碩士研究生分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題答案

碩士研究生分子生物學(xué)復(fù)習(xí)（JUJU）一、名詞解釋1.基因（gene）：是指核酸分子中貯存遺傳信息的遺傳單位，是指貯存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA序列信息及表達(dá)這些信息所必需的全部核苷酸序列。 2.基因組（genome）：是指細(xì)胞或生物體中，一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和?；蚪M的結(jié)構(gòu)主要指不同的基因功能區(qū)域在核酸分子中的分布和排列情況，基因組的功能是儲(chǔ)存和表達(dá)遺傳信息。 3.基因家族（genefamily）：是指核苷酸序列或編碼產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)具有一定程度同源性的一組基因。同一個(gè)家族的基因成員是由同一祖先基因進(jìn)化而來。4.假基因（pseudogene）：在多基因家族中，某些成員并不能表達(dá)出有功能的產(chǎn)物，這些基因稱為假基因，用ψ表示。假基因與有功能的基因同源，原來也可能是有功能的基因，由于缺失、倒位或點(diǎn)突變等原因失去活性，成為無功能的基因，它們或者不能轉(zhuǎn)錄，或者轉(zhuǎn)錄后生成無功能的異常多肽。5.質(zhì)粒（plasmid）：是存在于細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中的一類獨(dú)立于染色體的遺傳成分，它是由環(huán)形雙鏈DNA組成的復(fù)制子。質(zhì)粒DNA分子可以持續(xù)穩(wěn)定的處于染色體外的游離狀態(tài)，但在一定條件下又會(huì)可逆的整合到宿主染色體上，隨染色體的復(fù)制而復(fù)制，并通過細(xì)胞分裂傳遞到后代。 6.基因超家族（genesuperfamily）：是指一組由多基因家族及單基因組成的更大的基因家族。它們的結(jié)構(gòu)有程度不等的同源性，可能是由于基因擴(kuò)增后又經(jīng)過結(jié)構(gòu)上的輕微改變，因此它們可能都起源于相同的祖先基因。但是它們的功能并不一定相同，這一點(diǎn)正是與多基因家族的差別。這些基因在進(jìn)化上也有親緣關(guān)系，但親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。如免疫球蛋白超家族。 7.衛(wèi)星DNA（satelliteDNA）：為非編碼區(qū)串聯(lián)重復(fù)序列。通常存在于內(nèi)含子和間隔DNA內(nèi)。重復(fù)次數(shù)從數(shù)次至數(shù)百次，甚至幾十萬次，串聯(lián)重復(fù)單位從最短的2bp起，長(zhǎng)短不等。這類重復(fù)順序組成衛(wèi)星DNA的基礎(chǔ)?？煞譃槿悾捍螅。⑿l(wèi)星DNA。8.基因多態(tài)性：是指由于等位基因間在特定位點(diǎn)上DNA序列存在差異造成的，一般發(fā)生在基因序列中不編碼蛋白質(zhì)的區(qū)域和沒有重要調(diào)節(jié)功能的區(qū)域。9.操縱子（operator）：是阻遏蛋白識(shí)別與結(jié)合的一小段DNA序列，轉(zhuǎn)錄過程存在阻遏調(diào)控機(jī)制的基因中均含有這樣的序列。操縱子緊接在啟動(dòng)子下游，通常與啟動(dòng)子有部分重疊。 10.順式作用元件（cis-actingelements）：是指那些與結(jié)構(gòu)基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)、能夠被基因調(diào)控蛋白特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列。原核生物中主要是啟動(dòng)子、阻遏蛋白結(jié)合位點(diǎn)、正調(diào)控蛋白結(jié)合位點(diǎn)、增強(qiáng)子等。真核生物中包括啟動(dòng)子、上游啟動(dòng)子元件、增強(qiáng)子、加尾信號(hào)和一些反應(yīng)元件等。 11.反式作用因子（trans-actingelements）：在真核生物中，基因特異性轉(zhuǎn)錄因子稱為反式作用因子，這些因子通常是通過與增強(qiáng)子或上游啟動(dòng)元件結(jié)合而發(fā)揮作用。反式作用因子通過與通用轉(zhuǎn)錄因子及RNA聚合酶相互作用而刺激轉(zhuǎn)錄，這些相互作用促進(jìn)前起始復(fù)合物的形成。 12.增強(qiáng)子（enhancer）：是一種較短的DNA序列，能夠被反式作用因子識(shí)別與結(jié)合。反式作用因子與增強(qiáng)子元件結(jié)合后能夠調(diào)控（通常為增強(qiáng)）臨近基因的轉(zhuǎn)錄。增強(qiáng)子序列通常是數(shù)個(gè)形成一簇，位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游-100~-300bp處，但在基因之外或某些內(nèi)含子中也有增強(qiáng)子序列。13.啟動(dòng)子（promoter）：是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列。啟動(dòng)子具有方向性，一般位于結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的上游，啟動(dòng)子本身并不被轉(zhuǎn)錄。（也有一些真核生物啟動(dòng)子位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)下游，且可以被轉(zhuǎn)錄）14.載體（vector）：攜帶外源DNA進(jìn)入宿主細(xì)胞，并在宿主細(xì)胞中進(jìn)行無性繁殖或表達(dá)的小分子DNA。 這種DNA進(jìn)入受體細(xì)胞后，可自主復(fù)制，或插入到基因組中，隨受體細(xì)胞的基因組一起復(fù)制。載體上還常帶有特定的藥物抗性基因，便于篩選。（按功能可分為克隆載體和表達(dá)載體，按來源可分為質(zhì)粒、噬菌體、噬菌粒、粘粒、病毒和人工染色體載體等。）15.基因工程（geneengineering）：將基因進(jìn)行克隆，并利用克隆的基因表達(dá)、制備特定的蛋白或多肽產(chǎn)物，或定向改造細(xì)胞乃至生物個(gè)體的特性所用的方法及相關(guān)的工作統(tǒng)稱為基因工程。／是在分子水平上，用人工方法提取或制備DNA,在體外切割、拼接和重新組合，然后通過載體把重組的DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞，使外源DNA在受體細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制與表達(dá)，生產(chǎn)出人們所需要的產(chǎn)物，或定向創(chuàng)造生物新性狀，并使之穩(wěn)定地傳給下一代。 16.PCR（polymerasechainreaction）：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。是在DNA聚合酶、模版DNA、引物和4種dNTP存在的條件下進(jìn)行的體外酶促DNA合成反應(yīng)，是在體外特異性擴(kuò)增位于兩段已知序列之間的DNA區(qū)段的一種方法。／其原理是依據(jù)細(xì)胞中DNA半保留復(fù)制機(jī)理，DNA在不同溫度下變性、復(fù)性的特性，人為控制溫度（高溫變性、低溫退火、中溫延伸）循環(huán)多次后使目的基因得到擴(kuò)增。17.RNAi（RNAinterference）：RNA干涉，是指外源性的dsRNA所致的細(xì)胞內(nèi)有效的和特異性的基因封閉。其作用機(jī)制是雙鏈RNA被特異的核酸酶降解，產(chǎn)生干擾小RNA（siRNA），這些siRNA與同源的靶RNA互補(bǔ)結(jié)合，特異性酶降解靶RNA，從而抑制、下調(diào)基因表達(dá)。已經(jīng)發(fā)展成為基因治療、基因結(jié)構(gòu)功能研究的快速而有效的方法。／是指在生物體細(xì)胞內(nèi)，dsRNA引起同源mRNA的特異性降解，因而抑制相應(yīng)基因表達(dá)的過程。是一種轉(zhuǎn)錄后水平的基因沉默，在生物體內(nèi)普遍存在。／指在生物體細(xì)胞內(nèi)，外源性dsRNA（酶切產(chǎn)生siRNA）引起同源mRNA的特異性降解，因而抑制相應(yīng)基因表達(dá)的過程。是一種轉(zhuǎn)錄后水平的基因沉默，在生物體內(nèi)普遍存在（外源性dsRNA被一種叫DICER的dsRNA內(nèi)切酶剪切產(chǎn)生siRNA，其可識(shí)別靶mRNA分子并使其被相應(yīng)的核糖核酸酶切割成片段，從而抑制正常基因的表達(dá)），正常時(shí)生物體內(nèi)不會(huì)有RNAi現(xiàn)象，只有在外源性RNA導(dǎo)入的情況下會(huì)發(fā)生。18.分子雜交（nucleicacidhybridization）：是指具有互補(bǔ)序列的兩條核酸單鏈在一定條件下按堿基酸對(duì)原則形成雙鏈的過程。 19.基因診斷（genediagnosis）：是以DNA和RNA作為診斷材料，通過檢查基因的存在、缺陷或異常表達(dá)，對(duì)人體狀態(tài)和疾病作出診斷的方法和過程。