新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件

新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求新冠病毒核酸檢測1目錄1背景及名詞4

標(biāo)識標(biāo)志及生物安全2實(shí)驗(yàn)室設(shè)置及分區(qū)3實(shí)驗(yàn)室圖例4目錄1背景及名詞4標(biāo)識標(biāo)志及生物安全2實(shí)驗(yàn)室設(shè)置及分區(qū)背景及名詞01背景及名詞012020年3月11日，世界衛(wèi)生組織宣布，根據(jù)評估，世衛(wèi)組織認(rèn)為新冠肺炎疫情可被稱為全球大流行2020年3月11日，世界衛(wèi)生組織宣布，根據(jù)評估，世衛(wèi)組織認(rèn)為什么要進(jìn)行為什么要進(jìn)行新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度，將病原微生物分為四類：a)第一類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物；b)第二類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物；c)第三類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物；……….根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對個體或者根據(jù)實(shí)驗(yàn)室對病原微生物的生物安全防護(hù)水平，將實(shí)驗(yàn)室分為一級（BiosafetyLevel1,BSL-1）、二級（BSL-2）、三級（BSL-3）、四級（BSL-4）。生物安全防護(hù)水平為二級的實(shí)驗(yàn)室適用于操作能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。按照實(shí)驗(yàn)室是否具備機(jī)械通風(fēng)系統(tǒng)，將BSL-2實(shí)驗(yàn)室分為普通型BSL-2實(shí)驗(yàn)室、加強(qiáng)型BSL-2實(shí)驗(yàn)室。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室對病原微生物的生物安全防護(hù)水平，將新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件人間傳染的病原微生物名錄中華人民共和國衛(wèi)生部制定二OO六年人間傳染的病原微生物名錄中新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件實(shí)驗(yàn)室開展新冠病毒核酸檢測的條件：獲得臨床檢驗(yàn)擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目開展資質(zhì)通過二級生物安全實(shí)驗(yàn)室備案省新冠肺炎疫情防控指揮部批準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室開展新冠病毒核酸檢測的條件：實(shí)時(shí)熒光（PCR）在PCR進(jìn)行的同時(shí)，對其過程進(jìn)行監(jiān)測的能力（即實(shí)時(shí)）。因此，數(shù)據(jù)可在PCR擴(kuò)增過程中，而非PCR結(jié)束之后，進(jìn)行收集。以反應(yīng)以循環(huán)中首次檢測到目標(biāo)擴(kuò)增的時(shí)間點(diǎn)為特征，而非在一定循環(huán)數(shù)后目標(biāo)分子累計(jì)的擴(kuò)增量。PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制實(shí)時(shí)熒光（PCR）在PCR進(jìn)行的同時(shí)，對其過程進(jìn)行監(jiān)臨床基因擴(kuò)增（PCR）檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室：

