糞便隱血-課件

糞便隱血試驗(yàn)

第五小組糞便隱血試驗(yàn)

上消化道出血量＜5ml時(shí)，糞便中無可見的血液，且紅細(xì)胞被破壞，顯微鏡檢查也未見到紅細(xì)胞。需要用化學(xué)法、免疫法等才能證實(shí)的出血，稱為隱血。其檢測(cè)方法包括化學(xué)法、免疫學(xué)方法、轉(zhuǎn)鐵蛋白測(cè)定法以及其他方法。

傳統(tǒng)化學(xué)方法的優(yōu)點(diǎn):結(jié)果顯示快、清晰、成本低、結(jié)果可以半定量，但特異性差，受飲食影響等干擾因素大，假陽性率高，含亞鐵離子的食物和藥物對(duì)結(jié)果有干擾，敏感度低，出血量>90μg/ml才能檢出。

膠體金法優(yōu)點(diǎn)：特異性高，靈敏度高，不受其他藥物及鐵劑、動(dòng)物血等干擾，不受飲食限制，簡(jiǎn)便、快速，是目前早期診斷消化道出血性疾病的一個(gè)首選的好方法。缺點(diǎn):強(qiáng)陽性標(biāo)本會(huì)產(chǎn)生假陰性結(jié)果，且單獨(dú)免疫法對(duì)于血基質(zhì)無特異性，對(duì)上消化道檢出率不如化學(xué)法高。傳統(tǒng)化學(xué)方法的優(yōu)點(diǎn):結(jié)果顯示快、清晰、成本

兩種方法在方法學(xué)上互補(bǔ)，故本次實(shí)驗(yàn)選擇膠體金法與化學(xué)法（采用鄰甲苯胺法）同時(shí)進(jìn)行糞便隱血試驗(yàn)。

