微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則講解課件

微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則

影響藥品微生物的檢驗(yàn)結(jié)果的因素。

1、實(shí)驗(yàn)人員在取樣或試驗(yàn)過程中污染微生微。

2、生物學(xué)分析方法本身的誤差。

3、樣品中或環(huán)境中微生物分布不均勻等因素在藥品檢驗(yàn)中，為保證微生物試驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性和重現(xiàn)性，藥品微生物實(shí)驗(yàn)室必須使用經(jīng)驗(yàn)證的檢測(cè)方法并按良好的實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)試驗(yàn)。影響藥品微生物的檢驗(yàn)結(jié)果的因素。

藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范包括以下幾個(gè)方面：人員、培養(yǎng)基、菌種、實(shí)驗(yàn)室的布局和運(yùn)行、設(shè)備、文件、實(shí)驗(yàn)記錄、結(jié)果的判斷等。藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范包括以下幾個(gè)方面：人員、培養(yǎng)基、菌

人員培訓(xùn)

從事藥品微生物試驗(yàn)工作的人員均要受到教育、培訓(xùn)及具備相關(guān)工作的經(jīng)驗(yàn)。

微生物實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)具備微生物學(xué)或相近專業(yè)知識(shí)的教育背景。

崗前培訓(xùn)

1、根據(jù)實(shí)驗(yàn)人員的崗位及職責(zé)對(duì)其進(jìn)行相應(yīng)的培訓(xùn)

2、工作所必需的設(shè)備操作的培訓(xùn)

3、微生物檢驗(yàn)技術(shù)的培訓(xùn)

4、實(shí)驗(yàn)室生物安全等方面的培訓(xùn)

經(jīng)考核合格后方可上崗，同時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定所有級(jí)別實(shí)驗(yàn)人員的繼續(xù)教育計(jì)劃。

微生物實(shí)驗(yàn)室管理人員的培訓(xùn)

1、微生物實(shí)驗(yàn)室管理人員培訓(xùn)包括：管理技能、實(shí)驗(yàn)室安全、試驗(yàn)按排、預(yù)算、實(shí)驗(yàn)室研究、實(shí)驗(yàn)結(jié)果評(píng)估和數(shù)據(jù)偏差的調(diào)查及技術(shù)報(bào)告書寫等。。微生物實(shí)驗(yàn)室管理人員的培訓(xùn)1、微

微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)施規(guī)劃和運(yùn)行

微生物實(shí)驗(yàn)室的規(guī)劃和設(shè)計(jì)應(yīng)充分考慮到微生物操作規(guī)范和實(shí)驗(yàn)室安全操作的要求。合理的規(guī)劃及活動(dòng)區(qū)域的劃分將提高微生物實(shí)驗(yàn)室操作的可靠性。

微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)施規(guī)劃和運(yùn)行

無菌室布局

無菌室應(yīng)遠(yuǎn)離交通干道、廁所及污染區(qū)，應(yīng)選上、下水道及其他安裝適宜的位置。無菌室的配套設(shè)施包括洗刷、培養(yǎng)基配制、消毒滅菌、滅菌物品存放和傳輸、培養(yǎng)間、結(jié)果觀察、試驗(yàn)菌實(shí)驗(yàn)和辦公室等，要集中，減少污染，便于管理和使用。

無

微生物實(shí)驗(yàn)室的規(guī)劃實(shí)驗(yàn)室應(yīng)劃分成潔凈區(qū)、無菌區(qū)和培養(yǎng)區(qū)等。

藥品微生物檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)符合《中國藥典》無菌檢查、微生物限度檢查試驗(yàn)環(huán)境的要求

1、獨(dú)立設(shè)置的潔凈室（區(qū)）或隔離系統(tǒng)

2、細(xì)菌（真菌）實(shí)驗(yàn)室

3、培養(yǎng)室

4、培養(yǎng)基及實(shí)驗(yàn)用具準(zhǔn)備（包括滅菌）區(qū)

