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不同年齡兒童過敏原檢驗(yàn)結(jié)果及分級情況分析目錄TOC\o"1-2"\h\u4667不同年齡兒童過敏原檢驗(yàn)結(jié)果及分級情況分析 116562【關(guān)鍵詞】過敏原兒童特異性免疫球蛋白E免疫印跡法年齡 189961.研究背景 1273871.1選題背景 1235211.2選題意義 2118092.資料與方法 235762.1基礎(chǔ)資料 2231322.2納排標(biāo)準(zhǔn) 288092.3檢測方法 2122282.4結(jié)果判斷 3203772.5觀察指標(biāo) 3284412.6統(tǒng)計(jì)方法 3203673.研究結(jié)果 3321253.1不同年齡兒童主要過敏原分析 384983.2不同年齡兒童陽性排名前三的過敏原分級情況分析 469803.3不同年齡段常見過敏性疾病的主要過敏原分析 5298054.討論 6281705.結(jié)論 88281參考文獻(xiàn) 8【摘要】目的:研究兒童過敏原與年齡分布的關(guān)系。方法:選擇2021年5月到2021年8月復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院收集的1170例過敏性疾病患兒作為研究對象,疾病類型包括特應(yīng)性皮炎,支氣管炎,過敏性鼻炎,蕁麻疹、濕疹等。根據(jù)其年齡不同將其分成0~1歲(n=230)、2~3歲(n=236)、4~6歲(n=348)、7~12歲(n=294)、13~18歲(n=62)5組,采用免疫印跡法對患兒過敏原特異性免疫球蛋白E(IgE)抗體進(jìn)行檢測,對不同年齡階段患兒過敏原檢測結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果:牛奶、戶塵螨、雞蛋白在全年齡段中占比處于較高水平,牛奶和雞蛋白在3歲以前的患兒中占比處于較高水平,在3歲以后,牛奶和雞蛋白占比水平逐漸下降,戶塵螨、粉塵螨占比水平增高;隨著年齡上升,過敏性鼻炎和支氣管炎占比逐漸上升,4-5歲后食物過敏比例下降;牛奶、雞蛋白在各年齡段中過敏分級均較為輕微,主要以一、二級為主,患兒在4-18歲時(shí)戶塵螨過敏分級在二~四級為主。結(jié)論:牛奶、戶塵螨、雞蛋白為各年齡段患兒主要接觸的過敏原;隨著患兒年齡增加,吸入性過敏增多而食入性過敏降低,特異性皮炎和食物過敏相對減少,而過敏性鼻炎和支氣管炎占比相對增加,患兒過敏分級明顯增加?!娟P(guān)鍵詞】過敏原兒童特異性免疫球蛋白E免疫印跡法年齡1.研究背景1.1選題背景隨著全球氣候變暖、工業(yè)化進(jìn)程加快,植被分布變化及人們飲食和生活習(xí)慣改變,過敏性疾病在兒童群體中的發(fā)生比例逐漸增加,使得其生活學(xué)習(xí)工作受到較大的影響[1]。特異性皮炎、兒童哮喘、過敏性鼻炎均為臨床較常見過敏性疾病,給患兒生活及學(xué)習(xí)帶來嚴(yán)重影響,尤其是過敏性鼻炎引起的鼻塞等癥狀,可能使得患兒因?yàn)楹粑鼡Q氣不充分而引起機(jī)體血氧供應(yīng)短缺,對其身體及神經(jīng)發(fā)育產(chǎn)生一定阻礙,盡管嚴(yán)重威脅人們的健康,但又因?yàn)槠鋸?fù)雜的病因和發(fā)病機(jī)制,使得其缺少可根治的方法。1.2選題意義過敏性疾病在18歲以下兒童或青少年中較為常見,伴隨社會(huì)生產(chǎn)力的提高,人們的生活條件也得到明顯改善,而過敏性疾病的發(fā)生比例卻隨著可接觸過敏原的增多而呈現(xiàn)逐年增高趨勢。