藥物鑒別方法-課件

第三章

藥物的鑒別方法

1ppt課件第三章藥物的鑒別方法1ppt課件概述：藥物的鑒別試驗(yàn)（identificationtest）是根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)，采用化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)方法來判斷藥物的真?zhèn)?。意義：藥品質(zhì)量檢驗(yàn)工作中的首項(xiàng)任務(wù)，只有在藥物鑒別無誤的情況下，進(jìn)行藥物的雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定等分析才有意義。鑒別方法：化學(xué)鑒別法儀器鑒別法（光譜法、色譜法）其他方法等2ppt課件概述：藥物的鑒別試驗(yàn)（identificationtest一、化學(xué)鑒別法概念：化學(xué)鑒別法是根據(jù)藥物與化學(xué)試劑在一定條件下發(fā)生離子反應(yīng)或官能團(tuán)反應(yīng)產(chǎn)生不同顏色，生成不同沉淀，呈現(xiàn)不同熒光，釋放不同氣體，來判斷藥物的真?zhèn)?。特點(diǎn)：化學(xué)鑒別法有一定的專屬性和靈敏度，實(shí)驗(yàn)成本低，應(yīng)用廣，且簡(jiǎn)便易行。無機(jī)藥物陰陽離子鑒別反應(yīng)的專屬性和靈敏度都比較高，化學(xué)鑒別法是藥物分析中最常用的鑒別方法，但專屬性比儀器分析法差。3ppt課件一、化學(xué)鑒別法概念：化學(xué)鑒別法是根據(jù)藥物與化學(xué)試劑在一定條件

(一)一般鑒別試驗(yàn)一般鑒別試驗(yàn)（generalidentificationtest）是依據(jù)某一類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)或理化性質(zhì)的特征，通過化學(xué)反應(yīng)來鑒別藥物的真?zhèn)?。?duì)無機(jī)藥物是根據(jù)其組成的陰離子和陽離子的特殊反應(yīng)；對(duì)有機(jī)藥物則大都采用典型的官能團(tuán)反應(yīng)。4ppt課件(一)一般鑒別試驗(yàn)4ppt課件

通常一般鑒別試驗(yàn)僅供確認(rèn)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中單一的化學(xué)藥物，若為數(shù)種化學(xué)藥物的混合物或有干擾物質(zhì)存在時(shí)，除另有規(guī)定外，一般是不適用的。因此，一般鑒別試驗(yàn)只能證實(shí)是某一類藥物，而不能證實(shí)是哪一種藥物。

5ppt課件5ppt課件分類：1.顯色反應(yīng)鑒別法2.沉淀生成反應(yīng)鑒別法3.熒光反應(yīng)鑒別法4.氣體生成反應(yīng)鑒別法6ppt課件分類：6ppt課件1.顯色反應(yīng)鑒別法（1）三氯化鐵顯色反應(yīng)：含酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基的藥物。（2）異羥肟酸鐵反應(yīng)：芳酸及其酯類、酰胺類的藥物。（3）茚三酮顯色反應(yīng)：化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有脂肪氨基的藥物。（4）重氮化-偶合顯色反應(yīng)：含芳伯氨基或能產(chǎn)生芳伯氨基的藥物。（5）氧化還原顯色反應(yīng)及其他顏色反應(yīng)。7ppt課件1.顯色反應(yīng)鑒別法7ppt課件【示例】

有機(jī)氟化物鑒別方法取供試品約7μg，照氧瓶燃燒法進(jìn)行有機(jī)破壞，用水20ml與0.01mol／L氫氧化鈉溶液6.5ml為吸收液，待燃燒完全后，充分振搖，取吸收液2ml，加茜素氟藍(lán)試液0.5ml，再加12％醋酸鈉的稀醋酸溶液0.2ml，用水稀釋至4ml，加硝酸亞鈰試液0.5ml，即顯藍(lán)紫色，同時(shí)做空白對(duì)照試驗(yàn)?！臼纠?/p>

