器官移植及免疫學檢驗（免疫學檢驗課件）

第二十七章器官移植及免疫學檢驗

目的：

救治末期器官衰竭、惡性血液病、腫瘤以及某些遺傳病。要求：

盡可能讓移植物能在受者體內生存或暫存常時間。問題：排斥反應。移植的目的和要求腿移植油畫器官移植的歷史——第一次成功1954年12月23日，23歲的同卵雙生的赫里克兄弟，進行了成功的腎移植手術。諾貝爾獎：約瑟夫·默里JosephE.Murray(1/2)NobelPrizeinPhysiologyorMedicine1990Discoveriesconcerningorgantransplantationinthetreatmentofhumandisease

與移植免疫發(fā)展有關的諾貝爾獲獎者實施第一例人同卵孿生兄弟間的腎移植如果采用藥物抑制免疫系統(tǒng)，在非親緣關系的人之間進行器官移植是可能的In1954,thefirstsuccessfulhumankidneytransplantwasperformedbetweentwinsinBoston.Transplantswerepossibleinunrelatedpeopleifdrugsweretakentosuppressthebody'simmunereaction器官移植的歷史臨床發(fā)展階段1963年，美國的醫(yī)學家進行人類歷史上的第一例肝移植1963年，美國另一位醫(yī)生做了第一例肺移植1967年，南非完成了第一例心臟移植（存活18天）1968年，美國幾位科學家又進行了第一例心肺聯(lián)合移植截止到2009年底全球器官移植已突破兩百萬例，包括腎、肝、心、肺、骨髓、小腸、關節(jié)、甲狀旁腺、胰腺等33種器官或組織。我國器官移植始于60年代，目前我國器官移植數(shù)量居世界第2位。腎移植1960年吳階平院士率先實行第一例腎移植，腎移植5萬多例，目前每年完成超過5000例，數(shù)量僅次于美國；截止07年我國肝移植14613多例。心臟移植取得突破，還開展了胰腎聯(lián)合移植、肝腎聯(lián)合移植、心肺聯(lián)合移植等高難度手術2005年12月21日，衛(wèi)生部正式公布《人體器官移植技術臨床應用管理暫行辦法》。器官移植已成為治療各種器官和造血系統(tǒng)終末期疾病

的重要手段之一

指應用異體或自體正常器官、組織、細胞置換病變或功能缺損的器官、組織、細胞，以維持和重建機體生理功能的治療方法。第一節(jié)器官移植的基本知識一、移植的概念移植物（graft）：被移植的細胞、組織或器官供者(donor)

：提供移植物的個體受者（recipient）或宿主（host）：接受移植物的個體自體移植（autograft）同系移植/同基因移植（syngraft）同種（異體/異基因）移植（allograft）異種移植（xenogeneicgraft）二、移植的類型自體移植(autologoustransplantation)

同系移植(isograft)同卵雙生間、純系動物間的移植同種異體移植(isogeneictransplantation)同種間不同個體的移植，具遺傳基因、MHC差異異種移植(heterogoustransplantation)異種動物間的移植：種間差異性更大移植排斥反應（graftrejection）

指移植后，受者免疫系統(tǒng)識別移植物抗原或移植物中免疫細胞識別受者抗原，產(chǎn)生免疫應答，導致移植物功能喪失或受者機體損害的過程。三、移植排斥反應有關排斥反應的研究醫(yī)學免疫學器官移植難題――免疫排斥反應的發(fā)現(xiàn)彼得·梅達沃的皮膚移植實驗，證實了在組織器官移植過程中的確存在免疫排斥。移植排斥反應特點：區(qū)分“自己”與“非己”特異性記憶性移植排斥反應——特異性免疫應答

異種之間的移植無一例外地要失??；同一種系內不相關的個體之間的移植常常要失??；同種異體的受體對首次移植物排斥時間較長，但再次接受同一供體的移植物，則迅速被排斥；自體移植總是能成功；受體與供體間的血緣關系愈近，移植愈可能成功。移植排斥反應的規(guī)律

