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文檔簡介
版權所有:中國好課堂課題1DNA的粗提取與鑒定1.DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最低。2.DNA不溶于酒精,但是細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精,可利用酒精將DNA和蛋白質(zhì)分開。3.DNA對蛋白酶、高溫和洗滌劑有耐受性。4.在加熱條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍色。5.哺乳動物成熟的紅細胞不含細胞核,不能作為提取DNA的實驗材料。若選取肝臟細胞或植物細胞,則必須充分研磨。6.雞血中加入檸檬酸鈉可防止血液凝固。7.用玻璃棒攪拌時,動作要輕緩且沿同一個方向進行,以免加劇DNA分子的斷裂。一、實驗原理1.提取思路:利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學性質(zhì)方面的差異,提取DNA,去除其他成分。2.提取原理(1)DNA的溶解性:①DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,利用這一特點,選擇適當?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達到分離的目的。②DNA不溶于酒精溶液,但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則可溶于其中。(2)DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性:①蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但對DNA沒有影響。②大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60~80℃的高溫,發(fā)生變性,而DNA在80_℃以上才會變性。③洗滌劑能夠瓦解細胞膜,但對DNA沒有影響。二、實驗操作1.實驗材料的選取選用DNA含量相對較高的生物組織,成功的可能性更大。2.破碎細胞,獲取含DNA的濾液(1)動物細胞的破碎(以雞血為例):在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可。(2)植物細胞的破碎(以洋蔥為例):先將洋蔥切碎,然后加入一定的洗滌劑和食鹽,進行充分地攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。3.去除濾液中的雜質(zhì)(1)方案一:通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)。(2)方案二:直接在濾液中加入嫩肉粉,反應10~15min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)。(3)方案三:將濾液放在60~75_℃的恒溫水浴箱中保溫10~15min,使蛋白質(zhì)變性而與DNA分離。4.DNA的析出在濾液中加入與濾液體積相等的、冷卻的酒精溶液,靜置2~3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物。5.DNA的鑒定將呈白色絲狀的DNA溶解于5mL物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液中,再加入4mL的二苯胺試劑,沸水中加熱5min,冷卻后觀察溶液的顏色,注意要同時設置對照實驗。三、操作提示1.以血液為實驗材料時,每100mL血液中需要加入3g檸檬酸鈉,防止血液凝固。2.加入洗滌劑后,動作要輕緩、柔和,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟的操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時,動作要輕緩,以免加劇DNA分子的斷裂,導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。3.鑒定DNA用的二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,否則會影響鑒定的效果。1.下圖中能反映DNA溶解度與NaCl溶液濃度之間關系的是()解析:選CDNA在NaCl溶液中的溶解度隨著NaCl溶液濃度的變化而變化,在NaCl溶液濃度為0.14mol/L時DNA溶解度最小。2.在DNA粗提取與鑒定實驗中,除去雜質(zhì)時將濾液放在60~75℃的恒溫水浴箱中保溫10~15min的目的是()A.使DNA變性 B.使蛋白質(zhì)變性C.使DNA和蛋白質(zhì)變性 D.