水楊酸鑒別方法取供試品的稀溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫色。8ppt課件【示例】有機(jī)氟化物鑒別方法8ppt課件2.沉淀生成反應(yīng)鑒別法（1）與重金屬離子的沉淀反應(yīng)：在一定條件下，藥物和重金屬離子反應(yīng)，生成不同形式的沉淀。（2）與硫氰化鉻銨（雷氏銨鹽）的沉淀反應(yīng)：這類藥物多為生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機(jī)堿及其鹽。（3）其他沉淀反應(yīng)9ppt課件2.沉淀生成反應(yīng)鑒別法9ppt課件【示例】氯化物的鑒別取供試品溶液，加硝酸使成酸性后，加硝酸銀試液，即生成白色凝乳狀沉淀。分離，沉淀加氨試液即溶解，再加硝酸，沉淀復(fù)生成。如供試品為生物堿或其他有機(jī)堿的鹽酸鹽，須先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，取濾液進(jìn)行試驗(yàn)。10ppt課件【示例】氯化物的鑒別10ppt課件3.熒光反應(yīng)鑒別法（1）藥物本身可在可見光下發(fā)射熒光。（2）藥物溶液加硫酸使呈酸性后，在可見光下發(fā)射熒光。（3）藥物和溴反應(yīng)后，于可見光下發(fā)射出熒光。（4）藥物和間苯二酚反應(yīng)后，發(fā)射出熒光及藥物經(jīng)其他反應(yīng)后，發(fā)射熒光。11ppt課件3.熒光反應(yīng)鑒別法11ppt課件4.氣體生成反應(yīng)鑒別法（1）大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺類藥物：可經(jīng)強(qiáng)堿處理后加熱，產(chǎn)生氨氣。（2）化學(xué)結(jié)構(gòu)中含硫的藥物：可經(jīng)強(qiáng)酸處理后，加熱，發(fā)生硫化氫氣體。（3）含碘有機(jī)藥物：經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣。（4）含醋酸酯和乙酰胺類藥物：經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯的香味。12ppt課件4.氣體生成反應(yīng)鑒別法12ppt課件(二)專屬鑒別試驗(yàn)

藥物的專屬鑒別試驗(yàn)（specificidentificationtest）是證實(shí)某一種藥物的依據(jù)，它是根據(jù)每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學(xué)特性不同，選用某些特有的靈敏的定性反應(yīng)，來鑒別藥物的真?zhèn)巍?/p>

13ppt課件(二)專屬鑒別試驗(yàn)13ppt課件小結(jié)：

綜上所述，一般鑒別試驗(yàn)是以某些類別藥物的共同化學(xué)結(jié)構(gòu)為依據(jù)，根據(jù)其相同的物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行藥物真?zhèn)蔚蔫b別，以區(qū)別不同類別的藥物。而專屬鑒別試驗(yàn)，則是在一般鑒別試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，利用各種藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)差異，來鑒別藥物，以區(qū)別同類藥物或具有相同化學(xué)結(jié)構(gòu)部分的各個(gè)藥物單體，達(dá)到最終確證藥物真?zhèn)蔚哪康摹?4ppt課件小結(jié)：14ppt課件二、儀器鑒別法

藥物的儀器鑒別法主要包括紫外–可見光譜鑒別法、紅外光譜鑒別法、薄層色譜法、高效液相色譜法和氣相色譜法等。15ppt課件二、儀器鑒別法藥物的儀器鑒別法主要包括紫外–可見光譜1.紫外–可見光譜鑒別法概述：主要用于有機(jī)化合物的分析，有些有機(jī)藥物分子結(jié)構(gòu)中由于含有在紫外可見光區(qū)能產(chǎn)生吸收的基團(tuán)，因而顯示吸收光譜?？筛鶕?jù)光譜上的特征吸收，包括最大吸收波長(zhǎng)（λmax）、吸收系數(shù)（E）、吸收度比值等參數(shù)進(jìn)行鑒別。特點(diǎn)：此法簡(jiǎn)單易行，應(yīng)用范圍廣，使用頻率高，但因?yàn)槲展庾V比較簡(jiǎn)單，吸收曲線形狀變化不大，缺乏精細(xì)結(jié)構(gòu)，故作鑒別的專屬性遠(yuǎn)不如紅外光譜法。1%1cm16ppt課件1.紫外–可見光譜鑒別法1%1cm16ppt課件常用的鑒別方法：

