品管部QC崗位職責標準匯集(89個)39

頒發(fā)部門微生物限度檢查操作規(guī)程接收部門奏效日期操作標準質量擬訂人擬訂日期文件編號審查人審查日期文件頁數共6頁同意人同意日期散發(fā)部門目的成立微生物限度檢查的標準操作規(guī)程，保證查驗結果的正確性。范圍合用于本廠質監(jiān)科化驗室對本廠生產的固體系劑及物料進行微生物限度的檢查。責任化驗員有責任依照本操作規(guī)程進行查驗、判斷,并對查驗結果負責。定義微生物限度檢查法系指非規(guī)定滅菌制劑及其原、輔料遇到微生物污染程度的一種檢查方法，包含染菌量及控制菌的檢查。內容5.1總則：供試品應隨機抽樣。一般抽樣量為查驗用量（2個以上最小包裝單位）的倍量。供試品在檢查前不得開啟，檢查全過程均應嚴格恪守無菌操作規(guī)程，嚴防再污染。控制菌的污染檢查應做相應的已知菌比較試驗，比較菌株為大腸桿菌（[B）44102]，每批試驗已知菌加入量為50-100個。染菌量的檢查或控制菌的檢查均應做空白比較試驗。供試品稀釋成稀釋液后應在均勻狀態(tài)下取樣，凡有抑菌成份或防腐劑的供試品應做特別辦理后進行查驗。供試品稀釋后應在1小時內操作完成。第2頁/共6頁5.1.7除還有規(guī)定外，細菌培育溫度為30-35℃，霉菌、酵母菌培育溫度為25-28℃，控制菌培育溫度為36℃±1℃。5.1.8細菌、霉菌查驗結果的報告以1g、1或102為單位；控制菌查驗報告以每1g、每1或每102為單位報告“檢出”或“未檢出”。5.2儀器、器具恒溫培育箱、隔水式生化培育箱、電子天平，移液管(1、10)、試管、離心管、雙碟、鑷子、剪刀、不銹鋼吸管筒、酒精燈、取樣勺、稱量紙、研缽一個、不銹鋼雙碟筒。器具的包扎移液管：用紗布包住移液管，而后放入不銹鋼滅菌筒內。試管、雙碟：試管在管口塞上紗布棉塞、雙碟放入不銹鋼雙碟筒內。無菌衣、褲、帽、口罩：用布口袋將洗凈的衣褲、帽子、口罩配套后裝入，扎緊袋口，再用牛皮紙包好。器具的滅菌將包扎好的器具，在121±0.5℃蒸汽滅菌柜中滅菌30分鐘，物件拿出時切勿立刻置冷處，免得急速冷卻滅菌物件內蒸汽凝造成負壓，易致染菌，應置烘箱烘干。5.3培育基、試劑營養(yǎng)瓊脂培育基稱取本品36克，加1升蒸餾水，加熱溶解后，按需要進行分裝，經121℃分鐘滅菌備用?；⒓t培育基稱本品30克，加1升蒸餾水，加熱溶解，分裝，高壓滅菌116℃20分鐘。膽鹽乳糖培育菌（）稱本品36克，加1升蒸餾水，加熱溶解，分裝，高壓滅菌116℃20分鐘。曙紅亞甲藍瓊脂培育基（）稱本品42克，加1升蒸餾水，加熱溶解，分裝，高壓滅菌116℃20分鐘。生理鹽水稱取9g氯化鈉，加水1000溶解，分裝后于121℃±0.5℃濕熱滅菌30分鐘，供作稀釋劑用。75%酒精棉量取無水乙醇75，加水稀釋至100，搖勻，將脫脂棉與75%酒精混淆即得。5.3.70.1%新潔而滅第3頁/共6頁量取5%新潔而滅20，加水稀釋至約1000，搖勻，即得。5.4進入無菌室的操作重點用肥皂水洗手，換消毒鞋，封閉緩沖間紫外燈，將器具物件搬入傳達窗口內，用紫外燈滅菌15分鐘，封閉第一層門，用1%新潔而滅清洗雙手，用消毒毛巾擦干，換上無菌衣、褲、帽子、口罩及消毒鞋。封閉無菌室內紫外燈，進入第二層門并將器具搬至無菌室內，封閉無菌室門。凡進入無菌室后不該再出門取物件，所以，在每次試驗中所用物件一定計劃好，并準備好備用物件。從進入第一層門直至無菌室內，隨工作人員的進入就噴霧0.1%新潔而滅溶液。5.5檢查法：細菌、霉菌的染菌量，采納培育皿菌落計數法。供試液的制備：固體供試品以無菌操作稱取10g，置含0.9%氯化鈉的生理鹽水100中，振搖溶解，使成1:10稀釋度的供試液。而后汲取1:10的供試液1，置含0.9%氯化鈉的生理鹽水9中，稀釋成1:100稀釋度的供試液。挨次可制成1:1000的供試液。吸樣：分別汲取1:10、1:100、1:1000的供試液1分別注入2-3個平皿中。注皿：將預先消融并置45℃水浴中保溫備用的細菌、霉菌培育基分別傾注入平皿，每皿約15，隨即轉動平面，使供試液與培育基混勻，分別作上標志，置水平臺上待凝。同時作空白比較（不加樣品，將兩個雙碟分別加入虎紅培育基和營養(yǎng)瓊脂培育基，操作同上）。培育：培育

