2024屆 一輪復(fù)習(xí) 人教版 微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用 課件 （87張）（單選版）

第十單元生物技術(shù)與工程第36課微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用?學(xué)業(yè)質(zhì)量水平要求?1．通過分析培養(yǎng)基各成分在微生物培養(yǎng)中的作用，得出可以通過調(diào)整培養(yǎng)基的配方，有目的地培養(yǎng)某種微生物的結(jié)論。(科學(xué)思維)2．通過分析選擇培養(yǎng)基的原理，理解適者生存的含義。(生命觀念)3．通過微生物的相關(guān)實(shí)驗(yàn)，學(xué)會(huì)培養(yǎng)、分離微生物以及微生物計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。(科學(xué)探究)層級(jí)一構(gòu)建必備知識(shí)

培養(yǎng)關(guān)鍵能力01考點(diǎn)一微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)考點(diǎn)二微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)考點(diǎn)一微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)1．培養(yǎng)基(1)概念：人們按照微生物對(duì)________的不同需求，配制出供其________的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。(2)種類①按物理狀態(tài)可分為液體培養(yǎng)基和__________。②按功能可分為選擇培養(yǎng)基和__________。(3)成分：各種培養(yǎng)基一般都含有水、____、氮源和______，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)____、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及____的需求。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生長(zhǎng)繁殖固體培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基碳源無(wú)機(jī)鹽pH氧氣2．無(wú)菌技術(shù)(1)含義：在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。(2)常用方法雜菌污染溫和的物理、化學(xué)所有的微生物巴氏消毒法濕熱滅菌灼燒滅菌3．微生物的純培養(yǎng)(1)概念：由________繁殖所獲得的微生物群體是純培養(yǎng)物，獲得________的過程就是純培養(yǎng)。(2)過程：包括__________、滅菌、接種、____和培養(yǎng)等步驟。(3)常用接種方法：________法和____________法。單一個(gè)體純培養(yǎng)物配制培養(yǎng)基分離平板劃線稀釋涂布平板(4)實(shí)例——酵母菌的純培養(yǎng)高壓蒸汽滅菌干熱滅菌平板劃線法倒置未接種1．培養(yǎng)基只能用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物，不能用以積累其代謝物。 (

)2．由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物。 (

)3．經(jīng)高壓蒸汽滅菌后的培養(yǎng)基，要冷卻至50℃左右時(shí)，才能在酒精燈火焰附近倒平板。 (

)4．平板劃線時(shí)要注意將最后一次的劃線與第一次的劃線相連。 (

)×√√×【教材細(xì)節(jié)命題】(選擇性必修3P12～13旁欄思考)(1)在未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長(zhǎng)？____。如果有，說明了________________。(2)在接種酵母菌的培養(yǎng)基上，如果你觀察到了不同形態(tài)的菌落，你能分析出可能是由什么引起的嗎？______________________________________________________________________________。沒有培養(yǎng)基被雜菌污染如果觀察到了不同形態(tài)的菌落，可能是接種的菌種不純或者無(wú)菌操作不規(guī)范等引起的1．常見物品的消毒或滅菌方法(1)消毒方法及適用對(duì)象(2)滅菌方法及適用對(duì)象2．平板劃線操作的注意事項(xiàng)(1)灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。(2)第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始，能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。(3)劃線時(shí)最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。(4)劃線時(shí)用力大小要適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基表面劃破。(5)操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行火焰灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束時(shí)，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的如下表：項(xiàng)目第一次操作每次劃線之前劃線結(jié)束目的殺死接種環(huán)上原有的微生物殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目依次減少殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免微生物污染環(huán)境和感染操作者12345考向1|

培養(yǎng)基的成分與功能的分析1．下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述，正確的是(

)A．培養(yǎng)基是為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)的基質(zhì)B．培養(yǎng)基中都只含有碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽C．固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D．微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可形成肉眼可見的單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落12345A