分解蛋白質(zhì)解析:選B大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60~80℃的高溫,而DNA在80℃以上才會變性。在60~75℃的恒溫水浴箱中保溫10~15min,目的是使蛋白質(zhì)變性,然后分離得到DNA。3.在制備雞血細胞液的過程中,加入檸檬酸鈉的目的是()A.防止凝血 B.加快DNA析出C.加快DNA溶解 D.加速凝血解析:選A檸檬酸鈉是抗凝血物質(zhì),防止凝血,有利于雞血細胞液的制備。eq\a\vs4\al(核心要點一)eq\b\lc\|\rc\(\a\vs4\al\co1(,,,,))eq\a\vs4\al(DNA粗提取與鑒定的原理和方法)1.DNA與蛋白質(zhì)在NaCl溶液中的溶解度項目溶解規(guī)律2mol/L的NaCl溶液0.14mol/L的NaCl溶液DNA溶解析出蛋白質(zhì)部分發(fā)生鹽析沉淀溶解總結①DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同;②選擇適當?shù)柠}溶液就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達到分離目的[名師點撥]高溫和鹽溶液對DNA和蛋白質(zhì)的影響不同(1)鹽析過程中DNA的空間結構不變,沒有變性,只是溶解度在不同鹽濃度下溶解度不同,因此改變鹽濃度,可重新使DNA溶解。(2)高溫使DNA和蛋白質(zhì)變性時破壞的鍵不同。DNA變性時,氫鍵被破壞;降溫時DNA能復性,是可逆過程。而蛋白質(zhì)變性時往往是二硫鍵被破壞,因此蛋白質(zhì)變性是不可逆的。2.DNA提取與鑒定的原理和方法基本原理方法目的DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同溶于NaCl溶液中并稀釋①NaCl溶液為2mol/L時,DNA溶解,而部分蛋白質(zhì)發(fā)生鹽析生成沉淀,通過過濾可除去部分蛋白質(zhì)及不溶于NaCl溶液的雜質(zhì);②當NaCl溶液稀釋至0.14mol/L時,DNA析出,過濾可除去溶于NaCl溶液的部分蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)DNA不被蛋白酶所水解加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶,分解蛋白質(zhì)DNA不溶于酒精溶液加入冷卻酒精(95%)DNA析出,除去溶于酒精的蛋白質(zhì)DNA可被二苯胺染成藍色加入二苯胺,并沸水浴加熱鑒定DNA[題組沖關]1.在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中,實驗原理是DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同。DNA的溶解和析出與圖中所示曲線的對應點符合的是()A.a(chǎn)點濃度最適合析出DNAB.b點濃度最適合析出DNAC.c點濃度最適合溶解DNAD.d點濃度最適合析出DNA解析:選B用高濃度的NaCl溶液溶解DNA,能除去在高鹽溶液中不能溶解的雜質(zhì),用低濃度的NaCl溶液使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì),因此,反復溶解、析出DNA能除去與DNA溶解度不同的雜質(zhì)。從題圖可以看出,DNA在濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中(b點)的溶解度最小,因此最適合析出DNA,但是隨著NaCl溶液濃度的增大或減小,溶解度均逐漸增大。2.下列有關“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述,正確的是()A.利用DNA溶于酒精,而蛋白質(zhì)不溶于酒精的原理可將DNA與蛋白質(zhì)分離B.利用高溫能使蛋白質(zhì)變性,卻對DNA沒有影響的特性,可將DNA與蛋白質(zhì)分離C.在溶有DNA的物質(zhì)的量濃度為2mol/L的氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水,輕輕攪拌后過濾,取濾液進行以后的實驗D.在DNA濾液中加入嫩肉粉,通過木瓜蛋白酶的作用,可將DNA與蛋白質(zhì)分離解析:選D利用DNA不溶于酒精,而蛋白質(zhì)溶于酒精的原理可將DNA和蛋白質(zhì)分開。溫度過高,DNA和蛋白質(zhì)的活性都會受到影響。在物質(zhì)的量濃度為2mol/L的氯化鈉溶液中DNA的溶解度較大,但加入蒸餾水后,DNA溶解度降低,DNA析出,過濾后應取其黏稠物進行以后的實驗。蛋白酶能分解蛋白質(zhì),而不能分解DNA,因此可利用嫩肉粉中的木瓜蛋白酶將DNA和蛋白質(zhì)分離。eq\a\vs4\al(核心要點二)eq\b\lc\|\rc\(\a\vs4\al\co1(,,,,))eq\a\vs4\al(DNA粗提取與鑒定的實驗操作)1.