諸葛健工業(yè)微生物育種學(xué)復(fù)習(xí)思考題參考答案

DNADNA四種脫氧核苷酸、引物、DNA聚合酶、模板鏈。子有哪幾種?大腸桿菌存在兩類(lèi)終止子： (1)不依靠于ρ因子的終止子，或稱(chēng)為簡(jiǎn)潔終止子。能形成發(fā)夾構(gòu)造外，在終點(diǎn)前還有一系列(6個(gè))尿苷酸；回文對(duì)稱(chēng)區(qū)通常有一段富含G-C的序列寡聚U序列可能供給信號(hào)使RNA聚合酶脫離模板rU-dA組成的RNA-DNA雜交分子具有特別弱的堿基配對(duì)構(gòu)造；當(dāng)聚合酶暫停時(shí)，RNA-DNA雜交分子解開(kāi)，轉(zhuǎn)錄終止。 文構(gòu)造之后也沒(méi)有寡聚U，必需在ρ因子存在時(shí)才發(fā)生上，借助水解NTP獲得的能量沿RNA鏈發(fā)生暫停，ρ因子追上酶，ρ因子與酶相互作用，造成RNA釋放。ρ因子與RNA聚合酶一起從DNA上脫落，轉(zhuǎn)錄終止。蛋白質(zhì)翻譯的終止密碼子有UAA、UAG、UGAβ-半乳糖苷酶基因是否在任何狀況下都表現(xiàn)為高水平的轉(zhuǎn)錄。不是，乳糖操縱子不僅有反式作用元件〔乳糖阻遏子〕還受順時(shí)作用因子〔DNA序列如啟動(dòng)子等〕的調(diào)控。LACCAP的表達(dá)水平。移框突變是指三聯(lián)體密碼的閱讀方式轉(zhuǎn)變，造成蛋白質(zhì)氨基酸排列挨次發(fā)生改變，其后果是翻譯出的蛋白質(zhì)可能完全不同。因此這個(gè)不肯定。假設(shè)移碼后，都不肯定有活性。轉(zhuǎn)座子(TransposonDNA因組中通過(guò)轉(zhuǎn)錄或逆轉(zhuǎn)錄，在內(nèi)切酶的作用下，在其他基因座上消滅。轉(zhuǎn)座子的這種行為，與假基因的消滅頗有相像甚至一樣之處。有些科學(xué)家將后者視為[1]。轉(zhuǎn)座子的覺(jué)察，證明白基因組并不是一個(gè)靜態(tài)的集合，而是一個(gè)不斷在轉(zhuǎn)變自身構(gòu)成的動(dòng)態(tài)有機(jī)體。依據(jù)轉(zhuǎn)IIIDNA座子跳動(dòng)而插入到某個(gè)功能基因時(shí)，就會(huì)引起該基因的失活，并誘導(dǎo)產(chǎn)生突變型，而當(dāng)轉(zhuǎn)座子再次轉(zhuǎn)座或切離這一位點(diǎn)時(shí)，失活基因的功能又可得一恢復(fù)。遺傳分析可確定某基因的突變是否由轉(zhuǎn)座子引起。由轉(zhuǎn)座子引起的突變便可以轉(zhuǎn)座子DNA為探針，從突變株的基因組文庫(kù)中釣出含該轉(zhuǎn)座子的DNA片段，并DNA因組文庫(kù)，最終得到完整的基因。T-DNA入突變，并進(jìn)而分別基因，因此大大提高了分別基因的效率。轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽法的主要步驟是:工業(yè)微生物，(3)轉(zhuǎn)座子插入突變的鑒定及分別轉(zhuǎn)座子在目標(biāo)工業(yè)微生物的活動(dòng)性能檢測(cè)對(duì)轉(zhuǎn)座子插入引起的突變體，利用轉(zhuǎn)座子序列作探針，分別克隆目的基因。名詞解釋:RNA〕中的核苷酸序列突然發(fā)生了穩(wěn)定的可遺傳的變化。突變型：由于突變體中DNA堿基序列的轉(zhuǎn)變，所產(chǎn)生的的等位基因及的表現(xiàn)型稱(chēng)為突變型。