解析：培養(yǎng)基是為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)的基質(zhì)，A正確；微生物培養(yǎng)基的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等，有的還需要生長(zhǎng)因子等特殊的營(yíng)養(yǎng)，固體和半固體培養(yǎng)基需要瓊脂，液體培養(yǎng)基不需要瓊脂，B錯(cuò)誤；液體培養(yǎng)基中加入瓊脂可制成固體培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤；微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)，可以形成肉眼可見的菌落，但不一定是單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的，D錯(cuò)誤。123452．已知某種細(xì)菌以CO2為唯一碳源，下列相關(guān)敘述正確的是(

)A．可推測(cè)該細(xì)菌的代謝類型為自養(yǎng)需氧型B．無(wú)機(jī)鹽是該細(xì)菌不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)C．培養(yǎng)過程中碳源同時(shí)充當(dāng)該細(xì)菌的能源物質(zhì)D．培養(yǎng)該細(xì)菌的培養(yǎng)基中不需要添加氮源12345B

解析：該細(xì)菌以CO2為唯一碳源，可推測(cè)該細(xì)菌的代謝類型為自養(yǎng)型，但不能確定是不是需氧型，A錯(cuò)誤；微生物生長(zhǎng)一般需要水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，B正確；CO2不能為微生物提供能量，C錯(cuò)誤；氮源是微生物必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，培養(yǎng)該細(xì)菌的培養(yǎng)基中需添加氮源，D錯(cuò)誤。12345考向2|

無(wú)菌技術(shù)的辨析3．(2021·北京卷)人體皮膚表面存在著多種微生物，某同學(xué)擬從中分離出葡萄球菌。下述操作錯(cuò)誤的是(

)A．對(duì)配制的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B．使用無(wú)菌棉拭子從皮膚表面取樣C．用取樣后的棉拭子在固體培養(yǎng)基上涂布D．觀察菌落的形態(tài)和顏色等進(jìn)行初步判斷12345C

解析：為避免雜菌污染干擾，需對(duì)配制的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A正確；葡萄球菌需從人體皮膚的微生物中分離，為避免雜菌污染，故需要使用無(wú)菌棉拭子從皮膚表面取樣，B正確；棉拭子上的微生物需要用平板劃線法在培養(yǎng)基上進(jìn)行接種，C錯(cuò)誤；根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別，D正確。123454．(2022·湖北卷改編)滅菌、消毒、無(wú)菌操作是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見的操作。下列敘述正確的是(

)A．動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無(wú)菌條件下進(jìn)行B．微生物、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C．為防止蛋白質(zhì)變性，不能用高壓蒸汽滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D．可用高壓蒸汽滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌12345D

解析：動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，A錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保證無(wú)菌環(huán)境，而微生物的培養(yǎng)不能加入抗生素，B錯(cuò)誤；一般用高壓蒸汽滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，C錯(cuò)誤；可用高壓蒸汽滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，D正確?！疽族e(cuò)提醒】把握選擇無(wú)菌技術(shù)的原則(1)考慮無(wú)菌技術(shù)的效果：滅菌的效果比消毒要好。(2)考慮操作對(duì)象的承受能力：活體生物材料、操作者的手等只能消毒，而不能滅菌。12345考向3|

微生物的純化方法及過程的分析5．下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，下列說法錯(cuò)誤的是(

)A．①步驟使用的培養(yǎng)基是已經(jīng)調(diào)節(jié)過pH并滅菌的培養(yǎng)基B．①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行C．③到④的過程中，接種環(huán)共灼燒了5次D．④步驟操作時(shí)，不能將第1次和第5次的劃線相連12345C

