中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座

3.1苷提取分離技術(shù)中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第1頁介紹：苷類又稱配糖體：是由糖或糖衍生物與另一非糖物質(zhì)經(jīng)過糖端基碳連結(jié)而成化合物，水解后又能生成糖和非糖化合物這兩部分物質(zhì)。苷元：苷中非糖物質(zhì)，又稱配糖基、苷元。苷元結(jié)構(gòu)類型差異很大。如黃酮、蒽醌、甾體等。苷鍵：苷元與糖之間連接鍵。糖：中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第2頁中藥中糖類包含單糖、低聚糖和多糖。單糖是糖最小單位。低聚糖由2~9個單糖聚合而成。多糖由10個以上單糖聚合而成，多數(shù)多糖是由數(shù)百至數(shù)千個單糖聚合而成。中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第3頁

3.1.1必備知識

中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第4頁一、糖1.單糖五糖醛糖甲基五碳糖六碳醛糖六碳酮糖糖醛酸中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第5頁五碳醛糖六碳醛糖六碳酮糖中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第6頁2.低聚糖2至9個單糖經(jīng)過苷鍵鍵合而成直鏈糖或支鏈糖。多糖麥芽糖中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第7頁二、苷依據(jù)苷元結(jié)構(gòu)類型：黃酮苷、蒽醌苷、香豆素苷、氰苷、吲哚苷等。依據(jù)苷在植物體內(nèi)是原本存在還是次生：原生苷和次生苷。依據(jù)苷元上連接單糖基個數(shù)：單糖苷、二糖苷等；依據(jù)苷元上連接糖鏈位置是一處、兩處還是多處：單糖鏈苷、二糖鏈苷等；依據(jù)苷鍵原子不一樣：可分為氧苷、硫苷、氮苷和碳苷，其中氧苷最多見。

中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第8頁

氧苷：苷鍵原子為氧。硫苷：苷鍵原子為硫。氮苷：苷鍵原子為氮。碳苷：苷鍵原子為碳。苷類苷分類：按苷鍵原子分中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第9頁（一）苷分類

1、氧苷：最常見是醇苷、酚苷和酯苷。

（1）醇苷：由糖端基羥基與苷元上醇羥基脫水縮合而成苷。

紅景天苷

龍膽苦苷

含有致適應(yīng)作用紅景天苷

治療肝炎龍膽苦苷

中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第10頁（2）酚苷酚苷是由糖端基羥基與苷元上酚羥基脫水而成苷。

天麻苷丹皮苷天麻中鎮(zhèn)靜成份天麻苷丹皮中丹皮苷中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第11頁（3）酯苷是由糖端基羥基與苷元上羧基脫水而成苷。其苷鍵現(xiàn)有縮醛性質(zhì)又有酯性質(zhì)，故稀酸稀堿均易使其水解。R=H山慈菇苷AR=OH山慈菇苷B含有抗霉菌作用中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第12頁（4）氰苷氰苷是由糖端基羥基與氰醇衍生物分子中羥基脫水形成苷，且多為α-氰基。氰基性質(zhì)不穩(wěn)定，易為稀酸和酶水解，其苷元α-羥氰性質(zhì)也不穩(wěn)定，易分解為醛和酮，并釋放出易引發(fā)中毒氫氰酸?？嘈尤手芯哝?zhèn)咳作用苦杏仁苷R＝葡萄糖苦杏仁苷R＝H野櫻苷中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第13頁2、硫苷硫苷可看成由糖端基羥基與苷元上巰基（-SH）脫水縮合而成苷，且其水解后苷元不含巰基。蘿卜中蘿卜苷

中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第14頁3、氮苷氮苷是由糖端基碳直接與苷元上氮原子相連苷。如：核苷類、腺苷、鳥苷、尿苷以及巴豆中巴豆苷。腺苷巴豆苷中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第15頁4、碳苷