（1）比較光譜的一致性：按照藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，將供試品與對(duì)照品用規(guī)定溶劑分別配成一定濃度的供試溶液，在規(guī)定波長(zhǎng)區(qū)間繪制吸收曲線，比較光譜圖是否一致。（2）比較光譜中最大吸收波長(zhǎng)和相應(yīng)吸光度的一致性：按照藥品標(biāo)準(zhǔn)，將供試品配制成相應(yīng)供試液，在規(guī)定條件下測(cè)定，與標(biāo)準(zhǔn)品溶液相比較二者的最大吸收波長(zhǎng)和吸光度，如果相同可初步判斷是同一種藥物。17ppt課件常用的鑒別方法：17ppt課件（3）比較最大吸收波長(zhǎng)和最小吸收波長(zhǎng)的一致性。（4）比較最大、最小吸收波長(zhǎng)和相應(yīng)吸收光度比值的一致性。（5）藥物經(jīng)過化學(xué)處理后，測(cè)定其反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜。以上方法可以單獨(dú)使用，也可以幾個(gè)方法結(jié)合起來使用，以提高方法的專屬性。

18ppt課件（3）比較最大吸收波長(zhǎng)和最小吸收波長(zhǎng)的一致性。18ppt【示例1】

布洛芬片的鑒別方法取本品的細(xì)粉適量，加0.4％氫氧化鈉溶液制成每1ml中含布洛芬0.25mg的溶液，濾過，取續(xù)濾液，照紫外-可見分光光度法（附錄ⅣA）測(cè)定，在265nm與273nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，在245nm與271nm的波長(zhǎng)處有最小吸收，在259nm的波長(zhǎng)處有一肩峰。19ppt課件【示例1】布洛芬片的鑒別方法19ppt課件【示例2】維生素B2