解析：①步驟表示倒平板，在倒平板之前培養(yǎng)基已經(jīng)調(diào)節(jié)過pH并滅過菌，A正確。①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止雜菌污染，B正確。接種環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過灼燒來滅菌，所以③到④的過程中5次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結(jié)束后還需灼燒滅菌1次，防止造成污染，由此可見，③到④的過程中共需灼燒接種環(huán)6次，C錯(cuò)誤。④步驟操作時(shí)，不能將第1區(qū)和第5區(qū)的劃線相連，D正確?！疽族e(cuò)分析】培養(yǎng)物、純培養(yǎng)物、純培養(yǎng)的辨析考點(diǎn)二微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)1．微生物的選擇培養(yǎng)(1)選擇培養(yǎng)基：將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)__________其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。(2)稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋后，將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面，進(jìn)行培養(yǎng)。抑制或阻止①系列稀釋操作系列稀釋：移液管需要經(jīng)過滅菌。操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)離火焰1～2cm。操作過程如下：②涂布平板操作序號(hào)圖示操作1取0.1mL菌液，滴加到__________2將涂布器浸在盛有____的燒杯中3將沾有少量酒精的涂布器在火焰上灼燒，待酒精燃盡后，冷卻8～10s培養(yǎng)基表面酒精③培養(yǎng)：待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后，將平板____，放入30～37℃的__________中培養(yǎng)1～2d。序號(hào)圖示操作4用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使菌液________涂布均勻倒置恒溫培養(yǎng)箱2．微生物的數(shù)量測(cè)定(1)稀釋涂布平板法①計(jì)數(shù)原理：當(dāng)樣品的____________時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)______，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的______，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。②計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)：為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。稀釋度足夠高單菌落菌落數(shù)30～300③計(jì)數(shù)方法：通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)為_________、適于計(jì)數(shù)的平板。在__________下，至少應(yīng)對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出______。④統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用______表示。30～300同一稀釋度平均值菌落數(shù)(2)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法①計(jì)數(shù)原理：利用特定的__________或____________，在顯微鏡下觀察、計(jì)數(shù)，然后再計(jì)算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量。②優(yōu)點(diǎn)：是一種常用的、________的測(cè)定微生物數(shù)量的方法。③缺點(diǎn)：統(tǒng)計(jì)的結(jié)果一般是死菌數(shù)和活菌數(shù)的總和。細(xì)菌計(jì)數(shù)板血細(xì)胞計(jì)數(shù)板快速直觀3．土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)脲酶尿素1．利用稀釋涂布平板法和平板劃線法均可實(shí)現(xiàn)細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)。 (

)2．培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)基的pH會(huì)增大。 (

)3．篩選分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源，且為液體培養(yǎng)基。 (

)4．利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)就是活菌的實(shí)際數(shù)。 (

)5．統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)目最多的平板進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。 (