是由糖端基碳直接與苷元上碳原子相連苷。碳苷苷元多為黃酮、蒽醌、蒽酮、沒食子酸等，尤以黃酮碳苷最多。

蘆薈苷中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第16頁原生苷和次生苷原生苷苦杏仁苷酶次生苷（野櫻苷）中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第17頁（二）苷理化性質(zhì)性狀形態(tài)苷類多為固體，糖基少易形成結(jié)晶，糖基多多呈具吸濕性無定形粉末。顏色苷類有無色，有如黃酮、蒽醌苷呈深淺不一樣黃色、橙色。味普通無味或稍具苦味，也有很苦（龍膽苦苷）或很甜（甜菊苷）中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第18頁旋光性苷有旋光性，且多為左旋，但水解后變?yōu)橛倚?。另外，苷無還原性，但水解后單糖卻有還原性。故比較苷類水解前后旋光性和還原性改變，都有利于檢識苷類存在。溶解性普通來說，苷類具親水性，可溶于水、甲醇、乙醇等極性有機溶劑，不溶于乙醚、苯、石油醚等極性小有機溶劑。而苷元具親脂性，可溶于有機溶劑，不溶于水。中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第19頁

（三）苷鍵裂解經(jīng)過苷鍵裂解反應(yīng)切斷苷鍵，能夠了解苷元結(jié)構(gòu)及糖種類，確定苷元與糖及糖與糖之間連接方式。慣用切斷苷鍵方法有：酸水解堿水解酶水解氧化開裂中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第20頁苷鍵屬于縮醛結(jié)構(gòu)，易被稀酸水解。酸水解難易與苷鍵原子電子云密度及其所處空間環(huán)境有親密關(guān)系。苷鍵原子上電子云密度越高或其附近空間位阻越小，則苷鍵原子越易質(zhì)子化，也就越易水解。苷+5%HCl→苷元+糖1.酸水解中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第21頁酸水解規(guī)律苷鍵原子不一樣，水解難易不一樣。水解由易至難為：

氮苷、氧苷、硫苷、碳苷。糖環(huán)狀結(jié)構(gòu)大小不一樣，水解難易不一樣。呋喃糖苷較吡喃糖苷易水解，因為酮糖多為呋喃環(huán)結(jié)構(gòu)，醛糖多為吡喃環(huán)結(jié)構(gòu)，故酮糖苷較醛糖苷易水解。糖C2位取代基性質(zhì)不一樣，水解難易不一樣。水解由易至難：2-去氧碳苷，2-羥基糖苷，2-氨基糖苷。吡喃糖苷中，C5上取代基越大，越難水解。故水解由易至難為:

五碳糖苷、甲基五碳糖苷、六碳糖苷、七碳糖苷若C5上接COOH則最難水解。中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第22頁

普通苷類在稀酸條件下即可發(fā)生酸水解。對一些難水解苷需較猛烈水解條件（如長時間在酸中加熱），但這么又易使苷元結(jié)構(gòu)改變生成脫水苷元。兩相水解反應(yīng)：適于水解后對酸不穩(wěn)定苷元，即在反應(yīng)混和液中加入與水不相混溶有機溶劑（如苯），使水解釋放出苷元能快速轉(zhuǎn)溶于有機層，從而防止其在酸水中停留時間過長而被破壞。酸水解注意事項：糖苷/水+H++CHCl3Δ苷元/CHCl3+糖/水中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第23頁2.堿水解普通苷鍵對稀堿穩(wěn)定，故極少用稀堿來水解苷鍵，但酚苷、酯苷以及烯醇苷或β－吸電子基取代苷時，遇堿就能被水解。4-羥基香豆素苷中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第24頁3.酶水解特點：條件溫和：不改變苷元結(jié)構(gòu)，得到苷元或次生苷和低聚糖，并可獲知苷元與糖、或糖與糖之間連接方式。專屬性強：某種酶往往只能水解某一個或某一類苷鍵。如轉(zhuǎn)化糖酶可水解β果糖苷鍵麥芽糖酶可水解α-葡萄糖苷鍵中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第25頁中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第26頁

