便且節(jié)省抗原。其陽(yáng)性出現(xiàn)常比 CF試驗(yàn)早，流行性斑疹傷寒在病程第5日即可有80％以上病例呈陽(yáng)性，2～3周時(shí)陽(yáng)性率幾乎100％。Q熱第1周陽(yáng)性率為50％，凝集效價(jià)于病程 1月左右達(dá)高峰，繼而迅速下降，于數(shù)月內(nèi)消失，維持時(shí)間不如 CF試驗(yàn)長(zhǎng)久，因而不適用于追溯性研究。地方性斑疹傷寒患者可出現(xiàn)效價(jià)較低的陽(yáng)性反應(yīng)。(3)間接血凝試驗(yàn)的一些特點(diǎn)與微量凝集試驗(yàn)相同，也只具群特異性，不能作種的區(qū)別。主要用于斑疹傷寒群和蜱傳斑點(diǎn)熱群的血清學(xué)試驗(yàn)．還可用于鑒別原發(fā)性和復(fù)發(fā)型斑疹傷寒，前者血清中主要是 IgM型抗體，后者主要為 IgG僅供學(xué)習(xí)與交流，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除 謝謝3精品資料型抗體。斑疹傷寒患者的血凝抗體于病程第 5～7天出現(xiàn)，迅速上升，效價(jià)?？蛇_(dá)1：400～1：3200，比CF試驗(yàn)高，高值維持2～10周，下降也較補(bǔ)體結(jié)合抗體快，血凝抗體只見于感染的活動(dòng)期，病后3～6個(gè)月即消失。(4)間接免疫熒光試驗(yàn)方法敏感，重復(fù)性好，又節(jié)省材料和時(shí)間，廣泛應(yīng)用于立克次體病的血清學(xué)診斷，特別是恙蟲病，為群特異性。在本試驗(yàn)中，單份血清抗體滴度達(dá)≥1：128或恢復(fù)期比急性期血清抗體效價(jià)上升 4倍或以上者，有立克次體病診斷意義。恙蟲病患者血清熒光抗體多在 1周末出現(xiàn)，2周末有顯著升高，3～4周達(dá)高峰，6個(gè)月后仍保持一定水平，可持續(xù)數(shù)年至十年，而有利于流行病學(xué)調(diào)查。3．用于立克次體病的診斷方法雖有多種，但國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室最常用者仍為外一斐試驗(yàn)，此為非特異性凝集反應(yīng)，取雙份或三份血清標(biāo)本，抗體效價(jià)有 4倍以上增長(zhǎng)者具有診斷意義。直接檢查法可作為立克次體病的預(yù)測(cè)和篩選，此方法是取組織活檢標(biāo)本，直接用免疫熒光或免疫酶染色檢查立克次體，具有特異性。從血液或其他臨床材料中分離病原體是可靠的診斷依據(jù)，但這一方法既昂貴又費(fèi)時(shí)，且易致實(shí)驗(yàn)室傳播，故不適宜在一般實(shí)驗(yàn)室推廣。4．影響本試驗(yàn)結(jié)果的因素(1)疾病早期有效的抗生素治療可頓挫疾病，抗體的產(chǎn)生會(huì)延遲 1周左右，其最高效價(jià)也可能降低。若發(fā)病數(shù)天后進(jìn)行抗生素治療，對(duì)抗體產(chǎn)生的時(shí)間或其最終效價(jià)影響極小。(2)引起Q熱的I相脂多糖抗原與光滑型革蘭陰性桿菌有交叉反應(yīng)。(3)類風(fēng)濕因子陽(yáng)性的血清在間接免疫熒光試驗(yàn)中，可出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。僅供學(xué)習(xí)與交流，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除 謝謝4精品資料外-斐試驗(yàn)參考范圍：外-斐試驗(yàn)<l：160臨床評(píng)價(jià)：1．外-斐試驗(yàn)是臨床上診斷立克次體病常用的血清學(xué)試驗(yàn)，為非特異性凝集反應(yīng)。立克次體屬中的普氏立克次體、莫氏立克次體、斑點(diǎn)熱立克次體和恙蟲病立克次體具有耐熱、耐稀堿的多糖抗原，而變形桿菌某些特殊菌株如 X19、X2和XK的菌體與其有共同抗原成分，能發(fā)生交叉反應(yīng)。