)6．利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)量就是活菌的數(shù)量。 (

)×√××××【教材細(xì)節(jié)命題】1．(選擇性必修3P16思考·討論)(1)如果讓你配制一種培養(yǎng)基，將土壤稀釋液中能分解尿素的細(xì)菌分離出來，培養(yǎng)基的配方該如何設(shè)計(jì)？__________________________________________________________。(2)該培養(yǎng)基與普通培養(yǎng)基有哪些共同點(diǎn)和不同點(diǎn)？______________________________________________________________________。設(shè)計(jì)一種選擇培養(yǎng)基，用尿素作為唯一氮源，可以將分解尿素的細(xì)菌分離出來與普通培養(yǎng)基相比，這種培養(yǎng)基只是用尿素作為唯一氮源，培養(yǎng)基的其他營(yíng)養(yǎng)成分基本相同2．(選擇性必修3P16思考·討論)結(jié)合對(duì)照組，分析培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出一些菌落。_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。如果沒有接種的培養(yǎng)基上沒有菌落生長(zhǎng)，說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。如果接種后的完全培養(yǎng)基上的菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)，說明選擇培養(yǎng)基篩選出了一些尿素分解菌1．常見選擇培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)原理與應(yīng)用實(shí)例選擇培養(yǎng)基設(shè)計(jì)原理應(yīng)用實(shí)例具體處理分離菌種依據(jù)營(yíng)養(yǎng)需求不添加碳源自養(yǎng)微生物(硝化細(xì)菌等)不添加氮源固氮微生物(根瘤菌等)以尿素為唯一氮源能分解尿素的微生物以石油為唯一碳源能分解石油的微生物選擇培養(yǎng)基設(shè)計(jì)原理應(yīng)用實(shí)例具體處理分離菌種加入某種化學(xué)物質(zhì)，其不作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，對(duì)目標(biāo)微生物無(wú)害，但會(huì)抑制或殺死其他微生物加入青霉素、四環(huán)素或鏈霉素抑制細(xì)菌和放線菌生長(zhǎng)→分離酵母菌、霉菌等加入10%的酚抑制細(xì)菌和霉菌生長(zhǎng)→分離放線菌選擇培養(yǎng)基設(shè)計(jì)原理應(yīng)用實(shí)例具體處理分離菌種利用特殊環(huán)境置于無(wú)氧條件下厭氧型和兼性厭氧型微生物置于高鹽環(huán)境中其他菌在高鹽環(huán)境中易失水而不能生存→分離金黃色葡萄球菌置于高溫環(huán)境中其他微生物因酶失活而無(wú)法生存→分離耐高溫微生物2．平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較項(xiàng)目平板劃線法稀釋涂布平板法圖示過程用接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線，將聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)項(xiàng)目平板劃線法稀釋涂布平板法優(yōu)點(diǎn)可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征相同點(diǎn)都使用固體培養(yǎng)基，若沒有特殊要求，兩種方法都可以用來分離微生物3．兩種微生物計(jì)數(shù)方法的比較項(xiàng)目間接計(jì)數(shù)法(稀釋涂布平板法)直接計(jì)數(shù)法(顯微計(jì)數(shù)法)原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量項(xiàng)目間接計(jì)數(shù)法(稀釋涂布平板法)直接計(jì)數(shù)法(顯微計(jì)數(shù)法)公式每克樣品中的菌落數(shù)＝(C/V)×MC：稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)；V：涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積/mL；M：稀釋倍數(shù)每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)＝每小格內(nèi)平均細(xì)菌數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù)缺點(diǎn)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落不能區(qū)分活菌和死菌結(jié)果比實(shí)際值小比實(shí)際值大4．微生物的篩選與鑒別方法(1)微生物的篩選方法單菌落挑取法利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物選擇培養(yǎng)法利用選擇培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng)，直接獲得目的微生物鑒定培養(yǎng)法利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物(2)微生物的鑒別方法菌落特征鑒別法根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別指示劑鑒別法在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種微生物后，培養(yǎng)基變紅，說明該種微生物能夠分解尿素透明圈鑒別法為了篩選出高效降解淀粉菌種，該培養(yǎng)基應(yīng)以可溶性淀粉為唯一碳源，由于培養(yǎng)基中含有淀粉，而以淀粉為唯一碳源的微生物能產(chǎn)生淀粉酶分解淀粉，淀粉被分解后遇碘液不呈現(xiàn)藍(lán)色，因而隨著淀粉被分解，藍(lán)色褪去，出現(xiàn)透明圈5．對(duì)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分析與評(píng)價(jià)內(nèi)容現(xiàn)象結(jié)論有無(wú)雜菌污染的判斷對(duì)照的培養(yǎng)皿中無(wú)菌落生長(zhǎng)未被雜菌污染培養(yǎng)物中菌落數(shù)偏高可能被雜菌污染菌落形態(tài)多樣，菌落數(shù)偏高培養(yǎng)物中混入其他氮源內(nèi)容現(xiàn)象結(jié)論選擇培養(yǎng)基的篩選作用牛肉膏培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目大于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目選擇培養(yǎng)基具篩選作用樣品的稀釋操作得到2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在30～300的平板操作成功重復(fù)組的結(jié)果若選取同一種土樣，統(tǒng)計(jì)結(jié)果應(yīng)接近135246考向1|

選擇培養(yǎng)基成分與功能的分析1．下列能選擇出分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基是(

)A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、蒸餾水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、瓊脂、蒸餾水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、瓊脂、蒸餾水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、蒸餾水135246A

