杜仲提取物對三黃雞生產(chǎn)性能和腸道微生物菌群的影響

杜仲提取物對三黃雞生產(chǎn)性能和腸道微生物菌群的影響

杜仲是一種獨特的雌性樹種，形成一個屬和一個屬（杜仲科）。它既是名貴中藥材,又是很好的保健品,傳統(tǒng)取其皮入藥。近年研究表明,杜仲葉與皮的化學成分基本相同,藥效類似。杜仲葉中含有蛋白質、脂肪、維生素、礦物元素等營養(yǎng)成分以及綠原酸、桃葉珊瑚甙和松脂醇二葡萄糖甙等藥用成分。近年來,日本已廣泛采用杜仲葉粉作為飼料添加劑,并借此生產(chǎn)大量綠色及天然食品,取得了顯著的經(jīng)濟效益。我國自20世紀90年代以來,對杜仲飼料添加劑也進行了較為深入的研究。研究結果表明,杜仲飼料添加劑具有增強動物免疫力,提高畜禽生產(chǎn)性能,改善肉、蛋、奶品質的功效。本試驗通過研究杜仲提取物對三黃雞生產(chǎn)性能和腸道微生物菌群的影響,初步探討了杜仲提取物在肉雞日糧中的適宜添加量。1材料和方法1.1提取物和萃取液的制備杜仲提取物由張家界恒興生物科技有限公司提供(綠原酸含量8%);黃霉素由山東勝利股份有限公司生產(chǎn)(效價為8%)。杜仲提取物的制備:將新鮮杜仲葉(皮)切碎,碾成粉末,置于沸水中(料液比=1∶20),用直徑為0.45μm微孔膜過濾,收集濾液,并將濾渣重復提取1次,合并2次所得濾液。此濾液主要含有綠原酸(0.67%),京尼平甙(0.26%),黃酮類化合物(1.83%),京尼平甙酸(0.18%)和桃葉珊瑚甙(0.33%)等。將此濾液減壓濃縮,噴霧干燥,即得杜仲提取物。1.2玉米日糧中黃素的含量選用1日齡健康三黃雞150羽(公母各1/2)隨機分成5個處理組,各組體重差異均不顯著(P>0.05),分別在試驗1、2、3組中加入1500、2000、2500g/t杜仲提取物,試驗4組添加黃霉素50mg/kg,對照組飼喂玉米-豆粕型基礎日糧,不添加任何藥物(抗球蟲藥除外)。基礎日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。1.3日糧part動物試驗于2004年6~8月在湖南農(nóng)業(yè)大學動物營養(yǎng)代謝室進行。試驗按試雞日齡分為2個階段,0~4和5~10周齡。試驗前對雞舍及其用具做好消毒工作,并按常規(guī)免疫程序進行預防接種。試雞采用分欄網(wǎng)上平養(yǎng)和24h連續(xù)光照,第1~2周保持正常育雛溫度(第1周33~34℃,第2周27~31℃),2周后脫溫。雞舍自然通風,相對濕度60%~75%,試雞自由采食和飲水。日糧組成與營養(yǎng)水平均以干物質為基礎。CompositionandnutrientlevelswerebasedonDM.*預混料可為每kg全價料提供Thepremixprovidesfollowingfor1kgoffeed:VA5000IU;VB11.5mg;VB26mg;VB61.5mg;VB120.01mg;VD3500IU;VE10IU;VK31mg;煙酸Nicotinicacid35mg;葉酸Folicacid0.8mg;生物素Biotin0.8mg;D-泛酸鈣D-calciumpantothenate12mg;銅Cu20mg;鐵Fe90mg;鋅Zn50mg;錳Mn70mg;碘I0.38mg;硒Se0.16mg。1.4測量指標1.4.1體重試驗開始時記錄各重復試雞的初生重及每個飼養(yǎng)階段結束時早晨空腹稱活重。1.4.2消耗準確記錄各階段各重復的耗料量,并計算各階段的總耗料量和平均耗料量及飼料轉化率。