阿膠化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展

阿膠化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展

阿富汗是馬科動(dòng)物的祖先。它是通過煮沸和濃縮新鮮皮膚而成的干燥皮膚。人參和鹿也被稱為“營(yíng)養(yǎng)之王”。它被記錄在《神農(nóng)本草經(jīng)》中，并被列為優(yōu)秀。陶洪景說，“因?yàn)樗錾跂|方，所以叫阿薩米?！?。阿膠味甘、性平,歸肺、肝、腎經(jīng)。具有補(bǔ)血滋陰、潤(rùn)燥、止血之功效,被歷代醫(yī)家尊稱為補(bǔ)血“圣藥”。主治血虛萎黃,眩暈心悸,肌痿無力,心煩不眠,虛風(fēng)內(nèi)動(dòng),肺燥咳嗽,癆咳咯血,吐血尿血,便血崩漏,妊娠胎漏。近代醫(yī)藥工作者運(yùn)用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的觀點(diǎn)和現(xiàn)代化技術(shù)手段,對(duì)其化學(xué)成分及有效物質(zhì)基礎(chǔ)、藥理作用及其機(jī)理作用和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等進(jìn)行了多方面的探討和研究,并取得了顯著的研究成果。綜述如下,以饗同行。1化學(xué)成分及其有效物質(zhì)基礎(chǔ)研究1.1蛋白質(zhì)凝膠的組成阿膠多由膠原蛋白(Collagen)和多肽類物質(zhì)、多糖類物質(zhì)及其它小分子物質(zhì)組成。蛋白質(zhì)和氨基酸主要是在制膠過程中膠原蛋白中的肽鍵(-CO-NH-CO-)部分?jǐn)嗔?形成的一系列降解產(chǎn)物。阿膠的蛋白類含量約為60%~80%左右,主要蛋白質(zhì)有3種:驢血清白蛋白、驢膠原蛋白α1(Ⅰ)型和驢膠原蛋白α2(Ⅰ)型,其中血清白蛋白的含量最高;并推測(cè)血清白蛋白和膠原蛋白可能大量地以結(jié)合的狀態(tài)存在于阿膠中。含有18種氨基酸(包括7種人體必需氨基酸),27種微量元素,其中必需微量元素有Fe、Cu、Zn、Mn、Cr、Ni、V、Sr等9種(目前認(rèn)為必需微量元素為14種,尤以前四種微量元素含量最豐富)。阿膠中還含有硫酸皮膚素(DS)和透明質(zhì)酸(HA)等多糖類及其降解、結(jié)合成分。劉穎等采用分級(jí)過濾法,分離出阿膠(東阿阿膠批號(hào):901212、910313,2批)的有效成分(阿膠的組成可以分為三部分,一是小分子部分:包括糖、無機(jī)鹽、低級(jí)脂肪醇和酸等;二是大分子部分:主要是蛋白類物質(zhì);三是不溶性雜質(zhì))進(jìn)行測(cè)定,用其含量和特性來衡量阿膠的質(zhì)量,并可進(jìn)一步作組分的特性研究。1.2小鼠體內(nèi)各組分的抗凝作用楊帆等模擬人體胃、腸消化過程建立了人工消化模型來處理阿膠,然后運(yùn)用超濾膜技術(shù)將其按照分子量大小分成3個(gè)組分,即組分A,分子量小于5000;組分B,分子量在5000~8000之間;組分C,分子量大于8000,并且對(duì)這3個(gè)組分的補(bǔ)血效果在體內(nèi)體外進(jìn)行比較。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,A、B、C3個(gè)組分對(duì)小鼠骨髓細(xì)胞都有不同程度的增殖作用,增殖幅度分別為50%、40%、20%,且這種增殖作用呈現(xiàn)一定的濃度依賴性;A組分能有效保護(hù)細(xì)胞不受阿霉素毒性的影響,而B組分的效果不明顯。A、B組分能改善貧血?jiǎng)游锏募t白細(xì)胞數(shù),且A組分比B組分效果明顯;A、B組分的療效是通過刺激骨髓中造血干祖細(xì)胞的增殖分化來實(shí)現(xiàn)的,且A組分比B組分效果明顯。由此可以推斷,阿膠產(chǎn)生藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)是其中分子量較小的組分。朱新生等對(duì)阿膠進(jìn)行特殊處理,提取出“生物酸”成分,并對(duì)其進(jìn)行了抗凝及實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍作用研究。結(jié)果顯示,“生物酸”具有明顯的抗凝及抑制潰瘍的作用。2關(guān)于阿托戈斯藥理作用和作用的機(jī)制研究2.1阿托斯基文的療效2.1.1復(fù)方膠囊的補(bǔ)血作用阿膠具有顯著的抗貧血作用。