1.病人準(zhǔn)備檢驗(yàn)前兩天內(nèi)建議應(yīng)禁食動(dòng)物血、臟器及含葉綠素類食物、鐵劑、中藥、維生素C等藥品。2.標(biāo)本采集處理保存要求患者自行留取1-5g新鮮糞便標(biāo)本于干燥、清潔、無吸水性的有蓋且有明顯標(biāo)記的容器內(nèi)。糞便標(biāo)本應(yīng)選擇其中膿血粘液等病理成分，若無，應(yīng)多部位取材。糞便標(biāo)本收集后應(yīng)盡快（2小時(shí)內(nèi)）進(jìn)行檢測(cè)，以免因長(zhǎng)時(shí)間放置導(dǎo)致隱血試驗(yàn)的敏感性降低。1.病人準(zhǔn)備3.實(shí)驗(yàn)原理膠體金法：大便或其他體液隱血的免疫一步檢驗(yàn)法是一個(gè)高靈敏度的夾心式酶聯(lián)免疫測(cè)定法。該法采用抗人血紅蛋白的單克隆抗體和多克隆抗體，特異地針對(duì)糞便樣品中的人血紅蛋白。鄰甲苯胺法：血紅蛋白中的亞鐵血紅素有類似過氧化物酶的活性，能催化過氧化氫生成新生態(tài)氧，將受體鄰甲苯胺氧化成鄰甲偶氮苯而顯藍(lán)色。3.實(shí)驗(yàn)原理糞便隱血_課件糞便隱血_課件膠體金法：1)在稀釋樣杯中加入0.5ml的蒸餾水；2）用采樣棒在標(biāo)本的6個(gè)最有可能陽性的部位取樣；3）取好樣品后，將樣品與蒸餾水充分混勻；4）將金標(biāo)紙條MAX線一端插入稀釋樣杯中，3-5分鐘后觀察結(jié)果。膠體金法：6.結(jié)果判斷鄰甲苯胺法：滴加雙氧水溶液后隨即出現(xiàn)藍(lán)色陽性反應(yīng)，報(bào)告為++++；在10秒內(nèi)出現(xiàn)陽性反應(yīng)，報(bào)告為+++；在一分鐘內(nèi)出現(xiàn)陽性反應(yīng)，報(bào)告為++；在1分鐘后5分鐘內(nèi)出現(xiàn)陽性反應(yīng)，報(bào)告為+；沒有任何顏色反應(yīng)則報(bào)告陰性。膠體金法：檢測(cè)區(qū)與質(zhì)控區(qū)均出現(xiàn)紅色線的為陽性，如僅質(zhì)控區(qū)出現(xiàn)紅色線為陰性，如質(zhì)控線不出現(xiàn)紅色線則表示試驗(yàn)無效應(yīng)重做。6.結(jié)果判斷當(dāng)免疫法與化學(xué)法結(jié)果同為陽性時(shí)，判定結(jié)果為陽性結(jié)果，化學(xué)法顯色結(jié)果可作為出血程度的參考；當(dāng)免疫法結(jié)果為陽性而化學(xué)法結(jié)果為陰性時(shí)，判定結(jié)果為陽性，但可能其標(biāo)本隱血的含量極微少；當(dāng)免疫法結(jié)果為陰性而化學(xué)法結(jié)果為陽性時(shí)，建議復(fù)查；當(dāng)兩者均為陰性時(shí)，判定為陰性結(jié)果。當(dāng)免疫法與化學(xué)法結(jié)果同為陽性時(shí)，判定結(jié)果為陽性結(jié)果，化學(xué)法顯7.臨床意義1）上消化道有出血：OB（大便隱血實(shí)驗(yàn)）呈陽性2）消化性潰瘍：陽性率40%~70%,呈間斷性陽性，治療糞便外觀正常時(shí)，OB仍可持續(xù)5~7天陽性，此后若出血停止OB可轉(zhuǎn)陰；只要消化道出血大于5ml，即可出現(xiàn)陽性，但不作為診斷的直接依據(jù)；若OB呈強(qiáng)陽性提示消化性潰瘍合并出血3）消化道癌癥：陽性率95%，呈持續(xù)陽性，可OB可作為消化道癌篩選指標(biāo)4）流行性出血熱：陽性率84%，OB為重要佐證5）藥物導(dǎo)致胃粘膜損傷（Eg阿司匹林、消炎痛、糖皮質(zhì)激素等）腸結(jié)核、潰瘍性結(jié)膜炎、結(jié)腸息肉、鉤蟲病等，OB顯示陽性。7.臨床意義8.質(zhì)控鄰甲苯胺法：采用血標(biāo)本作為陽性對(duì)照。膠體金法：質(zhì)控區(qū)所顯示的紫紅色帶（質(zhì)控區(qū)被事先固定上相應(yīng)抗體）是判定層析反應(yīng)過程是否正常，即作為試紙條的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。8.質(zhì)控9.注意事項(xiàng)1）糞便標(biāo)本不能混入肛門、直腸的出血，糞便應(yīng)新鮮，為提高檢出便中血液的幾率，可多次采集大便樣本。2）在糞便標(biāo)本的采集、運(yùn)送過程中和使用試劑進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，操作人員應(yīng)注意做好個(gè)人防護(hù)，避免人體接觸以防止可能產(chǎn)生的污染和自身感染。3）試驗(yàn)前3天內(nèi)不要食用動(dòng)物血、肉、肝、鐵劑（硫酸亞鐵，枸緣酸亞鐵、紅色補(bǔ)丸、富馬酸鐵）、富含葉綠素的食物（菠菜、青菜），避免假陽性反應(yīng)；亦不可大量服用Vc或其他有還原作用的物質(zhì)，避免出現(xiàn)假陰性反應(yīng)。4）3%的雙氧水必須有效，還應(yīng)該做陽性對(duì)照試驗(yàn)（將雙氧水涂在血片上，有泡沫則可用）。5）牙齦出血，鼻出血、經(jīng)血亦可導(dǎo)致化學(xué)法陽性反應(yīng)。故化學(xué)法陽性者，應(yīng)以膠體金法復(fù)查并參考問診發(fā)出報(bào)告。6）用具應(yīng)殺菌處理的器