定君生臨床應用進展

定君生臨床應用進展

1probictis簡介在古代編年史中，阿拉伯人喝了祖母奶并長壽。公元76年，羅馬歷史學家plineius認為喝發(fā)酵牛奶可以治愈胃腸炎。1907年，俄羅斯的微觀生物學家metsnikoff發(fā)現(xiàn)，長期攝入牛奶可以促進健康和延長壽命。進入20世紀以來,人們逐漸發(fā)現(xiàn)了其它對人體有益的微生物,如雙歧桿菌、酵母菌等。Lillyandstillwell在1965年首次提出了probiotics這個概念,當時認為probiotics與抗生素相反,是一種由微生物產(chǎn)生的能刺激其它生物生長的物質(zhì)。1996年美、德、英、荷、瑞典及日本等國15位專家在“國際新抗菌策略研究組ISGNAS”討論會中提出了新的probiotics定義:“probiotics是含活菌或包括菌體組分及代謝產(chǎn)物的死菌的生物制品,經(jīng)口或其它黏膜投入旨在黏膜表面處改善微生物與酶的平衡或刺激特異性與非特異性免疫,最近FAO對probiotics(益生菌)定義是:當攝入足夠數(shù)量時能給宿主帶來有益的、健康影響的活的微生物,最初益生菌主要用于一些腸道疾病的預防和治療。如20世紀二三十年代,美國人就應用乳桿菌來治療便秘和腹瀉以及急性嬰幼兒腹瀉。隨著對人體微生態(tài)系統(tǒng)了解的深入,口腔、皮膚、泌尿生殖道微生態(tài)系統(tǒng)的重要性逐漸得到了人們的重視,隨之各種益生菌制劑或產(chǎn)品開發(fā)出來,如:定菌生、培菲康、乳酸菌素等。2分離的微生物早在1890年德國的AlbertDoederlein就報告了他們關(guān)于妊娠婦女陰道細菌學研究,并在2年后發(fā)表了他的單行本專著。他證明德氏乳桿菌是陰道乳酸的來源,在培養(yǎng)基上或陰道內(nèi)部證明其能夠抑制致病菌的生長,該菌當時被命名為Doederlein桿菌。健康婦女的陰道是一個復雜的微生態(tài)系統(tǒng),其中寄生著超過50種的微生物,德國AlbertDoederlein發(fā)現(xiàn)了Doederlein桿菌、脆弱擬桿菌(BacteroidesFragilis)、韋榮球菌(Veill-onellaspecies)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus)、溶血性鏈球菌(StreptococcusHemolyticus)、大腸埃希氏桿菌(Escherichiacoli)、其中以厭氧菌和兼性厭氧菌為主。Gorbach等證實在生育期健康婦女陰道內(nèi)厭氧菌與需氧菌比例接近10∶1。1928年StanleyThoms將Doederlein桿菌列入嗜酸乳桿菌(Lactobzcillusacidophilus)屬。嗜酸乳桿菌屬包括許多種或亞種,德氏乳桿菌乳酸亞種菌株尤其是能產(chǎn)H2O2的卷曲乳酸桿菌和詹森乳桿菌在陰道微生態(tài)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)機制上具有重要作用。除了這些現(xiàn)在確定可以定植于正常陰道的微生物還有真菌、原蟲和病毒,他們主要寄居于陰道四周的側(cè)壁黏膜中,這些微生物之間相互制約、相互作用、相互依賴、有層次、有序的定植于陰道黏膜上皮,共同形成生物膜。3陰道內(nèi)微生物的產(chǎn)生生物膜(biofilm,BF)是指附著于有生命的和無生命體表的有組織的共生微生物群落。BF中含90%以上的水分,其余是與微生物有關(guān)的組成,其中包括活菌、死菌、代謝產(chǎn)物、細菌分泌的大分子多聚物,吸附的營養(yǎng)物質(zhì)、代謝產(chǎn)物和微生物的裂解產(chǎn)物。BF存在著各種生物大分子,如蛋白質(zhì)、多糖、DNA、RNA、肽聚糖、脂質(zhì)和磷脂等。陰道內(nèi)的微生物就是寄生在這層膜里,從中獲得營養(yǎng),逃避宿主的免疫排斥以及抗生素的殺傷。陰道內(nèi)細菌大部分寄生于BF中,其中占優(yōu)勢地位的細菌是乳桿菌。乳桿菌為革蘭氏陽性桿菌,無芽孢、細菌彎曲、微需氧,但在厭氧環(huán)境下生長更好,每克陰道分秘物中含有107~108CFU乳桿菌。乳桿菌能夠通過替代、排斥、競爭機制阻止致病微生物粘附于陰道上皮細胞,還可以分泌細胞素、乳酸、表面活性物質(zhì)、H2O2等抑制致病微生物生長,以乳桿菌為主的微生物在陰道內(nèi)構(gòu)成了一個動態(tài)復雜的生物群落。