轉(zhuǎn)基因水稻的可持續(xù)發(fā)展

轉(zhuǎn)基因水稻的可持續(xù)發(fā)展

水稻是世界上100多個國家種植的主要食品。亞洲的水稻產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的92%,其中我國是世界水稻產(chǎn)量最高的國家,占世界總產(chǎn)量的31%。水稻是我國的主要糧食作物,占我國糧食總產(chǎn)的40%。但是,水稻本身還存在許多問題,一方面水稻容易受到病蟲害的危害,另一方面水稻的營養(yǎng)品質(zhì)有待提高。生物技術(shù)在農(nóng)業(yè)中的廣泛應(yīng)用為水稻的抗逆、增產(chǎn)、改善營養(yǎng)品質(zhì)提供了更快捷更有效手段。從上個世紀(jì)90年代開始,國內(nèi)外的科學(xué)家已經(jīng)成功培育出一系列的抗蟲、抗病轉(zhuǎn)基因水稻品種以及各種改善營養(yǎng)品質(zhì)的轉(zhuǎn)基因水稻品種。但是,由于目前的安全性評價體系還不完善,人們對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的環(huán)境和食用安全性存在疑慮,還沒有國家允許轉(zhuǎn)基因水稻的商業(yè)化種植。2005年4月,“綠色和平”組織的一份轉(zhuǎn)基因水稻的報告掀起了軒然大波:雖然我國政府尚未批準(zhǔn)任何一個轉(zhuǎn)基因水稻的商業(yè)化生產(chǎn),但該組織卻在湖北發(fā)現(xiàn)了非法銷售和種植的轉(zhuǎn)基因水稻,由此生產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因大米已進入市場。到目前為止,學(xué)術(shù)界對轉(zhuǎn)基因食品的安全性還沒有定論,對轉(zhuǎn)基因食品的安全性評價工作還在探索中。但是,這次事件使我們意識到,基于目前國內(nèi)轉(zhuǎn)基因食品的監(jiān)管制度不完善,轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品在未經(jīng)允許的情況下便悄然流入市場,我們必須加緊對轉(zhuǎn)基因食品的安全性評價工作,建立可接受的安全性評價體系,一方面為已經(jīng)發(fā)展成熟的轉(zhuǎn)基因水稻等產(chǎn)品進行商業(yè)化生產(chǎn)提供依據(jù),促進轉(zhuǎn)基因市場的規(guī)范化;另一方面,要對已經(jīng)流入市場的品種提供安全與否的依據(jù),以決定采取何種措施。目前開展的轉(zhuǎn)基因大米的食用安全性評價工作主要是從全食品水平與表達蛋白水平進行的,評價的主要方面是實質(zhì)等同性分析、營養(yǎng)與毒理學(xué)評價的動物喂養(yǎng)試驗、急性毒理學(xué)評價、致畸性評價、免疫毒理學(xué)評價、致敏性評價和外源基因與蛋白的安全性評價等幾個方面來進行的。以下將從這幾個方面分別進行總結(jié)。1水稻品種的質(zhì)量要求根據(jù)世界衛(wèi)生組織(FAO),世界糧農(nóng)組織(WHO)及經(jīng)濟合作發(fā)展組織(OECD)提出的實質(zhì)等同性概念,主要是將轉(zhuǎn)基因作物及來源的食品與非轉(zhuǎn)基因同源對照物在表型、農(nóng)藝性狀、組成成分等方面進行詳細(xì)的比較,從而得出轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因同源對照物是否具有實質(zhì)等同性的結(jié)論。