作為刺激機(jī)體而造成其免疫異常的主要原因,過敏原對于過敏性疾病的發(fā)病及病情發(fā)展均有重要的促進(jìn)作用,但不同的過敏原對于不同年齡患兒的發(fā)病時(shí)間、發(fā)病嚴(yán)重程度均會(huì)造成不同的影響,因而了解不同年齡兒童過敏原對于指導(dǎo)臨床醫(yī)師采取相應(yīng)的干預(yù)方式有重要意義。2.資料與方法2.1基礎(chǔ)資料選擇2021年10月到2021年10月本地某三甲醫(yī)院收集的1170例存在過敏性疾病患兒作為研究對象,根據(jù)其年齡不同將其分成0~1歲(n=230)、2~3歲(n=236)、4~6歲(n=348)、7~12歲(n=294)、13~18歲(n=62)5組,包括男性患兒700例,女性患兒470例;疾病類型包括特應(yīng)性皮炎181例,支氣管炎133例,過敏性鼻炎138例,皮疹(包括蕁麻疹、濕疹等)78例,食物過敏324例,其他497例。本研究經(jīng)該醫(yī)院倫理審核后批準(zhǔn)實(shí)行。2.2納排標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn):(1)參照《中國兒童過敏原檢測臨床應(yīng)用專家共識》[2]相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),所有患兒均被診斷為不同的過敏性疾病,且可檢測出明確的過敏原;(2)年齡<18歲;(3)有完整的病理資料且其監(jiān)護(hù)人簽字同意參與調(diào)查。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)過敏性疾病急性發(fā)作期患兒;(2)接受檢查前已服用免疫抑制類藥物;(3)不能按照要求完成血樣采集。2.3檢測方法使AllergyScreen過敏原半定量檢測系統(tǒng)(德國Mediwiss公司產(chǎn)品)檢測清特異性免疫球蛋E(sIgE)。方法如下:于清晨手機(jī)患兒空腹靜脈血2ml,離心后在2h內(nèi)通過免疫印跡法對患兒血清中引起過敏的29種sIgE進(jìn)行檢測;待系統(tǒng)恢復(fù)至室溫,用配好的清洗液對硝酸纖維素膜進(jìn)行濕潤處理,然后在檢測板上加入些許待測血清,采用混勻器將其攪拌勻稱,通過室溫孵育近1h,以待測內(nèi)容物中的過敏原免疫球蛋白E(IgE)和依附在硝酸纖維素膜上的過敏原發(fā)生抗原抗體特異性反應(yīng)為宜,對反應(yīng)槽進(jìn)行沖刷后加入標(biāo)記生物素的抗人IgE抗體與抗原抗體復(fù)合物反應(yīng),在沖洗后加入250結(jié)合有堿性磷酸酶的鏈霉親和素標(biāo)記物,孵育一刻鐘后再次沖洗,加入底物BCIP/NBT,孵育一刻鐘后通過流水對底物酶顯色反應(yīng)進(jìn)行終止,待其已不再濕潤時(shí)可通過儀器顯示數(shù)字對其數(shù)值進(jìn)行讀取。2.4結(jié)果判斷當(dāng)儀器顯示的數(shù)值范圍<0.35IU/ml時(shí)為陰性,儀器顯示數(shù)值≥0.35IU/ml時(shí)為陽性。2.5觀察指標(biāo)分析不同年齡患兒主要過敏原分布,包括牛奶、戶塵螨、粉塵螨、熱帶無瓜螨、混合菌、雞蛋白、狗毛皮屑、蝦/蟹、貓毛皮屑、煙曲霉、牛肉/羊肉、雞蛋黃、六月禾/黑麥草/梯牧草、花生/黃豆、懸鈴木/白蠟、小麥/蕎麥、藜/反枝莧、葎草、桃/蘋果/芒果/荔枝/草莓、復(fù)葉槭/桑/洋槐/榆/柏/構(gòu)樹、榿/楊/柳/山毛櫸/橡/胡桃、矮豚草、腰果/開心果/榛子/杏仁/核桃、蠶絲、蟑螂、刺柏/樺、魚、艾蒿、芝麻等。