將凝結好的平皿按規(guī)定溫度倒置于培育箱中培育。細菌培育72小時。

48小時；霉菌菌落形態(tài)細菌菌落是一個菌細胞或菌細胞團在限制地點上，經必定條件下生殖成肉眼可見的細菌集體，外觀潤濕或干燥，表面圓滑或折皺，外緣齊整或缺點。擁有放射或樹枝樣分枝的菌絲是霉菌菌落的特點。初形成時多無色透明，有顯然的折光性，成熟的霉菌菌落有各樣顏色的孢子形成。在較暗的背景下以透射光察看，易于辨別。菌落計數法：先用肉眼察看，標志并計數，而后用5-10倍放大鏡檢查有無遺漏。第4頁/共6頁若有片狀菌落或花斑樣菌落延伸生長的以及平板遇到污染的狀況，則該平板計數無效。若平板上有2個或許2個以上的菌落重疊，如可辯解，仍以2個或是2個以上菌落計數。當一個稀釋級用2個平板時，應采納2個平板菌落數的均勻值。計算各稀釋級的均勻菌落數按菌數報告規(guī)則報告菌數。如各稀釋級平板均無菌落生長，或僅最低稀釋級均勻菌落數小于報告菌數為小于10個。

1時，則菌數報告規(guī)則：細菌宜選用均勻菌落數在30～300之間的稀釋級，霉菌宜選用均勻菌落數在30～100之間的稀釋級作為報告菌數計算的依照。若有1個稀釋級在30～300（30～100）之間時，將該稀釋級的菌落數乘以稀釋倍數報告；好像時有釋級在30～300（30～100）之間時，按下式計算兩級比值。高稀釋級的均勻菌落數×稀釋倍數比值=—————————————————低稀釋級的均勻菌落數×稀釋倍數