李宗鐸等利用60Coy射線輻射法、失血法、2%苯肼、環(huán)磷酰胺和馬利蘭致貧血法,造成小鼠貧血,灌服以阿膠為主藥的復(fù)方阿膠膏,考察其補(bǔ)血作用。結(jié)果顯示,復(fù)方阿膠膏可以糾正輻射致貧血和失血性貧血;升高2%苯肼致溶血性貧血的Hb、RBC和RBC壓積;對(duì)環(huán)磷酰胺、馬利蘭等化療藥物致貧血小鼠模型有一定治療作用。2.1.2復(fù)方膠囊的聯(lián)合應(yīng)用劉培民等在進(jìn)行以阿膠為君藥的復(fù)方阿膠漿對(duì)荷S180肉瘤小鼠抑瘤、延長(zhǎng)生存期及聯(lián)合化療藥增效減毒的實(shí)驗(yàn)中,發(fā)現(xiàn)復(fù)方阿膠漿針對(duì)S180肉瘤具有一定的抑瘤作用,可明顯延長(zhǎng)荷瘤小鼠的生存時(shí)間,有效緩解放化療所帶來的免疫力低下、體重下降和降低繼發(fā)感染性死亡的幾率,聯(lián)合化療應(yīng)用具有協(xié)同增效作用,增效率達(dá)到了24.46%,并可減少化療所帶來的白細(xì)胞減少及免疫力低下等副作用。2.1.3協(xié)同給藥對(duì)小鼠細(xì)胞免疫和嘴唇免疫功能的影響李志等采用小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)、小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(MTT法)、小鼠血清溶血素滴度測(cè)定(血凝法)和小鼠脾細(xì)胞抗體生成試驗(yàn),研究阿膠口服液對(duì)小鼠細(xì)胞免疫和體液免疫功能的影響,并探討和分析阿膠口服液對(duì)小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用。試驗(yàn)結(jié)果表明,阿膠口服液能夠提高小鼠的細(xì)胞免疫和體液免疫功能,對(duì)小鼠的免疫功能有正向調(diào)節(jié)作用。2.1.4用于心血管系統(tǒng)的藥物2.1.4.復(fù)血對(duì)血壓的影響用麻醉貓經(jīng)反復(fù)由股動(dòng)脈放血造成嚴(yán)重的出血性休克模型,靜注5%~6%阿膠溶液約8mL·kg-1,使血壓下降,經(jīng)每次10mL反復(fù)注射等滲氯化鈉溶液4次,血壓無明顯升高。當(dāng)隨即改為靜注5%阿膠溶液20mL后,血壓即漸漸恢復(fù)至正常高度。另外,還觀察了阿膠對(duì)內(nèi)毒素性休克犬的血液動(dòng)力學(xué)、流變學(xué)、球結(jié)膜微循環(huán)及其存活時(shí)間的影響。結(jié)果表明,給內(nèi)毒素2h后,阿膠組血壓明顯高于對(duì)照組,6h后,體循環(huán)總阻力明顯低于對(duì)照組,差異顯著(P<0.01);阿膠能明顯降低內(nèi)毒素性休克所造成之升高的全血粘度及血漿相對(duì)粘度,但不能阻止內(nèi)毒素引起的血細(xì)胞比容的增加;阿膠能使內(nèi)毒素性休克犬的球結(jié)膜微循環(huán)障礙減輕,或盡快恢復(fù)正常;還能延長(zhǎng)內(nèi)毒素休克犬的存活時(shí)間(P<0.05)。2.1.4.2.血管的滲透性梁柳文報(bào)道,阿膠能擴(kuò)張血管,縮短活化部分凝血酶原時(shí)間(APTT),提高血小板數(shù),降低病變血管的通透性。2.1.5血清鈣、磷含量和陣風(fēng)pla的測(cè)定熊元君等對(duì)由維甲酸鈣造成骨質(zhì)疏松癥的大鼠灌服阿膠鈣口服液試驗(yàn),認(rèn)為可提高血清鈣、磷含量,使已降低的PLA升高,增加股骨鈣、磷含量和骨質(zhì)密度。同樣也可增加缺乏維生素D而致佝僂病模型大鼠血清鈣、磷含量,降低ALP活性,升高股骨中Ca、P含量,X光片顯示,骨質(zhì)有明顯改善。2.1.6其主要表現(xiàn)為肌軟烷回血倪章祺用低蛋白喂養(yǎng)豚鼠使發(fā)生進(jìn)行性肌營(yíng)養(yǎng)障礙,出現(xiàn)輕者行動(dòng)如跛足狀、行動(dòng)困難,重者癱痹難起立、發(fā)育障礙、瘦削虛弱等癥狀。然后用阿膠拌在正常食物中治療,經(jīng)過6~19周。其肌軟跛癱癥狀逐漸減輕,其中40%癥狀消失。在進(jìn)行性營(yíng)養(yǎng)性肌變性時(shí),一般尿中肌酐系數(shù)降低,而肌酸系數(shù)升高。經(jīng)阿膠治療者肌酐與肌酸一般可逐漸恢復(fù)正常。同時(shí)肌肉內(nèi)酸含量增加明顯。