5、樣品接收和儲(chǔ)藏區(qū)、標(biāo)準(zhǔn)菌株儲(chǔ)藏區(qū)

6、污染物處理區(qū)

7、文檔處理區(qū)等輔助區(qū)域?qū)ι鲜鰠^(qū)域明確標(biāo)識(shí)。藥品微生物檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)符合《中國藥典》無菌檢查、微生

控制程序和操作規(guī)程

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立控制程序和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程.控制程序和操作規(guī)程

無菌抽樣特別是無菌生產(chǎn)的產(chǎn)品。應(yīng)有非常嚴(yán)格的無菌防護(hù)措施，避免在抽樣過程中造成微生物的污染。。隔離器技術(shù)也適于微生物試驗(yàn)或無菌試驗(yàn)。隔離器也應(yīng)定期對(duì)試驗(yàn)區(qū)的潔凈度和滅菌效果等功能進(jìn)行驗(yàn)證。。

無菌抽樣特別是無菌生產(chǎn)的產(chǎn)品。應(yīng)有非常嚴(yán)格的無菌防護(hù)

實(shí)驗(yàn)室使用的消毒劑應(yīng)無菌對(duì)并定期更換。污染微生物的樣品，需進(jìn)一步分析鑒定，均應(yīng)在陽性菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。被檢樣品應(yīng)有傳遞、儲(chǔ)存、處置和識(shí)別管理程序。待驗(yàn)樣品應(yīng)在合適的條件下儲(chǔ)存，應(yīng)明確規(guī)定和記錄儲(chǔ)存條件。廢棄樣品和有害廢棄物應(yīng)制定處理規(guī)程。實(shí)驗(yàn)室使用的消毒劑應(yīng)無菌對(duì)并定期更換。

設(shè)備實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備與檢驗(yàn)?zāi)芰凸ぷ髁肯噙m應(yīng)的儀器設(shè)備，其種類和型號(hào)、測(cè)量范圍和準(zhǔn)確度等應(yīng)滿足檢驗(yàn)的要求，設(shè)備的安裝和布局應(yīng)便于操作，易于維護(hù)、清潔和校準(zhǔn)。設(shè)備儀器設(shè)備管理制度和操作規(guī)程1、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立完整的儀器設(shè)備管理制度。為保證設(shè)備處于良好工作狀態(tài)，應(yīng)定期維護(hù)和期間核查，并保存相關(guān)記錄。儀器設(shè)備管理制度和操作規(guī)程1、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立完

重要的儀器設(shè)備，應(yīng)由專人負(fù)責(zé)，保證其運(yùn)行狀態(tài)正常和受控，同時(shí)應(yīng)有相應(yīng)的備用設(shè)備以保證試驗(yàn)菌株和微生物培養(yǎng)的連續(xù)性.重要的儀器設(shè)備，應(yīng)由專人負(fù)責(zé)，保證其運(yùn)行狀態(tài)正常和受3、對(duì)于一些容易污染微生物的儀器設(shè)備、無菌器具應(yīng)有明確標(biāo)識(shí)及標(biāo)準(zhǔn)的操作規(guī)程。3、對(duì)于一些容易污染微生物的儀器設(shè)備、無菌器具應(yīng)記錄

規(guī)范化管理記錄檔案將充分證明試驗(yàn)規(guī)范化和檢驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性。包括以下幾個(gè)方面：

1、試驗(yàn)人員

2、試驗(yàn)設(shè)備

3、培養(yǎng)基及稀釋液

4、試驗(yàn)操作程序記錄規(guī)范化管理實(shí)驗(yàn)記錄的保存

完整的實(shí)驗(yàn)記錄，以便確認(rèn)數(shù)據(jù)的完整性。

實(shí)驗(yàn)記錄的保存完整的實(shí)驗(yàn)記錄，以便確認(rèn)數(shù)據(jù)的完整性。

實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)是原始記錄，為保證實(shí)驗(yàn)記錄的真實(shí)性。