實驗材料的選取不同生物組織中DNA的含量不同,在選取材料時,應依據(jù)“DNA含量高、材料易得、便于提取”的原則,如雞血、菜花、洋蔥等。若選取雞血作為實驗材料,可在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水,同時用玻璃棒攪拌,使血細胞吸水破裂,釋放核物質(zhì),過濾后收集濾液。若選取植物細胞,應加入一定量的洗滌劑和食鹽,并進行充分地攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。2.提取DNA的實驗步驟步驟實驗操作目的制備雞血細胞液每100mL血液中加入3g檸檬酸鈉,然后靜置或離心,除去上清液防止血液凝固,使血細胞與血漿分離提取細胞核物質(zhì)在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水,并充分攪拌,過濾后收集濾液使細胞因過度吸水而破裂,釋放核物質(zhì)溶解DNA向上述濾液中加入NaCl,使NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為2mol/L,并用玻璃棒沿一個方向攪拌,然后過濾溶解DNA,過濾除去不溶的雜質(zhì)析出DNA向上述濾液中緩緩加入蒸餾水并輕輕攪拌,至白色絲狀黏稠物不再增加時停止加水,然后用多層紗布過濾使NaCl溶液的濃度降至0.14mol/L,析出DNA,過濾除去溶于該濃度的NaCl溶液的雜質(zhì)DNA的再溶解將紗布上的黏稠物放入2mol/L的NaCl溶液中,攪拌至完全溶解,然后過濾溶解DNA,過濾除去雜質(zhì)提取較純凈的DNA向上述濾液中加入等體積的體積分數(shù)為95%的冷卻酒精溶液,待出現(xiàn)絲狀物時用玻璃棒沿一個方向攪拌,將絲狀物卷起除去溶于酒精的雜質(zhì),獲得較純凈的DNA3.DNA的鑒定試管序號AB1加入2mol/L的NaCl溶液5mL2加DNA絲狀物溶解—3加4mL二苯胺混勻4沸水浴5min實驗現(xiàn)象變藍不變色實驗結論DNA在沸水浴條件下,遇二苯胺會變成藍色4.實驗操作分析(1)實驗中有2次加入蒸餾水,第一次加入的目的是使雞血細胞吸水漲破,第二次加入的目的是稀釋NaCl溶液至0.14mol/L,從而析出DNA。(2)實驗中有3次加入NaCl,作用均為溶解DNA。(3)實驗中有4次過濾:第一次過濾第二次過濾第三次過濾第四次過濾濾液中含DNA的核物質(zhì)DNA溶于0.14mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)DNA紗布上細胞膜、核膜等殘片不溶于2mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)DNA不溶于2mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)過濾前加入的物質(zhì)蒸餾水NaCl溶液蒸餾水NaCl溶液過濾目的去除細胞膜、核膜等雜質(zhì)去除不溶于2mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)去除溶于0.14mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)去除不溶于2mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)[名師點撥]DNA的粗提取與鑒定中的注意事項(1)過濾含DNA的黏稠物時不能用濾紙代替紗布,否則會因DNA被吸附到濾紙上,而導致DNA大量損失。(2)用玻璃棒攪拌時,動作要緩慢且沿同一方向進行,目的是防止DNA被破壞。(3)盛放雞血細胞液的容器最好是塑料器具,因為DNA易被玻璃制品吸附,影響最終的DNA提取量。最后提取DNA用于鑒定時,可用玻璃棒將DNA卷出。(4)二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,否則二苯胺會變成淺藍色,影響鑒定效果。(5)鑒定DNA還可使用甲基綠染液,甲基綠染液可將DNA染成綠色。[題組沖關]3.在DNA的粗提取和鑒定實驗中,以下操作步驟錯誤的是()A.將雞血細胞置于蒸餾水中并用玻璃棒攪拌釋放出DNA等核物質(zhì)B.在DNA析出和再溶解過程中要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動C.在用酒精析出DNA時,要使用冷酒精,甚至再將混合液放入冰箱中冷卻D.鑒定DNA時,需要將甲基綠試劑加入含DNA的溶液中并進行水浴加熱解析:選D將雞血細胞置于蒸餾水中并用玻璃棒攪拌有利于細胞吸水漲破,釋放出DNA等核物質(zhì);在DNA析出和再溶解過程中要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動,防止DNA鏈斷裂;在用酒精析出DNA時,要使用冷酒精,甚至再將混合液放入冰箱中冷卻;鑒定DNA時,需要將二苯胺試劑加入含DNA的溶液中并進行水浴加熱。