主要組織相容性抗原（MHA）

次要組織相容性抗原（mHA）

ABO血型抗原系統(tǒng)組織特異性抗原（一）誘導移植排斥反應的抗原1、主要組織相容性抗原（MHA）

進行個體移植是，引起移植排斥反應最強的是HLA。在三類HLA中，I、II類分子是引發(fā)移植排斥反應的首要抗原，尤其是HLA－DR位點的抗原分子。HLA-DR、HLA-A、HLA-B3.移植物存活與HLA配型的關系供、受者HLA-A和HLA-B相配位點與移植物存活率正相關；供、受者HLA-DR/Q位點相配更重要：HLA-DR和HLA-DQ基因有很強的連鎖不平衡；2、次要組織相容性抗原（mHA）

排斥反應的程度輕，速度慢

性染色體編碼的mHA：Y染色體上。女性受者對

男性供者的排斥

常染色體編碼的mHA：

主要和次要組織相容性抗原引起排斥反應3、人類紅細胞血型抗原：

分布于幾乎所有人體組織器官的血管內皮細胞表面

ABO血型系統(tǒng)(供受者必須一致?。?/p>

Rh血型系統(tǒng)4、組織特異性抗原血管內皮細胞特異性抗原、腎特異性抗原、肝臟特異性抗原、骨髓特異性抗原等。極強的抗原性同種排斥反應主要抗原mHC引起較弱的排斥反應，H-Y抗原內皮細胞抗原、皮膚SK抗原等。同種異基因移植排斥反應的抗原mHC組織特異性抗原MHC紅細胞和肝腎組織及血管內皮細胞血型抗原引起同種移植排斥反應的抗原同種異基因抗原的識別2.間接識別途徑indirectrecognition1.直接識別途徑directrecognition（二）T細胞識別同種異型抗原的機制受者T細胞識別供者APC所提呈的同種異型MHC抗原。1、直接識別途徑過客白細胞（passengerleukocyte）：存在于移植物中的供者APC和淋巴細胞。過客白細胞中的DC是直接識別途徑的主要APC。直接識別的特點1.速度快、強度大，在急性排斥反應中起主要作用。2.參與的T細胞約占總數(shù)的1%－10%。3.對免疫抑制藥物敏感。受者APC對供者MHC抗原進行處理，并提呈給受者T細胞，使之活化，引起排斥反應。2、間接識別途徑受者APC介導間接識別途徑。1.引起的排斥反應出現(xiàn)較晚，急性排斥中晚期和慢性排斥反應中起主要作用。2.參與的T細胞約占總數(shù)的0.01%~0.1%。3.對免疫抑制藥相對不敏感。間接識別的特點

1．細胞免疫應答效應2.體液免疫應答效應3．非特異性免疫應答效應

（三）移植排斥反應的效應機制

供體移植物的抗原可被受體免疫系統(tǒng)識別，介導宿主抗移植物反應（hostversusgraftrejection,HVGR），另一方面受者組織抗原也可刺激移植物中的免疫細胞，誘導免疫應答，引起移植物抗宿主反應（graftversushostrejection,GVHR)。

（四）移植排斥反應的類型宿主抗移植物反應(host-versus-graftReaction,HVGR)，見于一般器官移植，包括超急性、急性、慢性排斥反應移植物抗宿主反應(hraft-versus-hostReaction,GVHR)，主要發(fā)生在骨髓移植和其他免疫細胞移植根據(jù)排斥反應發(fā)生的時間強度、發(fā)病機理、臨床表現(xiàn)及病理變化，分為：超急性排斥反應急性排斥反應慢性排斥反應1、宿主抗移植物反應（HVGR）超急性排斥反應（hyperacuterejection）：指移植器官與受者的血管接通后立即或1～2天內發(fā)生的排斥反應。見于：術前多次輸血長期血液透析再次移植的個體發(fā)生時間：移植器官與受者血管接通后數(shù)分鐘至1～2天內發(fā)生。1.超急性排斥反應