1.4.3盲腸道ph取盲、回腸腸道內(nèi)容物1g左右,用蒸餾水稀釋10倍,用PHBJ-290型便攜式pH計測定。1.4.4分離菌株在腸內(nèi)測定試驗結束時,每組隨機取3羽體重適中的健康肉雞進行屠宰,立即剖腹取盲、回腸各1段,并結扎所取腸段,用酒精棉消毒結扎口,將所取腸段放入已滅菌的樣品袋,帶回實驗室,檢測各腸段內(nèi)容物中乳酸桿菌、雙歧桿菌和大腸桿菌。參照文獻測定以上微生物數(shù)量,每g樣的含菌數(shù)用lg(cfu)/g表示。1.5數(shù)據(jù)的統(tǒng)計與分析采用SAS統(tǒng)計軟件的單因素方差分析,并用Duncan氏法進行多重比較,結果以平均值±標準誤表示。2結果2.1杜仲提取物對三黃雞產(chǎn)量的影響2.1.1總日增重的比較由表2可見,在第1階段,試驗2組平均日增重最高,比試驗4組提高0.59%,比對照組提高3.05%,但各組間差異不顯著(P>0.05)。在第2階段,平均日增重以試驗3組和試驗4組較高,與對照組相比差異顯著(P<0.05),且添加杜仲提取物的3個試驗組比對照組平均日增重分別提高3.34%、4.93%和13.42%。在整個階段,平均日增重仍以試驗3組和試驗4組較高。添加杜仲提取物的3個試驗組比對照組平均日增重分別提高2.68%、4.30%和8.22%。2.1.2差異不顯著的原因由表2可見,在第1階段,平均日采食量以試驗4組最高,試驗3組最低,各組間差異不顯著(P>0.05)。在第2階段,平均日采食量以試驗3組最高,比對照組高4.83%,各組間差異不顯著(P>0.05)。就整個階段而言,平均日采食量以試驗4組最高,試驗3組次之,各組間差異不顯著(P>0.05)。2.1.3差異不顯著的原因由表2可見,在第1階段,飼料轉化率以試驗4組最高,比試驗2、3組和對照組分別高4.39%、4.39%和5.94%。但各組間差異不顯著(P>0.05)。在第2階段,飼料轉化率以試驗4組最低,比對照組降低9.81%(P<0.05),與其他各組相比,差異不顯著(P>0.05)。在添加杜仲提取物的3個試驗組中,試驗3組飼料轉化率最低,比對照組降低7.69%(P>0.05),與試驗4組相比差異不顯著(P>0.05)。就整個階段而言,飼料轉化率以試驗4組最低,比對照組降低6.01%(P<0.05),與添加杜仲提取物的3個試驗組相比,差異不顯著(P>0.05)。在添加杜仲提取物的3個試驗組中,飼料轉化率分別為3.02%、3.06%和3.01%,與試驗4組相比差異不顯著(2.97%)(P>0.05)。同行數(shù)據(jù)肩注完全不同表示差異顯著(P<0.05)。下表同。Valueswithdifferentletterssuperscriptsinthesamerowmeansignificantdifference(P<0.05).Thesameasbelow.2.2杜仲提取物對三黃雞腸道內(nèi)容物ph的影響由表3可知,對照組盲腸和回腸內(nèi)容物pH為6.84和6.64,均高于其他各組,但各組間差異不顯著(P>0.05)。2.3添加杜仲提取物的3個試驗組中乳酸桿菌、回腸內(nèi)容物和大腸桿菌濃度的變化,見表1本試驗于肉雞飼養(yǎng)試驗結束時取其腸道內(nèi)容物分別測定盲腸、回腸內(nèi)的大腸桿菌、雙歧桿菌和大腸桿菌的濃度(見表4)。結果表明:日糧中添加杜仲提取物能顯著降低肉雞盲腸中大腸桿菌數(shù)量(P<0.05)。試雞各組間盲腸、回腸內(nèi)容物中乳酸桿菌差異不顯著(P>0.05),在添加杜仲提取物的3個試驗組中,盲腸、回腸內(nèi)容物中乳酸桿菌以試驗4組濃度最高,與試驗3組差異不顯著(P>0.05),比對照組增加1.86%和2.65%。