4.如圖為“DNA的粗提取與鑒定”的實驗裝置,請回答問題:(1)本實驗材料選用雞血細胞液,而不是雞全血,主要原因是雞血細胞液中________含量較高。(2)圖A中加入蒸餾水的目的是______________________________________________。(3)通過圖B所示步驟取得濾液后,再向濾液中加入NaCl,使NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為2mol/L的目的是_____________________________________________________________。(4)圖C所示加入蒸餾水的目的是_____________________________________________。(5)為鑒定實驗所得絲狀物的主要成分是DNA,可用________試劑進行檢測,在沸水浴條件下,可以看到顏色反應為________色。解析:(1)雞血細胞核內(nèi)DNA含量豐富,材料易得;雞全血包括血漿,而雞血細胞液為雞全血除去血漿后剩下的部分,其中DNA含量更高,更易提取。(2)如圖A所示,向雞血細胞液中加入蒸餾水,細胞會因吸水漲破而釋放出核物質(zhì)DNA。(3)如圖B所示,向濾液中加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液后,DNA溶解而蛋白質(zhì)析出。(4)如圖C所示,向DNA濃鹽溶液中加入蒸餾水,使NaCl溶液濃度降低,從而使DNA溶解度降低而析出。(5)在沸水浴條件下,DNA與二苯胺反應呈藍色。答案:(1)DNA(2)使血細胞吸水漲破,釋放出核物質(zhì)DNA(3)使DNA溶解于NaCl溶液中(4)使DNA因溶解度下降而析出(5)二苯胺藍[隨堂基礎鞏固]1.在混合物中提取DNA分子的基本思路是()A.根據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的差異B.根據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的共性C.根據(jù)各種大分子在細胞內(nèi)的功能D.根據(jù)各種大分子的結構和在細胞內(nèi)的位置解析:選A提取生物大分子的基本思路是:選用一定的物理或化學方法分離具有不同物理或化學性質(zhì)的生物大分子。DNA分子的粗提取是利用DNA與蛋白質(zhì)等其他成分在物理和化學性質(zhì)方面的差異進行分離的。2.下列不宜選作DNA粗提取材料的是()A.洋蔥表皮細胞 B.鮮豌豆種子C.人成熟的紅細胞 D.豬肝解析:選C用于DNA粗提取的材料應具備的條件是細胞中要含有DNA,且DNA的含量要豐富,A、B、D三項都符合要求。而人成熟的紅細胞無細胞核,不含DNA,所以不宜選作實驗材料。3.向溶有DNA的物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液中不斷加入蒸餾水,在這個過程中DNA和雜質(zhì)蛋白質(zhì)等的溶解度變化情況分別是()A.減小、減小 B.增大、增大C.先減小后增大、增大 D.減小、增大解析:選CDNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,在物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最?。坏鞍踪|(zhì)的溶解度隨NaCl溶液濃度的降低而逐漸增大。4.下列有關“DNA的粗提取與鑒定”實驗原理的敘述,正確的是()A.DNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl溶液濃度的升高而減小B.利用DNA不溶于酒精的性質(zhì),可除去細胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純的DNAC.DNA是大分子有機物,易溶于水也溶于某些有機溶劑D.在沸水浴中,DNA遇二苯胺會出現(xiàn)紫色反應解析:選B隨NaCl溶液濃度的升高,DNA的溶解度先降低后增大。DNA不溶于酒精等有機溶劑。在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺后呈現(xiàn)藍色。5.在DNA粗提取與鑒定實驗中,若選擇的實驗材料為植物細胞,破碎細胞時要加入一定量的洗滌劑和食鹽。加入洗滌劑和食鹽的目的分別是()①利于DNA的溶解②分離DNA和蛋白質(zhì)③瓦解細胞膜④溶解蛋白質(zhì)A.①③ B.③②C.④① D.③①解析:選D食鹽的主要成分是NaCl,DNA在一定物質(zhì)的量濃度的NaCl溶液中易溶解,加入洗滌劑的目的是瓦解細胞膜。6.