這項工作被認(rèn)為是轉(zhuǎn)基因作物安全性評價的重要的起始點,但并非是安全性評價的全部。由于不同的農(nóng)作物的主要成分及抗?fàn)I養(yǎng)因子不同,對于需要檢測比較的成分無法作出統(tǒng)一規(guī)定。因此OECD于2001年至2004年制定了針對各種農(nóng)作物的需要檢測比較的成分,其中,對轉(zhuǎn)基因水稻的成分分析就有詳細(xì)的規(guī)定,包括不同部位、不同加工程度的產(chǎn)品需檢測的營養(yǎng)成分,主要的抗?fàn)I養(yǎng)因子等,并且提供了歷史參考數(shù)據(jù)。進行實質(zhì)等同性分析的關(guān)鍵之一是選取與轉(zhuǎn)基因品種具有可比性的對照品種。目前的轉(zhuǎn)基因水稻產(chǎn)品主要改變的特性是提高其抗病蟲害性質(zhì),而對其營養(yǎng)成分的改變不大,屬于實質(zhì)等同性分析中的第二種情況,即除了轉(zhuǎn)入成分不同外,其他成分與非轉(zhuǎn)基因親本相似?？梢赃x取同品系的、具有長期食用歷史的傳統(tǒng)水稻品種,或是其親本進行實質(zhì)等同性分析。李英華等,卓勤,Han等,Wang等以及Li等都對轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻中主要的營養(yǎng)成分(蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、纖維、灰分、各類脂肪酸、維生素和礦物質(zhì)等)與非轉(zhuǎn)基因親本進行了實質(zhì)等同性分析。分析的結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)基因大米中的各類主要營養(yǎng)因子與非轉(zhuǎn)基因親本中的含量基本一致。但是這些分析采用的都是單季節(jié)單地點的數(shù)據(jù),并且缺少水稻中抗?fàn)I養(yǎng)因子的分析。根據(jù)歐盟的有關(guān)規(guī)定,要求進行實質(zhì)等同性分析的數(shù)據(jù)不得低于兩個種植季,并且每次選取的地點不得少于六個。這樣做的目的是為了減少由于氣候與環(huán)境的差異造成的統(tǒng)計分析的誤差。Oberdoerfer等據(jù)此對轉(zhuǎn)bar基因的抗除草劑水稻與其親本進行了細(xì)致的營養(yǎng)成分等同性分析。他們選取了不同季節(jié)不同地點種植的轉(zhuǎn)基因水稻以及在相同環(huán)境下種植的非轉(zhuǎn)基因水稻進行了比較。并且對水稻不同加工產(chǎn)品如整個谷粒、糙米、精米、米粉、米麩及麩油等進行了分別比較,這種完整的全方面的營養(yǎng)成分分析既消除了由于不同年份與土壤環(huán)境造成的影響,也兼顧了水稻的不同加工方式及各個部位成分含量的不同的影響。同時他們還進行了各種抗?fàn)I養(yǎng)因子的比較分析(植酸,胰蛋白酶抑制劑及血液凝集素)。分析的結(jié)果認(rèn)為,轉(zhuǎn)bar基因水稻與其親本水稻在主要營養(yǎng)成分上(碳水化合物、蛋白、鐵、鈣、VB1、VB2、煙酸)具有實質(zhì)等同性。此外,大部分的營養(yǎng)成分含量都在報道的商業(yè)化產(chǎn)品的范圍內(nèi)。隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展,單純提高農(nóng)作物的抗逆性質(zhì)已不能滿足市場需求,通過引入外源基因改善農(nóng)作物的營養(yǎng)品質(zhì)的轉(zhuǎn)基因作物,即第二代轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品,正在成為研發(fā)的主流。