其基本原理是檢測(cè)DNA或RNA的結(jié)構(gòu)變化與否，量的多少及表達(dá)功能是否正常，以確定被檢查者是否存在基因水平的異常變化，以此作為疾病診斷的依據(jù)。 20.基因治療（genetherapy）：是應(yīng)用基因或基因產(chǎn)物，治療疾病的一種方法。狹義的說，基因治療是把外界的正常或治療基因，通過載體轉(zhuǎn)移到人體的靶細(xì)胞，進(jìn)行基因修飾和表達(dá)，改善疾病的一種治療手段。21.miRNA（microRNA）：是真核生物中發(fā)現(xiàn)的一類內(nèi)源性的具有調(diào)控功能的非編碼RNA，其大小長(zhǎng)約20～25nt。成熟的miRNA是由較長(zhǎng)的初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物經(jīng)過一系列核酸酶的剪切加工而產(chǎn)生的，隨后組裝進(jìn)RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體，通過堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式識(shí)別靶mRNA，并根據(jù)互補(bǔ)程度的不同指導(dǎo)沉默復(fù)合體降解靶mRNA或阻遏靶mRNA的翻譯。／長(zhǎng)度約20-25個(gè)堿基對(duì)的非編碼單鏈RNA，通過與mRNA3'UTR互補(bǔ)的機(jī)制結(jié)合到mRNA上，抑制其轉(zhuǎn)錄或直接導(dǎo)致其降解，從而抑制基因表達(dá)。有高等生物基因組編碼，在物種進(jìn)化中相當(dāng)保守。miRNAs的表達(dá)具組織特異性和時(shí)序性，在細(xì)胞生長(zhǎng)和發(fā)育過程的調(diào)節(jié)中起多種作用22.反義RNA（anti-senseRNA）：其堿基序列正好與mRNA互補(bǔ)，從而可與mRNA配對(duì)結(jié)合形成雙鏈，抑制mRNA作為模板進(jìn)行翻譯。 23.轉(zhuǎn)染（transfection）：指真核細(xì)胞主動(dòng)攝取或被動(dòng)導(dǎo)入外源DNA片段而獲得新的表型的過程。 24.轉(zhuǎn)化（transformation）：是指將質(zhì)?；蚱渌庠碊NA導(dǎo)入處于感受態(tài)的宿主細(xì)胞，并使之獲得新的表型的過程。轉(zhuǎn)化現(xiàn)象在自然界普遍存在，是常見的基因轉(zhuǎn)移方式之一。25.基因表達(dá)：是指生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列過程，合成特定的蛋白質(zhì)，進(jìn)而發(fā)揮其特定的生物學(xué)功能和效應(yīng)的全過程。但并非所有基因表達(dá)過程都產(chǎn)生蛋白質(zhì)，rRNA、tRNA編碼基因轉(zhuǎn)錄生成RNA的過程也屬于基因表達(dá)。26.限制性核酸內(nèi)切酶（restrictionendonuclease）：是一類能識(shí)別雙鏈DNA分子中特定核苷酸序列，并在識(shí)別序列內(nèi)或附近特異切割雙鏈DNA的核酸內(nèi)切酶。27. 基因組學(xué)（genomics）：指對(duì)所有基因進(jìn)行基因組作圖（包括遺傳圖譜、物理圖譜、轉(zhuǎn)錄圖譜），核酸序列分析，基因定位和基因功能分析的一門科學(xué)。包括結(jié)構(gòu)基因組學(xué)、功能基因組學(xué)、比較基因組學(xué)。28.蛋白質(zhì)組學(xué) （proteomics）：是對(duì)不同時(shí)間和空間發(fā)揮功能的特定蛋白群體的研究，它是指從整體角度分析細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成分、表達(dá)水平與修飾狀態(tài)，了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系，揭示蛋白質(zhì)功能與細(xì)胞生命活動(dòng)規(guī)律的一個(gè)新的研究領(lǐng)域。蛋白質(zhì)組學(xué)的研究技術(shù)體系包括：樣品制備，雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳，蛋白質(zhì)的染色，凝膠圖像分析，蛋白質(zhì)分析，蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫等。／是指對(duì)在一定時(shí)間內(nèi)或某一特定環(huán)境條件下，細(xì)胞、組織或有機(jī)體內(nèi)所表達(dá)的所有蛋白質(zhì)（即蛋白質(zhì)組）進(jìn)行系統(tǒng)的、總的研究的一門學(xué)科。（旨在闡明生物體全部蛋白質(zhì)的表達(dá)模式和功能模式，內(nèi)容包括鑒定蛋白質(zhì)表達(dá)、存在方式、結(jié)構(gòu)、功能的互相作用方式等，它不同于傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)學(xué)科，是在生物體或其細(xì)胞的整體蛋白質(zhì)水平上進(jìn)行的，從一個(gè)機(jī)體或一個(gè)細(xì)胞的蛋白質(zhì)整體活動(dòng)來揭示生命規(guī)律。包括表達(dá)蛋白質(zhì)組學(xué)和細(xì)胞圖形（功能）蛋白質(zhì)組學(xué)。）29. 順反子（cistron）：編碼單條多肽鏈的一個(gè)遺傳功能單位，即轉(zhuǎn)錄單位。有單順反子和多順反子。／即是由結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄出的、并作為模板與核蛋白體結(jié)合、指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的一類RNA分子。在真核細(xì)胞中一種mRNA分子只能翻譯出一種蛋白質(zhì)，為單順反子。在原核細(xì)胞中一種mRNA分子可翻譯出多種蛋白質(zhì)，為多順反子。二、問答題1.真核生物基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。P351）結(jié)構(gòu)基因：真核生物的結(jié)構(gòu)基因是不連續(xù)的，編碼氨基酸的序列被非編碼序列打斷，因而被成為斷裂基因。編碼序列之間的序列稱為內(nèi)含子，被隔開的編碼序列稱為外顯子。2）順式調(diào)控元件：是指那些與結(jié)構(gòu)基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)、能夠被基因調(diào)控蛋白特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列。包括啟動(dòng)子、上游啟動(dòng)子元件、增強(qiáng)子、加尾信號(hào)和一些反應(yīng)元件等。3）基因家族：是指核苷酸序列或編碼產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)具有一定程度同源性的一組基因。同一個(gè)家族的基因成員是由同一祖先基因進(jìn)化而來。根據(jù)基因家族同源性程度的不同可以分為以下幾型：①基因序列相同；②基因序列高度同源；③基因序列不同，編碼產(chǎn)物具有同源功能區(qū)；④基因序列不用，編碼產(chǎn)物具有小段保守基序；⑤基因超家族。4）假基因：在多基因家族中，某些成員并不能表達(dá)出有功能的產(chǎn)物，這些基因稱為假基因，用ψ表示。假基因與有功能的基因同源，原來也可能是有功能的基因，由于缺失、倒位或點(diǎn)突變等原因失去活性，成為無功能的基因，它們或者不能轉(zhuǎn)錄，或者轉(zhuǎn)錄后生成無功能的異常多肽。5）重復(fù)序列：真核基因組存在大量重復(fù)序列，除了編碼rRNA、tRNA、組蛋白及免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)基因外，大部分重復(fù)序列是非編碼序列。根據(jù)出現(xiàn)頻率不同可分為：高度重復(fù)序列、中度重復(fù)序列、單拷貝序列。6）真核生物基因組中的轉(zhuǎn)座子：是一些可以移動(dòng)的遺傳因素。7）端粒：真核生物基因組染色體DNA為線性分子，其末端存在一種特殊的結(jié)構(gòu)形式，稱為端粒。該結(jié)構(gòu)是一段DNA序列和蛋白質(zhì)形成的復(fù)合體，只存在于真核細(xì)胞染色體末端。其在染色體的定位、復(fù)制、末端保護(hù)以及控制細(xì)胞壽命等方面起重要作用。8）非編碼序列：占基因組90%以上，編碼序列小于DNA總量的5%。9）為單基因結(jié)構(gòu)，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子。10）有多復(fù)制起點(diǎn)，每個(gè)復(fù)制起點(diǎn)大小不一。2.真核生物和原核生物基因組結(jié)構(gòu)的異同點(diǎn)。P35①真核基因組遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于原核生物的基因組。②真核基因具有許多復(fù)制起點(diǎn)，每個(gè)復(fù)制子大小不一。原核基因只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)。每一種真核生物都有一定的染色體數(shù)目，除了配子（精子和卵子）為單倍體外，體細(xì)胞一般為雙倍體，即含兩份同源的基因組，而原核基因組則是單拷貝的。