2個稀當比值≤2時，以兩稀釋級的均值報告，當比值>2時，以低稀釋級的均勻菌落數乘以稀釋倍數報告；好像時有3個稀釋級的均勻菌落數均在30～300之間時，此后2個稀釋級計算級間比值報告；如各稀釋級的均勻菌落數均不在30～300以最靠近30或300的稀釋級均勻菌落數乘以稀釋倍數報告；如各稀釋級均勻菌落數均在300（100）以上，按最高稀釋級均勻菌落數乘以稀釋倍數報告；如各稀釋級均勻菌落數均小于30時，一般按最低稀釋級均勻菌落數乘以稀釋倍數報告。控制菌的檢查：除還有規(guī)定外，取供試液10（相當于供試品1g、1、102），直接或辦理后接種，經增菌、分別培育后，進行革蘭染色、生化試驗與血清凝聚試驗等項檢查。大腸桿菌檢查法：取膽鹽乳糖培育基3份，每份100，2份分別加入規(guī)定量的供試液，其中1份加入比較菌50-100個作陽性比較，第3份加入與供試液等量的稀釋液作陰性比較。培育18-24小時（必需時可延至48小時）。陰性比較應無菌生長。取上述3份的培育物各0.2，分別接種至5培育基管內培育，分別于5小時與24小不時，取未接種的培育基管作本底比較，將各管置365紫外光下察看。陽性比較管體現熒光，陽性。供試液的管體現熒光，陽性；無熒光，陰性。而后加數滴靛基質試液于管內，液面呈玫瑰紅色為陽性，呈試劑本色為陰性。當陰性比較呈陰性，陽性比較正常生長，供試液膽鹽乳糖培育基培育液澄第5頁/共6頁明，并證明無菌生長，判未檢出大腸桿菌。如陽性、靛基質陰性，或陰性、靛基質陽性，均應取供試液膽鹽乳糖培育基培育物劃線于曙紅亞甲藍（）瓊脂平板或麥康凱瓊脂平板，培育18-24小時，如上述供試液培育物的分別平板無菌落生長，判未檢出大腸桿菌?；蛴芯渖L，應精選2-3個可疑菌落依照藥典規(guī)定作生化試驗及革蘭染色、鏡檢，并按規(guī)定判斷結果。大腸桿菌菌落形態(tài)在瓊脂平板上的典型菌落呈紫黑色或中心深紫色，圓形，稍突出，邊沿齊整，表面圓滑，帶有金屬光彩。非典型形態(tài)，在瓊脂平板上呈淺紫、粉紫、粉色，無顯然的暗色中心，應做為疑似菌進行判定。比較試驗：陰性比較試驗：查驗試驗全過程無菌技術的靠譜性。菌數測定陰性比較試驗分別汲取生理鹽水1置于無菌平皿中，分別按細菌、霉菌測定方法注皿、培育，不得長菌?？刂凭鷻z查陰性比較試驗汲取生理鹽水于增菌液中，按控制菌檢查方法檢查不得長菌。陽性比較試驗：檢查供試品能否對控制菌生長產生擾亂作用及檢查培育條件能否適合。方法：于供試液中加入必定量的相應比較菌，做平行試驗。規(guī)定陽性比較菌株為大腸桿菌[（B）44102]。比較菌的加入量為50-100個，可預先預試確立。用計數方法，取37℃培育18-20小時的新鮮肉湯培育物，以10倍遞增稀釋至10-6,取其0.1于一般肉湯瓊脂板表面涂抹進行測定。當供試品未檢出菌時，而陽性比較試驗也未能檢出，則不可以做出供試品未檢出控制菌的結論。陽性比較試驗操作一定與供試品查驗操作嚴格分開，防止交錯污染。5.6復試：菌數測定不合格者應復試，控制菌查驗以一次查驗為準，不再復試，但應保存檢出菌株一個月備查。復試項目以不合格項目為準，做單項復試。復試需取同批樣品測定2次。復試報告以3次測定結果的算術均勻值報告。第6頁/共6頁5.7查驗報告：測定菌數報告：以各次測定結果的所有均勻值報告?？刂凭砸淮尾轵灥慕Y果報告：報告為檢出或未檢出控制菌。培訓6.1培訓對象：化驗員。6.2培訓時間：二小時。7記錄記錄名稱保存部門保存時間微生物限度查驗記錄質監(jiān)科藥品有效期后一年01-006-00微生物限度查驗記錄品名：批號：規(guī)格：查驗日期：年代日細菌計數30～35℃48h稀釋倍數空白