是指通過擴(kuò)增檢測特定的DNA或RNA，進(jìn)行疾病診斷、治療檢測和預(yù)后判定的實(shí)驗(yàn)室。生物安全實(shí)驗(yàn)室:通過防護(hù)屏障和管理措施，達(dá)到生物安全要求的病原微生物實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)：實(shí)驗(yàn)室的物理分區(qū)，該區(qū)域內(nèi)生物風(fēng)險(xiǎn)相對較大，需對實(shí)驗(yàn)室的平面設(shè)計(jì)、圍護(hù)結(jié)構(gòu)的密閉性、氣流，以及人員進(jìn)入、個體防護(hù)等進(jìn)行控制的區(qū)域。臨床基因擴(kuò)增（PCR）檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室：主實(shí)驗(yàn)室mainroom是生物安全實(shí)驗(yàn)室中污染風(fēng)險(xiǎn)最高的房間，包括實(shí)驗(yàn)操作間、動物飼養(yǎng)間、動物解剖間等，主實(shí)驗(yàn)室也稱核心工作間。緩沖間bufferroom設(shè)置在被污染概率不同的實(shí)驗(yàn)室區(qū)域間的密閉室。需要時(shí)，可設(shè)置機(jī)械通風(fēng)系統(tǒng)，其門具有互鎖功能，不能同時(shí)處于開啟狀態(tài)。主實(shí)驗(yàn)室mainroom實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及分區(qū)02實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及分區(qū)02PCR反應(yīng)特點(diǎn)01020304引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；堿基配對原則；TaqDNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；靶基因的特異性與保守性。PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12）量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克（μg=10-6）水平在2～4小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA粗制品及RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活組織等DNA擴(kuò)增檢測。特異性強(qiáng)靈敏度高樣本純度要求低簡便快捷PCR反應(yīng)特點(diǎn)01020304引物與模板DNA特異正確的結(jié)合新冠病毒傳染性極強(qiáng)新冠病毒傳染性極強(qiáng)核心思想生物安全防污染AB防樣本交叉污染防檢測試劑污染防擴(kuò)增產(chǎn)物氣溶膠污染工作人員、來訪人員安全社區(qū)和環(huán)境安全樣本及實(shí)驗(yàn)室安全核心思想生物安全防污染AB防樣本交叉污染工作人員、來訪人員安設(shè)計(jì)依據(jù)①新型冠狀病毒實(shí)驗(yàn)室生物安全指南（第二版）②GB18489-2008《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》③GB50346-2011《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》④WS233-2017《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》⑤《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法》衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)【2020】194號⑥《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作導(dǎo)則》⑦《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范》設(shè)計(jì)依據(jù)①新型冠狀病毒實(shí)驗(yàn)室生物安全指南（第二版）選址及裝修選址：充分考慮生物安全和環(huán)境保護(hù)建筑結(jié)構(gòu)：地面、墻面、頂板、管道、櫥柜等在消毒、清潔、防滑、防滲漏、防積塵等方面特殊要求。路線：設(shè)計(jì)緊急撤離路線，緊急出口處應(yīng)有明顯的標(biāo)識。警示：進(jìn)入限制措施，如警示牌、警示燈、警示線、門禁等選址及裝修選址：充分考慮生物安全和環(huán)境保護(hù)門、窗《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》GB50346-2011門、窗《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》GB50346-201分區(qū)樣本接收區(qū)域試劑準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)擴(kuò)增區(qū)產(chǎn)物分析區(qū)按功能進(jìn)行分區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)分區(qū)樣本接收區(qū)域試劑準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)擴(kuò)增區(qū)產(chǎn)物分析區(qū)按功能進(jìn)新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件物理隔離物理上完全分開的各自獨(dú)立的區(qū)域獨(dú)立的送排風(fēng)系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)室不能用中央空調(diào)注意傳遞窗的密封性及傳遞窗的互鎖注意門的密封性及緩沖間的互鎖物理隔離物理上完全分開的各自獨(dú)立的區(qū)域空調(diào)、通風(fēng)和凈化二級生物安全實(shí)驗(yàn)室中的a類和b1類實(shí)驗(yàn)室可采用帶循環(huán)風(fēng)的空調(diào)系統(tǒng)。二級生物安全實(shí)驗(yàn)室中的b2類實(shí)驗(yàn)室宜采用全新風(fēng)系統(tǒng)，防護(hù)區(qū)的排風(fēng)應(yīng)根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評估來確定是否需經(jīng)高效空氣過濾器過濾后排出。b1類實(shí)驗(yàn)室中可能產(chǎn)生污染物外泄的設(shè)備必須設(shè)置帶高效空氣過濾器的局部負(fù)壓排風(fēng)裝置，負(fù)壓排風(fēng)裝置應(yīng)具有原位檢漏功能。空調(diào)、通風(fēng)和凈化二級生物安全實(shí)驗(yàn)室中的a類和b1類實(shí)驗(yàn)室可采面積和環(huán)境面積：根據(jù)工作量的大小、儀器設(shè)備的配置情況，保證工作有效、互不干擾。面積和環(huán)境面積：根據(jù)工作量的大小、儀器設(shè)備的配置情況，保證工溫度、濕度、通風(fēng)、照明溫度、濕度、通風(fēng)、照明流向及流程人流、物流、及空氣流向單向流動試劑準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)超凈實(shí)驗(yàn)室非必須樣本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)及產(chǎn)物分析區(qū)負(fù)壓原安裝排風(fēng)扇實(shí)驗(yàn)室不符合要求

流向及流程人流、物流、及空氣流向單向流動新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件分區(qū)：樣本接收區(qū)域功能：臨床樣本接收編號、血清（漿）預(yù)處理及保存配置：生物安全柜、離心機(jī)、冰箱、加樣器及其他耗材對于2019-CoV二級生物安全實(shí)驗(yàn)室要求，個人三級防護(hù)。分區(qū)：樣本接收區(qū)域新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件標(biāo)題內(nèi)容標(biāo)題內(nèi)容新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件試劑準(zhǔn)備區(qū)功能：試劑的存儲、試劑的配制及試劑準(zhǔn)備PCR實(shí)驗(yàn)室中最潔凈的區(qū)域無基因的概念本區(qū)域的氣壓與相鄰區(qū)域應(yīng)為正壓。配置：根據(jù)實(shí)際需要可配備加樣器、天平、離心機(jī)等，最好有超凈工作臺（凈化實(shí)驗(yàn)室不需要）。紫外燈和可移動紫外燈，專用工作服及其他用品。試劑準(zhǔn)備區(qū)功能：試劑的存儲、試劑的配制及試劑準(zhǔn)備≥0Pa

