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西洋參皂苷的提取及純化
衣潔菡西洋參皂苷的提取及純化衣潔菡1目錄前言111目的和意義2國內(nèi)外的研究現(xiàn)狀3人參皂苷的分類4實(shí)驗(yàn)方法及步驟5本項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)新點(diǎn)67目錄前言111目的和意義2國內(nèi)外的研究現(xiàn)狀3人參皂苷的分類42前言西洋參是人參的一種,又稱花旗參,兩者雖然同種,但因?yàn)闅夂蛴绊?,前者的參面橫紋比后者更明顯,有效成分含量也較高。人參皂苷為西洋參的主要有效成分,它具有西洋參根的主要生理活性,是由皂苷元和糖相連構(gòu)成的糖苷類化合物。前言西洋參是人參的一種,又稱花旗參,兩者雖然同3目的和意義由于人參皂苷尚未實(shí)現(xiàn)全化學(xué)合成,其單體皂苷只能從西洋參的根、莖等部位提取總皂苷后,經(jīng)加工、分離及純化得到。各種皂苷的含量、存在部位不盡相同,且藥理作用有的相似、有的相反、有的具有獨(dú)特的藥理作用。為了充分發(fā)揮各單體的生物活性,有望進(jìn)一步對各單體進(jìn)行制備,應(yīng)用于新藥開發(fā)領(lǐng)域。故對總皂苷的提取、人參皂苷Rb1和Re的分離和純化進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。人參各單體皂苷普遍具有調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、降低血清中膽固醇含量、防止心血管疾病、消炎、解毒等生理功效。firstthenfinally目的和意義由于人參皂苷尚未實(shí)現(xiàn)全化學(xué)合成,其單體皂苷只能從4國內(nèi)外的研究現(xiàn)狀
人參皂苷的研究始于1854年,美國學(xué)者首先從西洋參中提取分離出了總皂苷,1962年藤田等人從人參根中分離得到了人參皂苷及苷元,70年代初,研究得到了多種人參皂苷單體。我國學(xué)者也對人參皂苷成分進(jìn)行了深入的研究,從1981年到目前,匡學(xué)海、蔡培列、陳英杰等人已從人參屬植物中發(fā)現(xiàn)了40多種人參皂苷。國內(nèi)外的研究現(xiàn)狀人參皂苷的研究始于1854年5
人參皂苷的分類:
人參皂苷屬四環(huán)三萜類化合物,按其苷元部分的結(jié)構(gòu)不同可分為三種類型,既原人參二醇型皂苷(簡稱PPD),如人參皂苷Ra1、Ra、Rb1、Rb2、Re和Rd;原人參三醇型皂苷,(簡稱PPT),如人參皂苷Rf、Rg2和Rh1等;齊墩果酸,如人參皂苷Ro。人參皂苷的分類:人參皂苷屬四環(huán)三萜類化合物,按其苷元6實(shí)驗(yàn)方法及步驟:一、總皂苷的提?。?、取西洋參60oC烘干粉碎,稱取100g,用12倍量的70%的乙醇水浴加熱回流提取3次(400mL×3),每次2小時(shí)。2、三次提取液混合,減壓濃縮至50mL,得西洋參粗提液。3、D101大孔吸附樹脂的預(yù)處理(具體見相關(guān)參考文獻(xiàn))4、西洋參粗提液用15倍量的水溶解,過濾后上預(yù)處理好的D101大孔吸咐樹脂柱。先用水洗柱以除去大部分雜質(zhì),再用2%的NaOH溶液洗柱除去色素,后用2%的HCl溶液洗柱,再用水洗柱至流出液為中性。最后用90%(濃度根據(jù)文獻(xiàn)及具體情況)的乙醇淋洗,收集流出液。5、流出液回收,60oC減壓干燥,得干燥黃白色粉末為西洋參總皂苷,稱重并用HPLC檢測人參皂苷Rb1和Re的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。實(shí)驗(yàn)方法及步驟:一、總皂苷的提?。?二、人參皂苷Rb1和Re的分離
:取西洋參總皂苷6.0g,用30mL70%的乙醇溶解,加入300mL丙酮攪拌(丙酮的加入必須在攪拌下緩緩進(jìn)行,以免二醇組皂苷析出過快將大量的三醇組皂苷包裹在沉淀中,而達(dá)不到預(yù)期的分離效果),析出沉淀,靜止放置。
過濾沉淀并干燥,得棕黃色干燥粉末為A部分(Rb1),稱重。將母液回收,減壓蒸干,得棕黃色粉末為B部分(Re),稱重。HPLC分別測定A、B中Rb1和Re的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。二、人參皂苷Rb1和Re的分離:取西洋參總皂苷6.0g,用8三、人參皂苷Rb1和Re的純化:
A部分用20mL水溶解,加200mL丙酮攪拌,析出大量沉淀,靜置,過濾,沉淀再用20mL水溶解,加200mL丙酮同法處理,靜置,過濾,60oC減壓干燥,得黃白色干燥疏松粉末,為人參皂苷Rb1。稱重并用HPLC檢測,人參皂苷Rb1的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。
A部分丙酮沉淀的母液回收溶劑至干,得到的粉末與B部分合并,用30mL95%的乙醇溶解,加300mL丙酮攪拌,析出沉淀,靜置,過濾,母液回收至干,再用20mL95%乙醇溶解,加200mL丙酮同法處理,過濾,溶液回收至干,再用丙酮同法處理一次,過濾,回收溶液至于,60℃減壓干燥,得黃白色干燥疏松粉末,為人參皂苷Re。稱重并用HPLC檢測人參皂苷Re的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。
1、Rb1的純化:2、Re的純化:三、人參皂苷Rb1和Re的純化:A部分用20mL水9本項(xiàng)試驗(yàn)的創(chuàng)新之處:firstthenAfterthat首先建立了西洋參皂苷的實(shí)驗(yàn)室反應(yīng)體系,利用該方法研究了人參皂苷的生物活性。
本實(shí)驗(yàn)采用萃取、大孔樹脂進(jìn)行分離純化,得到總皂苷和單體皂苷;采用高效液相對單體成分進(jìn)行定量測定,結(jié)果穩(wěn)定、可靠。具有重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值,本研究不僅優(yōu)化了人參皂苷的提取工藝,也為西洋參的藥用
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