生物型乳牙根管充填材料的組織病理學研究

生物型乳牙根管充填材料的組織病理學研究

根管治療是治療感染根管和根尖周圍疾病的最有效方法。由于乳牙是暫時性器官,到替牙期,乳牙牙根發(fā)生生理性吸收、脫落,恒牙萌出;因此對乳牙根管充填材料的要求是能隨乳牙牙根吸收,且不影響繼承恒牙發(fā)育和萌出的糊劑。臨床傳統(tǒng)應用氧化鋅丁香油(zincoxideeugenol,ZOE)糊劑,為化學制劑。有研究表明根管內的ZOE糊劑不與牙根同步吸收。因此,人們一直在尋找生物制劑,用于乳牙的根管充填;如骨形成蛋白,但有不足之處。殼聚糖(Chitosan,CS)是甲殼素最重要的衍生物。甲殼素廣泛存在于海洋動物的甲殼中,是由葡萄糖結構單元組成與纖維素具有相似結構的均一多糖,具有良好的生物相容性和獨特的生物學活性。由于甲殼素分子中乙?；拇嬖?不利于應用,現(xiàn)多用的是其脫乙?；锛呆燃谆撘阴ざ嗵?又名殼聚糖。其具有成膜性、可紡性,并具有促進傷口愈合、骨形成等功能,且可被人體吸收利用。殼聚糖已被廣泛應用在食品、生化、醫(yī)藥衛(wèi)生、美容保健等領域。在口腔醫(yī)學領域,近年來陸續(xù)將其應用于牙周病及齲病防治、拔牙術后干槽癥預防和骨腔填充等方面,均顯示其具有良好的生物學性能,但用作根充糊劑的報道不多。本研究旨在觀察殼聚糖糊劑用于乳牙根管充填后的作用效果和反應,為研制生物型乳牙根管充填材料提供實驗依據(jù)。實驗材料的充填1. 殼聚糖根管充填根端微滲漏實驗實驗參照Rohde等的方法,通過比較根端微滲漏值,評價殼聚糖糊劑、殼聚糖硫酸鋇糊劑(chitosan-bariumsulfate,CS-BS)和ZOE糊劑的根尖封閉性能。根充糊劑的制備:殼聚糖糊劑:將殼聚糖粉(北京環(huán)境研究所陳祖輝提供)與滅菌注射用水按1:1調成糊劑。殼聚糖硫酸鋇糊劑:殼聚糖與硫酸鋇粉4:1重量混合,再與滅菌注射用水1:1調成糊劑。ZOE糊劑:將氧化鋅粉與丁香油液按臨床常規(guī)調成根充糊劑。選擇門診患者因重度牙周炎或正畸需要而拔除的正常單根離體牙60顆。要求牙體組織完整、牙根發(fā)育完全,無畸形、損傷、齲壞及其他病變。將60顆離體牙隨機分為4組,每組15顆;均于釉牙骨質線上1~2mm處去除牙冠,拔除根髓、測量并記錄工作長度,用15~40#H擴大針擴銼根管,并可見根尖孔處15#擴大針通過,3%過氧化氫液及0.9%氯化鈉溶液反復交替沖洗根管,棉捻吸干后常規(guī)充填根管。殼聚糖組、殼聚糖硫酸鋇組采用輸送充填器根充;ZOE組用螺旋根充器充填根管;各組根管口用磷酸鋅粘固粉封閉?？瞻讓φ战M根管內不填入任何根充物,根管口用磷酸鋅粘固粉封閉。其中殼聚糖硫酸鋇組、ZOE組牙根拍X線片證實根充良好;殼聚糖組肉眼確認根充到底(殼聚糖X線透射)。牙根放入內有無菌水棉球的密閉玻璃器皿中,置37℃、8d;待根充材料充分凝固,取出吹干,在距根尖孔2mm處根面向冠方均勻涂覆2層指甲油,再將牙根垂直懸吊于1%亞甲藍染液中,深度約為牙根長度的3/4,浸泡6d;取出牙根,流水沖洗、吹干,用金剛砂車針在牙齒的唇舌面或近遠中面沿長軸各磨一溝槽,用鑿子將牙鑿成兩半,保證剖面通過根尖孔。30倍解剖鏡測量染料自根尖至冠方的滲透距離,數(shù)值用SPSS10.0軟件單因素方差分析,q檢驗比較組間差異。操作過程由1人完成。2殼聚糖乳牙根管充填動物實驗根充糊劑的制備:無菌殼聚糖硫酸鋇糊劑和氧化鋅丁香油糊劑的配制同實驗1。動物實驗:選用中國農(nóng)業(yè)科學院動物研究所提供的小型豬8頭,雌雄各半,5月齡,體重15~18kg。選擇上、下頜乳前磨牙為實驗牙,共32顆。小型豬按1ml/kg體重耳后注射復方賽胺酮全身麻醉。