在蛋白質(zhì)和DNA的混合液中,要想得到較純的DNA,可采用的方法有()①向混合液中加入足量的蒸餾水②向混合液中加入DNA水解酶③向混合液中加入冷的體積分數(shù)為95%的酒精溶液④向混合液中加入蛋白酶A.①② B.③④C.①③ D.②④解析選BDNA分子在物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,在冷的酒精溶液中可析出,據(jù)此可將DNA和蛋白質(zhì)分離;蛋白酶可將蛋白質(zhì)水解成可溶性的多肽,從而將蛋白質(zhì)與DNA分離。7.如圖為DNA粗提取實驗過程中的一些重要步驟,據(jù)圖回答:(1)正確的操作順序是_____________________________________________________。(2)圖中步驟C、E都加入蒸餾水,但加入的目的不同,分別是_________________和________________。(3)圖中步驟A中所用的酒精必須經(jīng)過________________________________________才能使用,該步驟的目的是______________________________________________。解析:DNA粗提取的過程:雞血細胞漲破后過濾→用2mol/L的NaCl溶液溶解→過濾除去不溶雜質(zhì)析出含DNA的黏稠物→過濾→黏稠物溶解在2mol/L的NaCl溶液中→過濾→95%的酒精中進一步提純。根據(jù)圖示及以上分析,正確的操作順序為C→B→E→D→A。答案:(1)C→B→E→D→A(2)加速血細胞的破裂降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出(3)充分預冷處理提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA[課時跟蹤檢測]一、選擇題1.下列關于DNA的粗提取與鑒定實驗的相關敘述,錯誤的是()A.可以選擇DNA含量較高的生物組織為材料,如雞的血細胞B.DNA不溶于酒精,且在0.14mol/L的氯化鈉溶液中析出C.可以利用嫩肉粉把雜質(zhì)多糖和RNA去除D.洗滌劑可以瓦解細胞膜,從而獲得含有DNA的濾液解析:選C雞血細胞中含有DNA,可作為提取DNA的生物材料,不可選用哺乳動物成熟的紅細胞;DNA不溶于酒精,且NaCl溶液濃度為0.14mol/L時DNA溶解度最小,兩者均可將DNA大量析出;嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,可將蛋白質(zhì)水解,從而除去蛋白質(zhì);洗滌劑可以瓦解細胞膜,從而獲得含有DNA的濾液。2.“DNA的粗提取與鑒定”實驗中,提取雞血細胞的核物質(zhì)和析出含DNA的黏稠物這兩步中都用到了蒸餾水,其作用分別是()A.防止雞血細胞失水皺縮和稀釋NaCl溶液至0.14mol/L使DNA析出B.防止雞血細胞失水皺縮和溶解DNAC.使雞血細胞吸水漲破和稀釋NaCl溶液至0.14mol/L使DNA析出D.使雞血細胞吸水漲破和溶解DNA解析:選C第一次加蒸餾水的目的是使雞血細胞漲破,釋放出核DNA,第二次加蒸餾水的目的是將NaCl溶液濃度降低到0.14mol/L,使DNA析出。3.某同學用洋蔥進行DNA粗提取和鑒定實驗,操作錯誤的是()A.加入洗滌劑后用力進行快速、充分地研磨B.用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNAC.加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌D.加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱解析:選A加入洗滌劑后,攪拌動作要輕緩、柔和,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟的操作;用蛋白酶分解過濾后的研磨液中的蛋白質(zhì),可純化過濾后研磨液中的DNA;加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌的目的是保證DNA分子不斷裂,保持其完整性;加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱才能出現(xiàn)顏色反應。4.若從植物細胞中提取DNA,發(fā)現(xiàn)實驗效果不好,如看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定時顏色反應不明顯等。其可能的原因是()①植物細胞中不含DNA②研磨不充分③過濾不充分④冷酒精的量過大A.①② B.③④C.①④ D.②③解析:選D研磨不充分會使細胞核內(nèi)的DNA釋放不完全,提取的DNA量變少;過濾不充分也會導致提取的DNA量過少;若用于沉淀DNA的酒精量過少,也會導致DNA的沉淀量少,從而影響實驗效果。5.在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中,如果實驗材料是植物細胞,需要進行研磨并攪拌。