染色體構(gòu)造的轉(zhuǎn)變，多數(shù)是染色體或染色單體遭到巨大損傷產(chǎn)生斷裂，而因。DNA數(shù)幾對(duì)核苷酸的缺失、插入或置換，分為堿基置換〔轉(zhuǎn)換和顛換〕和移碼突變。〔嘧啶〕所置換。DNA〔嘧啶〕被一個(gè)嘧啶〔嘌呤〕所置換。同義突變：由于遺傳密碼的簡(jiǎn)并性，突變后的密碼子編碼的仍是同一種氨基酸。堿基序列發(fā)生轉(zhuǎn)變而氨基酸序列未發(fā)生轉(zhuǎn)變的隱蔽突變。由于突變后的密碼子代表另一種氨基酸，從而造成個(gè)別堿基的轉(zhuǎn)變導(dǎo)致多肽鏈上某個(gè)氨基酸為另一種氨基酸所取代。突變后的密碼子變成終止密碼子，是一類(lèi)是引起遺傳性狀轉(zhuǎn)變的突變。移碼突變：在DNA序列中由于一對(duì)或少數(shù)幾對(duì)核苷酸的插入或缺失，而使其后變。一般只引起一個(gè)基因的表達(dá)消滅錯(cuò)誤。在某一條件下具有致死效應(yīng)，而在另一條件下沒(méi)有致死效應(yīng)的突變型。如：溫度敏感突變型。突變基因通過(guò)再次突變回復(fù)到野生型基因的表型性狀。表型不發(fā)生轉(zhuǎn)變的基因突變，包括同義突變和氨基酸序列發(fā)生轉(zhuǎn)變而不影響蛋白質(zhì)功能的錯(cuò)義突變。一世代〔1〕中產(chǎn)生突變株的數(shù)目來(lái)表示。轉(zhuǎn)座因子：細(xì)胞基因組中能夠從一個(gè)位置轉(zhuǎn)移到另一個(gè)位置的一段DNA序列，〔E.coliMu〕等。幾乎所以生物都有轉(zhuǎn)座因子存在。子或化學(xué)物質(zhì)。誘變劑分為化學(xué)誘變劑、物理誘變劑和生物誘變劑三類(lèi)。把經(jīng)紫外線(xiàn)照耀后的微生物馬上暴露在可見(jiàn)光下時(shí)，可明顯降低其死亡率的現(xiàn)象。其本質(zhì)是一種酶促反響，在可見(jiàn)光〔300~500nm〕的活覺(jué)察光復(fù)活酶。切除修復(fù)：是生物體內(nèi)進(jìn)展DNADNADNA聚合酶以及連接酶的協(xié)同作用下將嘧啶二聚體酶切除去，繼而重合成一段正DNADNA是一種越過(guò)損傷而進(jìn)展的修復(fù)，不將模板上損傷堿基除去，而是通RecT=T，而分裂而稀釋。SOS在正常細(xì)胞中被關(guān)閉，僅在細(xì)胞受到重大損傷時(shí)激活的一種旁路修復(fù)系統(tǒng)，是唯一導(dǎo)致突變的修復(fù)。SOSDNA。表型的轉(zhuǎn)變落后于基因突變的現(xiàn)象。微生物通過(guò)自發(fā)突變或人工誘2〔segregationallag〕和生理性表型延遲〔physiologicallag〕。突變。基因產(chǎn)物的缺陷型。體具有抗性的變異菌株。純合狀態(tài)的隱性致死都導(dǎo)致個(gè)體的死亡應(yīng)的突變型。如：溫度敏感突變型調(diào)整突變型：?jiǎn)适?duì)某一基因或操縱子表達(dá)力量調(diào)整的突變型?！蔡攸c(diǎn)〕，即突變具有自發(fā)性，稀有性，隨機(jī)性，獨(dú)立性，可誘發(fā)性，可遺傳性，可逆性。位點(diǎn)和所產(chǎn)生的表型變化等方面都帶有比較明顯的隨機(jī)性。自發(fā)和不確定的?；鋵?duì)的錯(cuò)誤引起自發(fā)突變。C發(fā)地變T，DNAGC→ATDNADNA運(yùn)動(dòng)而造成堿基配對(duì)錯(cuò)誤，修復(fù)系統(tǒng)的各種缺陷所導(dǎo)致的結(jié)果。