與宿主環(huán)境共同組成一個平衡系統(tǒng),機體內(nèi)外環(huán)境的變化都可以影響這個系統(tǒng)的平衡,使陰道微生物群發(fā)生變化。4導致陰道微生物群失衡4.1陰道混合物涂片情況如SaibinaCauci等用革蘭氏染色技術(shù)發(fā)現(xiàn),在1486份40歲~79歲絕經(jīng)前期或絕經(jīng)后期婦女的陰道分泌物涂片中,絕經(jīng)前期婦女11.4%、絕經(jīng)后期44.1%缺乏乳桿菌。4.2陰道菌群失調(diào)專家們認為陰道存在一種“微生態(tài)亞失調(diào)狀態(tài)”,即陰道微生態(tài)在機體內(nèi)外因素作用下所發(fā)生的輕度菌群失調(diào),該狀態(tài)是可逆的,如機體免疫力或祛除誘因則可不治而愈,自然恢復。如果進一步發(fā)展形成一種或幾種菌群的優(yōu)勢生長或外源微生物的定植則導致不可逆性失調(diào),國外JanRSchwebke等對51位絕經(jīng)前期無臨床生殖道感染癥狀的女性陰道分泌物培養(yǎng)分析,發(fā)現(xiàn)38(70%)位女性有明顯的陰道菌群失調(diào),僅有11(22%)位是以乳桿菌為優(yōu)勢的陰道微生態(tài)環(huán)境,并發(fā)現(xiàn)陰道菌群的改變與陰道內(nèi)藥物的應用。大量的性伙伴,頻繁的性交史,不使用避孕套有明顯的相關(guān)性,也證明了這種微生態(tài)亞失調(diào)狀態(tài)的存在。4.3陰道微生態(tài)環(huán)境惡化外力和分娩等因素引起的陰道損傷、長期使用抗生素,放射線及免疫抑制劑的過度使用等原因,基于以上3種因素,致使陰道的生態(tài)環(huán)境發(fā)生急劇變化,破壞其微生態(tài)平衡。導致陰道的菌群失調(diào),此時極易引起陰道的感染性疾病,感染的主要來源是陰道微生態(tài)群落中的條件致病菌,如大腸桿菌、類桿菌、消化球菌、金黃色葡萄球菌、B族鏈球菌、白色念球菌、滴蟲以及支原體等等,最后發(fā)展成為各種類型的陰道炎。5乳桿菌的作用目前認為BV是以陰道加德納氏菌(Gard-nerellaVaginalis)等多種微生物增加為主,同時伴有乳桿菌減少的陰道菌群紊亂所致的內(nèi)源性感染,調(diào)查其病原,無特異的微生物發(fā)現(xiàn),如滴蟲、念珠菌以及淋球菌等。其病因多認為是來源于陰道微生物群中的多種條件致病菌的復合感染。BV患者的陰道菌群失調(diào)主要表現(xiàn)為陰道加德納氏菌、類桿菌、彎曲菌、消化球菌、優(yōu)桿菌及支原體的增多,而乳桿菌的數(shù)量顯著減少,Exchen-bach等調(diào)查了67名BV患者及28名正常健康婦女的陰道菌群,結(jié)果發(fā)現(xiàn)BV患者產(chǎn)生H2O2的乳桿菌檢出率(6%)顯著低于健康婦女(96%),同時伴有陰道加德納氏菌及厭氧菌的進度生長。作者認為產(chǎn)H2O2的乳桿菌對維持正常陰道生態(tài)系統(tǒng)的抗感染能力起重要作用,BV患者由于產(chǎn)H2O2乳桿菌的顯著減少,導致不含過氧化氫酶的包括加德納氏菌在內(nèi)的多種細菌的過度生長,Klebanoff等也證實乳桿菌產(chǎn)生的H2O2對陰道加德納氏菌及類桿菌具有殺傷作用,發(fā)揮殺傷作用的最適pH值為5.0~6.0,乳桿菌在體外對從BV患者陰道中分離的陰道加德納氏菌擬桿菌、厭氧球菌也具有抑制作用。pH值5.5~6.0時其抑制效果最明顯,和體內(nèi)相似。國內(nèi)董德剛等的研究結(jié)果也表明從健康婦女陰道中分離的乳桿菌在體內(nèi)外對陰道的葡萄球菌、腸桿菌、酵母菌有抑制作用,同時可使陰道環(huán)境的pH值下降。目前臨床上治療BV的主要藥物是滅滴靈,口服滅滴靈可使95%的患者臨床癥狀好轉(zhuǎn),這也說明BV是多種細菌包括厭氧菌在內(nèi)的復合感染。然而滅滴靈的毒性反應也不容忽視,短期應用10%~25%的患者可出現(xiàn)惡心及味覺異常。長期應用可引起二重感染以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的毒性,并有致畸作用,其在妊娠中應用受到限制,它還具有使致病菌過度生長的作用,使陰道的正常優(yōu)勢菌乳桿菌不能再建立,這是臨床上BV患者頑固復發(fā)的一個重要原因。由于BV的主要病理生理改變是陰道的菌群失調(diào),因此使用恢復患者陰道微生態(tài)平衡的制劑是治愈BV的關(guān)鍵,目前國內(nèi)外已涌現(xiàn)了多種從健康婦女陰道中分離的乳桿菌為主要成分的微生態(tài)制劑,它們用以治療BV取得了較好的療效。