4.氧化開裂法Smith降解法常用氧化開裂法，適于酸水解時苷元易被破壞苷或難水解碳苷，能防止采取猛烈酸水解而造成苷元結(jié)構(gòu)遭破壞，對苷元結(jié)構(gòu)研究有主要意義。中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第27頁Smith降解反應(yīng)可分三步：第一步：在水中或稀醇溶液中，用NaIO4在室溫條件下將糖元氧化開裂為二醛。第二步：將二醛用NaBH4還原成醇，以防醛與醇深入縮合而使水解困難。第三步：調(diào)整pH2左右，室溫放置讓其水解。中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第28頁

3.1.2苷提取與分離苷：極性伴隨糖基增多而增大。糖基增多，苷元所占百分比對應(yīng)變小，親水性增大。苷元：普通可溶于低極性有機溶劑。中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第29頁一、苷提取苷種類不一樣，性質(zhì)不一樣，提取分離方法也不一樣。原生苷類：需抑制或破壞酶活性。如：甲醇、乙醇、沸水提取或在藥材中加入一定量碳酸鈣。次生苷或苷元：利用酶水解，工業(yè)上普通采取發(fā)酵法來酶解。在提取過程中要盡可能防止與酸與堿接觸，以防苷類被酸或堿水解。中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第30頁通常是將生藥乙醇或甲醇提取物順次以石油醚脫脂，以乙醚或氯仿抽出苷元，以乙酸乙酯抽出單糖苷或少糖苷，再以丁醇提取多糖苷。中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第31頁二、苷分離經(jīng)初步提取得到苷類往往不一樣程度地混有其它物質(zhì)，需深入分離純化。堿溶酸沉法：鉛鹽沉淀法：酚性物質(zhì)與非酚性物質(zhì)；鄰二酚羥基或羧基成份與普通酚羥基。凝膠過濾法：大孔樹脂法：其它色譜柱：如硅膠、聚酰胺、活性炭等。中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第32頁（一）化學檢識1、堿性酒石酸銅2、氨性硝酸銀3、Molish試劑反應(yīng)三、苷檢識中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第33頁Molish反應(yīng)（α-萘酚-濃硫酸反應(yīng)）：方法：于糖或苷水溶液中加入3%α-萘酚乙醇溶液混合后，沿管壁滴加濃硫酸，使酸層集于下層，則于兩液層交界處展現(xiàn)紫（棕）色環(huán)。中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第34頁（二）色譜檢識1、紙色譜檢識展開劑：正丁醇-醋酸-水（4：1：5上層，BAW）水飽和苯酚問題：紙色譜中以BAW和正丁醇作展開劑，展開糖，誰Rf值大？中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第35頁2、薄層色譜檢識硅膠用0.03mol/L硼酸溶液或無機鹽水溶液代替水涂布薄層，能增加糖在固定相中溶解度，樣品承載量顯著增加。問題：吸附薄層還是分配薄層？中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第36頁本章節(jié)要求

掌握糖、苷概念，基本結(jié)構(gòu)類型。掌握其理化性質(zhì)。熟悉糖、苷提取分離。中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第37頁1、依據(jù)苷原子分類，屬于C－苷是A、山慈菇苷B、黑芥子苷C、巴豆苷D、蘆薈苷E、毛茛苷中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第38頁2、苦杏仁苷酸水解最終產(chǎn)物是A、杏仁腈兩分子葡萄糖B、野櫻皮苷和一分子葡萄糖C、氫氰酸、苯甲酸和一分子葡萄糖D、氫氰酸、苯甲酸和二分子葡萄糖中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第39頁3、從新鮮植物中提取原生苷時應(yīng)注意是A、苷溶解性B、苷極性C、苷穩(wěn)定性D、苷酸水解性E、植物中共存酶對苷水解特征

4、屬于碳苷是A、蘆薈苷B、番瀉苷C、蘆薈大黃苷D、大黃素-8-o-葡萄糖苷中藥化學苷的提取分離技術(shù)專家講座第40頁5、含苷類中藥醇提取液如要將苷和游離苷元分離，采取方法是A、回收