例如降低致敏蛋白含量的低致敏大米,提高β-胡蘿卜素含量的“黃金水稻”,以及提高必需氨基酸含量的高蛋白的水稻等。對于這一類產(chǎn)品的營養(yǎng)品質(zhì)分析就不能用簡單的營養(yǎng)等同來評價其是否安全。例如,Momma等對轉(zhuǎn)入大豆球蛋白的轉(zhuǎn)基因水稻進行營養(yǎng)成分分析時,就發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因水稻的蛋白含量比非轉(zhuǎn)基因親本高出20%,并且相應(yīng)的一些氨基酸含量也有所提高。這種情況下,蛋白與氨基酸含量升高就是期望的目的性狀,并非不安全的表現(xiàn)。對于這一類產(chǎn)品的安全評價必須結(jié)合進一步的營養(yǎng)學(xué)、毒理學(xué)及免疫學(xué)研究。2動物飼養(yǎng)及營養(yǎng)品質(zhì)對冷卻壓的影響營養(yǎng)學(xué)評價是對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的重要評價方法之一。通過轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品飼喂動物,檢測實驗動物的血液學(xué)及臟器重等營養(yǎng)學(xué)指標(biāo),并與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ战M進行比較,從而評價轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品在營養(yǎng)方面的變化,為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品進一步應(yīng)用于人類食品提供參考。對轉(zhuǎn)基因大米的營養(yǎng)學(xué)評價是建立在營養(yǎng)成分分析的基礎(chǔ)上的,主要手段是將轉(zhuǎn)基因大米磨成粉,摻到動物飼料中,對動物進行短期的喂養(yǎng),觀察其營養(yǎng)狀態(tài)指標(biāo),并與非轉(zhuǎn)基因水稻飼養(yǎng)組及基礎(chǔ)飼料飼養(yǎng)組進行比較,分析轉(zhuǎn)基因水稻對實驗動物營養(yǎng)狀況的影響。也有給動物飼喂正常飼料,將轉(zhuǎn)基因與非轉(zhuǎn)基因大米磨成粉混合灌胃給動物的方式。在實驗動物的選擇上,主要有大鼠(spraguedawley或者Wister大鼠)、小型豬、豬、雞等。王茵等用抗除草劑轉(zhuǎn)bar基因水稻按照三個劑量組飼喂大鼠30d,結(jié)果表明各劑量組大鼠生長發(fā)育、體重、食物利用率、血常規(guī)、臟體比及病理組織學(xué)觀察等指標(biāo)與陰性對照組差異不顯著。無作用劑量為64g/kgbw。李英華等在對Xa21轉(zhuǎn)基因水稻進行了實質(zhì)等同性分析后,根據(jù)美國制定的滿足嚙齒類動物生長發(fā)育營養(yǎng)需求的AIN93G飼料配方及轉(zhuǎn)基因水稻和傳統(tǒng)水稻的營養(yǎng)成分(主要是蛋白質(zhì)含量)設(shè)計出滿足大鼠營養(yǎng)需求的水稻粉的最大添加量。在對72只雌雄各半的Wistar大鼠進行了為期28d的喂養(yǎng)后,對其進食量、體重身長、蛋白質(zhì)功效比、血常規(guī)、血生化、臟體比和骨密度等營養(yǎng)指標(biāo)進行了檢測和比較,認(rèn)為轉(zhuǎn)基因大米對大鼠沒有明顯的毒副作用。