氨芐西林與紅霉素聯(lián)用的體外抑菌實驗研究

氨芐西林與紅霉素聯(lián)用的體外抑菌實驗研究【摘要】目的：研究繁殖期殺菌劑和抑菌劑聯(lián)用的可能性，降低細菌內(nèi)毒素的釋放量，改善臨床感染癥狀。方法:采用微生物井式擴散法，在無菌條件下，用藤黃八疊球菌作菌懸液，氨芐西林、紅霉素標準品為模型藥物，測定兩者合用后的抑菌圈。結(jié)果:兩種抗生素聯(lián)用后的抑菌圈與氨芐西林單用的抑菌圈相當。結(jié)論:抑菌劑與繁殖期殺菌劑聯(lián)用并不降低繁殖期殺菌劑的殺菌效能，聯(lián)用時應(yīng)以同時合用或殺菌劑后使用抑菌劑為宜。

【關(guān)鍵詞】氨芐西林，紅霉素，抑菌圈，藤黃八疊球菌

繁殖期殺菌劑在殺滅細菌的同時會引起內(nèi)毒素大量釋放，導致臨床癥狀加?。?］。繁殖期殺菌劑和抑菌劑聯(lián)用歷來被認為是抗生素的不合理用藥［2］，原因是抑菌劑抑制細菌的生長無法使繁殖期殺菌劑起到殺菌作用，從而使聯(lián)用失去意義。繁殖期殺菌劑主要是β內(nèi)酰胺類抗生素，包括青霉素類和頭孢菌素類，發(fā)揮抗菌作用時與細胞外膜上的青霉素結(jié)合蛋白結(jié)合，細胞壁合成受阻，最后細菌破裂死亡。抑菌劑主要是大環(huán)內(nèi)酯類，其抗菌機制是抑制細菌蛋白質(zhì)合成致細菌死亡。到目前為止，尚未見有實驗研究證明繁殖期殺菌劑和抑菌劑聯(lián)用不合理。

1材料

氨芐西林標準品，紅霉素標準品，10μL微量進樣器，隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱，藤黃八疊球菌。

2方法

Ⅱ號培養(yǎng)基及滅菌緩沖液的制備［3］

菌懸液的制備［4］

取已分離出的單個菌落接種于試管斜面上，在30℃恒溫箱培養(yǎng)24h。取上述菌種，分別接種于2個扁瓶斜面上，置30℃恒溫箱培養(yǎng)，一斜面培養(yǎng)24h，搖勻后趁熱吸取18mL注入水平臺上的玻璃培養(yǎng)皿中，待冷凝后用角膜環(huán)鉆在同一圓周上打若干個孔,孔距適當,倒置備用。

標準溶液的制備

精密稱取標準品適量，用滅菌水溶解制備貯備液。

實驗方法［5］

無菌條件下在菌碟孔中分別點樣，點樣量為10μL，平行實驗菌碟為6個，置恒溫箱中培養(yǎng)16～18h后取出，用游標卡尺測量抑菌圈直徑。

氨芐西林與紅霉素聯(lián)用對生長期相同細菌的影響依“”、“”制備兩種細菌懸液和菌碟，每碟打四個孔，分別注入10μL滅菌水、2μg/mL紅霉素、μg/mL氨芐西林及混合液，依“”法試驗。

不同濃度紅霉素對氨芐西林殺菌效果的影響依“”、“”制備兩種細菌懸液和菌碟，每碟打六個孔，適當稀釋使含氨芐西林均為μg/mL，紅霉素分別、、、μg/mL，依“”法試驗。

氨芐西林與紅霉素聯(lián)用方式對氨芐西林殺菌效果的影響依“”、“”制備兩種細菌懸液和菌碟，每碟打六個孔，從1～6依次編號，分別注入10μL滅菌水、2μg/mL紅霉素、μg/mL氨芐西林、混合液、μg/mL氨芐西林、2μg/mL紅霉素，置恒溫箱中培養(yǎng)6h后，在5、6號孔中分別再注入10μL2μg/mL紅霉素、μg/mL氨芐西林后，繼續(xù)培養(yǎng)至16～18h后取出，用游標卡尺測量抑菌圈直徑。

氨芐西林與紅霉素聯(lián)用對放置不同時間細菌懸液的影響將細菌懸液分別在4℃冰箱中放置0d、3d、7d后，分別依“”法試驗。

3結(jié)果

氨芐西林與紅霉素聯(lián)用對生長期相同細菌的影響

結(jié)果見表1。由表1可知繁殖期殺菌劑氨芐西林與生長期抑菌劑紅霉素混合溶液的抑菌圈與氨芐西林單獨使用時的抑菌圈比較差異無統(tǒng)計學意義，兩者聯(lián)用不論在細菌生長期是否一致都與單獨使用的殺菌效力相當。表1氨芐西林與紅霉素單用、聯(lián)用后的抑菌圈直徑

不同濃度紅霉素對氨芐西林殺菌效果的影響

結(jié)果見表2。由表2可知，合用不同濃度的紅霉素對氨芐西林的殺菌效果影響不同，濃度小于1μg/mL時，抑菌圈略大，濃度大于1μg/mL時，抑菌圈相近，但差異均無統(tǒng)計學意義。表2不同濃度紅霉素與氨芐西林聯(lián)用的抑菌圈直徑

氨芐西林與紅霉素聯(lián)用方式對氨芐西林殺菌效果的影響

結(jié)果見表3。由表3可知，紅霉素與氨芐西林的合用方式不同，效果也不同。同時合用或先用氨芐西林后用紅霉素效果相近，差異無統(tǒng)計學意義。表3氨芐西林與紅霉素不同聯(lián)用方式的抑藥圈直徑注：*表示與μg/mL氨芐西林組比較差異有統(tǒng)計學意義

氨芐西林與紅霉素聯(lián)用對放置不同時間細菌懸液的影響

由表4可知，細菌懸液放置7d對實驗結(jié)果幾無影響且細菌生長期相同與否對實驗結(jié)果也無影響，但7d時t值小于3d時t值，故細菌懸液放置時間不宜超過3d。表4氨芐西林與紅霉素放置不同時間的抑菌圈直徑注：*表示與μg/mL氨芐西林組比較差異有統(tǒng)計學意義

4討論

以往認為，繁殖期殺菌劑和生長期抑菌劑不能聯(lián)用，但本文體外實驗研究結(jié)果與傳統(tǒng)理論的結(jié)論相反，其作用機制及臨床驗證有待進一步研究。臨床感染的情況復雜，細菌往往不處在同一生長狀態(tài)，繁殖期殺菌劑可以殺滅繁殖期的細菌，抑菌劑可以抑制生長期細菌的繁殖，并且聯(lián)合應(yīng)用可降低細菌內(nèi)毒素的釋放量，改善臨床癥狀，從而達到良好的治療目的。考慮到聯(lián)用方式對殺菌效果有影響，一旦聯(lián)用應(yīng)以同時合用或先使用殺菌劑后使用抑菌劑為宜。

【參考文獻】

［1］徐能武,袁建成,肖光夏,等.β內(nèi)酰胺類抗生素誘導革蘭氏陰性菌釋放內(nèi)毒素對其療效的影響［J］.中國抗生素雜志,2000,25(2):112116.

［2］李端.藥理學［M］.第4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1999:299300.

［3］中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)［S］.2000版.北京:化學工業(yè)出版社,2000:附錄ⅪP8286.

［