實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)是原始記錄，為保證實(shí)驗(yàn)記錄的真實(shí)性。微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制

制定嚴(yán)格的微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制程序

1、培養(yǎng)基的質(zhì)量和規(guī)范化操作

2、菌種的保藏

3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確判斷微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制制定嚴(yán)格的微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量培養(yǎng)基的制備和質(zhì)量控制1、培養(yǎng)基的制備方法

2、貯藏條件

3、質(zhì)量控制試驗(yàn)培養(yǎng)基的制備和質(zhì)量控制1、培養(yǎng)基的制備方法

1、培養(yǎng)基制備

⑴培養(yǎng)基可按處方制備也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的商品化成品培養(yǎng)基，配制時(shí)應(yīng)按使用說明上的要求操作確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求。

⑵配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水，特殊情況下需要用去離子水和蒸餾水，對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基應(yīng)用滅菌水和無菌容器配制與分裝，配制時(shí)若需加熱助溶應(yīng)注意溫度不要過高.⑵配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水，特殊情況下需要用去

2、培養(yǎng)基的滅菌培養(yǎng)基滅菌方法和條件，應(yīng)按說明書和驗(yàn)證試驗(yàn)的參數(shù)，采用不同的方法進(jìn)行滅菌。通常多用流通蒸汽滅菌濾膜過濾除菌(過濾器應(yīng)通過驗(yàn)證)

2、培養(yǎng)基的滅菌

⑴每批培養(yǎng)基滅菌后均應(yīng)測(cè)定PH值除非經(jīng)驗(yàn)證表明培養(yǎng)基的PH允許的變化范圍很寬，否則，培養(yǎng)基的PH的范圍不得超過規(guī)定的±0.2。

⑵制成平板或分裝于試管的培養(yǎng)基檢查⑶固體培養(yǎng)基檢查⑷氧化還原指示劑檢查⑸詳細(xì)記錄⑵制成平板或分裝于試管的培養(yǎng)基檢查

三、培養(yǎng)基的貯藏商品化培養(yǎng)基應(yīng)根據(jù)使用說明書上的要求進(jìn)行儲(chǔ)存。所采用的保藏和運(yùn)輸條件應(yīng)使培養(yǎng)基最低限度失去水分并提供機(jī)械保護(hù)。

三、培養(yǎng)基的貯藏

自配培養(yǎng)基應(yīng)標(biāo)記培養(yǎng)基的名稱、批號(hào)、配置日期并在驗(yàn)證的條件下儲(chǔ)存。

1、不得儲(chǔ)藏在高壓菌器中。

2、制備好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在2～25℃、避光的環(huán)境。

3、保存于密閉容器中，可防止水分流失以延長保存時(shí)間。

3、置冰箱保存一般不超過一周。瓊脂培養(yǎng)基不得在0℃或0℃以下存放。若要延長保存,保存期需經(jīng)驗(yàn)證保存。自配培養(yǎng)基應(yīng)標(biāo)記培養(yǎng)基的名稱、批號(hào)、配置日期并在驗(yàn)證的條4、固體培養(yǎng)基滅菌后的再融化應(yīng)在加熱的水浴中或采用流通蒸汽進(jìn)行，只允許一次，融化的培養(yǎng)基應(yīng)放在45～50℃的水浴中，不得超過8小時(shí)。

4、固體培養(yǎng)基滅菌后的再融化應(yīng)在加熱的水浴中或采用流通

四、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制為保證培養(yǎng)基的質(zhì)量對(duì)所配置的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制試驗(yàn)。

四、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制1、實(shí)驗(yàn)室配制的培養(yǎng)基的常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目有⑴pH值測(cè)定⑵適用性試驗(yàn)⑶定期的穩(wěn)定性檢查⑷培養(yǎng)基有效期的確定。

