蛋白質(zhì)表達(dá)分離純化實(shí)驗(yàn)_第1頁(yè)
蛋白質(zhì)表達(dá)分離純化實(shí)驗(yàn)_第2頁(yè)
蛋白質(zhì)表達(dá)分離純化實(shí)驗(yàn)_第3頁(yè)
蛋白質(zhì)表達(dá)分離純化實(shí)驗(yàn)_第4頁(yè)
全文預(yù)覽已結(jié)束

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

（1）（3）中，在帶有6個(gè)連續(xù)組氨酸殘基的重組氯霉素?；D(zhuǎn)移酶蛋白，該蛋白可用一種通過共價(jià)偶連的（MCACLB、氨芐青霉素、WashingBufferElutionBufferIPTG、蒸餾水、胰蛋白胨、酵母粉、氯化鈉儀器、耗材：搖床、離心機(jī)、層析柱、離心管、移液槍、槍頭盒、燒杯、棒LBTrytone10g，yeastextract5g，NaCl10g1000mLWashingBuffer：100mMNaH2PO4，10mMTris，8MUrea，pH6.3ElutionBuffer：100mMNaH2PO4，10mMTris，8MUrea，500mMImidazole，pH8.0。IPTG：100mMIPTG（異丙基硫代-β-D-半乳糖苷：2.38gIPTG溶于100mlddH2O中,0.22μm濾膜抽濾，-20℃保存。通過PCR方法：以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板，按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物（在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)，PCR逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈，以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。物行瓊脂糖電泳后，用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。PCRT4DNADH5α，根據(jù)重組載體的標(biāo)志（Amp）作篩以此重組質(zhì)粒DNABL215mLLB基中（含100ug/mL氨芐青霉素，37℃震蕩培養(yǎng)過夜。100ug/mL氨芐青霉素）LB37OD600=0.6-0.8（0.6310ul樣品用于SDS分析。mmol/l3712000rpm離心10min，棄上清，菌體沉淀保存于-20℃或-70℃冰箱中。去離子水，8mL60min，4℃12000rpm離心30上清樣品用于分析。10-15mL/h流速上Ni2+-NTA10ulSDSWashingBuffer10-15mL/h流速洗柱，直至OD2803-4h10ulSDS分析。El

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間，僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請(qǐng)與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論