免疫學基礎：以體液免疫為主受者體內預存的IgM抗體：ABO、血小板、HLA及VEC等；血型相配者由IgG介導；補體或后續(xù)活性物質致血管內皮損傷;病理變化

血管內凝血缺血、變性和壞死應避免，且可避免急性排斥反應（acuterejection）：最常見的類型指在移植后數(shù)天至兩周左右出現(xiàn)的免疫排斥反應，一旦發(fā)生進展迅速

發(fā)生時間

移植后數(shù)天至2周左右出現(xiàn)，80%～90%發(fā)生于移植后一個月內2.急性排斥反應可使用免疫抵制劑免疫學基礎：以細胞免疫為主。CD4+T細胞介導的遲發(fā)型超敏反應、CTL、巨噬細胞、NK細胞及抗體。①移植物血管損傷針對血管內皮細胞表面同種異型抗原的IgG抗體補體依賴的細胞毒作用②實質細胞損害CD4+Th1介導的遲發(fā)型超敏反應CD8+Tc直接殺傷表達同種異型抗原的移植物細胞慢性排斥反應（chronicrejection）：指發(fā)生于移植后數(shù)周、數(shù)月、甚至數(shù)年的免疫排斥反應

發(fā)生時間移植后數(shù)周、數(shù)月、甚至數(shù)年發(fā)生病理變化：正常組織結構的喪失和纖維化以及慢性血管病變：移植物內血管平滑肌細胞增生，血管硬化。3.慢性排斥反應使用免疫抑制劑無效免疫學基礎：體液免疫和細胞免疫共同作用（具體尚不完全清楚）①急性排斥反應細胞壞死的延續(xù)和結果②炎癥性CD4+T細胞/MΦ相關的慢性炎癥③反復多次抗體或細胞介導的內皮損傷細胞損傷誘發(fā)持續(xù)分泌多種生長因子(如胰島素樣生長因子、血小板源性生長因子、轉化生長因子等）導致血管壁增厚、間質纖維化。④非免疫學因素誘發(fā)組織器官的退行性病變：局部缺血、再灌注損傷、免疫抑制劑毒副作用、感染、高血壓、糖尿病等。

移植排斥反應的分類和特點類型反應時間反應機制超急性術后數(shù)分鐘至幾小時受者體內事先存在的天然抗體加急性1~5天T淋巴細胞急性7~14天T淋巴細胞慢性數(shù)月至數(shù)年抗體、補體、內皮細胞增生

移植物抗宿主反應（Graft-versus-hostreaction，GVHR）是由移植物中的抗原特異性淋巴細胞識別宿主組織抗原而發(fā)生的一種排斥反應

發(fā)生條件①宿主與移植物之間組織相容性不合②移植物中含有足夠數(shù)量的免疫細胞③宿主處于免疫無能或免疫功能嚴重缺陷狀態(tài)移植物抗宿主病4.移植物抗宿主反應GVHR發(fā)生情況一旦發(fā)生一般難以逆轉，導致移植失敗，嚴重損傷患者，甚至死亡

主要見于：骨髓移植（主要）、胸腺移植、脾移植、新生兒接受大量輸血

1.

供者T細胞識別宿主MHC，介導細胞免疫應答，并活化NK，Mφ等。2.細胞因子網(wǎng)絡失衡受者自身因素導致的細胞因子異常；供者T細胞被激活，分泌細胞因子；直接毒性+激活供者T淋巴細胞；GVHR發(fā)生機制3.移植物抗白血病反應植物中供者免疫細胞向受者殘留的白血病細胞發(fā)動免疫攻擊，從而防止白血病的復發(fā)——GVHR的一種特殊類型。原因：

mHC

相對特異性的血細胞抗原白血病特異性抗原在白血病時增高的正?？乖?、急性GVHD供受者HLA不相配或未對受者進行預防性處理時移植后數(shù)天，最遲在術后2個月內即可發(fā)生皮膚、肝臟、腸道等多個靶器官上皮細胞的壞死皮膚瘙癢性斑丘疹、厭食、惡心、腹瀉、血清膽紅素增高等由移植物中成熟T細胞介導，也可能與NK細胞有關Acutegraft-versus-hostreactionwithvividpalmarerythema

