河北省淡水香港海鷗型菌的分布及耐藥性分析

河北省淡水香港海鷗型菌的分布及耐藥性分析

香港的海鷗菌(。11.1藥物、試劑與儀器頭孢哌酮麥康凱瓊脂(麥康凱瓊脂臨用時(shí)按配方加入1%葡萄糖和16μg/ml頭孢哌酮),MH瓊脂(北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司),氧化酶試劑、API20NE生化試條和VITEKGNI+鑒定卡(法國(guó)生物梅里埃公司),藥敏紙片和大腸埃希菌ATCC25922購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所,以上均在有效期內(nèi)使用。1.2農(nóng)業(yè)生產(chǎn)品種采集本次樣品共采集429份,采樣地點(diǎn)按地理位置、城鄉(xiāng)及養(yǎng)殖和天然水體分別選擇石家莊78份、平山縣農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)92份、保定市農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)49份、滿城縣集貿(mào)市場(chǎng)58份、白洋淀27份和衡水湖125份,采集種類按照當(dāng)?shù)刂饕B(yǎng)殖及消費(fèi)品種,其中草魚(yú)92份、鯉魚(yú)189份、鯽魚(yú)96份、其他52份。采樣時(shí)間按照淡水魚(yú)的生活習(xí)性及市場(chǎng)銷售情況,選擇3-11月份進(jìn)行采樣。1.3菌株鑒定及培養(yǎng)以無(wú)菌操作用棉拭子涂抹魚(yú)腸內(nèi)壁中下段,直接涂布在含頭孢哌酮32μg/ml的血平板及麥康凱平板上,37℃需氧培養(yǎng)48h。挑取可疑菌落接種三糖鐵瓊脂斜面,37℃需氧培養(yǎng)48h。凡氧化酶及觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性菌株進(jìn)行脲酶和精氨酸雙水解酶實(shí)驗(yàn),二者均陽(yáng)性者接種API20NE及VITEKGNI+進(jìn)行生化鑒定。1.4菌株標(biāo)準(zhǔn)及驗(yàn)證方法按WHO推薦的K-B瓊脂紙片擴(kuò)散法進(jìn)行,結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)參照腸桿菌科標(biāo)準(zhǔn)(2005版CLSI/NCCLSM100-S15Vol.25NO.1)。以大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923作為質(zhì)控菌株。22.1香港海鷗菌分布2.1.1香港海鷗型菌的生長(zhǎng)本研究在3-11月期間對(duì)淡水魚(yú)香港海鷗型菌進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果8株香港海鷗型菌的檢出集中在7-8月份,3-5月及11月份魚(yú)腸道涂抹物在頭孢哌酮血平板上幾乎無(wú)菌生長(zhǎng),6月份及9、10月份有菌生長(zhǎng)但未檢出香港海鷗型菌。2.1.2魚(yú)類的陽(yáng)性率本研究共采集淡水魚(yú)429份,檢出香港海鷗型菌8株,總陽(yáng)性率1.86%(8/429),其中草魚(yú)的陽(yáng)性率為5.43%(5/92),鯉魚(yú)為0.53%(1/189),鯽魚(yú)為2.08%(2/96),其他淡水魚(yú)未檢出(0/52),草魚(yú)的陽(yáng)性率較高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2.1.3陽(yáng)性率本研究共檢出香港海鷗型菌8株,其中石家莊(含平山縣)6株,陽(yáng)性率3.53%(6/170);衡水湖2株,陽(yáng)性率1.60%(2/125);保定(含滿城縣、白洋淀)未檢出(0/134)。三地區(qū)陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2.2外粘菌素藥敏檢測(cè)結(jié)果顯示本次分離的8株香港海鷗型菌對(duì)萬(wàn)古霉素、頭孢哌酮、克林霉素、甲硝唑完全耐藥,對(duì)多粘菌素B、紅霉素、慶大霉素、阿米卡星、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、磺胺、氯霉素、替卡西林/克拉維酸敏感。對(duì)氨芐西林、安曲南、頭孢曲松、頭孢噻吩、頭孢呋辛鈉、萘啶酸、鏈霉素部分耐藥。見(jiàn)表3。3香港海鷗型菌污染風(fēng)險(xiǎn)香港海鷗型菌最先由港大醫(yī)學(xué)院Teng和Woo等在一名肝硬化病人分離到,隨著對(duì)該菌的深入研究,表明該菌只存在淡水魚(yú)中,并且該菌陽(yáng)性率最高的是草魚(yú)和鳙魚(yú)本研究結(jié)果與相關(guān)的報(bào)道基本一致,但陽(yáng)性率偏低,其中草魚(yú)的陽(yáng)性率最高,為5.43%(5/92),鯽魚(yú)為2.08%(2/96),鯉魚(yú)為0.53%(1/189),表明在河北省的淡水魚(yú)中存在香港海鷗型菌污染,并且香港海鷗型菌的檢出高峰在腹瀉病高發(fā)的7、8月份,養(yǎng)殖和野生魚(yú)類均有檢出,在地域分布上,石家莊和衡水均有檢出,保定134份魚(yú)未檢出,但不排除香港海鷗型菌污染的潛在風(fēng)險(xiǎn)。香港海鷗型菌引起人群腹瀉的途徑是通過(guò)食入未經(jīng)煮熟的水產(chǎn)品或在加工過(guò)程中交叉污染食物而引起的感染,因此香港海鷗型菌引發(fā)食源性疾病的潛在危害非常大,應(yīng)引起相關(guān)部門的重視。本次研究并對(duì)8株香港海鷗型菌進(jìn)行了耐藥性檢測(cè),結(jié)果顯示8株香港海鷗型菌對(duì)萬(wàn)古霉素、頭孢哌酮、克林霉素、甲硝唑完全耐藥,對(duì)多粘菌素B、替卡西林/克拉維酸、紅霉素、慶大霉素、阿米卡星、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、磺胺、氯霉素敏感。對(duì)安曲南、頭孢曲松、頭孢噻吩、頭孢呋辛鈉、萘啶酸、鏈霉素、氨芐西林部分耐藥。與Lau耐藥檢測(cè)結(jié)果同時(shí)提示河北省分離的香港海鷗型菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素如氨芐西林以及頭孢噻酚、頭孢曲松、頭孢呋辛等均出現(xiàn)不同程度耐藥,由于β-內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生是致革蘭陰性病原