③真核基因都是由一個(gè)結(jié)構(gòu)基因與相關(guān)的調(diào)控區(qū)組成，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子（monocistron），即一分子mRNA只能翻譯成一種蛋白質(zhì)。原核基因具有操縱子結(jié)構(gòu)，即由幾個(gè)功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起，連同它們的調(diào)控序列組成一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位。轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為多順反子。④真核生物基因組中含有大量重復(fù)順序，而原核生物基因組除rRNA、tRNA基因外，重復(fù)順序不多。⑤真核生物基因組內(nèi)非編碼的順序占90%以上?；蛑蟹蔷幋a順序所占的比例是真核生物與細(xì)菌、病毒的重要區(qū)別，且在一定程度上也是生物進(jìn)化的標(biāo)尺。⑥真核基因是斷裂基因，即編碼序列被非編碼序列分隔開來，基因與基因間的非編碼序列為間隔DNA，基因內(nèi)非編碼序列為內(nèi)含子，被內(nèi)含子隔開的編碼序列則為外顯子。而原核基因是連續(xù)的。⑦功能相關(guān)的基因構(gòu)成各種基因家族，它們可串聯(lián)在一起，亦可相距很遠(yuǎn)，但即使串聯(lián)在一起的成簇的基因也是分別轉(zhuǎn)錄的。⑧真核生物基因組中也存在一些可以移動(dòng)的遺傳因素，這些DNA順序并無明顯生物學(xué)功能，似乎為自己的目的而組織，故有自私DNA之稱，其移動(dòng)多被RNA介導(dǎo)（如哺乳動(dòng)物及人類基因組中的逆轉(zhuǎn)座子），也有被DNA介導(dǎo)的（如果蠅及谷類中的DNA轉(zhuǎn)座子）。1、原核結(jié)構(gòu)基因無重疊現(xiàn)象，即同一部分DNA序列不編碼兩種蛋白質(zhì)2、原核具有編碼同工酶的基因3、原核DNA分子中有多種功能的識(shí)別區(qū)域，如復(fù)制起始區(qū)與終止區(qū)、轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)區(qū)與終止區(qū)等，這些區(qū)域往往具有特殊序列，并含有反向重復(fù)序列。3.人類基因組的組織結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。P371）人類基因組的重復(fù)序列：（按組織結(jié)構(gòu)和分布特點(diǎn)分類）①反向重復(fù)序列：是指兩個(gè)順序相同的拷貝在DNA鏈上呈反向排列。人類基因組中約含5%的反向重復(fù)序列，散布于整個(gè)基因組中，常見于基因組的調(diào)控區(qū)內(nèi)，可能與復(fù)制轉(zhuǎn)錄的調(diào)控有關(guān)。②串聯(lián)重復(fù)序列：特點(diǎn)是具有一個(gè)固定的重復(fù)單位，該重復(fù)單位頭尾相連形成重復(fù)順序片段，約占人類基因組10%。編碼區(qū)串聯(lián)重復(fù)序列：如組蛋白基因、5sRNA基因等，其意義在于快速大量合成相應(yīng)基因的mRNA。非編碼區(qū)串聯(lián)重復(fù)序列：其通常存在于間隔DNA和內(nèi)含子內(nèi)，是組成衛(wèi)星DNA的基礎(chǔ)。③散在重復(fù)序列：除串聯(lián)重復(fù)和反向重復(fù)序列之外的所有重復(fù)序列，不論重復(fù)次數(shù)多少，都可歸在散在重復(fù)序列。根據(jù)重復(fù)序列的長(zhǎng)度可分為短散在核元件和長(zhǎng)散在核元件。2）人類基因組中的DNA多態(tài)性：DNA多態(tài)性是指發(fā)生在DNA水平的多態(tài)性。在人類漫長(zhǎng)的進(jìn)化過程中，由于染色體結(jié)構(gòu)的改變、DNA突變、重組、交換以及轉(zhuǎn)座子的插入等，使得除了單卵雙胞得個(gè)體外，沒有兩個(gè)個(gè)體的DNA組成是完全相同的。（人類基因組多態(tài)性都是按孟德爾規(guī)律遺傳的，具有體細(xì)胞穩(wěn)定性和種系穩(wěn)定性，因此可用它們作為染色體上疾病基因座位的遺傳標(biāo)記。）①基因多態(tài)性：是由于等位基因間在特定位點(diǎn)上DNA序列存在差異造成的。②限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性：是指突變、重排、單個(gè)核苷酸的插入或缺失可使DNA順序發(fā)生改變，其中有些可能造成限制酶切位點(diǎn)的增加、缺失或易位，致使DNA分子的限制酶切位點(diǎn)數(shù)目、位置發(fā)生改變。用限制酶切割不用個(gè)體基因組時(shí)，所產(chǎn)生的限制性片段的數(shù)目和每個(gè)片段的長(zhǎng)度不同。③串聯(lián)重復(fù)序列多態(tài)性：是以相同的核心序列按首尾相連的形式串聯(lián)排列在一起形成一段特殊的序列的重復(fù)次數(shù)有較大變化。為DNA序列長(zhǎng)度多態(tài)性。主要發(fā)生在小衛(wèi)星和微衛(wèi)星DNA。④單核甘酸多態(tài)性：是指基因組內(nèi)特定核苷酸位置上存在不同的堿基，其中最少的一種在群體中的頻率不低于1%。4.原核生物基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制。P78原核生物基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯偶聯(lián)，mRNA降解快、半衰期短。原核生物基因表達(dá)調(diào)控主要在轉(zhuǎn)錄水平，其次是翻譯水平。有兩種方式：起始調(diào)控（啟動(dòng)子調(diào)控）和終止調(diào)控（衰減子調(diào)控），轉(zhuǎn)錄是通過負(fù)調(diào)控因子和正調(diào)控因子進(jìn)行復(fù)合調(diào)控的。以大腸桿菌（E.coli）為例介紹。轉(zhuǎn)錄起始調(diào)控的主要模式：①σ因子控制特定基因的表達(dá)：不同的σ因子可以競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合RNA聚合酶，RNA聚合酶的核心酶與不同σ因子組成的全酶識(shí)別不同基因的啟動(dòng)子。②乳糖操縱子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控：在大腸桿菌的許多操縱子中，基因的轉(zhuǎn)錄不是由單一因子調(diào)控的，而是通過負(fù)調(diào)控因子和正調(diào)控因子進(jìn)行復(fù)合調(diào)控的。細(xì)菌通常優(yōu)先以葡萄糖作為能源，葡萄糖代謝產(chǎn)物能抑制細(xì)胞腺苷酸環(huán)化酶和激活磷酸二酯酶的活性，結(jié)果使細(xì)胞內(nèi)的cAMP水平降低。葡萄糖耗盡時(shí)，細(xì)胞內(nèi)cAMP水平升高，即可通過CAP調(diào)控其它操縱子的表達(dá)。E.coli的乳糖操縱子有Z、Y、A三個(gè)結(jié)構(gòu)基因，編碼β-半乳糖甘酶、乳糖透酶和半乳糖甘乙?；?，結(jié)構(gòu)基因上游有一個(gè)啟動(dòng)子（P）和一個(gè)操縱子（O）。啟動(dòng)子上游有一個(gè)CAP蛋白的結(jié)合位點(diǎn)。啟動(dòng)子、操縱子和CAP結(jié)合位點(diǎn)共同構(gòu)成乳糖操縱子的調(diào)控區(qū)。I基因是調(diào)節(jié)基因，編碼產(chǎn)生阻遏蛋白。阻遏蛋白為四聚體，每個(gè)亞基相同。在沒有乳糖的條件下，阻遏蛋白能與操縱子結(jié)合。由于操縱子與啟動(dòng)子有部分重疊，阻遏蛋白與操縱子結(jié)合后，抑制結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。但是阻遏蛋白的抑制作用并不是絕對(duì)的。乳糖存在時(shí)，乳糖經(jīng)透酶作用進(jìn)入細(xì)胞，經(jīng)β-半乳糖甘酶催化，轉(zhuǎn)變成半乳糖和葡萄糖，同時(shí)催化一小部分乳糖轉(zhuǎn)變成異乳糖。異乳糖作為誘導(dǎo)劑與阻遏蛋白結(jié)合，使阻遏蛋白構(gòu)象發(fā)生改變，導(dǎo)致阻遏蛋白與操縱基因的解聚，引起結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。lac操縱子中的lac啟動(dòng)子是弱啟動(dòng)子，RNA聚合酶與之結(jié)合的能力很弱，只有CAP結(jié)合到啟動(dòng)子上游的CAP結(jié)合位點(diǎn)后，促進(jìn)RNA聚合酶與啟動(dòng)子的結(jié)合，才能有效轉(zhuǎn)錄。在這種調(diào)控中，CAP起正調(diào)控作用。乳糖操縱子的轉(zhuǎn)錄起始由CAP和阻遏蛋白兩種調(diào)控因子來控制，可因葡萄糖和乳糖的存在與否而有4種不同的組合。葡萄糖存在、乳糖不存在：此時(shí)無誘導(dǎo)劑存在，阻遏蛋白與DNA結(jié)合，而且由于葡萄糖的存在，CAP也不能發(fā)揮正調(diào)控作用，基因處于關(guān)閉狀態(tài)。葡萄糖和乳糖都不存在：在沒有葡萄糖的情況下，CAP可以發(fā)揮正調(diào)控作用。但由于沒有誘導(dǎo)劑，阻遏蛋白的負(fù)調(diào)節(jié)作用是基因仍然處于關(guān)閉狀態(tài)。