的鑒別方法取含量測(cè)定項(xiàng)下的溶液，照紫外–可見分光光度法（附錄ⅣA）測(cè)定，在267nm、375nm、444nm的波長(zhǎng)處有最大吸收。375nm波長(zhǎng)處的吸光度與267nm波長(zhǎng)處的吸光度比值應(yīng)為0.31～0.33；444nm波長(zhǎng)處的吸光度與267nm波長(zhǎng)處的吸光度比值應(yīng)為0.36～0.39。20ppt課件【示例2】維生素B2的鑒別方法20ppt課件【示例3】苯妥英鈉的鑒別方法取本品約10mg，加高錳酸鉀10mg、氫氧化鈉0.25g與水10ml，小火加熱5分鐘，放冷，取上清液5ml，加正庚烷20ml，振搖提取，靜置分層后，取正庚烷提取液，照紫外-可見分光光度法（附錄ⅣA）測(cè)定，在248nm的波長(zhǎng)處有最大吸收。21ppt課件【示例3】苯妥英鈉的鑒別方法21ppt課件2.紅外光譜鑒別法概述：紅外光譜法是一種專屬性很強(qiáng)、應(yīng)用較廣（固體、液體、氣體樣品）的鑒別方法。有機(jī)藥物在紅外光區(qū)有特征吸收，藥物分子的組成、結(jié)構(gòu)、官能團(tuán)不同時(shí)，其紅外吸收光譜也不同，故可以作為有機(jī)藥物鑒別的依據(jù)。22ppt課件2.紅外光譜鑒別法22ppt課件適用對(duì)象：紅外光譜法主要用于組分單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥，特別適合于用其他方法不易區(qū)分的同類藥物，如磺胺類、甾體激素類和半合成抗生素類藥品。特點(diǎn)：由于繪制紅外光譜時(shí)受外界條件影響較大，圖譜容易發(fā)生變異，為確保鑒別結(jié)果準(zhǔn)確，中國(guó)藥典不單獨(dú)使用本方法進(jìn)行鑒別，常與其他方法聯(lián)合應(yīng)用進(jìn)行鑒別。23ppt課件適用對(duì)象：紅外光譜法主要用于組分單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥，特別常用的方法有：（1）標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照法：按照藥典指定的條件繪制供試品的紅外吸收光譜，然后與《藥品紅外光譜集》中的相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對(duì)比，比較是否一致，如果峰位、峰形以及相對(duì)強(qiáng)度等都一致時(shí)，則可以判斷二者是同一物質(zhì)。（2）直接對(duì)比法：將供試品與相應(yīng)的對(duì)照品在同樣條件下繪制紅外吸收?qǐng)D譜，直接對(duì)比是否一致。24ppt課件常用的方法有：24ppt課件【示例】丙磺舒的供試品與對(duì)照品紅外吸收?qǐng)D譜基本一致。25ppt課件【示例】丙磺舒的供試品與對(duì)照品紅外吸收?qǐng)D譜基25ppt課注意事項(xiàng)：①固體藥品在測(cè)定時(shí)，可能由于晶型的影響，致使測(cè)定的光譜圖與光譜集所收載的光譜圖不一致，遇此情況時(shí)，應(yīng)按光譜集中各相應(yīng)光譜圖中備注的方法進(jìn)行預(yù)處理后，再行測(cè)定。②采用壓片法時(shí)，影響圖譜形狀的因素較多，應(yīng)注意供試片的制備條件對(duì)圖譜形狀及各譜帶的相對(duì)吸收強(qiáng)度可能產(chǎn)生的影響。壓片時(shí)，若樣品（包括鹽酸鹽）與溴化鉀之間不發(fā)生離子交換反應(yīng)，則采用溴化鉀作為制片基質(zhì)。否則，鹽酸鹽樣品制片時(shí)必須使用氯化鉀基質(zhì)。26ppt課件注意事項(xiàng)：26ppt課件③測(cè)定時(shí)應(yīng)注意二氧化碳和水氣等干擾，必要時(shí)，應(yīng)采取適當(dāng)措施（如采用干燥氮?dú)獯祾撸┘右愿纳?。④儀器間分辨率的差異及不同的操作條件（如狹縫程序，掃描速度等）可能影響藥品光譜圖的判斷。為了方便比照，在比照所測(cè)藥品的光譜圖與光譜集所收載的藥品的光譜圖時(shí)，宜首先在測(cè)定藥品所用的儀器上錄制聚苯乙烯薄膜的光譜圖，并與光譜集收載的聚苯乙烯薄膜的光譜圖加以比較和校正。⑤本法對(duì)于多組分藥物或存在多晶現(xiàn)象而又無可重復(fù)轉(zhuǎn)晶方法的藥物不適用。27ppt課件③測(cè)定時(shí)應(yīng)注意二氧化碳和水氣等干擾，必要時(shí)，應(yīng)采取適當(dāng)措施（3.薄層色譜鑒別法概述：薄層色譜法（TLC）簡(jiǎn)單易行，具有分析和分離雙重功能，適用范圍日益擴(kuò)大。在實(shí)際工作中，一般采用對(duì)照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）比較法。即供試品與對(duì)照品分別按照中國(guó)藥典規(guī)定，配制一定濃度的供試品溶液與對(duì)照品溶液，在同一塊薄層板上點(diǎn)樣、展開、顯色，供試品應(yīng)與對(duì)照品相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。28ppt課件3.薄層色譜鑒別法28ppt課件【示例】維生素C顆粒的鑒別方法取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)維生素C10mg），加水10ml，振搖使維生素C溶解，濾過，取濾液作為供試品溶液；另取維生素C對(duì)照品，加水溶解并稀釋制成1ml中約含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅤB）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（5︰4︰1）為展開劑，展開，晾干，立即（1小時(shí)內(nèi)）置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的位置和顏色應(yīng)與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)相同。29ppt課件【示例】維生素C顆粒的鑒別方法29ppt課件4.高效液相色譜法（HPLC）和氣相色譜法（GC）一般規(guī)定按供試品含量測(cè)定項(xiàng)下的高效液相色譜法或氣相色譜法操作條件進(jìn)行試驗(yàn)。要求供試品和對(duì)照品色譜峰的保留時(shí)間應(yīng)一致。鑒別時(shí)如果采用含量測(cè)定方法的內(nèi)標(biāo)法時(shí)，可要求供試品溶液和對(duì)照品溶液色譜圖中藥物峰的保留時(shí)間與內(nèi)標(biāo)物峰的保留時(shí)間比值應(yīng)相同。30ppt課件4.高效液相色譜法（HPLC