解析：在A項(xiàng)的培養(yǎng)基中既有尿素作為唯一氮源，又有其他各種成分，可以選擇出分解尿素的細(xì)菌；而B項(xiàng)中無(wú)尿素作氮源，C項(xiàng)中缺少碳源，D項(xiàng)中有牛肉膏、蛋白胨可提供氮源的成分。2134562．物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌，結(jié)果如下圖。下列說法錯(cuò)誤的是(

)

A．透明圈的形成是因?yàn)閃物質(zhì)被分解B．所用的選擇培養(yǎng)基應(yīng)該是以物質(zhì)W為唯一氮源C．甲菌落中的細(xì)菌可能是利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈碊．乙菌落中的細(xì)菌都能降解W，不需要進(jìn)一步純化213456D

解析：W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明，因此透明圈的形成是因?yàn)閃物質(zhì)被分解，A正確；要篩選出能降解W的細(xì)菌，所用的選擇培養(yǎng)基應(yīng)該是以物質(zhì)W為唯一氮源，B正確；該培養(yǎng)基以W物質(zhì)為唯一氮源，而甲菌落周圍未出現(xiàn)透明圈，因此甲菌落中的細(xì)菌可能是利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，C正確；乙菌落中的細(xì)菌不一定都能降解W，因此仍需要進(jìn)一步純化，D錯(cuò)誤?！疽族e(cuò)提醒】能夠在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的不一定都是目的菌株原則上選擇培養(yǎng)基只能允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，但實(shí)際上，微生物的培養(yǎng)是一個(gè)非常復(fù)雜的問題，有些微生物可以利用其他微生物的代謝產(chǎn)物生長(zhǎng)繁殖，因此，能夠在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的不一定都是目的菌株。312456考向2|

微生物選擇培養(yǎng)方法的辨析3．(2022·江蘇卷)下列是某同學(xué)分離高產(chǎn)脲酶菌的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，不合理的是(

)A．選擇農(nóng)田或公園土壤作為樣品分離目的菌株B．在選擇培養(yǎng)基中需添加尿素作為唯一氮源C．適當(dāng)稀釋樣品是為了在平板上形成單菌落D．可分解酚紅指示劑使其褪色的菌株是產(chǎn)脲酶菌312456D

解析：農(nóng)田或公園土壤中含有較多的含脲酶的微生物，A正確；為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，配制的培養(yǎng)基應(yīng)選擇尿素作為唯一氮源，含脲酶的微生物在該培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)，B正確；當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，C正確；在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的pH升高，酚紅指示劑將變紅，因此在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，能對(duì)分離的菌種做進(jìn)一步鑒定，D錯(cuò)誤。4123564．(2022·全國(guó)乙卷)化合物S被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)。用菌株C可生產(chǎn)S，S的產(chǎn)量與菌株C培養(yǎng)所利用的碳源關(guān)系密切。為此，某小組通過實(shí)驗(yàn)比較不同碳源對(duì)菌體生長(zhǎng)和S產(chǎn)量的影響，結(jié)果見表。碳源細(xì)胞干重/(g·L-1)S產(chǎn)量/(g·L-1)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18412356回答下列問題：(1)通常在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時(shí)，需要對(duì)所需的玻璃器皿進(jìn)行滅菌，滅菌的方法有__________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)。

(2)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，菌株C生長(zhǎng)的最適碳源是______________；用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是____________。菌株C的生長(zhǎng)除需要碳源外，還需要____________________(答出2點(diǎn)即可)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

412356(3)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，碳源為淀粉時(shí)菌株C不能生長(zhǎng)，其原因是_____________________________________________________________。