〔酮式或烯醇式，氨基式DNA而表現(xiàn)出基因突變的自發(fā)性和隨機(jī)性。試述各種誘變劑的作用機(jī)制。有特異性誘變作用的化學(xué)誘變劑?為什么?不能找到具有特異性誘變作用的化學(xué)誘變劑，由于對(duì)于一般的化學(xué)誘變劑：堿基類(lèi)似物、堿基修飾劑、移碼突變劑，均不具有特異性。DNA——〔修復(fù)作用〕——突變基因——〔轉(zhuǎn)錄、翻譯〕——表型〔二倍體顯隱性、環(huán)境〕1.由于損傷未修復(fù)導(dǎo)致細(xì)胞死亡，不會(huì)產(chǎn)生表型。2.通過(guò)錯(cuò)誤的修復(fù)而固定損傷，細(xì)胞基因突變〔這種突變也可能是致死的〕，有可能產(chǎn)生表型轉(zhuǎn)變；3.原序列，不產(chǎn)生表型轉(zhuǎn)變。復(fù)，其結(jié)果如何?答：通常T=T是在DNA鏈上相鄰的嘧啶之間交聯(lián)而成的。這個(gè)二聚體對(duì)熱和酸TAA進(jìn)展，以至在形成的鏈上有了一個(gè)轉(zhuǎn)變了的堿基序列。對(duì)DNA分子中的胸腺嘧啶二聚體主要有五種修復(fù)途徑：光復(fù)活、切除修復(fù)、重組修復(fù)、SOS〔photoreactivation〕：是一種高DNA嘧啶二聚體的修復(fù)②切除DNAUvr負(fù)責(zé)切除大量的胸腺嘧啶二聚體③重組修復(fù)系統(tǒng)：不將損傷堿基除去，而是通過(guò)復(fù)制后，經(jīng)染色體交換，使子鏈上的空隙部位不再正對(duì)T=T，而是面對(duì)正RecT=T造成的可怕的后果。④SOSDNADNAT=T的任何位置，數(shù)量太大，錯(cuò)配修復(fù)和切除修復(fù)系統(tǒng)訂正一些，仍留有很多錯(cuò)配T=T，并切除錯(cuò)誤堿基實(shí)現(xiàn)模板的修復(fù)。光復(fù)活、切除修復(fù)和二聚體糖苷酶修復(fù)都是修復(fù)模板鏈，而重組修復(fù)是形成一條的模板鏈，SOS鏈。SOS修復(fù)是唯一導(dǎo)致突變的修復(fù)，其余的修復(fù)機(jī)制都是將DNA損傷恢復(fù)到DNA。即表型延遲，微生物通過(guò)自發(fā)突變或人工誘變而產(chǎn)生的基因型個(gè)體所表現(xiàn)出來(lái)的遺傳特性不能在當(dāng)代消滅，其表型的消滅必需經(jīng)過(guò)2代以上的生殖復(fù)制。表型延遲的緣由有兩種：分別是分別性表型延遲和生理性表型延遲。分別性表型延遲〔segregationallag〕是突變基因由雜合狀態(tài)到純合狀態(tài)所造成的表型拖延。生理性表型延遲〔physiologicallag〕是由于基因產(chǎn)物的“稀釋”過(guò)程所造成的表型拖延。〔形態(tài)突變型、養(yǎng)分突變型、抗性突變型、致死突變型、條件致死突變型、產(chǎn)量突變型〕1.試述高產(chǎn)突變株誘變選育的一-般步驟及每步的目的及留意事項(xiàng)。12.同步生長(zhǎng)狀態(tài)的旺盛的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期而細(xì)胞內(nèi)又含豐富的內(nèi)源性堿基。密度。誘變處理目的用誘變劑處理動(dòng)身菌株，誘發(fā)遺傳物質(zhì)發(fā)生轉(zhuǎn)變，使突變基因穩(wěn)定，純合并表達(dá)，而且有利于消退表型延遲高產(chǎn)突變株的分別與篩選，經(jīng)過(guò)分別和篩選獲得高產(chǎn)突變株。