盲腸內(nèi)容物中雙歧桿菌濃度以試驗3組和試驗4組最高,比對照組分別增加2.38%和3.01%,但各組間差異不顯著(P>0.05)。回腸內(nèi)容物中雙歧桿菌濃度以試驗2組最高,比對照組增加1.42%,比試驗4組增加1.55%,但各組間差異不顯著(P>0.05)。盲腸中大腸桿菌濃度以試驗4組最低,與試驗2組和試驗3組差異不顯著(P>0.05),比試驗1組降低5.55%(P<0.05),在添加杜仲提取物的3個試驗組中,隨著添加量的遞增,盲腸中大腸桿菌濃度依次遞減,且試驗2組與試驗3組比對照組降低4.16%和4.79%。試驗3組回腸中大腸桿菌濃度最低,各組間差異不顯著(P>0.05)。3討論3.1杜仲提取物的用量本試驗研究結果表明,日糧中添加杜仲提取物后,在第1階段,各組試雞平均日增重無顯著差異,且添加2500g/t組表現(xiàn)出降低趨勢。這與國內(nèi)外報道杜仲能促進動物生長的試驗結果不一致。這可能是由于試驗前期杜仲有效成分中的黃酮類化合物,對許多酶的活性都有抑制作用,從而抑制動物的生長,降低其飼料的利用率。但在第2階段,添加2500g/t組平均日增重顯著高于對照組(P<0.05),且在整個階段也表現(xiàn)這一趨勢,這可能與杜仲提取物添加使用的時間及劑量有關。隨著添加時間的延長,杜仲提取物的作用才得以發(fā)揮,且隨著劑量的增加,其效果越來越顯著。Clayton報道指出,中草藥中的有機酸和芳香油成分能促進動物消化液的分泌和采食,并促進生長,提高飼料利用率。本試驗前期,肉雞對添加杜仲提取物的飼料有一個適應過程,隨著添加時間的延長,采食量有所提高,肉雞飼料轉化率也隨之改變。3.2杜仲提取物的抑菌和生產(chǎn)性能本試驗中,添加杜仲提取物具有提高盲腸、回腸乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量的趨勢,但趨勢不明顯。與對照組相比,添加杜仲提取物2000g/t、2500g/t和黃霉素組均顯著降低了盲腸中大腸桿菌數(shù)量(P<0.05),且具有降低回腸中大腸桿菌數(shù)量的趨勢,這表明在三黃雞日糧中添加杜仲提取物,有利于乳酸桿菌和雙歧桿菌的增殖,且能明顯地抑制盲腸中大腸桿菌的增殖,這與何云等研究結果基本一致。此外,李平蘭等試驗指出,中草藥能調節(jié)肉雞腸道微生態(tài)平衡,顯著增加有益乳桿菌的數(shù)量和降低有害菌腸桿菌的數(shù)量。杜仲提取物中含有綠原酸、桃葉珊瑚甙、杜仲多糖和黃酮類等多種有效成分,綠原酸是杜仲主要的有效藥用成分之一,具有較廣泛的抗菌、利膽、止血及提高白血球數(shù)量和抗病毒的作用;體外抑菌試驗表明,杜仲對大腸桿菌、金色葡萄球菌、肺炎球菌和炭疽桿菌等均有不同程度的抑制作用。這些化合物可能通過對腸道中益生菌的增殖,從而在乳酸桿菌、雙歧桿菌等益生菌的作用下實現(xiàn)對動物機體免疫力的增強和生產(chǎn)性能的提高。此外,這類益生菌在腸道內(nèi)的增殖還可合成大量的B族維生素,產(chǎn)生乳酸、醋酸等有機酸及細菌素等抑菌物質等,這些均有助于動物對抗有害微生物,抵御病原微生物的侵襲,提高動物的免疫能力。在本次試驗中,添加杜仲提取物降低了盲腸和回腸內(nèi)容物的pH,提高了腸道內(nèi)容物的酸度,再次證明了杜仲提取物對抑制有害微生物的生長繁殖有一定作用。從本次試驗結果可知,杜仲提取物對腸道中有益菌乳酸桿菌和雙歧桿菌均有不同程度的增殖作用,而對腸道中條件性致病菌大腸桿菌卻有明顯的抑制作用,與對照組相比差異顯著(P<0.05)。在生產(chǎn)性能方面