(4)若以制糖廢液作為碳源，為進(jìn)一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路：_________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)利用制糖廢液生產(chǎn)S可以實(shí)現(xiàn)廢物利用，其意義是__________(答出1點(diǎn)即可)。412356解析：(1)通常在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時(shí)，為防止實(shí)驗(yàn)用的玻璃器皿等物品中原有的微生物污染培養(yǎng)物，需要使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子，即對(duì)所需的玻璃器皿進(jìn)行滅菌，玻璃器皿常用的滅菌方法有干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等。(2)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，以葡萄糖為碳源時(shí)菌株C的細(xì)胞干重最大，說明最適于菌株C生長(zhǎng)的碳源是葡萄糖；而以制糖廢液為碳源時(shí)，用菌株C生產(chǎn)S的產(chǎn)量高于以葡萄糖為碳源時(shí)的產(chǎn)量，說明最適于生產(chǎn)S的碳源是制糖廢液。微生物的生長(zhǎng)一般都需要水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、氧氣以及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求，故菌株C的生長(zhǎng)除需要碳源外，還需要氮源、無(wú)機(jī)鹽、水等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)412356(3)分析題中表格可以看出，在以淀粉為碳源的培養(yǎng)基中，菌株C不能生長(zhǎng)，原因可能是菌株C中缺少分解淀粉的酶，不能利用淀粉。(4)若以制糖廢液作為碳源，為進(jìn)一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，實(shí)驗(yàn)自變量為制糖廢液的濃度，可分別配制一系列不同濃度梯度的以制糖廢液為唯一碳源的培養(yǎng)基，培養(yǎng)菌株C，其他條件相同且適宜，一段時(shí)間后，測(cè)定并比較不同濃度制糖廢液中S的產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時(shí)對(duì)應(yīng)的制糖廢液濃度，即為生產(chǎn)S的最適碳源濃度。(5)利用制糖廢液生產(chǎn)S可以實(shí)現(xiàn)廢物利用，既有利于減少污染、節(jié)省原料，又能降低生產(chǎn)成本。412356答案：(1)高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌(2)葡萄糖制糖廢液氮源、無(wú)機(jī)鹽、水(3)不能合成淀粉酶(4)配制等量的一系列不同濃度的制糖廢液分別接種等量的菌株C，其他條件相同且適宜，培養(yǎng)一段時(shí)間后，測(cè)定不同濃度制糖廢液中S產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時(shí)對(duì)應(yīng)的制糖廢液濃度為生產(chǎn)S的最適碳源濃度(5)減少污染、節(jié)省原料、降低生產(chǎn)成本245136考向3|

微生物數(shù)量測(cè)定的方法5．土壤中有豐富的微生物，若利用其中某種微生物，則需要進(jìn)行菌種的分離和純化，過程如下圖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(

)245136A．若目的是篩選分解尿素[CO(NH2)2]的細(xì)菌，則尿素可以作為該菌的氮源和碳源B．3號(hào)試管的稀釋倍數(shù)為1×104，理論上3號(hào)試管的活菌數(shù)應(yīng)是4號(hào)試管的10倍C．4號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的活菌數(shù)約為1.1×108個(gè)D．該種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目少245136A

解析：若目的是篩選分解尿素[CO(NH2)2]的細(xì)菌，則尿素可以作為該菌的氮源，不能作為碳源，A錯(cuò)誤；由樣品稀釋示意圖分析可知，3號(hào)試管的稀釋倍數(shù)為1×104倍，3號(hào)試管中的活菌數(shù)應(yīng)是4號(hào)試管的10倍，B正確；4號(hào)試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為(110＋108＋112)÷3×10×105＝1.1×108(個(gè))，C正確；稀釋涂布平板得到的菌落可能是由兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞長(zhǎng)成的，故該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要低，D正確。2451366．(2023·廣東汕頭一模)熱纖梭菌是一種能高效降解纖維素的嗜熱厭氧細(xì)菌，可分泌一種多酶復(fù)合體將纖維素水解為可溶性糖，在農(nóng)林廢棄物的轉(zhuǎn)化利用中具有應(yīng)用價(jià)值。下圖是篩選該菌的過程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(

)245136A．從牛糞堆的深層取樣比從表層取樣更加合理B．甲、丙都是以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基C．用平板乙統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)可準(zhǔn)確反映該菌的真實(shí)數(shù)量D．丙中纖維素的殘留量可反映該菌降解纖維素的能力245136C