分析陽性排名在前三的過敏原在不同年齡患兒中的分級情況,根據(jù)過敏原檢測儀的數(shù)值顯示范圍對患兒過敏程度進(jìn)行分級,其中<0.35IU/ml為0級;0.35-0.7IU/ml為一級;0.7-3.5IU/ml為二級;3.5-17.5IU/ml為三級;17.5-50IU/ml為四級;50-100IU/ml為五級;>100IU/ml為六級。2.6統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS22.0軟件,計(jì)數(shù)資料采用頻數(shù)和百分?jǐn)?shù)表示,組間比較采用卡方檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.研究結(jié)果3.1不同年齡兒童主要過敏原分析對1170例存在過敏性疾病患兒過敏原進(jìn)行分析,牛奶和雞蛋白在3歲以前的患兒中占比處于較高水平,發(fā)生率分別為39.9%(388/1170)、33.7%(388/1170);在3歲以后,牛奶和雞蛋白占比水平逐漸下降,戶塵螨、粉塵螨占比水平增高,發(fā)生率分別為42.9%(388/1170)、38.4%(388/1170);牛奶、戶塵螨、雞蛋白在全年齡段中占比處于較高水平,總發(fā)生率分別為63.93%(748/1170)、36.07%(422/1170)、33.16%(388/1170);見表1。表1不同年齡兒童主要過敏原分析(n,%)過敏原0-1歲(n=230)1-3歲(n=236)3-6歲(n=348)6-12歲(n=294)12-18歲(n=62)例數(shù)百分比例數(shù)百分比例數(shù)百分比例數(shù)百分比例數(shù)百分比吸入性過敏原戶塵螨3816.528335.1714842.5312642.862743.55粉塵螨177.394719.9212736.499833.332438.71熱帶無瓜螨166.962510.596719.257726.191524.19混合霉菌104.354619.4987257525.512540.32狗毛皮屑5825.224820.347621.845318.031016.13艾蒿62.6172.97144.02124.0846.45貓毛皮屑3314.353816.15315.234013.6158.06煙曲霉135.65114.66329.2299.8658.06蠶絲104.35104.24174.89103.469.68蟑螂73.0493.81164.6237.8269.68刺柏/樺31.3198.05174.89155.158.06復(fù)葉槭/桑/洋槐/榆/柏/構(gòu)樹114.78104.24329.2206.834.84榿/楊/柳/山毛櫸/橡/胡桃...135.65145.93277.76165.4469.68矮豚草104.3593.81257.18155.1711.29懸鈴木/白蠟135.652410.173510.063411.561016.13藜/反枝莧187.83166.78267.47299.86914.52葎草135.65114.66216.03217.1446.45六月禾/黑麥草/梯牧草187.83229.32339.48258.5914.52食入性過敏原牛奶14964.7817373.3124770.9815452.382540.32花生/黃豆3716.092811.865916.953712.5969.68小麥/蕎麥2410.433313.986418.393612.2434.84桃/蘋果/芒果/荔枝/草莓125.22177.2288.05289.5234.84牛肉/羊肉3615.654117.377220.696522.111117.74雞蛋黃3213.913816