養(yǎng)分缺陷型：是指喪失了合成一種或者多種必需的生長(zhǎng)因子力量的菌株。他們應(yīng)用：〔1〕阻斷代謝途徑，積存中間代謝產(chǎn)物阻斷分支代謝，轉(zhuǎn)變代謝流向，積存另一端代謝產(chǎn)物解除反響抑制，積存代謝產(chǎn)物利用滲漏缺陷型進(jìn)展代謝調(diào)控育種試述養(yǎng)分缺陷型突變株選育的一般步驟及每步的目的及留意事項(xiàng)。(1〔選擇高劑量〕后培育：使突變基因穩(wěn)定，純合并表達(dá)，而且有利于消退表型延遲〔4〕檢出缺陷型：將缺陷型從群體中檢出分別養(yǎng)分缺陷型鑒定：確定該菌株是何種生長(zhǎng)因子缺陷型中選出高產(chǎn)突變株方法的原理及適用對(duì)象。熱差異殺菌法：利用芽孢或者孢子比養(yǎng)分細(xì)胞更加耐熱的特點(diǎn)，將誘變處理細(xì)菌形成芽孢，吧芽孢在根本養(yǎng)分液中培育一段時(shí)間，然后加熱殺死養(yǎng)分體。-適用于產(chǎn)芽孢細(xì)菌，產(chǎn)其他孢子微生物抗生素法：饑餓培育〔耗盡細(xì)胞內(nèi)氮源，防止加抗生素后殺〕參加抗生素處理 素法用于酵母養(yǎng)分缺陷型濃縮濾法：野生型孢子在根本培育基中萌發(fā)生成菌絲體而養(yǎng)分缺陷型孢子則不能萌發(fā)通過(guò)過(guò)濾而除去菌絲體，剩余多為缺陷型孢子 絲狀微生物饑餓處理法：某些條件下濃縮雙缺陷突變株遏突變型?？狗错懸种仆蛔兪侵附獬朔错懸种频耐蛔冎?，可能由兩種機(jī)制產(chǎn)生。一種是變構(gòu)酶的調(diào)整中心經(jīng)突變后發(fā)生構(gòu)象的轉(zhuǎn)變，造成其與變構(gòu)效應(yīng)物〔終產(chǎn)物〕從而無(wú)法抑制變構(gòu)酶的活力。另一種機(jī)制是變構(gòu)酶的其它位點(diǎn)發(fā)生變化，造成其構(gòu)象也不再發(fā)生足以造成酶活性下降或喪失的轉(zhuǎn)變?？狗错懽瓒敉蛔儎t可以通過(guò)以下緣由形成。一是相應(yīng)的調(diào)整基因發(fā)生突變，所合成的阻遏蛋白不再能和輔阻遏物〔終產(chǎn)物〕結(jié)合，從而不能生成有活性的阻遏蛋白?；蛘咄蛔兒蟮淖瓒舻鞍准词鼓芎洼o阻遏物結(jié)合，也不能形成有活性的阻遏蛋白。二是操縱子中對(duì)應(yīng)的操縱基因發(fā)生了突變，使其和阻遏蛋白的結(jié)合力量下降，或者完全喪失結(jié)合力量，從而也可以造成過(guò)量的輔阻遏物〔終產(chǎn)物〕不能關(guān)閉相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄與酶合成。 調(diào)整突變株可以通過(guò)篩選抗構(gòu)造類(lèi)似物突變和通過(guò)回復(fù)突變兩種方法篩選獲得。通過(guò)抗構(gòu)造類(lèi)似物突變株篩選抗反響調(diào)整突變株： 過(guò)回復(fù)突變篩選抗反響調(diào)整突變株：通過(guò)“原養(yǎng)型---養(yǎng)分缺陷型---原養(yǎng)型”選育途徑進(jìn)展，養(yǎng)分缺陷型回復(fù)突變株的篩選方法是首先將野生型菌株通過(guò)誘變處理，篩選代謝終產(chǎn)物的缺陷型突變株，然后，再對(duì)該突變株進(jìn)展誘變處理，用根本培育基篩選原養(yǎng)型回復(fù)突變，然后從這些原養(yǎng)型回復(fù)突變株中分別篩選能過(guò)量積存代謝終產(chǎn)物的突變株。簡(jiǎn)述抗構(gòu)造類(lèi)似物突變株過(guò)量積存代謝產(chǎn)物的緣由。