放置開口器,隨機選擇一側乳前磨牙16顆為實驗組,行根管充填術,用殼聚糖硫酸鋇糊劑作根充糊劑;對側同名牙為對照組16顆,用氧化鋅丁香油糊劑充填根管。均以磷酸鋅水門汀封閉窩洞。術后拍X線片確認根充到底。組織學檢查:分別于術后1、2、4、8周,每次處死2只動物。切取含實驗牙的上下頜骨塊,固定、脫鈣、常規(guī)石臘包埋、切片、HE染色,光鏡下觀察根尖周的組織學變化。結果1.染料微滲漏深度殼聚糖糊劑組、殼聚糖硫酸鋇糊劑組與氧化鋅丁香油糊劑組染料微滲漏深度無顯著差異(P>0.05)。3組根充材料與空白對照組相比均有極顯著性差異(P<0.01)(表1)。2.根周膜的吸收所有小型豬術后飲食正常,無一頭生病、死亡。①殼聚糖硫酸鋇糊劑根充1周根管內可見根充物,1例超充,所有病例根周膜內可見較多的慢性炎癥細胞浸潤。術后2周根管內根充物完整,3例根尖孔由根周膜組織封閉,血管擴張、充血,炎癥減輕;另1例超充,超充糊劑部分吸收。4周時根周膜血管擴張充血,仍有少量慢性炎癥細胞浸潤,超充糊劑完全吸收。8周時根管內均可見充填物,根周膜結構接近正常。②ZOE糊劑根充1周根管內可見根充物,2例超充,所有病例根周膜水腫、慢性炎癥細胞浸潤,血管擴張。術后2周恰填2例根周膜內血管擴張充血,少量炎癥細胞浸潤,超充2例超充物周圍肉芽組織形成,慢性炎癥細胞浸潤。術后4周根管內可見根充物,根尖周組織根周膜血管擴張充血、慢性炎癥細胞浸潤,并可見根尖周組織長入根尖孔,根管內壁少量牙本質吸收。8周根周膜均有少量炎癥細胞浸潤,超充物未吸收,周圍肉芽組織包裹,根周膜明顯增寬,吞噬細胞不明顯。綜上,殼聚糖硫酸鋇糊劑乳牙根管充填引起的根尖周炎癥反應輕,超充物對周圍組織刺激小、吸收快;ZOE糊劑根充引起的尖周炎癥反應較重,超充物對周圍組織刺激大,氧化鋅顆粒被包裹、吸收緩慢。殼聚糖糊劑與zeo糊劑的進一步發(fā)展ZOE糊劑是最常用的根管充填糊劑,物理性能穩(wěn)定,療效較為肯定。本研究將其作為對照,探討殼聚糖糊劑的生物相容性和對根管的封閉作用。根管充填是根管治療術的最后一步。根管充填的目的就是嚴密封閉根管系統(tǒng)和防止根尖區(qū)微滲漏。作為理想的根管充填材料應具備良好的組織相容性及嚴密封閉根尖孔的能力。本實驗所采用的染料法比較3種根管充填材料的根尖封閉性能,方法簡便可靠。實驗證明,殼聚糖糊劑與殼聚糖硫酸鋇糊劑充填根管的根端微滲漏值略低于ZOE糊劑,從數(shù)值看根端封閉性能優(yōu)于ZOE糊劑,但統(tǒng)計學分析無顯著性差異。我們的研究結果表明殼聚糖作為根充材料,在封閉性能方面并不亞于傳統(tǒng)的ZOE糊劑;但仍應對殼聚糖糊劑調制工藝加以改進,以提高密封性能。用于乳牙的根管充填材料除應具備一般的根管充填材料性能要求外,還應對繼承恒牙胚無害,不影響恒牙的萌出,且根充材料能與乳牙根同步吸收,后一點至關重要。曾有ZOE糊劑根管充填的動物實驗表明,根周組織有慢性炎癥反應且材料吸收緩慢。Mani等臨床觀察中,有60%病例糊劑吸收慢于牙根吸收。超充組有66.7%病例在根充6個月后超充部分仍未見吸收。另外當牙根吸收乳牙脫落后仍有ZOE顆粒存留于牙槽骨內。說明它不能與乳牙根同步吸收。本實驗中超充的病例在根充2個月后均未見糊劑吸收。超充的ZOE可能會引起異物反應,并游走到牙根之間,有可能對乳恒牙的替換造成影響。本實驗病理切片可見超填的ZOE被纖維組織包裹,且未見明顯的吞噬細胞。說明機體對ZOE主要表現(xiàn)為異物反應。選用殼聚糖硫酸鋇糊劑作為根管充填材料是由于硫酸鋇可阻射X線,治療過程中可用X線觀察根管充填情況。殼聚糖硫酸鋇糊劑超充后,除有少量硫酸鋇顆粒,殼聚糖本身能很快被吸收,根尖周的炎癥反應也較輕。且臨床操作更容易,特別對于根尖未形成的寬大根管,根管充填時明顯較