移植物抗宿主病2、慢性GVHD一個或多個器官的纖維化和萎縮最終可導致所累及器官的功能喪失血清學分型細胞學分型基因分型

第二節(jié)組織配型及配型方法一、HLA分型（一）血清學分型：

補體依賴細胞毒試驗：SD抗原HLA-ABCHLA-DRDQ原理：利用各種已知的HLA標準血清中的HLA抗體與待測淋巴細胞表面的HLA抗原結合，并激活補體，觀察細胞損傷效應。技術內容：分離待測淋巴細胞，與一系列已知抗HLA標準分型血清混合，抗體會特異性結合表達相應HLA抗原的淋巴細胞，添加補體，在補體的作用下，引起細胞死亡，死亡的細胞被臺盼藍染色，而活細胞由于細胞膜完整不著色，根據(jù)死亡細胞的百分比，判定其HLA的型別。記數(shù)、判斷結果。結果判斷讀數(shù)計分標準死亡細胞（100%）計分臨床意義0未試驗或無法計數(shù)0－101陰性11－202陰性可疑21－404陽性可疑41－806陽性反應>808強陽性反應（二）細胞學分型——LD抗原：HLA-D和DP

混合淋巴細胞培養(yǎng)(MLC)原理：兩個無關個體的淋巴細胞在體外混合培養(yǎng)，可互相刺激，向淋巴母細胞轉化。這種反應主要有HLA-D抗原的不同引起的。如果兩種淋巴細胞同型，就不發(fā)生轉化，否則就發(fā)生轉化?？赏ㄟ^形態(tài)學或3H-TdR滲入試驗來檢測淋巴細胞反應的強度，從而判定其HLA型別。成熟（靜息）淋巴細胞轉化淋巴細胞

雙向MLC—受、供體淋巴細胞混合體外培養(yǎng)，彼此作用，觀察細胞形態(tài)與細胞增殖。內容—分離計數(shù)彼此淋巴細胞，共孵育，染色計數(shù)轉化細胞。評價—用于移植前的交叉配合試驗，但不能對HLA-D進行進一步分型。

單向MLC1)MLC——滴血認親RFLP:限制性片段長度多態(tài)性分析PCR-SSOP：序列特異性寡核苷酸探針-PCRPCR-SSP：序列特異性引物-PCRPCR-SSCP：單鏈構象特異性-PCRSBT分型法：基于序列的HLA分型法多熒光微珠免疫分析基因芯片（三）基因分型

不同個體間的HLA復合體存在核苷酸堿基序列的差異，這種差異造成限制性內切酶識別位置及酶切位點數(shù)目的不同，用一組限制性內切酶消化、識別、切割這些位點，產(chǎn)生數(shù)量和長度不一的DNA酶解片段，經(jīng)瓊脂糖電泳或用特異性探針與酶解片段進行雜交即可確定HLA的基因型別。也可先對DNA片段進行體外PCR擴增，然后再進行RFLP分析，即PCR-RFLP。PCR-RFLP

先對HLA基因片段進行PCR擴增，然后將擴增片段轉移至NC膜或尼龍膜上，然后與用放射性核素或酶、地高辛等標記的寡核苷酸探針進行雜交，若待檢DNA與探針序列互補，則兩者結合，從而確定HLA的基因型別。PCR-SSOP

根據(jù)各型別HLA核苷酸堿基序列差異，設計出一套HLA等位基因的序列特異性引物，對待測DNA進行PCR擴增，因TaqDNA聚合酶沒有3′→5′核酸內切酶活性，引物3′端最后一個堿基是否與模板配對決定著能否擴增出產(chǎn)物。若將引物的3′端最后一個堿基設計在正好有差異的那個堿基序列上，則擴增產(chǎn)物僅需常規(guī)瓊脂糖電泳，根據(jù)特異產(chǎn)物存在與否即可直接對HLA進行分型。

用PCR擴增特定的靶序列,經(jīng)變性使之成為兩條單鏈,然后在無變性劑的中性聚丙烯酰胺凝膠中電泳。單鏈DNA如果存在堿基差異,即使一個堿基的不同,也會表現(xiàn)出電泳遷移率的不同,據(jù)此可將不同型別的HLA區(qū)分開,達到分型的目的。PCR-SSCP