由于構(gòu)造類(lèi)似物和代謝終產(chǎn)物在構(gòu)造上相像，它們和代謝終產(chǎn)物一樣，能夠與從而終止合成途徑中酶的合成。因此，可以起到代謝產(chǎn)物所具有的反響調(diào)整作用。但是，構(gòu)造類(lèi)似物不能像代謝產(chǎn)物那樣用于合成生物大分子，摻入細(xì)胞結(jié)構(gòu)，因而在細(xì)胞中的濃度是不變的，其反響調(diào)整作用不能被解除。因此，在含有構(gòu)造類(lèi)似物的根本培育基中，由于構(gòu)造類(lèi)似物的存在，代謝終產(chǎn)物的合成被抑制。由于這種代謝產(chǎn)物是生長(zhǎng)必需的，野生型細(xì)胞必定不能生長(zhǎng)。而那些能在含有構(gòu)造類(lèi)似物的根本培育基中能夠生長(zhǎng)的抗構(gòu)造類(lèi)似物突變株，之所以能夠生長(zhǎng)，是由于它們解除了反響調(diào)整。構(gòu)造類(lèi)似物抗性突變可能是抗反響抑制突變株。由于酶的構(gòu)造基因的突變，合成的酶的調(diào)整中心不再與構(gòu)造類(lèi)似物結(jié)合，使構(gòu)造類(lèi)似物失去了對(duì)該酶的反響抑制作用，細(xì)胞在突變酶的催化下合成代謝終產(chǎn)物供細(xì)胞生長(zhǎng)所需，因此，能在構(gòu)造類(lèi)似物存在的狀況下生長(zhǎng)。構(gòu)造縱基因突變后不再與阻遏物蛋白-構(gòu)造類(lèi)似物復(fù)合物結(jié)合，都可以解除構(gòu)造類(lèi)似物的阻遏作用?？箻?gòu)造類(lèi)似物突變的實(shí)質(zhì)是解除了反響抑制或反響阻遏，因此在這類(lèi)突變株中，合成代謝途徑也不再受代謝終產(chǎn)物的反響調(diào)整，能夠在終產(chǎn)物過(guò)量積存的狀況下還不斷合成該產(chǎn)物，從而可以大大提高終產(chǎn)物的合成量。簡(jiǎn)述抗構(gòu)造類(lèi)似物突變變株篩選的一般方法和應(yīng)留意的問(wèn)題。⑴一次性篩選法：將經(jīng)過(guò)誘變后培育的細(xì)胞直接涂布在含有肯定濃度構(gòu)造類(lèi)似〔藥物不很貴〕；加少量構(gòu)造類(lèi)似物，在抑菌圈內(nèi)長(zhǎng)出的個(gè)別菌落即為抗構(gòu)造類(lèi)似物突變株。留意的問(wèn)題：代謝產(chǎn)物或其構(gòu)造類(lèi)似物物的積存水平漸漸提高好。組成型突變株：原先只有在存在誘導(dǎo)底物時(shí)才能合成的誘導(dǎo)酶經(jīng)突變后，調(diào)整基因發(fā)生突變，不產(chǎn)生有活性的阻遏蛋白，或者操縱基因發(fā)生突變不再能與阻遏物相結(jié)合，從而成為在沒(méi)有誘導(dǎo)底物存在時(shí)也能產(chǎn)生大量誘導(dǎo)酶的突變株。篩選方法：⑴制造一種有利于組成型菌株生長(zhǎng)而不利于誘導(dǎo)型菌株生長(zhǎng)的培育條件，造成對(duì)組成型突變株的選擇優(yōu)勢(shì)；①限量誘導(dǎo)物恒化培育法掌握低于誘導(dǎo)濃度的誘導(dǎo)物作碳源進(jìn)展恒化連續(xù)培育。誘導(dǎo)型菌株生長(zhǎng)極弱，而變異株由于能產(chǎn)分解底物的酶而得以生長(zhǎng)。通過(guò)連續(xù)不斷參加穎基質(zhì)，野生型就會(huì)被“洗出”，組成型突變株就被不斷“濃縮”，最終到達(dá)能分別的濃度。