.17521.554715.99914.52腰果/開心果/榛子/杏仁/核桃156.52229.32277.76248.1669.68雞蛋白6829.578937.7113137.649231.29812.9蝦/蟹5222.616427.128022.994615.65711.29魚114.78177.2349.77258.523.23芝麻52.17156.36236.61165.4434.843.2不同年齡兒童陽性排名前三的過敏原分級情況分析在所有患兒中,陽性率排名前三的過敏原分別為牛奶、戶塵螨、雞蛋白,分別占其總數(shù)的63.93%(748/1170)、36.07%(422/1170)、33.16%(388/1170);牛奶、雞蛋白在各年齡段中過敏分級均較為輕微,主要以一、二級為主,患兒在4-18歲時(shí)戶塵螨過敏分級在二~四級為主,見表2。表2不同年齡兒童陽性排名前三的過敏原分級情況分析(n,%)過敏原0-1歲(n=230)2-3歲(n=236)4-6歲(n=348)7-12歲(n=294)13-18歲(n=62)例數(shù)百分比例數(shù)百分比例數(shù)百分比例數(shù)百分比例數(shù)百分比牛奶一級146.09125.08174.8951.7023.23二極5122.175523.315014.374916.671117.74三級2410.433012.717120.404013.6134.84四級00.0000.000.0000.0000.00五級00.0000.0000.0000.0000.00六級00.0000.0000.0000.0000.00戶塵螨一級2611.303715.68205.75258.5046.45二極104.352711.445014.373612.2458.06三級10.43166.784613.223913.27711.29四級10.4331.27308.62186.12914.52五級00.0000.0010.2931.0223.23六級00.0000.0010.2951.7000.00雞蛋白一級2510.874318.225415.526020.4146.45二極3013.043816.105515.80299.8646.45三級104.3572.97195.4620.6800.00四級20.8710.4230.8600.0000.00五級10.4300.0000.0010.3400.00六級00.0000.0000.0000.0000.003.3不同年齡段常見過敏性疾病的主要過敏原分析本次實(shí)驗(yàn)分析了最常見4種的過敏性疾?。ㄌ貞?yīng)性皮炎、過敏性鼻炎、食物過敏、支氣管炎)在各年齡段的占比和該疾病的主要過敏原。發(fā)現(xiàn)0-1歲的患兒過敏性疾病以特應(yīng)性皮炎和食物過敏為主;隨著年齡上升,過敏性鼻炎和支氣管炎占比逐漸上升,4-5歲后食物過敏比例下降。0-1歲患兒患特應(yīng)性皮炎和食物過敏的主要過敏原為雞蛋白和牛奶;各年齡段支氣管炎和過敏性鼻炎的致敏原主要以塵螨為主,混合霉菌也是過敏性鼻炎的主要過敏原之一。見表3、表4。表3各年齡段常見過敏性疾病分析(n,%)年齡段特應(yīng)性皮炎(%)過敏性鼻炎(%)食物過敏(%)支氣管炎(%)0-1歲(n=230)82(35.7)11(4.8)31(13.5)11(4.8)2-3歲(n=236)30(12.7)33(14.0)25(10.6)43(18.2)4-6歲(n=348)31(8.9)65(18.7)20(6.0)70(20.1)7-12歲(n=294)19(6.5)44(15.0)17(5.7)38(6.8)13-18歲(n=62)9(14.5)9(14.5)4(6.5)5(8)表4