醫(yī)學(xué)檢驗教材課件腦脊液檢驗VIP

臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第第一一章章血血液液標標本本采采集集與與處處理理臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗第十三章腦脊液檢驗江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院 王

梅臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)本

章

內(nèi)

容第一節(jié) 腦脊液的標本采集與處理第二節(jié) 腦脊液理學(xué)檢驗第三節(jié) 腦脊液顯微鏡檢驗第四節(jié) 腦脊液化學(xué)與免疫學(xué)檢驗第五節(jié) 腦脊液檢驗的臨床意義臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗?zāi)X脊液（cerebrospinal

fluid，CSF）主要是由腦室脈絡(luò)叢通過主動分泌和超濾作用以及腦室的室管膜和蛛網(wǎng)膜下腔產(chǎn)生，循環(huán)流動于腦室、蛛網(wǎng)膜下腔和脊髓中央管中的一種無色透明液體。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗成年人：約120m1～180m1，新生兒：約10ml～60ml緩沖保護作用運輸生理作用調(diào)節(jié)顱內(nèi)壓力和pH的穩(wěn)定性參與神經(jīng)內(nèi)分泌總?cè)萘颗R床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗?通過對腦脊液的檢驗，可了解腦脊液的改變，達到對中樞神經(jīng)系疾病的診斷、治療和預(yù)后判斷的目的。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗第一節(jié)腦脊液的標本采集與處理臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗一、標本采集?腦脊液標本的采集一般由臨床醫(yī)師通過腰椎穿刺采集★每管2ｍL腦脊液第1管 化學(xué)與免疫學(xué)檢查第2管 微生物檢查第3管 常規(guī)檢查★疑有惡性腫瘤，另采集1管作脫落細胞檢查。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗二、標本處理1、應(yīng)立即送檢，并于1小時內(nèi)檢驗完畢。2、若不能及時檢查，需在2～4℃環(huán)境下保存，4小時內(nèi)完成檢驗。3、標本放置過久可導(dǎo)致細胞破壞、葡萄糖等化學(xué)成分分解、細菌溶解等，影響檢驗結(jié)果。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗第二節(jié)腦脊液理學(xué)檢驗臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗一、顏色（一）檢測原理肉眼觀察腦脊液顏色變化，分別以無色、乳白色、紅色、棕色、黑色、綠色等描述。（二）參考區(qū)間無色或淡黃色。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（三）臨床意義?當中樞神經(jīng)系統(tǒng)有炎癥、損傷、腫瘤或梗阻時，破壞了血-腦脊液屏障，使腦脊液成分發(fā)生改變，而導(dǎo)致其顏色發(fā)生變化。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗表 腦脊液的顏色變化及臨床意義臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗二、透明度（一）檢測原理?肉眼觀察腦脊液透明度變化，分別以“清晰透明”、“微渾”、“渾濁”等描述。（二）參考區(qū)間?清晰透明。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（三）腦脊液的臨床意義?透明度與其所含有的細胞和細菌數(shù)量有關(guān)?！袒撔阅X膜炎時，腦脊液呈明顯乳白色渾濁?！探Y(jié)核性腦膜炎時，腦脊液呈毛玻璃樣渾濁?！檀┐虛p傷帶入紅細胞，腦脊液可呈輕微的紅色渾濁。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗表腦脊液新鮮出血與陳舊性出血的鑒別臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗三、凝固性（一）檢測原理?肉眼觀察腦脊液放置是否有沉淀、凝塊或薄膜。（二）參考區(qū)間?放置12～24小時后無薄膜、凝塊或沉淀。（三）臨床意義?腦脊液形成凝塊或薄膜與其所含的蛋白質(zhì)，尤其是與纖維蛋白原的含量有關(guān)。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗?化膿性腦膜炎的腦脊液靜置1～2小時內(nèi)即可出現(xiàn)凝固或沉淀物?結(jié)核性腦膜炎的腦脊液靜置12～24小時，可見液面由纖細的薄膜形成。?神經(jīng)梅毒的腦脊液可有小絮狀凝塊。?蛛網(wǎng)膜下腔梗阻的腦脊液呈黃色膠樣凝固。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗?腦脊液同時存在膠樣凝固、黃變癥和蛋白質(zhì)-細胞分離（蛋白質(zhì)明顯增高，細胞正?；蜉p度增高）稱為Froin-Nonne綜合征，這是蛛網(wǎng)膜下腔梗阻的腦脊液特點。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗四、比重（一）檢測原理?常用折射儀檢測比重。（二）參考區(qū)間?腰椎穿刺：1.006～1.008；?腦室穿刺：1.002～1.004；?小腦延髓池穿刺：1.004～1.008。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（三）臨床意義增高主要見于化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎等顱內(nèi)各種炎癥性病變；腦腫瘤、腦出血、腦積水等顱內(nèi)非炎癥性病變；高血壓、動脈硬化等顱外因素等。減低主要見于腦脊液循環(huán)受阻；腦脊液分泌減少；腦脊液流失過多等因素。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗第三節(jié)腦脊液顯微鏡檢驗（細胞學(xué)、病原學(xué)檢查）臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗一、細胞學(xué)檢查（一）檢測原理1.細胞總數(shù)計數(shù)儀器計數(shù)法。顯微鏡計數(shù)法：直接計數(shù)法和稀釋計數(shù)法。2.白細胞計數(shù)儀器計數(shù)法。顯微鏡計數(shù)法：直接計數(shù)法和稀釋計數(shù)法。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗白細胞分類儀器分類法。顯微鏡分類法：①直接分類法：單個核細胞和中性粒細胞所占的比例，以百分數(shù)表示。②染色分類法制備涂片后Wright染色。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（二）方法評價細胞計數(shù)儀器計數(shù)法精密度高、速度快、報告及時。形態(tài)學(xué)報警，必須進行顯微鏡計數(shù)法復(fù)查。顯微鏡計數(shù)法操作繁瑣，但可作為校正儀器的參考方法。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗2.白細胞分類計數(shù)表 腦脊液白細胞分類計數(shù)的方法學(xué)評價臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（三）質(zhì)量控制細胞計數(shù)：（1）及時檢查（2）校正（3）形態(tài)（4）辨別分類計數(shù)：離心速度不宜過快、時間過長。細胞涂片應(yīng)厚薄均勻，固定時間不能太長，更不能高溫固定。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（四）參考區(qū)間紅細胞： 無；白細胞： 成人（0～8）×106/L，兒童（0～15）×106/L；有核細胞分類：多為淋巴細胞及單核細胞（7:3）內(nèi)皮細胞偶見。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗圖

腦脊液中淋巴細胞圖

腦脊液中中性粒細胞臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（五）臨床意義1.腦脊液細胞數(shù)增高的程度及細胞種類的臨床意義表 腦脊液細胞數(shù)增高及細胞分類的臨床意義臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗2.

腔壁細胞、腫瘤細胞和污染細胞檢查的臨床意義。表腦脊液腔壁細胞、腫瘤細胞和污染細胞檢查的臨床意義臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗圖腦脊液脈絡(luò)叢細胞圖腦脊液原始粒細胞（急性粒細胞白血?。﹫D腦脊液腫瘤細胞（胃癌轉(zhuǎn)移）臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗二、病原學(xué)檢查（一）檢測原理1.細菌（1）顯微鏡檢查（2）細菌培養(yǎng)（3）ELISA法2.寄生蟲（1）顯微鏡檢查（2）腦囊蟲檢查3.梅毒螺旋體檢查臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（二）質(zhì)量控制苛養(yǎng)菌宜在床邊采集和接種腦脊液標本，同時作涂片檢查，以獲得初步診斷。顱內(nèi)膿腫需考慮標本在厭氧條件下轉(zhuǎn)運和培養(yǎng)。（三）參考區(qū)間陰性臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（四）臨床意義細菌檢查：排除污染因素，檢出細菌均視為有病原菌感染。寄生蟲檢查：檢出寄生蟲蟲卵和蟲體即可診斷為寄生蟲病。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗第四節(jié)腦脊液化學(xué)與免疫學(xué)檢驗臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)一、蛋白質(zhì)第十三章腦脊液檢驗（一）檢測原理蛋白質(zhì)定性檢查常用方法：潘迪試驗（Pandy試驗）硫酸銨試驗（Ross-Jone試驗、Nonne-Apelt試驗）Lee-Vinson試驗蛋白質(zhì)定量檢測常用方法：磺基水楊酸-硫酸鈉比濁法雙縮脲法、染料結(jié)合法、免疫學(xué)法臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗表 腦脊液蛋白質(zhì)定性檢查原理臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（二）方法評價1.蛋白質(zhì)定性檢查方法學(xué)評價見表13-4-2。表13-4-2

腦脊液蛋白質(zhì)定性檢查方法學(xué)評價臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗2. 蛋白質(zhì)定量檢測方法學(xué)評價見表13-3-3。表13-3-3