葡萄糖和乳糖都存在：乳糖的存在對(duì)基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生誘導(dǎo)作用。但由于葡萄糖的存在使細(xì)胞cAMP水平降低，cAMP-CAP復(fù)合物不能形成，CAP不能結(jié)合到CAP結(jié)合位點(diǎn)上，轉(zhuǎn)錄仍不能啟動(dòng)，基因處于關(guān)閉狀態(tài)。葡萄糖不存在、乳糖存在：此時(shí)CAP可以發(fā)揮正調(diào)控作用，阻遏蛋白由于誘導(dǎo)劑的存在而失去負(fù)調(diào)控作用，基因被打開，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄。1）阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)：在沒有乳糖的條件下，阻遏蛋白能與操縱序列O結(jié)合，抑制了RNA聚合酶與啟動(dòng)子P的結(jié)合，從而抑制酶與啟動(dòng)子的結(jié)合，使乳糖操縱子處于阻遏狀態(tài)。2）CAP的正性調(diào)節(jié)：分解代謝基因激活（CAP）分子內(nèi)存在DNA和CAMP結(jié)合位點(diǎn)，當(dāng)沒有葡萄糖使，CAMP濃度升高，CAMP與CAP結(jié)合，CAMP－CAP復(fù)合物結(jié)合于CAP結(jié)合位點(diǎn)，提高了乳糖操縱子的轉(zhuǎn)錄活性。3）不同生長(zhǎng)條件下的協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)：是指LAC操縱子阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)與CAP的正性調(diào)節(jié)機(jī)制協(xié)調(diào)合作。CAP不能激活被阻遏蛋白封閉的基因轉(zhuǎn)錄，反之沒有CAP的存在來加強(qiáng)轉(zhuǎn)錄活性，即使阻遏蛋白從操縱子上解離，基因仍無轉(zhuǎn)錄活性。具體以下4種情況。③阿拉伯糖操縱子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控④色氨酸操縱子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控⑤DNA片段倒位對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控轉(zhuǎn)錄終止的調(diào)控：分為依賴p因子和不依賴p因子的終止調(diào)控，核糖體也參與轉(zhuǎn)錄終止。翻譯的可調(diào)控性及調(diào)控方式：①SD序列對(duì)翻譯的影響A.SD序列的順序及位置對(duì)翻譯的影響不同的SD序列有一定的差異，因而翻譯起始效率不一樣。SD序列的核心序列是六個(gè)嘌呤（AGGAGG），SD序列與核糖體小亞基中16SrRNA3’端的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合，使起始密碼子定位于翻譯起始部位。SD1、SD2、SD3的序列可以不同，SD1/ORF1，SD2/ORF2，SD3/ORF3的AUG和SD之間的距離也不同。核糖體以不同的效率結(jié)合不同的SD和起始翻譯。SD序列位于起始密碼子AUG上游8～13個(gè)堿基處，不同的開放閱讀框上游的SD序列與起始密碼子之間的距離是不同的，這使得起始密碼子在翻譯起始部位定位的精確度不同，因而翻譯的起始效率也不相同。此外，某些蛋白質(zhì)與SD序列的結(jié)合也會(huì)影響mRNA與核糖體的結(jié)合，從而影響蛋白質(zhì)的翻譯。不同的SD序列有一定的差異，因而翻譯起始效率不一樣。SD序列與起始密碼子之間的距離，也影響mRNA翻譯效率。核糖體以不同的效率結(jié)合不同的SD和起始翻譯。不同的開放閱讀框上游的SD序列與起始密碼子之間的距離是不同，這使起始密碼子在翻譯起始部位定位的精確度不同，因而翻譯的起始效率也不同。B.mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)隱蔽SD序列的作用在某些mRNA分子中，核糖體結(jié)合位點(diǎn)在莖環(huán)中，使核糖體無法結(jié)合，只有破壞莖環(huán)結(jié)構(gòu)，核糖體才能結(jié)合。（紅霉素抗性的細(xì)菌編碼一種紅霉素甲基化酶，該酶使核糖體23SmRNA上特定位點(diǎn)的一個(gè)腺嘌呤甲基化，阻止紅霉素的結(jié)合。紅霉素通過該位點(diǎn)結(jié)合于核糖體，抑制蛋白質(zhì)合成。）②mRNA的穩(wěn)定性許多細(xì)菌mRNA降解速度很快，細(xì)菌的生理狀態(tài)和環(huán)境因素都會(huì)影響mRNA的降解速度。細(xì)菌mRNA的降解是由核酸內(nèi)、外切酶共同完成的。③翻譯產(chǎn)物對(duì)翻譯的調(diào)控：如核糖體蛋白的調(diào)控、翻譯終止因子RF2調(diào)節(jié)自身的翻譯。1．核糖體蛋白：核糖體蛋白合成的控制主要是在翻譯水平。每個(gè)操縱子轉(zhuǎn)錄的mRNA所編碼的蛋白質(zhì)中都有一種蛋白（或兩種蛋白形成的一個(gè)復(fù)合物）可以結(jié)合到多順反子上游的一個(gè)特定部位，阻止核糖體結(jié)合和起始翻譯。2．翻譯終止因子RF2調(diào)節(jié)自身的翻譯：RF2識(shí)別終止密碼UGA和UAA，RF1識(shí)別終止密碼UAG和UAA。④小分子RNA的調(diào)控作用1．調(diào)整基因表達(dá)產(chǎn)物的類型2．低水平表達(dá)基因的控制5.真核生物轉(zhuǎn)錄水平的基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制。P891）轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成反式作用因子通過與順式作用元件結(jié)合來影響轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成。TATA因子結(jié)合TATA盒，并與其他轉(zhuǎn)錄因子一起輔助RNApolII與啟動(dòng)子結(jié)合，形成穩(wěn)定的轉(zhuǎn)錄復(fù)合物。2）轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控真核基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機(jī)制涉及反式作用因子的激活及反式作用因子的作用。①反式作用因子的活性調(diào)節(jié)：A.表達(dá)式調(diào)節(jié)；B.共價(jià)修飾；C.配體結(jié)合；D.蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用。②反式作用因子與順式作用元件的結(jié)合③反式作用因子的作用方式：A.成環(huán)：反式作用因子結(jié)合于增強(qiáng)子后，利用DNA的柔曲性，彎曲成環(huán)，與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)靠近而發(fā)揮作用。B.扭曲：使DNA構(gòu)型改變而發(fā)揮作用。C.滑動(dòng)：反式作用因子結(jié)合到特異的位點(diǎn)上，然后沿DNA滑動(dòng)到另一特異的序列發(fā)揮作用。D.Oozing：一種反式作用因子與順式作用元件結(jié)合，促進(jìn)另一種反式作用因子與鄰近的順式作用元件結(jié)合，后者又促使下一個(gè)反式作用因子與其順式作用元件的結(jié)合，直到基因的轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)，進(jìn)而影響基因的轉(zhuǎn)錄。④反式作用因子的組合式調(diào)控作用：反式作用因子結(jié)合順式作用元件后，可激活轉(zhuǎn)錄，也可抑制轉(zhuǎn)錄。反式作用因子對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控不是由單一因子完成的，而是幾種因子組合，發(fā)揮特定的作用，稱為組合式基因調(diào)控。3）轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控①5’端加帽和3’端多聚腺苷酸化的調(diào)控意義：加帽和poly（A）尾不是mRNA穩(wěn)定的唯一因素，但是十分重要，保證mRNA在轉(zhuǎn)錄過程中不被降解。②mRNA的選擇剪接對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控作用A.mRNA選擇性剪接：真核細(xì)胞前體mRNA的剪接過程中，參加拼接的外顯子可以不按其在基因組的線性分布次序拼接，內(nèi)涵子也可以不被切除而保留，即一個(gè)外顯子或內(nèi)含子是否出現(xiàn)在成熟的mRNA中是可以選擇的，這種剪接方式稱為選擇性剪接。包括：外顯子選擇、內(nèi)含子選擇、互斥外顯子、內(nèi)部剪接位點(diǎn)。B.選擇剪接對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控作用③mRNA運(yùn)輸?shù)目刂脾躮RNA穩(wěn)定性條件調(diào)控主要是通過反式作用因子、順式作用元件和RNA聚合酶的相互作用來完成的。當(dāng)反式作用因子和順式作用元件結(jié)合后，將影響轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成，從而影響轉(zhuǎn)錄的起始和效率。