下列相關說法正確的是()A.在切碎的植物材料中加入一定量的洗滌劑和蒸餾水,充分研磨后過濾獲取濾液B.加入洗滌劑是為了瓦解細胞膜和核膜C.要快速攪拌產(chǎn)生泡沫以加速細胞膜的溶解D.先加入洗滌劑,攪拌和研磨后再加入食鹽解析:選B提取植物材料中的DNA時,需在切碎的組織中加入一定量的洗滌劑和食鹽。加入洗滌劑的目的是瓦解細胞膜和核膜,以利于DNA的釋放,同時要進行充分地攪拌和研磨,使DNA完全釋放。攪拌時應輕緩、柔和,避免產(chǎn)生大量泡沫,以利于后續(xù)操作。6.下表是關于DNA的粗提取與鑒定實驗中所使用的材料、操作及其作用的表述,正確的是()選項試劑操作作用A檸檬酸鈉溶液與雞血混合有利于血液凝固B蒸餾水與雞血細胞混合保持細胞形狀C蒸餾水加入溶解有DNA的NaCl溶液中析出DNA絲狀物D冷卻的酒精加入過濾后的NaCl溶液中產(chǎn)生特定的顏色反應解析:選C在DNA的粗提取與鑒定實驗中,檸檬酸鈉可以防止血液凝固;雞血中加入蒸餾水可以使細胞膜和核膜破裂;DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,在物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,有利于DNA析出;DNA不溶于酒精,而蛋白質(zhì)溶于冷卻的酒精可以獲得較純的DNA,DNA遇二苯胺(沸水浴加熱)呈藍色。7.DNA粗提取與鑒定實驗中有以下過濾:①過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細胞液;②過濾含黏稠物的0.14mol/L的NaCl溶液;③過濾溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液,以上過濾分別為了獲得()A.含核物質(zhì)的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液B.含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA黏稠物、含DNA的濾液C.含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA黏稠物、紗布上的DNAD.含較純的DNA濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液解析:選A用蒸餾水稀釋雞血細胞液,使血細胞的細胞膜、核膜破裂,釋放出核物質(zhì),此時過濾只能得到含DNA和其他物質(zhì)如蛋白質(zhì)的濾液,這種濾液必須經(jīng)過實驗中其他步驟的相繼處理,方能得到較純的DNA。DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最低,呈絲狀黏稠物,經(jīng)過濾留在紗布上。8.下列關于“DNA粗提取與鑒定實驗”的敘述,正確的是()A.洗滌劑能瓦解細胞膜并增大DNA在NaCl溶液中的溶解度B.將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍C.常溫下菜花勻漿中有些酶類會影響DNA的提取D.用玻璃棒緩慢攪拌濾液會導致DNA獲得量減少解析:選C洗滌劑能瓦解細胞膜,但對DNA在NaCl溶液中的溶解度無影響;DNA絲狀物需先溶解在適宜濃度的NaCl溶液中,然后加入二苯胺試劑,混合均勻后沸水浴加熱,待冷卻后觀察到溶液變藍;常溫下菜花勻漿中有些水解酶可能會使DNA水解而影響DNA的提??;用玻璃棒朝一個方向緩慢攪拌可減輕對DNA分子的破壞,有利于DNA分子的提取。9.下列與析出DNA黏稠物有關的敘述,不正確的是()A.操作時緩緩滴加蒸餾水,降低DNA的溶解度B.在操作時,用玻璃棒輕緩攪拌,以保證DNA分子完整C.加蒸餾水可同時降低DNA和蛋白質(zhì)的溶解度,兩者均可析出D.當絲狀黏稠物不再增加時,NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度約等于0.14mol/L解析:選C向含有DNA的溶液中加入蒸餾水后,NaCl溶液的濃度會變小,當NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時,DNA溶解度最小,而此時蛋白質(zhì)溶解在NaCl溶液中。10.在利用雞血進行“DNA的粗提取與鑒定”的實驗中,相關敘述正確的是()A.用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L,濾去析出物B.調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶,可去除部分雜質(zhì)C.將絲狀物溶解在2mol/LNaCl溶液中,加入二苯胺試劑即呈藍色D.