陳小萍等對轉(zhuǎn)豇豆胰蛋白酶抑制劑(CpTI)大米進行了同樣的營養(yǎng)學(xué)評價實驗,結(jié)果認(rèn)為這種轉(zhuǎn)基因大米中轉(zhuǎn)入的胰蛋白酶抑制劑沒有干擾其他營養(yǎng)素的吸收,在營養(yǎng)學(xué)角度上是安全的。趙志輝等將轉(zhuǎn)codA基因的耐鹽堿水稻及其親本按照30%的比例摻入大鼠飼料中,喂養(yǎng)30d后,檢測大鼠體重增重,以及血液中的各項激素指標(biāo),結(jié)果表明沒有顯著性差異。而對于改善營養(yǎng)品質(zhì)的轉(zhuǎn)基因品種來說,通過動物喂養(yǎng)試驗來觀察改變的營養(yǎng)特性可能造成的影響也是必不可少的。Momma等將轉(zhuǎn)入了大豆球蛋白的高蛋白大米加水磨成粉(25%,W/V)后,按照10g/kg體重的劑量灌胃SD大鼠,以非轉(zhuǎn)基因親本大米作為對照。三周后,兩組大鼠的體重、食物利用率,血液學(xué)指標(biāo)和臟器重等營養(yǎng)學(xué)指標(biāo)無明顯差異。腎臟與肝臟的組織病理學(xué)檢查也未發(fā)現(xiàn)異常。只是灌胃了轉(zhuǎn)基因高蛋白的大米的大鼠的攝食量稍有下降,經(jīng)分析認(rèn)為可能正是由于大米中蛋白含量高引起的,因此可認(rèn)為是預(yù)期效應(yīng)。楊月欣等和韓軍花等在對轉(zhuǎn)豇豆胰蛋白酶抑制劑(SCK)大米進行食用安全性評價時,采用了中國實驗用小型豬作為實驗對象。在用轉(zhuǎn)SCK大米和親本大米對斷乳小型豬進行了62d的短期喂養(yǎng)后,觀察動物的進食量、體格發(fā)育和臟器發(fā)育、血常規(guī)、血生化、骨骼發(fā)育和組織病理等營養(yǎng)狀況,結(jié)論認(rèn)為轉(zhuǎn)SCK大米對小型豬的生長發(fā)育沒有可觀察到的非預(yù)期的不良結(jié)果。此外,他們還進行了豬回腸蛋白質(zhì)及氨基酸消化率的比較研究。在對實驗豬進行外科手術(shù)放置T型瘺管后,分別飼喂轉(zhuǎn)SCK基因大米和親本大米,收集動物回腸末端消化產(chǎn)物,計算并分析了兩種大米的蛋白質(zhì)和氨基酸的消化率。結(jié)果顯示,除了轉(zhuǎn)基因大米組的賴氨酸消化率與親本大米組有差異外,其余的氨基酸及蛋白質(zhì)的消化率均相似,認(rèn)為基本滿足實質(zhì)等同性的要求。Schat等用含有30%的轉(zhuǎn)基因抗除草劑水稻喂雞42d,其生長率、采食量、谷物利用率、屠宰率等指標(biāo)與傳統(tǒng)水稻基本等同。在以上進行的實驗中有一個重要的問題被忽視了,那就是人類食用轉(zhuǎn)基因大米時是經(jīng)過蒸煮或發(fā)酵處理的,而不是生食。這也是“實質(zhì)等同性”原則中考慮的一個重要的方面。因為加工方法的不同而造成的食用結(jié)果不同也是有例可循的。如王忠華等在用轉(zhuǎn)Bt抗蟲水稻稻米喂養(yǎng)家蠶時就發(fā)現(xiàn)生米粉與熟米粉的結(jié)果截然不同。用生米粉喂養(yǎng)時,家蠶的體重、熟蠶數(shù)、結(jié)繭數(shù)、全繭量和繭層量均明顯低于對照,病理切片電鏡分析也表明食用了生的轉(zhuǎn)基因米粉的家蠶的腸細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯的變化;而食用了熟的轉(zhuǎn)基因米粉的家蠶則與對照組沒有明顯的差異。這是由于蒸煮后轉(zhuǎn)基因水稻中的Bt殺蟲蛋白變性失活所致。由此可見,在進行轉(zhuǎn)基因大米的食用安全性分析時,其加工過程導(dǎo)致外源蛋白的變化也是不可忽視的影響。