因此真核生物的轉(zhuǎn)錄調(diào)控特點(diǎn)在于：反式作用因子的結(jié)構(gòu)作用特點(diǎn)，以及反式作用因子如何影響轉(zhuǎn)錄起始過程，特別是轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成。1）反式作用因子有三個(gè)明顯的結(jié)構(gòu)作用特點(diǎn)：①分子中含有DNA識(shí)別結(jié)合域、轉(zhuǎn)錄激活域、蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)結(jié)合域；②能特異性識(shí)別及結(jié)合基因上游調(diào)控區(qū)的順式作用元件；③結(jié)合后，可激活或阻遏下游基因的表達(dá)。DNA結(jié)合域有以下結(jié)構(gòu)模式：鋅指結(jié)構(gòu)、同源結(jié)構(gòu)域、亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)、螺旋環(huán)螺旋結(jié)構(gòu)，堿性@結(jié)構(gòu)。轉(zhuǎn)錄活性域通常也具有酸性a螺旋結(jié)構(gòu)域，富含谷氨酰胺結(jié)構(gòu)域，富含脯氨酸結(jié)構(gòu)域。反式作用因子通過上述結(jié)構(gòu)特征介導(dǎo)反式作用因子與反式元件的相互作用。2）反式作用因子對(duì)轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控涉及反式作用因子的活性調(diào)節(jié)以及反式作用因子與順式作用元件的結(jié)合方式及特點(diǎn)。①活性調(diào)節(jié)：反式作用因子合成后，可以無活性的狀態(tài)存在，也可以在需要時(shí)才合成，合成后就有活性?？傊?，反式作用因子的激活包括以下4種類型：A.表達(dá)式調(diào)節(jié)：這類因子合成出來后就有活性，只在需要時(shí)才合成并迅速降解，不能積累。B.共價(jià)修飾調(diào)節(jié)：包括磷酸化去磷酸化修飾和糖基化修飾。C.配體結(jié)合后激活：如某些激素的受體型的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，與激素結(jié)合后即被激活。D.蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用：形成同源或異源二聚體后，才有調(diào)節(jié)活性。②與順式元件的結(jié)合方式及特點(diǎn)：反式作用因子被激活后，即可結(jié)合上游啟動(dòng)子元件和增強(qiáng)子元件中的保守性序列。只有少數(shù)是優(yōu)先于DNA序列結(jié)合，然后才被激活。A.作用方式：反式作用因子的結(jié)合位點(diǎn)一般離其所調(diào)控的基因域或RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)的距離較遠(yuǎn)，一般通過成環(huán)、扭曲、滑動(dòng)、Oozing等方式影響轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)節(jié)。B.組合式調(diào)控作用：反式作用因子的作用可以是激活轉(zhuǎn)錄，也可以是抑制轉(zhuǎn)錄，但反式作用因子對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控不是由單一因子完成的，而是幾種因子組合發(fā)揮特定的作用。不同因子的正或負(fù)調(diào)控的綜合結(jié)果，影響著基因的最后轉(zhuǎn)錄與否，而且產(chǎn)生的凈效應(yīng)也不是簡(jiǎn)單加和的結(jié)果。一種反式作用因子可參與調(diào)控不同基因的表達(dá)，幾種不同的反式作用因子可以控制一個(gè)基因的表達(dá)。通過上述組合式的表達(dá)，使有限數(shù)量的反式作用因子可以調(diào)控不同基因的表達(dá)。6.在大腸桿菌中如何獲得蛋白質(zhì)類的基因工程產(chǎn)品。P158、P1771）目的基因：插入大腸桿菌表達(dá)的目的基因可以是真核基因也可以是原核基因，目的基因如果來自真核細(xì)胞，必須是cDNA，并除去5端非編碼區(qū)和信號(hào)肽編碼區(qū)。2）選擇合適的載體：所用載體必須是大腸桿菌表達(dá)載體pRSET質(zhì)粒。3）選擇合適的限制性酶分別切割載體和靶基因片段4）用連接酶連接目的基因與載體：對(duì)于pRSET來說，目的基因與載體有兩種不同的連接方式，可構(gòu)建兩種不同的重組DNA表達(dá)載體，產(chǎn)生兩種不同的蛋白：即融合型蛋白和非融合型蛋白。5）轉(zhuǎn)化：將重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞（用氯化鈣制備感受態(tài)細(xì)胞）可采用CaCl2制備感受態(tài)細(xì)胞，也可使用電轉(zhuǎn)化、PEG方法等。6）篩選：包括抗生素耐藥菌株的篩選及重組轉(zhuǎn)化子的篩選7）表達(dá)：選擇受體菌株和誘導(dǎo)條件，A.受體菌與表達(dá)載體匹配；B.誘導(dǎo)條件主要由啟動(dòng)子決定。為了提高外源基因的表達(dá)水平，常用的方法是將受體菌的生長(zhǎng)與外源基因的表達(dá)分開。8）從分子量、生物活性等方面對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行初步鑒定9）表達(dá)產(chǎn)物的分離純化。7.如何實(shí)現(xiàn)疾病基因的克??？基因克隆即是在體外通過人工剪、接，將不同來源的DNA分子組成一個(gè)重組體，然后進(jìn)入宿主細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增或表達(dá)。疾病基因克隆通常包括如下步驟：1）目的基因的提?。杭膊』虻奶崛?；2）基因載體（克隆載體）的選擇與構(gòu)建；3）限制性酶切：將疾病基因切成不同大小的片段；4）連接到另一個(gè)DNA分子上（克隆載體）；5）轉(zhuǎn)化：將這個(gè)重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞；6）篩選和鑒定：對(duì)吸收了重組DNA的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定；7）基因表達(dá)：對(duì)含有重組DNA的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng)，檢測(cè)外源基因是否表達(dá)。8.PCR的原理和引物設(shè)計(jì)原則。P185PCR的基本原理：PCR是模板DNA、引物和4種dNTP存在的條件下依賴DNA聚合酶進(jìn)行體外的酶促DNA合成反應(yīng)，是在體外特異性擴(kuò)增位于兩段已知序列之間的DNA區(qū)段的一種方法。反應(yīng)體系中包括DNA模板、耐熱的TaqDNA聚合酶、化學(xué)合成的寡聚核苷酸引物、4種dNTP以及合適的緩沖體系。PCR技術(shù)的特異性取決于引物與模板結(jié)合的特異性。反應(yīng)分為3步：變性，退火和延伸。是半保留復(fù)制。原理：PCR的原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相似，但反應(yīng)體系較簡(jiǎn)單。是根據(jù)DNA半保留復(fù)制原理，DNA在不同溫度下變性、復(fù)性的特性，以待擴(kuò)增的目的DNA分子為模板，以一對(duì)分別與模板5’末端和3’末端互補(bǔ)配對(duì)的寡核苷酸片段為引物，在4種dNTP和耐熱的TaqDNA聚合酶及合適的緩沖體系中，通過人為控制溫度（高溫變性、低溫退火、中溫延伸）發(fā)生依賴DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)，循環(huán)多次后可使模板上介于兩個(gè)引物之間的目的DNA片段得到擴(kuò)增。其特異性取決于引物與模板結(jié)合的特異性。PCR引物設(shè)計(jì)原則：1）引物長(zhǎng)度一般為15～30個(gè)核苷酸。2）引物中的堿基盡可能隨機(jī)分布，避免出現(xiàn)嘌呤、嘧啶的堆積現(xiàn)象。引物序列中3端不應(yīng)有連續(xù)3個(gè)G和C，否則會(huì)使引物在模板的G+C富集區(qū)錯(cuò)誤配對(duì)。引物中G+C的含量在45～55%左右。設(shè)計(jì)引物時(shí)要考慮3和5端引物具有相似的Tm值。引物長(zhǎng)度要確保解鏈溫度不低于54oC。3）引物自身內(nèi)部不應(yīng)存在互補(bǔ)序列以避免折疊成發(fā)夾結(jié)構(gòu)。4）兩個(gè)引物之間不應(yīng)存在互補(bǔ)序列，尤其應(yīng)避免3端的互補(bǔ)重疊。5）引物的堿基序列不應(yīng)與非擴(kuò)增區(qū)域有同源性。要求在引物設(shè)計(jì)時(shí)采用計(jì)算機(jī)進(jìn)行輔助檢索分析。6）引物3端是引發(fā)延伸的起點(diǎn)，因此一定要與模板DNA配對(duì)。每條引物的3末端序列不能與任一條引物中的任何序列互補(bǔ)（互補(bǔ)序列不能超過3個(gè)堿基）。7）引物與模板結(jié)合是，引物的5端最多可以游離十幾個(gè)堿基而不影響PCR反應(yīng)的進(jìn)行。引物的5端可以修飾，因而可以改變幾個(gè)堿基，以引入酶切位點(diǎn)。