②循環(huán)培育法在一個(gè)不含誘導(dǎo)物培育基上和一個(gè)含誘導(dǎo)物作唯一碳源或氮源的培育基上進(jìn)展循環(huán)培育時(shí)，就能使組成型突變株在生長(zhǎng)上占優(yōu)勢(shì)，而予以選出。③誘導(dǎo)抑制劑法誘導(dǎo)物作唯一碳源或氮源，添加誘導(dǎo)抑制劑，只有變異株能合成酶利用底物進(jìn)展生長(zhǎng)④低誘導(dǎo)力量底物培育法利用誘導(dǎo)力量很生長(zhǎng)，從而可以篩選出組成型突變株。⑵選擇適當(dāng)?shù)蔫b別培育基，直接在平板上識(shí)別兩類(lèi)菌落，從而把組成型突變株選擇出來(lái)。①平板菌落識(shí)別法直接選擇出組成型突變株。何謂抗降解代謝阻遏突變型?如何進(jìn)展篩選?在微生物代謝中，一些易分解利用的碳源或氮源及其降解代謝產(chǎn)物阻遏與較難分解的碳氮源利用相關(guān)的酶的合成，稱(chēng)為降解代謝物阻遏效應(yīng)。篩選方法(1)抗碳源降解代謝物阻遏突變株的篩選常承受選育抗葡萄糖構(gòu)造類(lèi)似物突變株的方法篩選抗碳源降解代謝物阻遏突變型。(2)抗氮源降解代謝物阻遏突變株的篩選氮源降解代謝物阻遏主要是指分解含氮底物的酶受快速利用氮源的阻遏。解除這種阻遏的方法是篩選氨構(gòu)造類(lèi)似物和氨基酸構(gòu)造類(lèi)似物抗性突變株，甲胺是最常 用的氨構(gòu)造類(lèi)似物。量。舉例說(shuō)明而影響磷脂的合成和細(xì)胞膜構(gòu)造的完整性，所以在發(fā)酵過(guò)程中添加生物素可以轉(zhuǎn)變細(xì)胞膜的通透性的重要組成成分。因此油酸的缺陷型將由于失去合成油酸的力量而不能合成磷脂，進(jìn)而將影響細(xì)胞的完整性和通透性油的力量而不能合成磷脂，進(jìn)而將影響細(xì)胞通透性突變株，其中細(xì)胞膜構(gòu)造或功能的缺損就是形成溫度敏感突變株的重要緣由。因此可以通過(guò)選育因細(xì)胞膜構(gòu)造或功能而形成的溫度敏感突變株，在生長(zhǎng)階段完畢后通過(guò)調(diào)整發(fā)酵溫度來(lái)掌握細(xì)胞膜透性，從而增加產(chǎn)物的產(chǎn)量。胞膜構(gòu)造不完整的突變細(xì)胞，因此可以選育對(duì)溶菌酶敏感突變株提高細(xì)胞膜透性突變的結(jié)果，而使其群體中原有的一系列生物學(xué)性狀減退或消逝的現(xiàn)象。菌種退化的表現(xiàn)：原有的典型性狀變得不典型；生長(zhǎng)速度緩慢，產(chǎn)孢子越〔抗噬菌體，抗低溫〕力量減弱；致病性下降；遺傳標(biāo)記喪失菌種退化的緣由：①基因突變是引起菌種退化的主要緣由；②誘變后菌株本身不純；③傳代次數(shù)是加速退化的一個(gè)重要緣由；防治方法a.進(jìn)展充分的后培育及分別純化。b.增加突變位點(diǎn)，削減基因回復(fù)突變的幾率：a.b.制造適宜的培育條件；c.利用不易退化的細(xì)胞傳代；d.承受有效的菌種保藏方法③從菌種治理的措施上考慮:復(fù)壯定期對(duì)保藏菌種分別純化，淘汰已退化細(xì)胞；定期對(duì)發(fā)酵液進(jìn)展分別篩選，選取自發(fā)性突變的細(xì)胞—生產(chǎn)育種何謂菌種復(fù)壯，如何進(jìn)展？退化的的群體中選出尚未退化的個(gè)體，以到達(dá)回復(fù)原株固有性狀的措施。這種復(fù)壯工作以及需要分別篩選多少菌株。純種分別方法有四種，即涂布平板分別，傾注平板分別，平板劃線(xiàn)分別法和組適合生產(chǎn)要求的菌株。