色譜分析技術(shù)-高效液相色譜儀的基本操作（藥檢儀器課件）

高效液相色譜儀操作規(guī)范高效液相色譜法高壓高速高效應(yīng)用范圍廣國(guó)家藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)高效液相色譜儀規(guī)范操作學(xué)習(xí)目標(biāo)本講小結(jié)思考題高效液相色譜儀操作流程及關(guān)鍵點(diǎn)謝謝觀看泵pump單元泵二元泵四元泵結(jié)構(gòu)與工作原理二元泵兩個(gè)泵頭兩種溶劑精度高混合比例準(zhǔn)確四元泵四元比例閥四種溶劑靈活方便混合精度稍差梯度洗脫曲線梯度洗脫溶劑過(guò)濾器管道過(guò)濾器管道過(guò)濾器脈動(dòng)阻尼器高效液相色譜法高壓高速高效應(yīng)用范圍廣結(jié)構(gòu)與分類1本講小結(jié)要求與注意事項(xiàng)2單元泵二元泵四元泵在高壓下工作

輸出流量穩(wěn)定

重復(fù)性高不能有任何顆粒進(jìn)入思考題泵的種類與特點(diǎn)謝謝觀看進(jìn)樣器injector進(jìn)樣示意停流進(jìn)樣裝置手動(dòng)進(jìn)樣器學(xué)習(xí)目標(biāo)自動(dòng)進(jìn)樣器手動(dòng)進(jìn)樣器手動(dòng)進(jìn)樣器手動(dòng)進(jìn)樣器手動(dòng)進(jìn)樣器扳閥處于load與inject間阻死液流壓力驟增沖擊色譜柱頭Rheodyne公司進(jìn)樣閥Rheodyne7725i手動(dòng)進(jìn)樣器微量注射器平頭微量注射器微量注射器微量注射器自動(dòng)進(jìn)樣器拉式推式集成自動(dòng)進(jìn)樣器-拉式自動(dòng)進(jìn)樣器-拉式設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單樣品殘存難于清洗交叉污染拉式自動(dòng)進(jìn)樣器自動(dòng)進(jìn)樣器-推式自動(dòng)進(jìn)樣器-推式推式自動(dòng)進(jìn)樣器管路緊湊無(wú)樣品浪費(fèi)減少交叉污染大多采用自動(dòng)進(jìn)樣器-集成自動(dòng)進(jìn)樣器-集成自動(dòng)進(jìn)樣器-集成集成自動(dòng)進(jìn)樣器無(wú)樣品殘留需高壓密封增加成本發(fā)展快高效液相色譜法高壓高速高效應(yīng)用范圍廣種類與原理1本講小結(jié)要求與注意事項(xiàng)2手動(dòng)進(jìn)樣器：7725i+微量注射器自動(dòng)進(jìn)樣器：拉式推式集成體積準(zhǔn)確重復(fù)性好密封性好死體積小進(jìn)樣前過(guò)濾取樣準(zhǔn)確思考題項(xiàng)目六通閥拉式推式集成手動(dòng)/自動(dòng)取樣準(zhǔn)確度結(jié)果精密度樣品殘留更換定量環(huán)謝謝觀看色譜柱column色譜柱正常色譜圖拖尾峰未完全分離出峰順序改變常見(jiàn)固定相學(xué)習(xí)目標(biāo)色譜柱規(guī)格固定相基質(zhì)無(wú)機(jī)基質(zhì)-硅膠、氧化鋁聚合物基質(zhì)固定相基質(zhì)無(wú)機(jī)基質(zhì)-硅膠、氧化鋁聚合物基質(zhì)化學(xué)鍵合正相反相離子交換親和固定相基質(zhì)無(wú)機(jī)基質(zhì)-硅膠、氧化鋁聚合物基質(zhì)正相反相離子交換親和液態(tài)一定厚度液體易流失柱效下降化學(xué)鍵合固定相固定相固定相固定相柱頭塌陷峰拖尾色譜柱內(nèi)徑（i.d.）：1.0mm、2.1mm、3.0mm、4.6mm色譜柱內(nèi)徑（i.d.）：1.0mm、2.1mm、3.0mm、4.6mm長(zhǎng)度（length）：10-25cm色譜柱色譜柱常用色譜柱規(guī)格：15cm*4.6mm、25cm*4.6mm5cm*2.1mm、10cm*2.1mm10cm*3.0mm色譜柱色譜柱收集雜質(zhì)延長(zhǎng)壽命色譜柱色譜柱越長(zhǎng)

分離效果越好耗時(shí)

溶劑消耗量大色譜柱越粗

載樣量越大影響分離效果色譜柱連接管線長(zhǎng)度不夠空腔or死體積峰展寬色譜柱連接管線過(guò)長(zhǎng)漏液管線過(guò)短峰展寬柱溫箱改變分離效率分析高分子化合物分析黏度大樣品分析生物活性樣品高效液相色譜法高壓高速高效應(yīng)用范圍廣類型商品名稱生產(chǎn)廠商全多孔硅膠YQG北京化學(xué)試劑研究所YQG-1青島海洋化工廠ZorbaxSILDuPont（美）DG1-4天津化學(xué)試劑二廠PorasilA-DWaters（美）種類與規(guī)格1本講小結(jié)對(duì)分離效果影響2十八烷基硅烷鍵合硅膠C18粒徑2-10μm內(nèi)徑：1.0、2.1、3.0、4.6mm長(zhǎng)度：10-25cm固定相裝填均勻緊密管路與色譜柱連接緊密思考題謝謝觀看色譜過(guò)程與基本概念菊粉、玻璃柱、石油醚作用與名稱學(xué)習(xí)目標(biāo)色譜過(guò)程色譜過(guò)程分離色譜過(guò)程2.流動(dòng)相-流動(dòng)，氣態(tài)液態(tài)

石油醚3.固定相-固定的填充物菊粉色譜過(guò)程4.玻璃柱-裝填固定相

實(shí)現(xiàn)混合物分離

不銹鋼-色譜柱色譜過(guò)程1.混合試樣5.檢測(cè)器色譜過(guò)程t0色譜過(guò)程t1-t4色譜過(guò)程色譜過(guò)程色譜過(guò)程色譜過(guò)程色譜圖常用基本概念時(shí)間電信號(hào)強(qiáng)度色譜峰基線色譜圖常用基本概念W

峰寬通過(guò)色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)做切線，在基線上所截得的距離常用基本概念W

h/2

半峰寬峰高一半處的峰寬反映了色譜柱或所選色譜條件的好壞常用基本概念t0

死時(shí)間不被固定相保留的組分從進(jìn)樣到其在柱后出現(xiàn)濃度極大時(shí)的時(shí)間間隔常用基本概念tR

保留時(shí)間從進(jìn)樣開(kāi)始到某組分的色譜峰頂點(diǎn)的時(shí)間間隔基本定性參數(shù)tR

調(diào)整保留時(shí)間保留時(shí)間減去死時(shí)間常用基本概念‘常用基本概念A(yù)

峰面積色譜峰與基線間包圍的面積常用基本概念h

峰高色譜峰頂點(diǎn)至基線之間的垂直距離基本定量參數(shù)常用基本概念分配系數(shù)K

在固定相和流動(dòng)相中的濃度之比容量因子

k在固定相和流動(dòng)相中的質(zhì)量之比一定溫度和壓力下組分在兩相中達(dá)到分配平衡后色譜法分離效能高應(yīng)用范圍廣靈敏度