3中毒的評估3.1對大鼠90d飼養(yǎng)試驗的影響對轉(zhuǎn)基因作物進行90d動物喂養(yǎng)的亞慢性毒理學(xué)試驗,是FAO/WHO對轉(zhuǎn)基因作物進行食用安全性評價的推薦方法,而在我國農(nóng)業(yè)部頒布的《轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品食用安全檢測》標(biāo)準(zhǔn)中,大鼠90d喂養(yǎng)試驗已經(jīng)作為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品食用安全性評價工作必不可少的一部分。實際上,30d的動物喂養(yǎng)與90d的動物喂養(yǎng)只是時間長短上的不同,在各項檢測指標(biāo)及反映的營養(yǎng)學(xué)與毒理學(xué)狀態(tài)上,二者的作用是相似的。因此,動物喂養(yǎng)試驗的結(jié)果反映的是營養(yǎng)學(xué)和毒理學(xué)雙項指標(biāo)。目前已經(jīng)有Wang等、王忠華等對轉(zhuǎn)Bt水稻、李英華對轉(zhuǎn)Xa21水稻和卓勤對轉(zhuǎn)CpTI水稻進行了大鼠90d喂養(yǎng)試驗,并通過定期紀(jì)錄動物的進食量、體重,測量中期和末期的血常規(guī)和血生化,最后測量臟體比和骨密度等方式對轉(zhuǎn)基因大米和對照大米對大鼠的影響進行了比較。大部分生理指標(biāo)間沒有顯著性差異,Wang等發(fā)現(xiàn)少數(shù)雌性的血液學(xué)指標(biāo)存在差異,但是所有指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)。因此得出轉(zhuǎn)基因水稻與親本水稻在營養(yǎng)學(xué)與毒理學(xué)方面基本相似。此外,Crommwell等還對拜爾公司的LibertyLink抗除草劑轉(zhuǎn)基因水稻進行了為期98d的豬的喂養(yǎng)試驗。他們按照豬生長發(fā)育不同階段對營養(yǎng)的需求,將四種水稻(一種傳統(tǒng)商業(yè)化水稻、非轉(zhuǎn)基因水稻、轉(zhuǎn)基因水稻噴施除草劑和轉(zhuǎn)基因水稻不噴施除草劑)添加到生長期與育肥期的豬飼料中,通過檢測豬體重增重、食物利用率以及屠宰指標(biāo)等檢驗轉(zhuǎn)基因水稻對豬的生長發(fā)育的影響。結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因水稻與傳統(tǒng)水稻在成分和營養(yǎng)價值上具有相似作用。但是之前的實驗在劑量組的設(shè)置和最大劑量的選擇上存在分歧。根據(jù)農(nóng)業(yè)部最新規(guī)定,大鼠的90d喂養(yǎng)試驗需要設(shè)置三個劑量組,并且最高劑量組是不影響膳食平衡的最大添加量。因此,以后的亞慢性毒理學(xué)試驗設(shè)計將有章可循。3.2水稻致畸性研究人們對轉(zhuǎn)基因食品的主要的擔(dān)心就是長期作用,即這些食品會不會在短期內(nèi)觀察不到明顯的影響而會對子孫后代造成不良的影響。目前還沒有可靠的方法能夠證實轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的長期影響,而毒理學(xué)評價中的致畸性試驗則有一定的借鑒意義。李英華等和卓勤等分別對轉(zhuǎn)Xa21和轉(zhuǎn)CpTI水稻進行了老鼠傳代致畸性研究。他們分別用轉(zhuǎn)基因大米、非轉(zhuǎn)基因大米和AIN93飼料喂養(yǎng)親代大鼠,90d后雌雄合籠,觀察母鼠和胎鼠的生長發(fā)育情況。并以敵枯雙注射組作為陽性對照組。