9.核酸分子雜交的原理和基本過程。P214核酸分子雜交的原理：具有互補(bǔ)序列的兩條單鏈核酸分子在一定條件下（適宜的溫度及離子強(qiáng)度等）堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合，重新形成雙鏈；在這一過程中，核酸分子經(jīng)歷了變性和復(fù)性的變化，以及復(fù)性過程中各分子間鍵的形成和斷裂等。雜交的雙方是待測(cè)核酸序列和已知核酸序列。在雜交體系中已知的核酸序列稱作探針，探針通常用于進(jìn)行核素或非核素示蹤標(biāo)記?；具^程：1）Southern印跡雜交：鑒別DNA靶分子。①待測(cè)核酸樣品的制備：制備待測(cè)DNA，DNA的限制酶消化；②待測(cè)DNA樣品的電泳分離；③凝膠中的核酸變性（堿變性）；④Southern轉(zhuǎn)膜；⑤探針的制備；⑥Southern雜交（預(yù)雜交、雜交、洗脫）；⑦雜交結(jié)果的檢測(cè)。2）Northern印跡雜交：鑒別RNA靶分子。①實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備，創(chuàng)造一個(gè)無RNA酶的環(huán)境；②制備凝膠；③樣品的處理，確保核酸樣品具有相當(dāng)?shù)募兌群屯暾裕虎躌NA的電泳；⑤RNA的轉(zhuǎn)移；⑥RNA的固定；⑦探針標(biāo)記；⑧Northern雜交；⑨雜交結(jié)果的檢測(cè)。10.基因治療的基本策略。P270基因治療理論上可以通過兩個(gè)基本策略達(dá)到目的，即原位矯正病變基因和正?；蛉〈蚋深A(yù)。1）原位矯正病變基因：如同外科手術(shù)，切除病變部分，換上正常健康基因，目前難以做到。2）正?；蛉〈蚋深A(yù)：①基因置換，用正常的基因替換致病基因。即將特定的目的基因?qū)胩囟ǖ募?xì)胞，通過定位同源重組，以導(dǎo)入正常基因置換基因組內(nèi)原有的缺陷基因，不涉及基因組的任何改變。②基因添加，是指不除去異常基因，向靶細(xì)胞導(dǎo)入外源基因通過非定點(diǎn)整合，使其表達(dá)產(chǎn)物，從而彌補(bǔ)缺陷基因的功能?；蛳虬屑?xì)胞導(dǎo)入原本不表達(dá)的基因，利用該基因的表達(dá)產(chǎn)物達(dá)到治療疾病的目的。③基因干預(yù)，是采用特定的方法，抑制某個(gè)基因的表達(dá)，或通過破壞某個(gè)基因，使之不能表達(dá)，達(dá)到治療疾病的目的。4、免疫調(diào)節(jié)、調(diào)節(jié)性基因治療、化療保護(hù)性基因治療、特異性細(xì)胞殺傷性基因治療、生殖細(xì)胞基因治療等。11.RNA如何調(diào)節(jié)基因表達(dá)？P327下述一些重要種類的不編碼蛋白質(zhì)的RNA分子在生物大分子加工和基因表達(dá)調(diào)控等方面起著重要作用：1）gRNA（引導(dǎo)RNA）在mRNA編輯方面2）snRNA（核內(nèi)小分子RNA）在mRNA加工方面3）snoRNA（核仁小分子RNA）在rRNA切割和修飾的成熟過程中4）RNApol（RNA聚合酶）在tRNA加工方面5）端粒RNA在DNA復(fù)制和端粒合成過程中6）信號(hào)識(shí)別顆粒RNA在蛋白質(zhì)分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)中7）tmRNA在終止破損mRNA的合成方面8）Lin4相關(guān)的反義RNA在發(fā)育調(diào)控中的作用9）rps14相關(guān)的反義RNA對(duì)核蛋白體生物合成的調(diào)節(jié)10）dsRNA對(duì)靶基因沉默的調(diào)節(jié)11）Xist及其反義RNATsix對(duì)X染色體失活的調(diào)節(jié)，此外還有一些RNA分子的功能尚未得到很好的驗(yàn)證，如scRNA、7S，10SRNA等。1）DNA復(fù)制需要RNA引物2）RNA的參與保證復(fù)制的完整性3）RNA與基因表達(dá)：核蛋白體RNA：rRNA／mtrRNA——核蛋白體組分信使RNA：mRNA／mttRNA——蛋白質(zhì)合成模板轉(zhuǎn)運(yùn)RNA：tRNA／mtRNA——轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸核內(nèi)不均一RNA：HnRNA——成熟mRNA的前體核內(nèi)小RNA：SnRNA——參與hnRNA的剪接、轉(zhuǎn)運(yùn)核仁小RNA：SnoRNA——rRNA的加工、修飾胞漿小RNA：scRNA／7SL-RNA——蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成的信號(hào)識(shí)別體的組分4）RNA編輯5）選擇性剪接6）RNA催化能力——核酶，及其它催化能力7）RNA與基因表達(dá)調(diào)控——反義RNA&RNA干擾12.基因診斷的常用技術(shù)方法和原理。P253基因診斷是以DNA和RNA作為診斷材料，通過檢查基因的存在、缺陷或異常表達(dá)，對(duì)人體狀態(tài)和疾病作出診斷的方法和過程。其基本原理是檢測(cè)DNA或RNA的結(jié)構(gòu)變化與否，量的多少及表達(dá)功能是否正常，以確定被檢查者是否存在基因水平的異常變化，以此作為疾病診斷的依據(jù)。常用的生物分子生物學(xué)技術(shù)及原理：1）核酸分子雜交：Southern印跡法、Northern印跡法、斑點(diǎn)雜交、原位雜交2）聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）3）單鏈構(gòu)象多態(tài)性檢測(cè)（SSCP）：是一種基于單鏈DNA構(gòu)象差別來檢測(cè)點(diǎn)突變的方法。DNA經(jīng)變性形成單鏈后，在中性條件下單鏈DNA會(huì)因其分子內(nèi)堿基之間的相互作用，形成一定的立體構(gòu)象。相同長(zhǎng)度的單鏈DNA，如果堿基序列不同，形成的構(gòu)象就不同，這樣就形成了單鏈構(gòu)象的多態(tài)性。長(zhǎng)度相同而構(gòu)象不同的單鏈DNA在非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳中表現(xiàn)出不同的遷移率。4）限制酶酶譜分析：基因突變可能導(dǎo)致基因上某一限制酶識(shí)別位點(diǎn)的丟失或其相對(duì)位置發(fā)生改變，以此酶消化待測(cè)DNA和野生型對(duì)照DNA，通過比較二者的酶切片段的長(zhǎng)度、數(shù)量上的差異就可判斷待測(cè)DNA的突變情況。5）DNA序列測(cè)定：其直接以PCR產(chǎn)物為模板，在測(cè)序體系中以TagDNA聚合酶代替測(cè)序酶，而引物的5端帶有標(biāo)記，通過多次變性、退火、延伸的循環(huán)來完成測(cè)序反應(yīng)。6）DNA芯片技術(shù)

高考語文試卷一、語言文字運(yùn)用（15分）1．在下面一段話的空缺處依次填入詞語，最恰當(dāng)?shù)囊唤M是（3分）提到桃花源，許多人會(huì)聯(lián)想到瓦爾登湖。真實(shí)的瓦爾登湖，早已成為▲的觀光勝地，梭羅的小木屋前也經(jīng)常聚集著▲的游客，不復(fù)有隱居之地的氣息。然而虛構(gòu)的桃花源一直就在我們的心中，哪怕▲在人潮洶涌的現(xiàn)代城市，也可以獲得心靈的寧靜。A．名聞遐邇聞風(fēng)而至雜居 B．名噪一時(shí)聞風(fēng)而至棲居C．名噪一時(shí)紛至沓來雜居 D．名聞遐邇紛至沓來?xiàng)?．在下面一段文字橫線處填入語句，銜接最恰當(dāng)?shù)囊豁?xiàng)是（3分）在南方，芭蕉栽植容易，幾乎四季常青?！劣谠掠辰队?、雪壓殘葉，那更是詩人畫家所向往的了。①它覆蓋面積大，吸收熱量大，葉子濕度大。②古人在走廊或書房邊種上芭蕉，稱為蕉廊、蕉房，饒有詩意。③因此蕉陰之下，是最舒適的小坐閑談之處。④在旁邊配上幾竿竹，點(diǎn)上一塊石，真像一幅元人的小景。⑤在夏日是清涼世界，在秋天是分綠上窗。⑥小雨乍到，點(diǎn)滴醒人；斜陽初過，青翠照眼。A．①③②④⑥⑤ B．①④②③⑥⑤C．②①④③⑤⑥ D．②③④①⑤⑥3．下列詩句與“憫農(nóng)館”里展示的勞動(dòng)場(chǎng)景，對(duì)應(yīng)全部正確的一項(xiàng)是（3分）①笑歌聲里輕雷動(dòng)，一夜連枷響到明②種密移疏綠毯平，行間清淺縠紋生③分疇翠浪走云陣，刺水綠針抽稻芽④陰陰阡陌桑麻暗，軋軋房櫳機(jī)杼鳴A．①織布②插秧③車水④打稻 B．①織布②車水③插秧④打稻C．①打稻②插秧③車水④織布D．①打稻②車水③插秧④織布4．閱讀下圖，對(duì)VR（即“虛擬現(xiàn)實(shí)”）技術(shù)的解說不正確的是一項(xiàng)是（3分）A．VR技術(shù)能提供三個(gè)維度的體驗(yàn)：知覺體驗(yàn)、行為體驗(yàn)和精神體驗(yàn)。 B．現(xiàn)有的VR技術(shù)在精神體驗(yàn)上發(fā)展較快，而在知覺體驗(yàn)上發(fā)展較慢。C．VR技術(shù)的未來方向是知覺體驗(yàn)、行為體驗(yàn)和精神體驗(yàn)的均衡發(fā)展。D．期許的VR體驗(yàn)將極大提高行為體驗(yàn)的自由度和精神體驗(yàn)的滿意度。二、文言文閱讀（20分）閱讀下面的文言文，完成5—8題。臨川湯先生傳鄒迪光先生名顯祖，字義仍，別號(hào)若士。豫章之臨川人。生而穎異不群。體玉立，眉目朗秀。見者嘖嘖曰：“湯氏寧馨兒?！蔽鍤q能屬對(duì)。試之即應(yīng)，又試之又應(yīng)，立課數(shù)對(duì)無難色。