篩選工作一般分為初篩和復(fù)篩，初篩以量為主，對(duì)全部分別菌株進(jìn)展略粗放的生產(chǎn)性能測(cè)試，選出其中10%～20%生產(chǎn)潛力較大菌株。10%～20%的優(yōu)秀菌株在此進(jìn)展復(fù)篩，復(fù)篩課重復(fù)屢次直至選出最優(yōu)秀的幾個(gè)菌株。名詞解釋?zhuān)恨D(zhuǎn)化：受體細(xì)胞直接吸取暴露的外源DNA并與其自身遺傳物質(zhì)發(fā)生重組的過(guò)程。感受態(tài)：細(xì)胞能從四周環(huán)境中吸取DNA的一種生理狀態(tài)。經(jīng)轉(zhuǎn)化得到的重組子。普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)：能傳遞供體細(xì)菌染色體上任何基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)。只能傳遞染色體上原噬菌體特定位點(diǎn)四周少數(shù)基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)。轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒：在噬菌體成熟階段，負(fù)責(zé)包裝噬菌體DNA的酶間或誤將宿主DNA片誘導(dǎo)，也可以通過(guò)裂解反響得到。轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體：切離的噬菌體DNA正常地復(fù)制與包裝成噬菌體顆粒，由此形成了只能通過(guò)誘導(dǎo)溶源性得到。被轉(zhuǎn)導(dǎo)的宿主細(xì)胞叫作轉(zhuǎn)導(dǎo)子。經(jīng)轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒引入的野生型供體基因，在受體細(xì)胞內(nèi)既不進(jìn)展交換、整合和復(fù)制，也不快速消逝，而是僅表現(xiàn)為穩(wěn)定的轉(zhuǎn)錄、翻譯和性狀表達(dá)。轉(zhuǎn)染：專(zhuān)指感受態(tài)的大腸桿菌細(xì)胞捕獲和表達(dá)噬菌體DNA分子的生命過(guò)程。程。并存有兩個(gè)不同遺傳性狀的核細(xì)胞。在有絲分裂過(guò)程中，同源染色體間發(fā)生的交換，從而導(dǎo)致局部基因的純合化。單元化：在有絲分裂過(guò)程中一再發(fā)生染色體不分開(kāi)行為從而形成單倍體的過(guò)程。何謂基因重組？原核微生物和真核微生物有哪些基因重組形式？DNA交換和重排的過(guò)程。Hfr*FF+*F-雜交HfrF－FHfr復(fù)制，并將一條染色體母鏈轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞。HfrDNAHfr，F(xiàn)-細(xì)胞可獲得來(lái)自于供體的FF－性質(zhì)。FF＋細(xì)胞。整合過(guò)程可分為兩步：①結(jié)合配〔F＋〕細(xì)胞外表性纖毛的游離端與受體細(xì)胞〔F－〕接觸，：traYΙoriT并將其中的一條鏈切開(kāi)，F(xiàn)5’末端為首通過(guò)細(xì)胞質(zhì)橋通道F－DNAF試區(qū)分真菌的有性雜交和準(zhǔn)性雜交試述普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)中轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒和轉(zhuǎn)導(dǎo)子的形成機(jī)制成?！