試劑準(zhǔn)備區(qū)-10Pa標(biāo)本制備區(qū)擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)緩沖間緩沖間緩沖間PCR走道室外0Pa緩沖間緩沖間緩沖間PC標(biāo)本制備區(qū)功能：樣本處理核酸提取純化PCR反應(yīng)體系加樣完成直接與樣本接觸的區(qū)域，屬于實(shí)驗(yàn)室的核心實(shí)驗(yàn)區(qū)域氣壓與相鄰區(qū)域應(yīng)為負(fù)壓。配置：生物安全柜、病毒滅活設(shè)施、核酸提取儀、冰箱（冷凍和冷藏）、加樣器、離心機(jī)、移動紫外燈、洗眼設(shè)備、急救箱及其他專用耗材及用品。標(biāo)本制備區(qū)功能：樣本處理核酸提取純化PCR反應(yīng)體安全柜的擺放安全柜的擺放擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)功能：PCR體系的擴(kuò)增結(jié)果判讀PCR污染發(fā)生的最危險(xiǎn)區(qū)域關(guān)注擴(kuò)增產(chǎn)物的密封處理本區(qū)域氣壓的控制配置：擴(kuò)增儀紫外燈擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)功能：PCR體系的擴(kuò)增結(jié)果判讀≥0Pa

試劑準(zhǔn)備區(qū)-10Pa標(biāo)本制備區(qū)-20pa擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)緩沖間緩沖間緩沖間-10pa

送風(fēng)PCR走道排風(fēng)室外0Pa緩沖間緩沖間緩沖間-10pa送風(fēng)緩沖間緩沖間的作用是控制氣流和控制壓差的作用，防止污染空氣進(jìn)入潔凈區(qū)域。污染空氣有兩個概念：一是擴(kuò)增產(chǎn)物污染的空氣，另一為病毒污染的空氣。頂安裝紫外燈

，水池、衣柜。安裝排風(fēng)，送風(fēng)系統(tǒng)，調(diào)節(jié)壓差

，注意與實(shí)驗(yàn)室內(nèi)壓差，與外走道壓差。另外，標(biāo)本制備區(qū)緩沖間可兼作防護(hù)服的更換間，作為防護(hù)服更換間時(shí)應(yīng)注意緩沖間的氣壓設(shè)置。緩沖間的門宜能互鎖。緩沖間緩沖間的作用是控制氣流和控制壓差的作用，防止污染空氣進(jìn)新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件傳遞窗傳遞窗作為潔凈室的一種輔助設(shè)備，主要用于潔凈區(qū)與潔凈區(qū)、非潔凈區(qū)與潔凈區(qū)之間的小件物品的傳遞，以減少潔凈室的開門次數(shù)，最大限度的降低潔凈區(qū)的污染。

另外，傳遞窗給工作帶來極大方便傳遞窗的要求：密封性好，能互鎖適合潔凈室原理的圓弧轉(zhuǎn)角

定期檢查及更換紫外燈傳遞窗傳遞窗作為潔凈室的一種輔助設(shè)備，主要用于潔凈區(qū)與潔凈區(qū)設(shè)置及分區(qū)圖例03設(shè)置及分區(qū)圖例03新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求課件標(biāo)識標(biāo)志及生物安全04標(biāo)識標(biāo)志及生物安全04標(biāo)識、標(biāo)志實(shí)驗(yàn)室門口的生物危害標(biāo)識各區(qū)域明顯標(biāo)識各區(qū)域內(nèi)物品明顯分區(qū)標(biāo)識儀器設(shè)備分區(qū)標(biāo)識和狀態(tài)標(biāo)識人流和物流標(biāo)識標(biāo)識、標(biāo)志實(shí)驗(yàn)室門口的生物危害標(biāo)識門禁實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有門禁系統(tǒng)，生物危害標(biāo)識。主實(shí)驗(yàn)室門可自動關(guān)閉。采用機(jī)械通風(fēng)系統(tǒng)，送風(fēng)口和排風(fēng)口應(yīng)采取防雨、防風(fēng)、放雜物、防昆蟲及其他