高中生物專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

21一、課題目標(biāo)學(xué)問(wèn)目標(biāo)了解有關(guān)培育基的根底學(xué)問(wèn)。b.了解消毒和滅菌方法。力量目標(biāo)進(jìn)展無(wú)菌技術(shù)操作。b.進(jìn)展微生物培育。3.情感目標(biāo)形成勇于實(shí)踐、嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的科學(xué)態(tài)度和科學(xué)精神。二、課題重點(diǎn)教學(xué)教師活動(dòng)學(xué)生設(shè)計(jì)流程教學(xué)教師活動(dòng)學(xué)生設(shè)計(jì)流程活動(dòng)意圖1：培育基包括哪些根本成分？水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽問(wèn)題2：從細(xì)胞的化學(xué)元素組成來(lái)看，培育基中為什么都含有這些養(yǎng)分成分？C、H、O、N、P、S97％以上。【小結(jié)】共同歸納培育基的根本成分和主要來(lái)源?！?〕特別成分和條件提示學(xué)生培育基還需要滿足不同微生物生長(zhǎng)對(duì)PH、氧氣、特別養(yǎng)分物質(zhì)的要求：如乳酸桿pHpH〔二〕無(wú)菌技術(shù)講解：無(wú)菌操作泛指在培育微生物的操作中，全部防止雜菌污染的方法。強(qiáng)調(diào)無(wú)菌操作是培育微生物成功的關(guān)鍵。主要方面講解無(wú)菌技術(shù)主要方面：對(duì)試驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)展清潔和消毒；將培育器皿、接種用具和培育基等器具進(jìn)展滅菌；為避開(kāi)四周微生物污染，試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰四周旁進(jìn)展；避開(kāi)已滅菌處理的材料用具與四周物品相接觸。消毒與滅菌的比較列表讓學(xué)生進(jìn)展比較。環(huán) 一、根底學(xué)問(wèn)〔一〕培育基節(jié)概念：講解培育基概念：由人工方法配制而成的，專供微生物生長(zhǎng)生殖使用二：的混合養(yǎng)分基質(zhì)。講授2.種類課展現(xiàn)培育基相關(guān)圖片，講解依據(jù)物理性質(zhì)劃分的培育基種類、用途。

閱 了讀、解培傾 養(yǎng)基聽(tīng)。相關(guān)知3.成分根本成分 分展現(xiàn)1000mL牛肉膏蛋白胨培育基的養(yǎng)分構(gòu)成表格，讓學(xué)生分析答復(fù)以下問(wèn)題。 析、培育基成分牛肉膏5g蛋白胨10gNaCl5gH2O1000ml1：培育基包括哪些根本成分？水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽

供給的主要養(yǎng)分物質(zhì) 回碳源、磷酸鹽和維生素 答。氮源和維生素?zé)o機(jī)鹽氫元素、氮元素問(wèn)題2：從細(xì)胞的化學(xué)元素組成來(lái)看，培育基中為什么都含有這些養(yǎng)分成分？C、H、O、N、P、S97％以上?！拘〗Y(jié)】共同歸納培育基的根本成分和主要來(lái)源。養(yǎng)分含義 主要來(lái)源 歸物質(zhì)納、無(wú)機(jī)物：CO2、NaHCO3；有機(jī)物：糖碳源 能供給碳元素的物質(zhì)

類、脂肪酸、石油、花生粉餅等 回氮源 能供給氮元素的物質(zhì)細(xì)胞生命活動(dòng)必不行少的物水質(zhì)無(wú)機(jī) 供給除碳氮元素以外的各種鹽 重要元素包括某些大量元素

無(wú)機(jī)物：N2、NH3、氨鹽、硝酸鹽；答。有機(jī)物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等培育基、大氣、代謝產(chǎn)物培育基、大氣特別成分和條件提示學(xué)生培育基還需要滿足不同微生物生長(zhǎng)對(duì)PH、氧氣、特別養(yǎng)分物質(zhì)的要求：如乳酸桿菌時(shí)需要添加維生素，霉菌需要將培育基pH調(diào)整為酸性，細(xì)菌時(shí)需要將pH〔二〕無(wú)菌技術(shù)調(diào)無(wú)菌操作是培育微生物成功的關(guān)鍵。主要方面講解無(wú)菌技術(shù)主要方面：對(duì)試驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)展清潔和消毒；將培育器皿、接種用具和培育基等器具進(jìn)展滅菌；為避開(kāi)四周微生物污染，試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰四周旁進(jìn)展；避開(kāi)已滅菌處理的材料用具與四周物品相接觸。消毒與滅菌的比較列表讓學(xué)生進(jìn)展比較。工程理化因素強(qiáng)度消滅微生物數(shù)量是否消滅芽孢和孢子