結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)基因大米組與非轉(zhuǎn)基因大米組相比,大鼠受孕率、胚胎生長情況均無顯著性差異。按照傳統(tǒng)毒理學(xué)致畸性評價應(yīng)該傳代兩代以上。因為一代之內(nèi)有些基因的改變還不明顯,而增多傳代次數(shù)往往可以使一些隱性的改變顯現(xiàn)出來。此外,王忠華等、王茵等和薛大偉等采用了微核、精子畸變和組氨酸營養(yǎng)缺陷型鼠傷寒沙門氏菌株回變菌落數(shù)(Ames)等細(xì)胞水平的試驗分別對轉(zhuǎn)Bt水稻和轉(zhuǎn)Bar基因水稻進行了致畸性試驗研究。沒有發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因水稻的非期望效應(yīng)。3.3急性毒性研究王忠華等對轉(zhuǎn)Bt水稻進行了急性毒理學(xué)評價。將40只健康的雌雄各半的大鼠分為20g/kg體重劑量組和陰性對照組(1%羧甲基纖維素),大鼠經(jīng)4次灌胃,每次間隔2h,觀察7d。大鼠未出現(xiàn)死亡狀況,因此認(rèn)為LD50大于20g/kg體重,屬無毒類。王茵等也對轉(zhuǎn)Bar基因水稻進行了急性毒理學(xué)研究,將水稻碾成粉后80℃經(jīng)2h烘熟,再按照霍恩氏法進行急性毒性試驗,結(jié)果LD50>21.5g/kgbw,按照急性毒性分級屬無毒級。薛大偉等也以羧甲基纖維素為陰性對照與輔助試劑對轉(zhuǎn)基因水稻進行了30g/kgbw的急性毒性試驗。兩組動物均未見異常狀況,組織病理學(xué)檢查也沒有明顯的癥狀。由此可以推斷,轉(zhuǎn)基因稻米的LD50大于20g/kgbw,屬于無毒類。但是,在進行化學(xué)物質(zhì)的急性毒性分析時采用的是純物質(zhì)進行評價,而轉(zhuǎn)基因水稻中的目的蛋白(外源蛋白)表達量一般都比較低,如Bt蛋白通常表達量小于1%。而前面的化學(xué)成分分析顯示轉(zhuǎn)基因水稻與非轉(zhuǎn)基因親本的營養(yǎng)成份基本相似。在此情況下進行的急性毒性評價意義不大。關(guān)鍵是要對轉(zhuǎn)入的外源蛋白進行毒理學(xué)評價。但是,外源蛋白通常不易獲得。3.4小鼠免疫三因素三和三大基因型指標(biāo)的比較,見表1李英華等用轉(zhuǎn)CpTI大米和親本大米喂養(yǎng)BLAB/c小鼠30d,然后比較各組小鼠的各項免疫毒理指標(biāo):體重、臟器比、血常規(guī)、淋巴細(xì)胞的分類及功能,抗體生成細(xì)胞的檢測和IgG含量,巨噬細(xì)胞吞噬能力及NK細(xì)胞活性等,各方面均無顯著性差異。4篩選、致敏性試驗和黨組織抑制劑大米雖然被認(rèn)為是低致敏性食品,并且是唯一可以免于過敏性試驗的谷物。但是仍有對大米過敏的人存在,這個問題在日本比較顯著。Matsuda檢測了大米中的各種蛋白組分,發(fā)現(xiàn)鹽溶蛋白即清蛋白中的分子量16kD左右的三種蛋白是主要的過敏源。因此,在進行非期望效應(yīng)的分析時不但應(yīng)該從蛋白質(zhì)的總體含量上比較,也要重視各種蛋白組分的變化,尤其是具有潛在致敏性的清蛋白的變化。目前的轉(zhuǎn)基因水稻食用安全性評價中還沒有對此問題給與足夠的重視。而在動物致敏模型研究中,賈旭東等利用BN大鼠動物模型,向飼料中添加轉(zhuǎn)基因大米,測定大鼠血壓,并檢測血清中IgG、IgE抗體的含量來判定大鼠是否對轉(zhuǎn)基因大米過敏。這種方法的不足之處是有效致敏成分含量太低,缺乏針對性。