1、實(shí)驗(yàn)室配制的培養(yǎng)基的常規(guī)質(zhì)控項(xiàng)目有⑴pH值測(cè)定

2、當(dāng)一批培養(yǎng)基的質(zhì)控試驗(yàn)不符合規(guī)定，應(yīng)查找造成不合格的原因，避免問題的重復(fù)出現(xiàn)，處理后應(yīng)重新進(jìn)行質(zhì)控試驗(yàn)，合格后再使用。

2、當(dāng)一批培養(yǎng)基的質(zhì)控試驗(yàn)不符合規(guī)定，應(yīng)查找造成不合格

3、用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基，最好終端滅，否則在使用前應(yīng)進(jìn)行100%的預(yù)培養(yǎng)，避免出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

3、用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基，最好終端滅，否則在使用前應(yīng)進(jìn)4、培養(yǎng)基的有效期－是指已通過促生長試驗(yàn)的培養(yǎng)基在整個(gè)有效期內(nèi)均需符合這些相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)。

5、對(duì)配制培養(yǎng)基的過程作詳細(xì)的記錄。4、培養(yǎng)基的有效期－是指已通過促生長試驗(yàn)的培養(yǎng)基在整個(gè)常用菌種管理和保存常用菌種管理和保存

菌種的保存

微生物實(shí)驗(yàn)過程中，實(shí)驗(yàn)菌株可能是最敏感的，因?yàn)樗鼈兊纳锘钚院吞匦砸蕾囉诤线m的試驗(yàn)操作和貯藏條件。菌種的保存菌種的保存和處理

1、實(shí)驗(yàn)室菌種的處理和保藏的程序應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化，使盡可能減少菌種污染和生長特性的改變。

菌種的保存和處理1、實(shí)驗(yàn)室菌種的處理和保藏的程

2、工作菌種的傳代次數(shù)應(yīng)嚴(yán)格控制，不得超過5代，（從菌種保藏中心獲得的標(biāo)準(zhǔn)菌株為第0代）防止過度的傳代造成菌種變異。工作菌株不可替代標(biāo)準(zhǔn)菌株，標(biāo)準(zhǔn)菌株的商業(yè)衍生物僅可用作工作菌株。未使用完的菌懸液或被污染、變異的菌種應(yīng)滅菌后丟棄。2、工作菌種的傳代次數(shù)應(yīng)嚴(yán)格控制，不得超過5代，（

菌種的管理實(shí)驗(yàn)室必須建立菌種保存和使用文件化的程序管理制度；

1、朔源

2、貯藏條件

3、培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件

4、鑒定

5、銷毀的記錄

6、其它需要的程序菌種的管理

菌懸液的制備與保存采用經(jīng)驗(yàn)證的方法制備菌懸液，除另有規(guī)定外，微生物限度試驗(yàn)用菌懸液的制備同培養(yǎng)基靈敏度試驗(yàn)菌懸液的制

常用菌種保藏方法

菌種保藏方法有多種常用的保藏方法有;瓊脂斜面保藏方法、半固體培養(yǎng)基保藏法及液體培養(yǎng)基低溫保藏方法。常用菌種保藏

試驗(yàn)結(jié)果的判斷

一、影響試驗(yàn)結(jié)果的因素

⑴活微生物

⑵受到外界影響因素較

試驗(yàn)結(jié)果的判斷

一、影

實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)

1、對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行充分的分析和全面的評(píng)價(jià)是十分重要的。實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)分析內(nèi)容⑴實(shí)驗(yàn)室環(huán)境⑵抽樣區(qū)的防護(hù)條件⑶樣品本身對(duì)微生物是否具毒性⑷實(shí)驗(yàn)操作是否規(guī)范

分析內(nèi)容⑴實(shí)驗(yàn)室環(huán)境

2、如果依據(jù)分析調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)全過程中任何一個(gè)環(huán)節(jié)有錯(cuò)誤，可判實(shí)驗(yàn)結(jié)果無效，如果需要，重新抽樣復(fù)試.2、如果依據(jù)分析調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)謝謝，再見！