十三歲，就督學(xué)公試，補(bǔ)邑弟子員。每試必雄其曹偶。庚午舉于鄉(xiāng)，年猶弱冠耳。見者益復(fù)嘖嘖曰：“此兒汗血，可致千里，非僅僅蹀躞康莊也者?！倍〕髸?huì)試，江陵公①屬其私人啖以巍甲而不應(yīng)。曰：“吾不敢從處女子失身也?！惫m一老孝廉乎，而名益鵲起，海內(nèi)之人益以得望見湯先生為幸。至癸未舉進(jìn)士，而江陵物故矣。諸所為附薰炙者，骎且澌沒矣。公乃自嘆曰：“假令予以依附起，不以依附敗乎？”而時(shí)相蒲州、蘇州兩公，其子皆中進(jìn)士，皆公同門友也。意欲要之入幕，酬以館選，而公率不應(yīng)，亦如其所以拒江陵時(shí)者。以樂留都山川，乞得南太常博士。至則閉門距躍，絕不懷半刺津上。擲書萬卷，作蠹魚其中。每至丙夜，聲瑯瑯不輟。家人笑之：“老博士何以書為？”曰：“吾讀吾書，不問博士與不博士也?！睂ひ圆┦哭D(zhuǎn)南祠部郎。部雖無所事事，而公奉職毖慎，謂兩政府進(jìn)私人而塞言者路，抗疏論之，謫粵之徐聞尉。居久之，轉(zhuǎn)遂昌令。又以礦稅事多所蹠戾②，計(jì)偕之日，便向吏部堂告歸。雖主爵留之，典選留之，御史大夫留之，而公浩然長(zhǎng)往，神武之冠竟不可挽矣。居家，中丞惠文，郡國守令以下，干旄往往充斥巷左，而多不延接。即有時(shí)事，非公憤不及齒頰。人勸之請(qǐng)托，曰：“吾不能以面皮口舌博錢刀，為所不知后人計(jì)?！敝复采蠒局骸坝写瞬回氁??！惫跁鵁o所不讀，而尤攻《文選》一書，到掩卷而誦，不訛只字。于詩若文無所不比擬，而尤精西京六朝青蓮少陵氏。公又以其緒余為傳奇，若《紫簫》、《還魂》諸劇，實(shí)駕元人而上。每譜一曲，令小史當(dāng)歌，而自為之和，聲振寥廓。識(shí)者謂神仙中人云。公與予約游具區(qū)靈巖虎丘諸山川，而不能辦三月糧，逡巡中輟。然不自言貧，人亦不盡知公貧。公非自信其心者耶？予雖為之執(zhí)鞭，所忻慕焉。（選自《湯顯祖詩文集》附錄，有刪節(jié)）[注]①江陵公：指時(shí)相張居正，其為江陵人。②蹠戾：乖舛，謬誤。5．對(duì)下列加點(diǎn)詞的解釋，不正確的一項(xiàng)是（3分）A．每試必雄其曹偶 雄：稱雄B．酬以館選 酬：應(yīng)酬C．以樂留都山川 樂：喜愛D．為所不知后人計(jì) 計(jì)：考慮6．下列對(duì)原文有關(guān)內(nèi)容的概括和分析，不正確的一項(xiàng)是（3分）A．湯顯祖持身端潔，拒絕了時(shí)相張居正的利誘，海內(nèi)士人都以結(jié)識(shí)他為榮幸。B．因?yàn)樯蠒u(píng)當(dāng)權(quán)者徇私情、塞言路，湯顯祖被貶官至廣東，做了徐聞尉。C．湯顯祖辭官回家后，當(dāng)?shù)毓賳T爭(zhēng)相與他交往，而湯顯祖不為私事開口求人。D．湯顯祖與鄒迪光相約三月份到江南一帶游玩，但沒準(zhǔn)備好糧食，因而作罷。7．把文中畫線的句子翻譯成現(xiàn)代漢語。（10分）（1）見者益復(fù)嘖嘖曰：“此兒汗血，可致千里，非僅僅蹀躞康莊也者?！保?）然不自言貧，人亦不盡知公貧。公非自信其心者耶？予雖為之執(zhí)鞭，所忻慕焉。8．請(qǐng)簡(jiǎn)要概括湯顯祖讀書為文的特點(diǎn)。（4分）三、古詩詞鑒賞（11分）閱讀下面這首唐詩，完成9—10題。學(xué)諸進(jìn)士作精衛(wèi)銜石填海韓愈鳥有償冤者，終年抱寸誠?？阢暽绞?xì)，心望海波平。渺渺功難見，區(qū)區(qū)命已輕。人皆譏造次，我獨(dú)賞專精。豈計(jì)休無日，惟應(yīng)盡此生。何慚刺客傳，不著報(bào)讎名。9．本讀前六句是怎樣運(yùn)用對(duì)比手法勾勒精衛(wèi)形象的？請(qǐng)簡(jiǎn)要分析。(6分)10．詩歌后六句表達(dá)了作者什么樣的人生態(tài)度？（5分）四、名句名篇默寫（8分）11．補(bǔ)寫出下列名句名篇中的空缺部分。（1）名余曰正則兮，__________________。（屈原《離騷》）（2）__________________，善假于物也。（荀子《勸學(xué)》）（3）艱難苦恨繁霜鬢，__________________。（杜甫《登高》）（4）樹林陰翳，__________________，游人去而禽鳥樂也。（歐陽修《醉翁亭記》）（5）__________________，抱明月而長(zhǎng)終。（蘇軾《赤壁賦》）（6）浩蕩離愁白日斜，__________________。（龔自珍《己亥雜詩》）（7）道之以德，__________________，有恥且格。（《論語·為政》）（8）蓋文章，經(jīng)國之大業(yè)，__________________。（曹丕《典論·論文》）五、現(xiàn)代文閱讀（一）（15分）閱讀下面的作品，完成12~14題。表妹林斤瀾矮凳橋街背后是溪灘，那灘上鋪滿了大的碎石，開闊到叫人覺著是不毛之地。幸好有一條溪，時(shí)寬時(shí)窄，自由自在穿過石頭灘，帶來水草野樹，帶來生命的歡喜。灘上走過來兩個(gè)女人，一前一后，前邊的挎著個(gè)竹籃子，簡(jiǎn)直有搖籃般大，里面是衣服，很有點(diǎn)分量，一路拱著腰身，支撐著籃底。后邊的女人空著兩手，幾次伸手前來幫忙，前邊的不讓。前邊的女人看來四十往里，后邊的四十以外。前邊的女人不走現(xiàn)成的小路，從石頭灘上斜插過去，走到一個(gè)石頭圈起來的水潭邊，把竹籃里的東西一下子控在水里，全身輕松了，透出來一口長(zhǎng)氣，望著后邊的。后邊的走不慣石頭灘，盯著腳下，挑著下腳的地方。前邊的說：“這里比屋里清靜，出來走走，說說話……再呢，我要把這些東西洗出來，也就不客氣了?！闭f著就蹲下來，抓過一團(tuán)按在早鋪平好了的石板上，拿起棒槌捶打起來，真是擦把汗的工夫也節(jié)約了。看起來后邊的是客人，轉(zhuǎn)著身于看這個(gè)新鮮的地方，有一句沒一句地應(yīng)著：“水倒是清的，碧清的……樹也陰涼……石頭要是走慣了，也好走……”“不好走，一到下雨天你走走看，只怕?lián)鷶嗔四_筋。哪有你們城里的馬路好走?！薄跋掠晏煲蚕匆路?”“一下天呢，二十天呢。就是三十天不洗也不行。嗐，現(xiàn)在一天是一天的事情，真是日日清，月月結(jié)?！笨腿穗S即稱贊：“你真能干，三表妹，沒想到你有這么大本事，天天洗這么多?！敝魅宋⑽⑿χ?，手里捶捶打打，嘴里喜喜歡歡的：事情多著呢。只有晚上吃頓熱的，別的兩頓都是馬馬虎虎。本來還要帶子，現(xiàn)在托給人家。不過洗完衣服，還要踏縫紉機(jī)?！笨腿似鋵?shí)是個(gè)做活的能手，又做飯又帶孩子又洗衣服這樣的日子都過過?，F(xiàn)在做客人看著人家做活，兩只手就不知道放在哪里好。把左手搭在樹杈上，右手背在背后，都要用點(diǎn)力才在那里閑得住。不覺感慨起來：“也難為你，也虧得是你，想想你在家里的時(shí)候，比我還自在呢?！敝魅朔畔掳糸?，兩手一刻不停地揉搓起來：“做做也就習(xí)慣了。不過，真的，做慣了空起兩只手來，反倒沒有地方好放。鄉(xiāng)下地方，又沒有什么好玩的，不比城里?！笨腿诵睦镉行┟?，就學(xué)點(diǎn)見過世面的派頭，給人家看，也壓壓自己的煩惱：“說的是，”右手更加用力貼在后腰上，“空著兩只手不也沒地方放嘛。城里好玩是好玩，誰還成天地玩呢。城里住長(zhǎng)久了，一下鄉(xiāng)，空氣真就好，這個(gè)新鮮空氣，千金難買。”單夸空氣，好比一個(gè)姑娘沒有什么好夸的，單夸她的頭發(fā)。主人插嘴問道：“你那里工資好好吧？”提起工資，客人是有優(yōu)越感的，卻偏偏埋怨道：“餓不死吃不飽就是了，連獎(jiǎng)金帶零碎也有七八十塊?！薄澳鞘亲龆嘧錾僬諛幽醚?！”“還吃著大鍋飯。”“不做不做也拿六七十吧？”“鐵飯碗！”客人差不多叫出來，她得意。主人不住手地揉搓，也微微笑著?？腿说勾蚱稹氨Р黄健眮恚骸澳愫闷猓俏?，氣也氣死了，做多做少什么也不拿?！薄按蟊斫?，我們也搞承包了。我們家庭婦女洗衣店，給旅店洗床單，給工廠洗工作服都洗不過來。”“那一個(gè)月能拿多少呢？”客人問得急點(diǎn)。主人不忙正面回答，笑道：“還要苦干個(gè)把月，洗衣機(jī)買是買來了，還沒有安裝。等安裝好了，有時(shí)間多踏點(diǎn)縫紉機(jī)，還可以翻一番呢！”“翻一番是多少？”客人急得不知道轉(zhuǎn)彎。主人停止揉搓，去抓棒槌，這功夫，伸了伸兩個(gè)手指頭?？腿说哪X筋飛快轉(zhuǎn)動(dòng)：這兩個(gè)手指頭當(dāng)然不會(huì)是二十，那么是二百……聽著都嚇得心跳，那頂哪一級(jí)干部了？廠長(zhǎng)？……回過頭來說道：“還是你們不封頂好，多勞多得嘛。”“不過也不保底呀，不要打算懶懶散散混日子。”客人兩步撲過來，蹲下來抓過一堆衣服，主人不讓，客人已經(jīng)揉搓起來了，一邊說：“懶懶散散，兩只手一懶，骨頭都要散……鄉(xiāng)下地方比城里好，空氣第一新鮮，水也碧清……三表妹，等你大侄女中學(xué)一畢業(yè)，叫她頂替我上班，我就退下來……我到鄉(xiāng)下來享幾年福，你看怎么樣？”（選自《十月》1984年第6期，有刪改）12．下列對(duì)小說相關(guān)內(nèi)容和藝術(shù)特色的賞析，不正確的一項(xiàng)是？A．小說開頭的景物描寫，以自由流動(dòng)的溪水所帶來的“水草野樹”以級(jí)“生命的歡喜”，暗示著農(nóng)村的新氣象。B．小說中“一路拱著腰身”等動(dòng)作描寫，以及“真是日日清，月月結(jié)”等語言描寫，為下文表妹承包洗衣服這件事做了鋪墊。C．表姐兩次提到鄉(xiāng)下空氣“新鮮”，第一次是出于客套，第二次提到時(shí)，表姐對(duì)農(nóng)村的好已有了更多體會(huì)。D．表妹說的“不要打算懶懶散散混日子”，既表達(dá)了自己對(duì)生活的態(tài)度，也流露出對(duì)自己得不到休息的些許不滿。13．請(qǐng)簡(jiǎn)要分析表姐這一人物形象。（6分）14．小說刻畫了兩個(gè)人物，作者以“表妹”為題，表達(dá)了哪些思想感情？