舶仨樞院土倚浴城秩舅拗骷?xì)胞，噬菌體DNA〔包括烈性噬菌體的直接裂解及原噬菌體被激活〕DNA〔供體〕DNADNADNA進(jìn)噬菌體頭部，這樣就得到了轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒。DNA〕注入受體中。這樣受體中就有了供體的DNA，即轉(zhuǎn)導(dǎo)子。假設(shè)其中供體DNA不整合、不交換、不復(fù)制，但可DNADNA得完全轉(zhuǎn)導(dǎo)子。試述局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)中轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體和轉(zhuǎn)導(dǎo)子的形成機(jī)制局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)是以溫順性噬菌體為介導(dǎo)的，僅能將原噬菌體特定位點(diǎn)四周的少數(shù)基因傳遞給受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)方式。它可分為轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體的形成和轉(zhuǎn)導(dǎo)子的形成兩個(gè)階段。〔1〕轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體的形成機(jī)制—溶原性細(xì)菌被某些條件誘導(dǎo)，使DNADNADNADNA上，然后不正常的噬菌體DNA被包裝進(jìn)噬菌體頭部，這樣就形成了轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體?！?〕到受體DNA上，則形成不穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)子。假設(shè)其與受體DNA重組交換，則形成穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)子。試述原生質(zhì)體融合育種的特點(diǎn)及步驟具有一些傳統(tǒng)育種所沒(méi)有的優(yōu)勢(shì)。36步驟：親緣近一點(diǎn)ph，溫度適當(dāng)?shù)臈l件下，處理對(duì)數(shù)期細(xì)胞，菌體最好要進(jìn)展預(yù)處理〔PEG，電場(chǎng)〕誘導(dǎo)親株原生質(zhì)體融合再生融合的原生質(zhì)體：選擇適當(dāng)?shù)臐B透壓，再生培育基，培育條件篩選融合子：進(jìn)展數(shù)代培育，依據(jù)親本的遺傳標(biāo)記篩選融合子何謂核酸內(nèi)切酶？怎樣分類(lèi)？用途最廣的為哪種類(lèi)型？是一類(lèi)能夠識(shí)別雙鏈DNA分子中的某種特定核苷酸序列，并由此切割DNA雙鏈構(gòu)造的核酸限制性?xún)?nèi)切酶。依據(jù)酶的功能、大小和反響條件，及切割DNA的特點(diǎn)分為Ⅰ型酶，Ⅱ型酶和Ⅲ型酶，其中應(yīng)用最廣的是Ⅱ型酶。DNADNA分子的特異切割〔2〕DNARNA”-OHdNTPDNADNApolⅠ逐個(gè)將的聚合作用〔3〕堿性磷酸酶：催化核酸分子脫5’DNARNA5’-P5’-OHcDNA夾構(gòu)造的處理〔5〕RNADNA〔6〕DNADNA〔