總大腸菌群方法驗證方法證實報告

工程名稱： 生活飲用水 總大腸菌群方法名稱： 微生物指標總大腸菌群多管發(fā)酵法GB/T5750.12-2006驗證單位： 安陽協(xié)力環(huán)境檢測4Ｆ報告編寫人：報告日期： 年月 日一、試驗室根本狀況

注：參與驗證人員需要生疏儀器構造、原理，嫻熟操作儀器，能獨立完成整個分析過程。姓名性別年齡注：參與驗證人員需要生疏儀器構造、原理，嫻熟操作儀器，能獨立完成整個分析過程。姓名性別年齡職務或職稱所學專業(yè)從事相關分析工作年限張鑫男32初級工程師應用化學8關少坤男23化驗員計算機1魏悅女23化驗員社會體育1儀器名稱儀器廠家、規(guī)格型號儀器編號儀器名稱儀器廠家、規(guī)格型號儀器編號性能狀高壓蒸汽滅菌器上海申安醫(yī)療LDZX-50KBSAYXL/YQ-16〔計量/校準狀態(tài)、已校前處理儀器、設備生化培育箱北京東聯(lián)哈爾HPS-200AYXL/YQ-10已校藥品冷藏柜中科美菱YC-395LAYXL/YQ-17已校電子天平賽多利斯SQPAYXL/YQ-11已校器、設備生物顯微鏡寧波永光學N-125AYXL/YQ-06已校注：儀器包括采樣、前處理、分析過程涉及到的全部儀器。名稱廠家、規(guī)格有效期名稱廠家、規(guī)格有效期開標準溶液、考物質無蛋白胨乳糖磷酸氫二鉀瓊脂蒸餾水伊紅水溶液美藍水溶液結晶紫乙醇乙醇草酸銨水溶液碘碘化鉀沙黃二、方法原理及證明內容1適用范圍生活飲用水及其水源水中總大腸菌群的測定2使用儀器設備生化培育箱藥品冷藏箱電子天平生物顯微鏡3乳蛋白胨培育基：稱取乳糖蛋白胨干粉培育基23g1000ml蒸餾水中，家人煮沸至完全溶解，分裝有倒立發(fā)酵管試管中，每管10ml，115℃，20min46g1000ml10mL,115℃,20mi37.5g1000ml水中,加熱煮沸至完全溶解,121℃,15min8.5g1000ml,12℃，15min革蘭氏染色液4方法步驟及條件驗證用菌株及菌種要求50驗證樣品制備18~240.851mL100-1000cfu10mL90mL10~100cuf。試驗操作1mL1mL,9mL1:1010mL10mL1mL10mL1mL1:105151mL比照管,36℃±124±2h試驗結果推斷依據(jù)乳糖蛋白胨培育管未產氣產酸,判該管未檢出總大腸菌群;假設產酸產氣,應取發(fā)酵管中的培育物一環(huán)分別接種于伊紅美藍瓊脂平板上,培育18-24h染色、鏡檢和證明試驗。紫黑色、不帶或略帶金屬光澤的菌落:淡紫紅色中心較深的菌落。經上述染色鏡檢為革蘭氏陰性無芽孢桿菌,同時接種乳糖蛋白胨培育36℃±124±2h,有產酸產氣者,即報告總大腸菌群陽性?？偞竽c菌群最可能數(shù)的報告MPN100ml菌群的MPN樣品編號樣品編號樣品名稱初發(fā)酵復發(fā)酵鏡檢EMB平板分別結果MPN/100mlA1加菌液的461010.11010.11010.11010.1+++++++++++++--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--樣品樣品編號樣品名稱結果MPN/100ml空白A2空白比照<2初發(fā)酵復發(fā)酵鏡檢EMB平板分別1010.11010.11010.11010.1------------------------------------------------------------樣品編號樣品編號樣品名稱結果MPN/100ml空白A1空白比照<2樣品編號樣品名稱結果MPN/100mlA2加菌樣品編號樣品名稱結果MPN/100mlA2加菌液的110初發(fā)酵復發(fā)酵鏡檢EMB平板分別1010.11010.11010.11010.1+++++++++++++--+--+--+--+--+--+--+--++-++-++-++-++-++-++-++-初發(fā)酵復發(fā)酵鏡檢EMB平板分別1010.11010.11010.11010.1------------------------------------------------------------樣品樣品編號樣品名稱初發(fā)酵復發(fā)酵鏡檢EMB平板分別結果MPN/100ml加菌加菌A3液的941010.11010.11010.11010.1+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--++++++++++++++++++++++++初發(fā)酵復發(fā)酵鏡檢EMB平板分別1010.11010.11010.11010.1------------------------------------------------------------樣品編號樣品編號樣品名稱結果MPN/100ml空白A3空白比照<2綜上所述，依據(jù)本方法驗證明驗，可得出以下結論：本試驗室的證明試驗符合生活飲用水標