首先用PCR擴增HLA的DNA片段，擴增產(chǎn)物進行純化和測序，將此序列與HLA基因庫的DNA已知序列進行比較，即可獲得HLA的基因型別。最可靠也最徹底的基因分型方法。

用標記有生物素的特異性引物分別擴增HLA-A、B、DR等基因座位的特異性片段，擴增產(chǎn)物與已知的寡核苷酸探針（事先包被在不同顏色的磁珠上）進行雜交，洗脫沒有結合的DNA片段，再與熒光素標記的親和素結合，多熒光微珠在流式細胞儀上進行結果判讀，若擴增的DNA片段能與探針結合則發(fā)熒光，不結合則無熒光。多熒光微珠免疫分析

首先用PCR擴增獲得HLA的DNA片段，用放射性核素或熒光素標記擴增的DNA分子，再與預先點在固相支持物表面的成千上萬個代表不同基因的寡核苷酸探針進行雜交，通過放射自顯影或熒光檢測，雜交結果通過計算機軟件處理分析后獲得雜交信號的強度及分布模式圖，從而反映樣品中HLA的基因型別。基因芯片三、交叉配型試驗

檢測受者體內是否存在抗供者的特異性抗體以及受者對供者HLA抗原的相容程度，防止發(fā)生超急性排斥反應。

原理：交叉微量細胞毒試驗

內容：供者淋巴細胞+受者血清

T/B淋巴細胞毒性交叉配型、自身交叉配型、流式細胞術交叉配型。（一）供者的選擇（二）移植物和受者預處理（三）正確合理的組織配型（四）免疫抑制措施第三節(jié)避免移植排斥反應的免疫學檢驗及意義（一）選擇組織相匹配的供者1、一般情況（器官、全身情況、年齡）2、ABO血型相容（擬輸血）3、受者血清中預存抗體的檢測4、HLA配型（受、供者HLA等位基因相合的數(shù)目越多越好）1、ABO血型要求ABO血型必須相同或至少符合輸血原則。

2、HLA型別骨髓移植要求HLA必須匹配。腎臟、心臟、小腸、胰腺移植時HLA-DR配型較HLA-A，HLA-B重要。肝、肺移植要求ABO血型配合，對HLA配型要求不高。

移植排斥反應相關抗原的檢測

供、受者淋巴細胞進行混合培養(yǎng)4、mH抗原分型應盡可能選擇同性別的供者。3、交叉配合試驗（二）移植物和受者預處理1、供者的處理清除移植物中過客白細胞清除骨髓移植物中的T細胞2、受者的處理血漿置換術去除受者的抗A或抗B凝集素對受者進行脾切除、免疫抑制療法輸供者特異性血小板1、淋巴結照射2、免疫抑制劑的應用（1）化學性免疫抑制劑（2）生物性免疫抑制劑（3）中草藥：雷公騰、冬蟲夏草、落新婦（三）免疫抑制措施CsA，F(xiàn)K506：抑制活化的T細胞合成IL-2硝基咪唑硫嘌呤：抑制嘌呤合成，抑制T細胞增殖雷帕霉素：封閉IL-2受體的信號轉導存在的問題無選擇性抑制全身免疫功能，不能誘導耐受常具有毒副作用化學性免疫抑制劑生物性免疫抑制劑

抗淋巴細胞抗體抗黏附分子、細胞因子、細胞因子受體抗體反義核酸：針對細胞因子、黏附分子、共刺激分子等五、移植排斥反應的免疫學監(jiān)測（一）受者對移植物特異性免疫反應的監(jiān)測（二）受者其它免疫學指標監(jiān)測（一）受者對移植物特異性免疫