用菜花替代雞血作為實驗材料,其實驗操作步驟相同解析:選B用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L后,過濾并收集析出物;利用二苯胺試劑鑒定DNA時,需沸水浴加熱幾分鐘,才呈藍色;用菜花替代雞血作為實驗材料,需加入洗滌劑和食鹽,并對材料進行研磨。調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度改變不同物質(zhì)在其中的溶解度,加入木瓜蛋白酶分解蛋白質(zhì)都可以去除部分雜質(zhì)。二、非選擇題11.如圖是“DNA粗提取與鑒定”相關實驗步驟。請據(jù)圖分析回答:(1)雞血細胞是進行該實驗較好的實驗材料,這是因為________________________。從雞血細胞中釋放出核物質(zhì)的處理方法是_________________________________________。(2)圖A表示釋放核物質(zhì)后進行過濾的過程,過濾后取__________(填“濾液”或“析出物”)進行下一步實驗;圖B表示的相關操作過程中,加入2mol/LNaCl溶液的作用是_________;圖C表示在濾液中加入冷卻的95%的酒精,其目的是____________________。(3)為鑒定實驗所得絲狀物的主要成分是DNA,可滴加________溶液,結果絲狀物被染成綠色。(4)圖D中a試管為對照組,b試管為實驗組。①a試管現(xiàn)象________________________;b試管現(xiàn)象________________。②在沸水中加熱的目的是_____________,同時說明DNA對高溫有較強的________。③a試管在實驗中的作用是________。④b試管中溶液顏色的變化程度主要與________________有關。解析:圖A表示釋放核物質(zhì)后進行過濾的過程,紗布上的過濾物主要是細胞膜、核膜的碎片等雜質(zhì),而DNA主要存在于下面的濾液中,所以過濾后應取濾液進行下一步實驗。DNA不溶于冷酒精,而其他一些物質(zhì)可以溶于冷酒精,從而可進一步提純DNA。甲基綠為比較常用的細胞核染色劑,染色后細胞核中染色體呈綠色,可以用來鑒定DNA。答案:(1)雞血細胞核中DNA含量豐富,材料易得向雞血細胞溶液中加入蒸餾水,并攪拌(2)濾液溶解DNA分子提取雜質(zhì)更少的DNA(或去除脂溶性雜質(zhì))(3)甲基綠(4)①溶液不變藍溶液變藍②加快顏色反應速度耐受性③對照④加入DNA(絲狀物)的多少12.以下是有關DNA粗提取實驗的閱讀材料:A.核酸極不穩(wěn)定,在較為劇烈的化學、物理因素和酶的作用下很容易降解。但檸檬酸鈉溶液對DNA具有保護作用。B.DNA核蛋白在1mol/LNaCl溶液中溶解度很高,但在0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度很低;而RNA核蛋白溶于0.14mol/LNaCl溶液。C.用苯酚處理,可使蛋白質(zhì)變性,且留在苯酚層內(nèi);在DNA溶液中加入2.5倍體積、體積分數(shù)為95%的酒精,可將DNA分離出來。D.DNA在強酸環(huán)境下,水解產(chǎn)生脫氧核糖等小分子物質(zhì),它與二苯胺酸性溶液反應,能生成藍色化合物。E.實驗材料與器械:檸檬酸鈉溶液、石英砂、0.14mol/LNaCl溶液、1mol/LNaCl溶液、蒸餾水、苯酚、95%酒精、二苯胺試劑、濃硫酸、花椰菜、研缽、燒杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉網(wǎng)、酒精燈、吸管、試管等。F.實驗步驟:研磨得勻漿→過濾得濾液→濾液稀釋6倍→離心處理得沉淀物→沉淀物再溶解→加苯酚靜置后去上清液→提取出DNA→DNA鑒定。請根據(jù)以上材料回答下列問題:(1)研磨時,取10g花椰菜,加適量的石英砂、________________________________和____________。(2)將濾液稀釋6倍,其目的是___________________________________________。(3)取沉淀物,置于2mL1mol/LNaCl溶液中,使DNA核蛋白再次溶解,再加2mL苯酚充分振蕩后靜置,待其分層后棄其上層的苯酚。該步驟的目的是除去____________________________________________。(4)將剩余溶液中的DNA提取出來的方法是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)證明提取物確實是DNA分子的方法是___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析:(1)在研磨時加入少許石英砂是為了增大摩擦力,加快研磨的速度。加入1mol/LNaCl溶液是為了溶解DNA核蛋白,而加入檸檬酸鈉溶液是為了保護DNA不被破壞。(2)在0.14m
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