腦脊液蛋白質(zhì)定量檢測方法學(xué)評價臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（三）質(zhì)量控制蛋白質(zhì)定性檢查假陽性假陰性紅細胞過多時，須離心處理。Pandy試驗過于敏感臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗蛋白質(zhì)定量檢測如有多量細胞或渾濁，應(yīng)先離心取上清液測定。蛋白質(zhì)濃度過高，稀釋后重新檢測。注意磺基水楊酸-硫酸鈉法手工測定。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（四）參考區(qū)間蛋白質(zhì)定性：陰性或極弱陽性。蛋白質(zhì)定量：腰椎穿刺：0.2～0.4g/L；腦室穿刺：0.05～0.15g/L；小腦延髓池穿刺：0.1～0.25g/L。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（五）臨床意義?腦脊液蛋白含量增高，是血腦屏障被破壞的標志，常見于：中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥神經(jīng)根病變椎管內(nèi)梗阻其他臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗二、葡萄糖（一）檢測原理多采用葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法。（二）方法評價葡萄糖氧化酶法 反應(yīng)特異性低。己糖激酶法 特異性和準確性。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（三）質(zhì)量控制將標本用量加倍可提高檢測的靈敏度。病理情況下腦脊液常含有細胞和細菌，應(yīng)在留取標本后及時檢測。不能及時處理需要加適量防腐劑預(yù)防假性降低。（四）參考區(qū)間腰椎穿刺：2.5～4.4mmol/L；腦室穿刺：3.0～4.4mmol/L；小腦延髓池穿刺：2.8～4.2mmol/L。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（五）臨床意義?腦脊液葡萄糖的高低與血糖濃度、血-腦脊液屏障的通透性、葡萄糖的酵解程度有關(guān)。1.生理性變化早產(chǎn)兒及新生兒飽餐或靜脈注射葡萄糖后臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗病理性變化增高：見于①腦或蛛網(wǎng)膜下腔出血所致的血性腦脊液；②病毒性腦膜炎或腦炎；③急性顱腦外傷、中毒、缺氧、腦出血等所致丘腦下部損傷等；④糖尿病等。減低：見于①細菌性腦膜炎和真菌性腦膜炎，以化膿性腦膜炎早期減低最明顯；葡萄糖含量越低，則預(yù)后越差；②腦腫瘤；③神經(jīng)梅毒；④腦寄生蟲??；⑤低血糖。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗三、氯化物（一）檢測原理測定的方法有硝酸汞滴定法、電量分析法、硫氰酸汞比色法、離子選擇性電極法等。臨床常用電極法。（二）方法評價腦脊液氯化物檢測的方法學(xué)評價見表13-4-4。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗表13-3-4腦脊液氯化物檢測的方法學(xué)評價臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（三）質(zhì)量控制離子選擇性電極法應(yīng)及時擦去或更換電極。電量分析法可選用純試劑進行空白校正，通過預(yù)電解除去雜質(zhì)。（四）參考區(qū)間成人：120～130mmol/L；兒童：111～123mmol/L。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（五）臨床意義腦脊液氯化物含量約為血漿的1.2～1.3倍。減低：見于①細菌性或真菌性腦膜炎早期等；②細菌性腦膜炎的后期；③嘔吐、腎上腺皮質(zhì)功能減退癥和腎臟病變；④病毒性腦炎、脊髓灰質(zhì)炎、腦腫瘤。增高：主要見于腎炎、心力衰竭、尿毒癥、脫水和漿液性腦膜炎等。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗四、酶臨床檢測常用酶：√天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）√丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）√乳酸脫氫酶（LD）√腺苷脫氨酶（ADA）√肌酸激酶（CK）√溶菌酶（LZM）臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（一）檢測原理除溶菌酶外多用酶速率法，溶菌酶多數(shù)采用比濁法進行測定。（二）質(zhì)量控制避免溶血出現(xiàn)假性增高。避免高溫、劇烈振蕩果。（三）參考區(qū)間腦脊液主要酶參考區(qū)間見表13-4-5。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（四）臨床意義表13-4-5

腦脊液主要酶參考區(qū)間及濃度增高的臨床意義臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗五、蛋白電泳（一）檢測原理常用乙酸纖維薄膜電泳法、瓊脂糖凝膠電泳法。（二）方法評價電泳條件與血清蛋白電泳相同。若采用等電聚焦電泳可提高電泳圖譜的分辨率。高效毛細管電泳法，分辨率更強，且腦脊液標本無需濃縮。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（三）質(zhì)量控制標本在高分子聚乙二醇或右旋糖酐透析液中需濃縮（四）參考區(qū)間?前白蛋白：3%～6%；白蛋白：50%～70%；α1球蛋白4%～6%；α2球蛋白：4%～9%；β球蛋白：7%～13%；γ球蛋白：7%～8%。蛋白商（球蛋白/白蛋白比值）：0.4～0.8。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（五）臨床意義1.腦脊液蛋白電泳的臨床意義見表13-4-6。

表13-4-6

腦脊液蛋白電泳的臨床意義臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗蛋白商變化增高：主要見于腦脊髓灰質(zhì)炎、神經(jīng)梅毒、多發(fā)性硬化癥、亞急性梗死性全腦膜炎等。減低：主要見于脊髓壓迫癥、腦瘤、化膿性腦膜炎急性期等。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗六、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）正常腦脊液中免疫球蛋白含量極少,主要為IgG。（一）檢測原理主要有免疫電泳法、免疫散射比濁法和免疫擴散法。（二）方法評價凝膠沉淀試驗操作繁瑣、靈敏度低，耗時長等免疫比濁法靈敏、快速且能自動化測定。臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)技術(shù)第十三章腦脊液檢驗（三）參考區(qū)間IgG：10～40mg/L；IgA：0～6mg/L；IgM：0～0.22mg/L；IgE：極