外一斐試驗(yàn)系利用這三型變形桿菌的菌體抗原代替立克次體抗原進(jìn)行凝集試驗(yàn)，測(cè)定患者血清中的立克次體抗體。2．外-斐凝集素可早在發(fā)病 4～6天出現(xiàn)，多于 2～3周退熱前后達(dá)最高滴度，然后很快下降，維持?jǐn)?shù)月， 5個(gè)月后基本消失。外-斐試驗(yàn)宜取雙份或三份血清標(biāo)本(初人院、病程第 2周和恢復(fù)期)，滴定效價(jià)達(dá) 1：160即為陽(yáng)性，效價(jià)有4倍以上增長(zhǎng)者具有診斷意義。盡管外-斐試驗(yàn)有不能分型及特異性較差等缺點(diǎn)，但由于抗原易于獲得和保存，操作簡(jiǎn)便，故仍被廣泛應(yīng)用。由立克次體引起的疾病主要有流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、落磯山斑點(diǎn)熱、蜱媒立克次體病、恙蟲病、Q熱、立克次體痘和戰(zhàn)壕熱等，這些疾病在外-斐試驗(yàn)中的特點(diǎn)如下：(1)斑疹傷寒病人能產(chǎn)生高滴度的 OX19凝集素及低滴度的 OX2凝集素，陽(yáng)性率高達(dá)83.5％～93.4％，但不與OXK發(fā)生凝集。流行性斑疹傷寒在起病第5～6天時(shí)，病人血清即可與 OX19發(fā)生陽(yáng)性凝集反應(yīng)，其凝集效價(jià)于第 3周達(dá)到高峰，一般超過(guò)1：320，有時(shí)可達(dá)1：2560，陽(yáng)性率以第4周最高，繼而效價(jià)迅僅供學(xué)習(xí)與交流，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除 謝謝5精品資料速下降，于3～6個(gè)月內(nèi)轉(zhuǎn)為陰性。地方性斑疹傷寒患者的血清與變形桿菌OX19發(fā)生的凝集反應(yīng)，凝集效價(jià)一般較流行性斑疹傷寒為低，大多在 1：160～1：640，陽(yáng)性反應(yīng)出現(xiàn)于發(fā)病的第 5～17天，平均為第11～15天。(2)恙蟲病患者血清可與變形桿菌 OXK株發(fā)生凝集反應(yīng)，陽(yáng)性反應(yīng)最早在起病第4天即出現(xiàn)，第1周陽(yáng)性率不高，僅為 30％左右，第2周末為60％，第3～4周80%～90%的患者可呈陽(yáng)性。凝集效價(jià) 1：80～1：1280以上不等．多數(shù)在1：80～1：640之間，第1周開始上升，隨病程而逐漸增高，第 3～4周凝集效價(jià)達(dá)高峰，第5周開始下降，至第 8～9周多數(shù)為陰性。(3)落磯山斑點(diǎn)熱或蜱傳斑點(diǎn)熱患者的血清能產(chǎn)生 OX19與OX2凝集素，通常為OX19高于OX2，但也有OX2較高者。若僅出現(xiàn)OX2高滴度陽(yáng)性，則對(duì)斑點(diǎn)熱有特殊意義。(4)立克次體痘、Q熱及戰(zhàn)壕熱患者血清中的特異性抗體不能與變形桿菌抗原發(fā)生凝集反應(yīng)，故外-斐試驗(yàn)呈陰性結(jié)果。3．取組織活檢標(biāo)本，用免疫熒光及免疫酶染色法直接檢查立克次體，具有特異性，可作為標(biāo)本的預(yù)測(cè)和篩選。病原體的培養(yǎng)和鑒定是確診立克次體感染的可靠方法，但不適用于一般實(shí)驗(yàn)室。應(yīng)用血清學(xué)試驗(yàn)檢測(cè)患者血清中特異性抗原，對(duì)立克次體感染的診斷具有重要價(jià)值，常用的方法有補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、微量凝集試驗(yàn)、間接免疫熒光試驗(yàn)及間接血凝試驗(yàn)等。4．影響本試驗(yàn)結(jié)果的因素(1)某些非立克次體病，外-斐試驗(yàn)也可出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)．如變形桿菌尿路感染、鉤端螺旋體病、回歸熱、瘧疾、傷