反應的監(jiān)測體液免疫監(jiān)測－抗供者抗體的監(jiān)測-CDC試驗

1.抗供者HLA抗體

2.ABO血型抗體

3.抗內皮、單核細胞抗體

3.抗供者組織細胞抗體

細胞免疫監(jiān)測

1.T細胞亞群檢測：CD4+/CD8+,CD30/CD69CD4+↑提示易發(fā)生排斥反應，CD8+細胞則相反；CD4+/CD8+>1.2，則預示急性排斥反應的發(fā)生。

2.特異性細胞毒性T細胞檢測

CD4+——Th0-Th43.特異性Th細胞檢測

CTL(CD8+CD28+)和Ts（CD8+CD28-）

4.CD30和CD69（二）受者其它免疫學指標監(jiān)測E花環(huán)試驗淋巴細胞增殖能力檢測NK細胞功能監(jiān)測細胞因子及其受體監(jiān)測:IL-2，TNF等黏附分子監(jiān)測：ICAM-1,VCAM-1.ELAM-1共激分子B7-CD28/CTLA-4，CD40/CD40L;其它：CRP、β2-m等器官免疫排斥問題的突破――環(huán)孢素的發(fā)現(xiàn)

1978年10月，劍橋大學羅伊·卡恩教授通過實驗證明了環(huán)孢素的神奇效果。這種藥物使器官移植的生存率從20%多變成了80%多，它能夠控制絕大部分的移植器官躲開正常的排斥反應。

器官移植存在的問題排斥反應：免疫抑制藥物供體短缺：目前，我國人體器官移植數(shù)量僅次于美國，但隨之而來的器官來源問題成為目前的最大障礙。全球器官捐獻率最高的是西班牙，平均每百萬居民中有34名捐獻者，我國內地只有0.03名，兩者相差1000倍。僅1%患者能等到器官

我國目前的器官移植主要還是依靠死囚捐獻，移植死囚的器官占到總量的60%到70%左右，而公民間的自愿捐獻目前只占極少的一部分。

觀念

+腦死亡立法組織工程異種移植腦死亡對于臨床上雖有心跳但無自主呼吸，腦功能已經(jīng)永久性喪失，最終必致死亡的病人，稱之為腦死亡。我國一直把“心跳停止”、“呼吸消失”和“血壓為零”作為死亡的標準。但隨著醫(yī)學科技的發(fā)展，病人的心跳、呼吸、血壓等生命體征都可以通過一系列藥物和先進設備加以逆轉或長期維持。但是如果腦干發(fā)生結構性損傷破壞，無論采取何種醫(yī)療手段最終發(fā)展為心臟死亡。因此，與心臟死亡相比，腦死亡顯得更為科學，標準更可靠。

供體短缺1.思想觀念身體發(fā)膚，受之于父母，不敢毀損，為孝之始者也。得全尸葬；科學教育及觀念宣傳滯后；2.立法腦死亡立法第一人——陳忠華同濟醫(yī)院器官移植研究院院所長長江學者特聘教授亞洲移植醫(yī)學會常務理事中華醫(yī)學會器官移植學分會副主任委員主要專著《腦死亡》、《移植免疫學》參與我國80多位腦死亡患者捐獻器官移植移植免疫的前沿研究誘導受者產(chǎn)生針對移植物的免疫耐受

——最理想的途徑2.異種移植3.組織工程誘導免疫耐受

誘導同種異基因嵌合體供者特異性抗原輸入可誘導移植耐受阻斷T細胞活化的共刺激信號途徑過繼調節(jié)性T細胞——CD4+/CD25+誘生或過繼“耐受性DC”供者特異性輸血

Donor-specifictransfusion，DST促進Th2細胞活化，抑制Th1細胞功能；誘導受者產(chǎn)生供者組織特異性的封閉抗體；刺激機體產(chǎn)生同種抗原特異性TCR的獨特型抗體，阻斷輕微的移植物抗宿主反應；異體淋巴細胞可誘導受者產(chǎn)生移植物抗宿主樣反應，殺傷受者體內的同種反應性T細胞。CTLA-4-IgblockedB7/CD28interaction