不同年齡兒童陽性排名前三的過敏原分級情況分析年齡主要過敏性疾病主要過敏原例數(shù)占比0-1歲特應(yīng)性皮炎(n=82)雞蛋白2732.9%牛奶3542.7%食物過敏(n=31)雞蛋白929%牛奶825.8%2-3歲支氣管炎(n=43)戶塵螨1637.2%粉塵螨1023.3%混合霉菌1023.3%過敏性鼻炎(n=33)戶塵螨1030.3%狗毛皮屑927.2%4-6歲支氣管炎(n=70)戶塵螨2941.4%粉塵螨2231.4%過敏性鼻炎(n=65)戶塵螨1726.1%混合霉菌1726.1%7-12歲過敏性鼻炎(n=44)戶塵螨1738.6%混合霉菌1636.4%支氣管炎(n=38)戶塵螨1231.6%粉塵螨923.7%13-18歲特應(yīng)性皮炎(n=9)牛奶444.5%過敏性鼻炎(n=9)戶塵螨555.6%4.討論過敏性疾病在18歲以下兒童或青少年中較為常見,伴隨社會(huì)生產(chǎn)力的提高,人們的生活條件也得到明顯改善,而過敏性疾病的發(fā)生比例卻隨著可接觸過敏原的增多而呈現(xiàn)逐年增高趨勢。過敏原作為過敏性疾病中已明確的主要病因,對于過敏性疾病的發(fā)生起直接刺激作用,因而增加有關(guān)過敏原的檢測對于降低過敏性疾病的發(fā)生率有重要意義[3]。我國地域范圍寬廣,氣候條件和地理環(huán)境在不同地區(qū)都有一定差異,過敏原的種類也有部分存在季節(jié)性和地域性特征,因而檢測不同種類過敏原對于制定合適的過敏譜、針對性的預(yù)防過敏性疾病十分關(guān)鍵。本研究結(jié)果顯示,牛奶、戶塵螨、雞蛋白在全年齡段中占比處于較高水平,總發(fā)生率分別為63.93%、36.07%、33.16%;牛奶和雞蛋白在3歲以前的患兒中占比處于較高水平,發(fā)生率分別為39.9%、33.7%;在3歲以后,牛奶和雞蛋白占比水平逐漸下降,戶塵螨、粉塵螨占比水平增高,發(fā)生率分別為42.9%、38.4%,提示患兒過敏原在不同年齡呈現(xiàn)階段性特征,但牛奶和戶塵螨是兒童所接觸的主要過敏原。牛奶過敏是兒童較常見現(xiàn)象,兒童從斷奶期過度時(shí)往往需要通過喝牛奶替代,這就給患兒發(fā)生牛奶過敏提供了機(jī)會(huì)[4]。一般的食物過敏是由IgE所介導(dǎo)的,當(dāng)患兒食入牛奶后,變應(yīng)原特異性淋巴細(xì)胞分化的漿細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生牛奶特異性sIgE并于組織肥大細(xì)胞的表面結(jié)合,使得患兒因?yàn)橹匦陆佑|到牛奶時(shí),食物中的抗原蛋白質(zhì)和肥大細(xì)胞表面結(jié)合的sIgE結(jié)合,使得肥大細(xì)胞釋放組胺和白三烯等細(xì)胞因子相關(guān)介質(zhì),導(dǎo)致過敏反應(yīng)。亞熱帶地區(qū)氣候濕潤,雨量充沛,而這給依賴溫度和濕度的螨蟲提供了安穩(wěn)的生長環(huán)境,兒童的社會(huì)活動(dòng)相對單一,室內(nèi)時(shí)間較多,增加了患兒與室內(nèi)過敏原的接觸時(shí)間,這點(diǎn)也會(huì)隨著兒童自身免疫系統(tǒng)的逐漸成熟使得陽性率不斷增高。且隨著兒童年齡增高,逐漸被足球、籃球等戶外運(yùn)動(dòng)所吸引,與室外接觸增多,從而增加粉塵螨過敏幾率。王小勇[5]等的研究顯示,戶塵螨、粉塵螨等在各種疾病中的標(biāo)準(zhǔn)貫入實(shí)驗(yàn)陽性率均顯示最高水平,這表明螨蟲可引起Ⅰ型變態(tài)反應(yīng),又可以引起Ⅳ型變態(tài)反應(yīng),所以是過敏性鼻炎、哮喘、特應(yīng)性皮炎和蕁麻疹中主要的致敏原,與本研究結(jié)果相符。