傾 了聽(tīng)、解消閱 毒和讀、滅菌思 方考、法。回答。消毒溫順 局部 否滅菌猛烈 全部 是常用的消毒與滅菌的方法讓學(xué)生閱讀教材“試驗(yàn)室常用的消毒和滅菌方法材料，共同歸納常用的消毒 比與滅菌的方法，答復(fù)以下問(wèn)題。較、消毒方法：回①日常生活常常用到的是煮沸消毒法；②對(duì)一些不耐高溫的液體，則使用巴氏消毒法〔作簡(jiǎn)要介紹； 答。③對(duì)接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)首先噴灑石炭酸或煤酚皂等溶液以增加消毒效果，然后使用紫外線進(jìn)展物理消毒。④試驗(yàn)操作者的雙手使用酒精進(jìn)展消毒；⑤飲水水源用氯氣進(jìn)展消毒。滅菌方法：①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；閱②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱；③培育基、無(wú)菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。讀、④外表滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈。 歸問(wèn)題1.無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止試驗(yàn)室的培育物被其他外來(lái)微生物污染外，還納、有什么目的？ 回還能有效避開(kāi)操作者自身被微生物感染。 答。問(wèn)題2.請(qǐng)你推斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。假設(shè)需要，請(qǐng)選擇適宜1〕培育細(xì)菌用的培育基與培育皿〕〔〕試驗(yàn)操作者的雙手〔12〕〔〕需要消毒?！镜湫屠}】些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌()A.接種環(huán)、手、培育基 B.高壓鍋、手、接種環(huán)C.培育基、手、接種環(huán) D.接種環(huán)、手、高壓鍋【答案】C火焰灼燒可以快速?gòu)氐椎販缇m用于微生物的接種工具，如接種環(huán)。二、試驗(yàn)操作 演〔一〕制備牛肉膏蛋白胨培育基練、讓學(xué)生閱讀教材，講解制備步驟：回100mL培育基各成分用量。稱量：準(zhǔn)確稱取各成分。稱取牛肉膏和蛋白胨時(shí)動(dòng)作要快速，目的是防答。止牛肉膏吸取空氣中水分。進(jìn)溶化：①加水加熱熔化牛肉膏；②參加蛋白胨和氯化鈉連續(xù)加熱；③加入瓊脂；④用蒸餾水定容到100mL。整個(gè)過(guò)程不斷用玻棒攪拌，目的是防止瓊 行無(wú)脂糊底而導(dǎo)致燒杯裂開(kāi)。菌技pH1mol/LNaOHpH滅菌將配制好的培育基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中加塞包扎后用高壓蒸汽滅菌 術(shù)操鍋滅菌；所用培育皿用報(bào)紙包扎后用干熱滅菌箱滅菌。 作。倒平板：待培育基冷卻至50℃左右時(shí)在酒精燈火焰四周操作進(jìn)展。【方法點(diǎn)撥】倒平板的方法及留意事項(xiàng)圖文講解倒平板的方法及留意事項(xiàng)，讓學(xué)生答復(fù)以下問(wèn)題。①火焰旁右手拿錐形瓶，左手拔出棉塞；②右手拿錐形瓶，使錐形瓶的瓶口快速通過(guò)火焰； 閱③左手將培育皿翻開(kāi)一條縫隙，右手將培育基倒入培育皿，馬上蓋上皿蓋。 讀、④待平板冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)放置。 傾問(wèn)題1.培育基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板你用什么聽(tīng)、方法來(lái)估量培育基的溫度？ 思培育基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么方法來(lái)考、估量培育基的溫度？回問(wèn)題2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培育基。 答。問(wèn)題3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，皿蓋上會(huì)分散水珠，凝固后的培育基外表的濕度也比較高將平 。入培育基，造成污染。問(wèn)題4.在倒平板的過(guò)程中，假設(shè)不留神將培育基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培育微生物嗎？為什么？平板培育微生物?！捕臣兓竽c桿菌表達(dá)：微生物接種方法很多，最常用的接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線法定義和目的一個(gè)細(xì)胞生殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體,這就是菌落。