同種異型移植排斥反應的防治原理：組織配型、抑制受者的免疫應答、誘導免疫耐受、加強移植后的免疫檢測。供者選擇紅細胞血型檢查受者血清中細胞毒性預存抗體測定HLA分型（HLA-DRHLA-BHLA-A）移植物或受者的預處理移植物預處理：移植物中的過客白細胞，骨髓中成熟的T細胞受者預處理：輸入供者特異性血小板；借助血漿置換去除受者體內天然抗A或抗B凝集素；受者脾切除；免疫抑制治療。抑制受者免疫應答為目前的常規(guī)治療：抑制代謝的藥物和激素；抑制T細胞活化的藥物；抗體或其他生物制劑。誘導受者對移植物的免疫耐受骨髓移植中建立同種異基因嵌合體（建立同種異基因造血干細胞嵌合體、混合嵌合體）阻斷共刺激通路誘導同種異型反應性細胞失能（CTLA-4Ig融合蛋白、抗CD40L單抗）借助樹突狀細胞誘導T細胞失能人工誘導免疫耐受實驗受精卵DNA表達人MHC“基因工程豬”的制備異種移植體外自體胚胎定向誘導干細胞胚胎工程

定義：具有自我復制的能力，在一定條件下能夠分化成各種功能細胞。分類：包括：胚胎干細胞（embryonicstemcells,ES細胞）

生殖干細胞（embryonicgermcells,EG細胞）

具有全能性，能夠分化成全身200多種細胞類型，進一步形成機體的任何組織和器官。干細胞的基本概念（1）全能干細胞（totipotent）

具有分化成多種細胞和組織的潛能，但卻失去了發(fā)育成完整個體的能力。只能向一種或密切相關的兩種類型的細胞分化。（2）多能干細胞（pluripotent）（3）專能干細胞

患有糖尿病、進行性老年性癡呆、嚴重的心力衰竭或其他疾病，如果從他身上任何部位取下一些體細胞，通過核移植技術，將其體細胞的細胞核顯微注射至去核的人卵細胞中，這種包含與病人完全相同的遺傳物質的雜合卵細胞在體外培養(yǎng)發(fā)育成囊胚。

獲得的囊胚中分離并擴增所謂的“人胚胎干細胞”(ES)，并體外誘導它們分化成胰島細胞、神經(jīng)元、心肌細胞等，將這些細胞移植至發(fā)病部位，則能夠修復病人的組織或器官。

由于移植細胞與病人的基因完全相同，不會產(chǎn)生通常器官移植中的免疫排斥反應，修復的組織或器官將良好地履行職責，無需使用免疫抑制劑。

體外成熟卵子建立胚胎干細胞系定向分化各種干細胞(血細胞,骨細胞)定向分化克隆組織和器官

胚胎干細胞在體外具有無限增殖能力，可以發(fā)育為成體的各種組織細胞，因此，以胚胎干細胞作為“種子”細胞，將其在體外大量擴增并誘導分化為特定的組織細胞，如造血細胞、神經(jīng)細胞、心肌細胞、肝細胞、胰島素分泌細胞等，或直接發(fā)育為某種組織器官，可以廣泛用于器官移植、組織工程、細胞替代和基因治療。移植后的免疫檢測淋巴細胞亞群百分比及其功能移植物浸潤細胞的功能特征移植物內細胞因子表達水平習題1.某人燒傷后，取未受損的皮膚為其進行移植屬于A．自體移植B．同系移植C同種移植D．異種移植E胚胎組織移植2.健康人與患者間腎臟移植屬于A．自體移植B．同系移植C同種移植D．異種移植E胚胎組織移植3．將狒狒的心臟移植給患者，稱為A．自體移植B．同系移植C同種移植D．異種移植E胚胎組織移植4．同卵雙生間的移植屬于A．自體移植B．同系移植C同種移植D．異種移植E胚胎組織移植5.HLA分型的臨床應用最重要的是A.疾病的確定診斷B．尋找與某些疾病的相關性C.器官移植前的組織配型D.輸血前的檢查E．疾病預后的判斷6.HLA分型多采用A.沉淀法B．凝集法C.分子生物學方法D．金標法E．酶免法7.排斥反應的免疫檢驗中，體液免疫水平檢測不包括A．ABO血型B．HLA抗體