雞蛋包含豐富的營養(yǎng),也是人們攝取蛋白質(zhì)的重要來源。把雞蛋黃雞蛋白作為兩種過敏原區(qū)分檢測,便于兒童對雞蛋不致敏成分的營養(yǎng)獲取。不少家長相信雞蛋可以給兒童提供營養(yǎng)而將其作為兒童飲食的主要部分,兒童對雞蛋過敏時(shí),便避開食用雞蛋,雞蛋白相比雞蛋黃的陽性率更高,多數(shù)兒童對雞蛋的過敏為對雞蛋白的過敏,此時(shí)可避開雞蛋白,食用雞蛋黃以攝取營養(yǎng)。隨著年齡增加,吸入性過敏增加,而食入性過敏降低。0-1歲的患兒過敏性疾病以特應(yīng)性皮炎和食物過敏為主,主要過敏原為雞蛋白和牛奶;隨著年齡上升,過敏性鼻炎和支氣管炎占比逐漸上升,4-5歲后食物過敏比例下降。推測是因?yàn)椴煌挲g兒童所接觸的過敏原種類和概率不同使得不同年齡兒童對過敏原的免疫耐受性不同,嬰幼兒在出生后即食入大量蛋白質(zhì),但其胃腸功能尚不健全,使得胃腸道對于蛋白的分泌水平降低,腸道通透性增加,讓其更容易受到食入性過敏原的侵?jǐn)_而發(fā)生過敏現(xiàn)象。但年齡增長后,患兒因?yàn)殚L期使用雞蛋白、牛奶等食物,從而產(chǎn)生免疫耐受,因而其過敏發(fā)生;且由于兒童年齡增長后期戶外接觸塵螨的概率增加,且由于不像雞蛋白、牛奶等在此前經(jīng)受長期的接觸,未形成免疫耐受,因此吸入性過敏原明顯增加。此外患兒過敏疾病類型也因?yàn)檫^敏原構(gòu)成的改變而出現(xiàn)明顯變化,0-1歲患兒接觸的主要過敏原為食物,因而其過敏以食物過敏為主,另外幼兒因缺少防護(hù),喜歡在地上爬滾,從而沾染細(xì)菌或貓狗毛屑從而以前你特異性皮炎。但隨著年齡增加,其活動(dòng)范圍由戶內(nèi)轉(zhuǎn)向戶外,且在進(jìn)入幼兒園、學(xué)校后不同個(gè)體之間攜帶的病原微生物可能較差感染,從而引發(fā)呼吸道感染,大大增加了過敏性鼻炎和支氣管哮喘的發(fā)生率。陽性率排名前三的過敏原分別為牛奶、戶塵螨、雞蛋白,分別占其總數(shù)的63.93%、36.07%、33.16%;牛奶、雞蛋白在各年齡段中過敏分級均較為輕微,主要以一、二級為主,患兒在4-18歲時(shí)戶塵螨過敏分級在二~四級為主,這主要是由于患兒4歲以后戶外活動(dòng)增加,對于各種過敏原的接觸更為頻繁,其過敏反應(yīng)也會(huì)逐漸變得更為嚴(yán)重;而4歲以前患兒多在家中活動(dòng),接觸的過敏原有限,且接觸時(shí)間不長不至于引起過于嚴(yán)重的過敏反應(yīng);另外從免疫機(jī)制分析,在嬰幼兒時(shí)期免疫機(jī)制尚未發(fā)育完全,因而其過敏引起的免疫反應(yīng)也會(huì)較為輕微,但隨著四歲以后年齡增加,免疫機(jī)制逐漸發(fā)育完善,在接觸過敏原后引起的免疫反應(yīng)也會(huì)更為強(qiáng)烈。另外,傳統(tǒng)的過敏原檢測實(shí)驗(yàn)主要通過皮膚針刺實(shí)驗(yàn)進(jìn)行,但針刺實(shí)驗(yàn)多會(huì)引起患兒痛苦或產(chǎn)生劃痕,兒童多不易接受[6]。因而本研究通過采用近年來發(fā)展起來的免疫印跡檢測法對患兒過敏原進(jìn)行檢測,較皮膚點(diǎn)刺試驗(yàn)更加穩(wěn)定、標(biāo)準(zhǔn)化,可重復(fù)性較強(qiáng),有良好的應(yīng)用效果。5.結(jié)論綜上所述,牛奶、戶塵螨和雞蛋白是引起兒童過敏的主要過敏原,但隨著3歲以后年齡增加,以牛奶和
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