隨后,呂相征用轉(zhuǎn)Xa21基因大米的粗提蛋白灌喂BN大鼠,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因大米與非轉(zhuǎn)基因大米組檢測到的特異的IgE抗體的動物例數(shù)沒有統(tǒng)計學(xué)差異。皮膚過敏實驗表明,轉(zhuǎn)基因大米組和非轉(zhuǎn)基因大米組特異IgE抗體滴度相同。這種方法比直接飼喂大鼠的外源蛋白攝入量要高,但是仍然不是最理想的實驗方法。最有效的方式是直接對外源蛋白進行評價。由于作物中表達的外源蛋白含量很低,不易提取,現(xiàn)在主要是通過大腸桿菌和酵母等表達載體大量表達外源蛋白,進而對蛋白進行體外模擬消化、動物致敏性試驗等研究。李英華根據(jù)FAO/WHO2001年制定的致敏樹對原核表達的轉(zhuǎn)基因大米中的外源蛋白CpTI與標(biāo)記蛋白HPT進行了全面的致敏性評價。主要是氨基酸序列比對,過敏患者血清篩選試驗,以及模擬胃液消化試驗。通過以上逐步的檢驗,未發(fā)現(xiàn)這兩種蛋白具有潛在的致敏的可能。Lu等對HPT蛋白進行了進一步的致敏性評價,他們將原核表達的HPT蛋白用模擬胃腸液進行了體外模擬消化,并用HPT蛋白對BN大鼠進行了42d的致敏性試驗。體外模擬消化試驗表明,HPT蛋白在模擬胃液中40s內(nèi)被完全消化,而動物致敏性試驗表明,HPT蛋白沒有引起B(yǎng)N大鼠的組胺及IgG、IgE抗體水平升高。這是目前為止,對轉(zhuǎn)基因大米進行的最為系統(tǒng)的食用安全性評價研究。對于轉(zhuǎn)基因水稻的食用安全性評價體系的建立具有積極的促進作用。5潮霉素基因在水稻不同組織部位的表達分析外源導(dǎo)入基因的轉(zhuǎn)移問題一向是對轉(zhuǎn)基因安全性的擔(dān)憂的關(guān)鍵問題。消費者擔(dān)心轉(zhuǎn)基因食品中的抗生素標(biāo)記基因會轉(zhuǎn)移給消化道中的微生物,從而使微生物具有抗生素抗性,而使現(xiàn)有的治療藥物失效。針對這個問題,研究者們分別對抗生素抗性基因在加工產(chǎn)品中和在動物腸道中的降解情況進行了研究。沈立明等對含有潮霉素基因的轉(zhuǎn)基因大米的不同加工產(chǎn)品(米飯,粥,爆米花,鍋巴)進行了潮霉素基因的PCR檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn),加工方式對潮霉素基因降解影響顯著,加工后產(chǎn)品中,hpt基因以較大或完整片斷向食品或消化道微生物中轉(zhuǎn)移的可能性減小。徐海濱等就曾經(jīng)對轉(zhuǎn)基因水稻中的潮霉素標(biāo)記基因在大鼠體內(nèi)的代謝進行過研究,通過提取大鼠腸胃內(nèi)容物的基因片斷并進行PCR擴增,結(jié)果證明抗性基因與大多數(shù)基因一樣都可以被正常消化代謝。趙志輝等在用轉(zhuǎn)codA基因水稻飼喂大鼠30d后,對大鼠血液、肌肉、肝臟、胰臟、腎臟、胃及腸道內(nèi)容物進行PCR檢測,分析水稻內(nèi)源基因SPS與外源基因codA的特異性片段在大鼠體內(nèi)的轉(zhuǎn)移情況。結(jié)果表明,大鼠血液及各組織器官中沒有發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因水稻的內(nèi)源和外源基因片段。而在大鼠胃、腸道內(nèi)容物中發(fā)現(xiàn)了還沒來得及消化的水稻內(nèi)、外源基因片段。說明,短期的食用轉(zhuǎn)基因水稻,外源基因不會發(fā)生水平轉(zhuǎn)移。雖然如此,人們?nèi)匀粚股乜剐曰虻乃睫D(zhuǎn)移問題持慎重態(tài)度,不排除極少數(shù)的發(fā)生幾率,這畢竟