解析：熱纖梭菌是一種嗜熱厭氧細(xì)菌，牛糞堆的深層比表層氧氣含量更低，溫度更高，更適合熱纖梭菌生存，因此從牛糞堆的深層取樣比從表層取樣更加合理，A正確；題圖是篩選能高效降解纖維素的嗜熱厭氧細(xì)菌，因此甲、丙都是以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，B正確；根據(jù)圖乙中平板上菌落分布均勻可知，其為稀釋涂布平板法接種的菌種，由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌體連在一起時(shí)，平板上觀察到的只有一個(gè)菌落，因此用該方法統(tǒng)計(jì)的菌體數(shù)量會(huì)比活菌的實(shí)際數(shù)量少，C錯(cuò)誤；熱纖梭菌可分泌一種多酶復(fù)合體將纖維素水解為可溶性糖，因此丙中纖維素的殘留量可反映該菌降解纖維素的能力，D正確。層級(jí)二凝練學(xué)科素養(yǎng)

探析高考命題02【命題動(dòng)態(tài)】針對(duì)人類生產(chǎn)或生活的某一需求，或結(jié)合生活或生產(chǎn)實(shí)例，考查微生物的營(yíng)養(yǎng)要求，微生物的消毒與滅菌技術(shù)、微生物的選擇培養(yǎng)、微生物分離與計(jì)數(shù)的原理及操作過程的分析。呈現(xiàn)形式一般以選擇題為主，難度中檔。1．(2021·山東卷)解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色，乙菌菌落周圍不變色。下列說法錯(cuò)誤的是(

)A．甲菌屬于解脂菌B．實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C．可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比D．該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力[思維培養(yǎng)]B

解析：根據(jù)題干信息“甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色”，說明甲菌可以分泌脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色，因此甲菌屬于解脂菌，A正確；乙菌菌落周圍沒有出現(xiàn)深藍(lán)色，說明乙菌不能產(chǎn)生脂肪酶，不能利用脂肪為其供能，但乙菌也可以在培養(yǎng)基上生存，說明該培養(yǎng)基不是以脂肪為唯一碳源，B錯(cuò)誤；可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比，更加直觀，C正確；可以根據(jù)平板中菌落周圍深藍(lán)色的面積大小來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力，D正確。[技法總結(jié)]選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的比較項(xiàng)目選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基制備方法培養(yǎng)基中加入或減少某些化學(xué)物質(zhì)培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品原理依據(jù)某些微生物對(duì)某些物質(zhì)或環(huán)境條件的嗜好或抗性而設(shè)計(jì)產(chǎn)生特定的顏色或其他變化項(xiàng)目選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基用途從眾多微生物中分離出所需的微生物鑒別不同種類的微生物2．(2022·廣東卷)研究深海獨(dú)特的生態(tài)環(huán)境對(duì)于開發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學(xué)號(hào)”考察船對(duì)南中國(guó)?？瓶贾校袊?guó)科學(xué)家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株并進(jìn)一步研究了其生物學(xué)特性。回答下列問題：(1)研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用________________法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28℃厭氧培養(yǎng)一段時(shí)間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，為了獲得純種培養(yǎng)，除了稀釋涂布平板法，還可采用________________法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以__________為碳源時(shí)生長(zhǎng)狀況最好。

(2)研究發(fā)現(xiàn)，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來，推測(cè)其原因可能是_______________________________________(答一點(diǎn)即可)。(3)藻類細(xì)胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會(huì)聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度考慮，擬桿菌對(duì)深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是________________________________________________________________________________________________。(4)深海冷泉環(huán)境特殊，推測(cè)此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能還有____________________________________________________________________。解析：(1)培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。可以采用稀釋涂布平板法或平板劃線法，將單個(gè)微生物分散在固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)得到單菌落，從而獲得純凈培養(yǎng)物。分析題圖可知，在以纖維素為碳源的培養(yǎng)基中，細(xì)胞數(shù)量最多，可推知擬桿菌新菌株在以纖維素為碳源時(shí)生長(zhǎng)狀況最好。(2)深海冷泉中可能存在某些微生物，只有利用冷泉中的特有物質(zhì)才能生存(或需要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活)，故將采集