于篩選菌株的最簡(jiǎn)便方法之一。操作步驟讓學(xué)生閱讀教材平板劃線法操作圖文資料，講解操作步驟，讓學(xué)生答復(fù)以下問(wèn)題。 進(jìn)①將接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒直至燒紅。 行微②在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán)，并翻開(kāi)大腸桿菌的菌種試管的棉塞。 生物③將菌種試管口通過(guò)火焰到達(dá)消滅試管口雜菌的目的。培④將冷卻的接種環(huán)伸入到菌液中取出一環(huán)菌種。⑤將菌種試管口再次通過(guò)火焰后塞上棉塞。 養(yǎng)。3～5條平行線，蓋上皿蓋，不要?jiǎng)澠婆嘤Ｊ鲞^(guò)程，完成三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。留意不要將第五區(qū)的劃線與第一區(qū)劃線相連。⑧將平板倒置放在培育箱中培育。問(wèn)題1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操 傾作完畢時(shí)，仍舊需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 聽(tīng)、第一步灼燒接種環(huán)是為了避開(kāi)接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育物每次劃思考。環(huán)，能準(zhǔn)時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避開(kāi)細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。閱問(wèn)題2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)展劃線？以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。 讀、問(wèn)題3.在作其次次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端傾開(kāi)頭劃線？ 思考、生殖而來(lái)的菌落?；叵♂屚坎计桨宸ù?。定義和目的的標(biāo)準(zhǔn)菌落。操作步驟讓學(xué)生閱讀教材稀釋涂布平板法的系列稀釋操作和涂布平板操作圖文材料解相關(guān)操作步驟，讓學(xué)生答復(fù)以下問(wèn)題。系列稀釋操作9mL6101、102、103、104、105、106。1mL1013使之混勻。1011mL102102倍液。依此類推。留意：移液管需要經(jīng)過(guò)滅菌。操作時(shí)，試管口和移液管離火焰1~2cm處。涂布平板操作傾聽(tīng)、閱讀、思2步應(yīng)如何進(jìn)展無(wú)菌操作？應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌。例如，酒精燈與培育皿的距離要適宜、吸考、管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰四周等。 回【典型例題】 答。以下關(guān)于微生物接種的描述，正確的選項(xiàng)是()的接種C.利用平板劃線法不能得到單菌落，而利用稀釋涂布平板法能得到單菌落D.需要滅菌【答案】B落，接種器具都要進(jìn)展嚴(yán)格滅菌處理。三、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)讓學(xué)生分析答復(fù)相關(guān)問(wèn)題，加以講解。1.未接種的培育基外表是否有菌落生長(zhǎng)？假設(shè)有菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明什么？培育未接種培育基作用是比照，有菌落形成，說(shuō)明培育基滅菌不徹底。2.接種大腸桿菌培育基上，獨(dú)立菌落顏色、外形、大小如何？大腸桿菌菌落呈白色，為圓形，光滑有光澤，邊緣整齊。12h24h落大小不同；菌落分布位置一樣。緣由是時(shí)間越長(zhǎng)，菌落中細(xì)菌生殖越多，菌落體積越大；菌落的位置不動(dòng)，但菌落數(shù)增多。假設(shè)你在培育基上觀看到不同形態(tài)菌落，可能是哪些緣由引起的？培育基滅菌不徹底或雜菌感染等。演練、回答。能夠?qū)υ囼?yàn)結(jié)果進(jìn)展分分析。析、回答。環(huán) 共同回憶本節(jié)要點(diǎn)：節(jié) 一、培育基養(yǎng)分構(gòu)成：都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。三：種類：液體培育基和固體培育基。課堂二、無(wú)菌技術(shù)小結(jié)

呼 突應(yīng)、出本回 節(jié)重答。點(diǎn)。三、大腸桿