（6分）六、現(xiàn)代文閱讀（二）（12分）閱讀下面的作品，完成15~17題。書家和善書者沈尹默“古之善書者，往往不知筆法。”前人是這樣說過。就寫字的初期來說，這句話，是可以理解的，正同音韻一樣，四聲清濁，是不能為晉宋以前的文人所熟悉的，他們作文，只求口吻調(diào)利而已。筆法不是某一個(gè)人憑空創(chuàng)造出來的，而是由寫字的人們逐漸地在寫字的點(diǎn)畫過程中，發(fā)現(xiàn)了它，因而很好地去認(rèn)真利用它，彼此傳授，成為一定必守的規(guī)律。由此可知，書家和非書家的區(qū)別，在初期是不會(huì)有的。寫字發(fā)展到相當(dāng)興盛之后（尤其到唐代），愛好寫字的人們，一天比一天多了起來，就產(chǎn)生出一批好奇立異、相信自己、不大愿意守法的人，各人使用各人的手法，各人創(chuàng)立各人所愿意的規(guī)則。凡是人為的規(guī)則，它本身與實(shí)際必然不能十分相切合，因而它是空洞的、缺少生命力的，因而也就不會(huì)具有普遍的、永久的活動(dòng)性，因而也就不可能使人人都滿意地沿用著它而發(fā)生效力。在這里，自然而然地便有書家和非書家的分別了。有天分、有休養(yǎng)的人們，往往依他自己的手法，也可能寫出一筆可看的字，但是詳細(xì)監(jiān)察一下它的點(diǎn)畫，有時(shí)與筆法偶然暗合，有時(shí)則不然，尤其是不能各種皆工。既是這樣，我們自然無法以書家看待他們，至多只能稱之為善書者。講到書家，那就得精通八法，無論是端楷，或者是行草，他的點(diǎn)畫使轉(zhuǎn)，處處皆須合法，不能四號(hào)茍且從事，你只要看一看二王、歐、虞、褚、顏諸家遺留下來的成績(jī)，就可以明白的。如果拿書和畫來相比著看，書家的書，就好比精通六法的畫師的畫；善書者的書，就好比文人的寫意畫，也有它的風(fēng)致可愛處，但不能學(xué)，只能參觀，以博其趣。其實(shí)這也是寫字發(fā)展過程中，不可避免的現(xiàn)象。六朝及唐人寫經(jīng)，風(fēng)格雖不甚高，但是點(diǎn)畫不失法度，它自成為一種經(jīng)生體，比之后代善書者的字體，要嚴(yán)謹(jǐn)?shù)枚?。宋代的蘇東坡，大家都承認(rèn)他是個(gè)書家，但他因天分過高，放任不羈，執(zhí)筆單鉤，已為當(dāng)時(shí)所非議。他自己曾經(jīng)說過：“我書意造本無法?！秉S山谷也嘗說他“往往有意到筆不到處”。就這一點(diǎn)來看，他又是一個(gè)道地的不拘拘于法度的善書的典型人物，因而成為后來學(xué)書人不須要講究筆法的借口。我們要知道，沒有過人的天分，就想從東坡的意造入手，那是毫無成就可期的。我嘗看見東坡畫的枯樹竹石橫幅，十分外行，但極有天趣，米元章在后邊題了一首詩，頗有相互發(fā)揮之妙。這為文人大開了一個(gè)方便之門，也因此把守法度的好習(xí)慣破壞無遺。自元以來，書畫都江河日下，到了明清兩代，可看的書畫就越來越少了。一個(gè)人一味地從心所欲做事，本來是一事無成的。但是若能做到從心所欲不逾矩（自然不是意造的矩）的程度，那卻是最高的進(jìn)境。寫字的人，也需要做到這樣。（有刪改）15．根據(jù)原文內(nèi)容，下列說法不正確的一項(xiàng)是（3分）A．善書而不知筆法，這一現(xiàn)象出現(xiàn)在寫字初期，當(dāng)時(shí)筆法還未被充分發(fā)現(xiàn)和利用。B．唐代愛好寫字的人漸多，有一批人好奇立異，自創(chuàng)規(guī)則，經(jīng)生體就是這么產(chǎn)生的。C．二王、歐、虞、褚、顏諸家都是嚴(yán)格遵守筆法的典型，他們都屬于書家的行列。D．元明清三代，書畫創(chuàng)作每況愈下，優(yōu)秀作品越來越少，與守法度的習(xí)慣被破壞有關(guān)。16．下列關(guān)于原文內(nèi)容的理解和分析，不正確的一項(xiàng)是（3分）A．在寫字過程中，那些與實(shí)際不能完全切合的人為的規(guī)則，不具有普遍的永久的活動(dòng)性，因而不能稱之為筆法。B．書與畫相似，書家之書正如畫師之畫，謹(jǐn)嚴(yán)而不失法度，而善書者之書正如文人的寫意，別有風(fēng)致。C．蘇東坡天分高，修養(yǎng)深，意造的書畫自有天然之趣，但率先破法，放任不羈，成為后世不守法度的借口。D．一味從心所欲做事是不可取的，但寫字的人如能做到“從心所欲不逾矩”，卻能達(dá)到最高的境界。17．書家和善書者的區(qū)別體現(xiàn)在哪些方面？請(qǐng)簡(jiǎn)要概括。（6分）七、現(xiàn)代文閱讀（三）（12分）閱讀下面的作品，完成18~20題。天津的開合橋茅以升開合橋就是可開可合的橋，合時(shí)橋上走車，開時(shí)橋下行船，一開一合，水陸兩便，是一種很經(jīng)濟(jì)的橋梁結(jié)構(gòu)。但在我國，這種橋造得很少，直到現(xiàn)在，幾乎全國的開合橋都集中在天津，這不能不算是天津的一種“特產(chǎn)”。南運(yùn)河上有金華橋，于牙河上有西河橋，海河上有全鋼橋、全湯橋、解放橋。這些都是開合橋。為什么天津有這樣多的開合橋呢？對(duì)陸上交通說，過河有橋，當(dāng)然是再好沒有了。但是河上要行船，有了橋，不但航道受限制，而且船有一定高度，如果橋的高度不變，水漲船高，就可能過不了橋。要保證船能過橋，就要在橋下預(yù)留一個(gè)最小限度的空間高度，雖在大水時(shí)期，仍然能讓最高的船通行無阻。這個(gè)最小限度的空間高度，名為“凈空”，要等于河上航行的船的可能最大高度。根據(jù)河流在洪水時(shí)期的水位，加上凈空，就定出橋面高出兩岸的高度。如果河水漲落差距特別大，如同天津的河流一樣，那么，這橋面的高度就很驚人了。橋面一高，就要在橋面和地面之間造一座有坡度的“引橋”，引橋不僅增加了橋梁的造價(jià)，而且對(duì)兩旁的房屋建筑非常不利。這在城市規(guī)劃上成了不易解決的問題。這便是水陸文通之同的一個(gè)矛盾。為了陸上交通，就要有正橋過河，而正橋就妨礙了水上交通；為了水上交通，就要有兩岸的引橋，而引橋又妨礙了陸上交通，因?yàn)樯弦龢虻能囕v有的是要繞道而行的，而引橋兩旁的房屋也是不易相互往來的。在都市里，除非長(zhǎng)度有限，影響不大的以外，引橋總是一種障礙物，應(yīng)當(dāng)設(shè)法消除。開合橋就是消除引橋的一種橋梁結(jié)構(gòu)。天津開河橋多，就是這個(gè)原因。開合橋的種類很多，一種是“平旋橋”，把兩孔橋聯(lián)在一起，在兩孔之間的橋墩上，安裝機(jī)器，使這兩孔橋圍繞這橋墩在水面上旋轉(zhuǎn)九十度，與橋的原來位置垂直，讓出兩孔航道，上下無阻地好過船。一種“升降橋”，在一孔橋的兩邊橋墩上，各立塔架，安裝機(jī)器，使這一孔橋能在塔架間升降，就像電梯一樣，橋孔升高時(shí)，下面就可以過船了。一種是“吊旋橋”，把一孔橋分為兩葉，每葉以橋墩支座為中心，用機(jī)器轉(zhuǎn)動(dòng)，使其臨空一頭，逐漸吊起，高離水面，這樣兩葉同時(shí)展開，就可讓出中間通道，以便行船。一是“推移橋”把一孔橋用機(jī)器沿著水平面拖動(dòng)，好像拉抽屜是一樣，以使讓出河道行船。開合橋橋面不必高出地面，不用引橋，但開時(shí)不能走車，合時(shí)不能通船，水陸交通不可同時(shí)進(jìn)行。特別是，橋在開合的過程中，既非全開，又非全合，于是在這一段時(shí)間里，水陸都不能通行，這在運(yùn)輸繁忙的都市，如何能容許呢？因此，在橋梁史上，開合橋雖曾風(fēng)行一時(shí)，但在近數(shù)十年來，就日益減少了。那么，開合橋怎樣才能更好地服務(wù)呢？應(yīng)當(dāng)說，有幾種改進(jìn)的可能：一是將橋身減輕，改用新材料，使它容易開動(dòng)；二是強(qiáng)化橋上的機(jī)器，提高效率，大大縮減開橋合橋的時(shí)間；三是利用電子儀器，使橋的開合自動(dòng)化，以期達(dá)到每次開橋時(shí)間不超過3分鐘，如同十字道口的錯(cuò)車時(shí)間一樣。這些都不是幻想，也許在不久的將來就會(huì)實(shí)現(xiàn)。（有刪改）18．下列對(duì)文中“引橋”的理解，不正確的一項(xiàng)（3分）A．引橋是建造在河的兩岸有一定坡度的橋，其作用是引導(dǎo)車輛駛上正橋。B．在設(shè)計(jì)引橋時(shí)，需要綜合考慮空間高度、橋梁造價(jià)、城市規(guī)劃等因素。C．引橋方便了水上交通，但會(huì)妨礙陸上交通，因?yàn)樯弦龢虻能囕v必須繞道。D．在都市里，長(zhǎng)度過長(zhǎng)、影響太大的引橋是一種障礙物，應(yīng)該設(shè)法消除。19．下列對(duì)原文內(nèi)容的概括和分析，不正確的一項(xiàng)是（3分）A．開合橋成為天津的“特產(chǎn)”，與天津河流水位漲落差距特別大密切相關(guān)。B．建橋時(shí)，正橋橋面高出兩岸的高度等于河流平時(shí)的水位加上橋的凈空。C．除平旋橋之外，升降橋、吊旋橋、推移橋這三種都屬于一孔橋。D．改進(jìn)開合橋的關(guān)鍵是盡可能縮減橋的開合時(shí)間，提高通行效率。20．請(qǐng)結(jié)合全文，概括開合橋的優(yōu)缺點(diǎn)。（6分）八、作文（70分）21．根據(jù)以下材料，選取角度，自擬題目，寫一篇不少于800字的文章；除詩歌外，文體自選。物各有性，水至淡，鹽得味。水加水還是水，鹽加鹽還是鹽。酸甜苦辣咸，五味調(diào)和，共存相生，百味紛呈。物如此，事猶是，人亦然。語文Ⅱ（附加題）一、閱讀材料，完成22～24題。（10分）題自書杜拾遺詩后徐渭余讀書臥龍山之巔，每于風(fēng)雨晦暝時(shí)，輒呼杜甫。嗟乎，唐以詩賦取士，如李杜者不得舉進(jìn)士；元以曲取士，而迄今嘖嘖于人口如王實(shí)甫者，終不得進(jìn)士之舉。然青蓮以清平調(diào)三絕寵遇明皇實(shí)甫見知于花