Hallen等以產(chǎn)H2O2乳桿菌為主的活菌制劑治療28例BV患者,結(jié)果57%患者的陰道分泌涂片恢復正常,而安慰劑組無一例患者恢復正常。Parent等對32例確認為BV的患者給予含產(chǎn)H2O2乳桿菌及雌激素的微生態(tài)制劑治療,每天1片~2片塞入陰道,連續(xù)7天,2周后及4周后的治愈率分別為77%和88%,而安慰劑則為25%和22%,并且治療組患者的陰道分泌物涂片可發(fā)現(xiàn)大量的乳桿菌,此外Reid和McGroarty等也論證了乳桿菌活菌制劑對BV具有較好的治療效果。6乳桿菌的應用滴蟲性陰道炎屬性傳播性疾病,發(fā)病率很高,與健康婦女相比,滴蟲性陰道炎患者陰道分泌物的滴蟲支原體、鏈球菌以及厭氧菌群的分離率增加,而乳桿菌、念珠菌和棒狀桿菌的分離率下降,其它微生物變化不明顯。目前該病的治療主要采用滅滴靈口服或陰道局部用藥,治愈率較高。但由于滅滴靈具有一定的不良反應,并且用藥后復發(fā)率較高,因此它不是理想的治療藥物,而乳桿菌活菌制劑能充分補充陰道自凈作用,恢復陰道的微生態(tài)平衡,最終達到標本并治的效果,Nyumbl等用乳桿菌制劑治療滴蟲陰道炎,治愈率可達97%,隨著滴蟲的清除,陰道的各種微生物菌群恢復正常,并有效地防止了復發(fā)。德國學者也報導了乳桿菌對滴蟲性陰道炎具有較好的療效,1年后的治愈率由98.5%,國內(nèi)鄧燕杰觀察了定君生,對滴蟲性陰道炎的治療效果,結(jié)果表明用藥后能有效的降低陰道的pH,3個月后的治愈率可達83.9%,總有效率為96.8%,明顯優(yōu)于滅滴靈。其治療作用是乳桿菌調(diào)節(jié)陰道的微生態(tài)平衡,維持陰道的酸性環(huán)境,破壞了滴蟲的生存環(huán)境。此外乳桿菌在體外對滴蟲也有直接拮抗作用。7定君生治療陰道病臨床療效北京協(xié)和醫(yī)院等5家醫(yī)院,從1997年4月至8月對定君生進行臨床觀察,入選358例,完成試驗的314例,其中陰道瘙癢者248例,白帶多者308例,對照組111例應用甲硝唑(滅敵靈)栓,完成試驗101例。病程:試驗組最短發(fā)病3天,最長2個月。對照組最短發(fā)病1周,最長1個月,均為初次發(fā)病,以前從未檢查治療。結(jié)果經(jīng)定君生試驗組治療10天后,白帶增多的患者痊愈率79.2%(244/308),顯效率7.8%(24/308),總有效率87%。有陰道瘙癢癥狀者痊愈率86.6%(246/284),顯效率6.7%(19/284),總有效率93.3%。線索細胞轉(zhuǎn)陰289例,正常率92.0%(289/314);pH值>4.5達正常水平298例,正常率94.9%(289/314);胺實驗陰性294例,正常率95.1%(294/309)。314例治療后綜合實驗檢查指標總結(jié)果判定:恢復正常289例,顯效0例,有效9例,無效16例,正常率92.0%(289/314),總有效率92.0%。試驗組與對照組治療細菌陰道病101對試驗結(jié)果為:(1)治療白帶多,試驗組痊愈率73.7%(70/95),顯效率9.5%(9/95),總有效率83.2%;對照組痊愈率83.3%,顯效率2.1%(2/96),總有效率85.4%。兩組經(jīng)X2檢驗痊愈率差異無顯著性(P=0.1044),總有效率差異無顯著性(P=0.6608)。(2)治療陰道瘙癢,試驗組痊愈率79.5%(62/78),顯效率12.8%(10/78),總有效率92.3%;對照組痊愈率86.2%(75/87),顯效率1.1%(1/87),總有效率87.3%。兩組經(jīng)X2檢驗痊愈率差異無顯著性(P=0.2510),總有效率差異無顯著性(P=0.2510),總有效率差異無顯著性(P=0.2963)。兩組治療后線索細胞轉(zhuǎn)陰,試驗組84.2%(85/101),對照組83.2%(84/101)總有效率87.3%,兩組經(jīng)X2檢驗差異無顯著性(P=0.8718),pH值(<4.5)正常,試驗組91.1%(92/101)對照組89.1%(84/101),兩組經(jīng)X2檢驗差異無顯著性(P=0.1395)。胺實驗轉(zhuǎn)陰,試驗組89.4%(84/94),對照組92.7%(89/96),經(jīng)X2檢驗差異無顯著性(P=0.4601)。試驗表明,定君生治療細菌性陰道病臨床總有效率達87%~93.3%,而滅敵靈栓總有效率為85.4%~87.3%,治療后經(jīng)實驗室檢查,總有效率定菌生為92.0%,對照