2.1.7天麻、難以聯(lián)合應(yīng)用的研究劉培民等探討以阿膠為君藥的復(fù)方阿膠漿對(duì)小鼠抗疲勞、耐寒和耐缺氧的作用,3個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,復(fù)方阿膠漿可顯著提高小鼠耐疲勞能力、耐寒能力和耐缺氧作用。2.1.8增強(qiáng)記憶的作用。胡俊峰等探討了天麻和阿膠對(duì)亞慢性鉛中毒所致海馬超微結(jié)構(gòu)及學(xué)習(xí)記憶功能損害的保護(hù)作用。對(duì)大鼠進(jìn)行亞慢性醋酸鉛染毒,試驗(yàn)組分別給予天麻、阿膠或天麻、阿膠聯(lián)合應(yīng)用,監(jiān)測(cè)血鉛濃度,利用Y型迷宮測(cè)定各組學(xué)習(xí)記憶功能,并利用透射電鏡技術(shù)觀察各組海馬CA3區(qū)錐體細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果天麻、阿膠對(duì)鉛致海馬CA3區(qū)神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)及功能的損害均具有保護(hù)作用,從而改善學(xué)習(xí)記憶損傷,且有聯(lián)合增強(qiáng)效應(yīng)。2.1.9雙歧因子的作用田碧文等研究認(rèn)為,阿膠含有多糖成分,能起到雙歧因子的作用,從而促進(jìn)雙歧桿菌的生長(zhǎng)。因此,應(yīng)用阿膠具有促進(jìn)正常菌群的生長(zhǎng),維護(hù)機(jī)體微生態(tài)平衡,以達(dá)到有病治病、無病保健的目的。2.1.1方差分析和細(xì)胞因子檢測(cè)高云等探討了阿膠對(duì)骨愈合過程中相關(guān)基因表達(dá)的影響,結(jié)果,阿膠在骨愈合早、中期可促進(jìn)I、Ⅱ、Ⅲ型前膠原的mRNA、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β1mRNA)的表達(dá),因此阿膠可加強(qiáng)巨核細(xì)胞的聚集及增強(qiáng)其活性,并可促進(jìn)軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞的增殖及合成活性,加快軟骨內(nèi)骨化,促進(jìn)骨愈合作用。王忱等探討了阿膠作為預(yù)襯基質(zhì)在滌綸血管對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞化細(xì)胞貼壁率和內(nèi)皮細(xì)胞增生特性的改善作用。通過細(xì)胞分離、培養(yǎng)、電子顯微鏡等技術(shù),以人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞滌綸血管種植后24h的貼壁率為指標(biāo),以預(yù)襯基質(zhì)纖維結(jié)合(FN)、明膠、血漿為對(duì)照,研究阿膠作為預(yù)襯基質(zhì)的可行性;又使用體外內(nèi)皮細(xì)胞分離、種植、培養(yǎng)、H-胸腺嘧啶核苷摻入液體閃爍測(cè)量法等技術(shù),研究阿膠作為預(yù)襯基質(zhì)在滌綸人工血管對(duì)人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增生特性的影響,從預(yù)襯基質(zhì)對(duì)種植內(nèi)皮細(xì)胞增生特性影響角度研究阿膠作為預(yù)襯基質(zhì)的優(yōu)劣。趙福東等探討了阿膠對(duì)哮喘大鼠氣道炎癥及外周血Ⅰ型/Ⅱ型T輔助細(xì)胞因子的影響。結(jié)果表明,與哮喘模型組比較,阿膠低、中劑量組和斯奇康組IL-4水平顯著降低(P<0.01),NS對(duì)照組、阿膠低、中劑量組和斯奇康組人鼠肺組織嗜酸性細(xì)胞浸潤(rùn)程度也明顯減輕。2.2關(guān)于阿爾伯茨藥理作用的機(jī)制研究2.2.1蘇氨酸、組氨酸、氨基酸阿膠中的甘氨酸通過調(diào)節(jié)血清鐵,促進(jìn)血紅蛋白的合成;精氨酸可使機(jī)體生長(zhǎng)素和睪丸酮分泌增多,促進(jìn)血紅蛋白的合成;蘇氨酸、組氨酸、賴氨酸均具有生血作用。阿膠含有豐富的鐵元素和大量的動(dòng)物蛋白,是一種極易吸收的鐵補(bǔ)充劑,長(zhǎng)期服用可使機(jī)體內(nèi)鐵元素的攝入量增多,恢復(fù)鐵元素在體內(nèi)的生理功能,有效地控制缺鐵性貧血。銅為數(shù)十種酶的重要成分和紅血球的組成元素,同時(shí)促進(jìn)鐵的利用和造血過程,并參與免疫機(jī)制和彈性蛋白的合成。2.2.2血微環(huán)境的作用阿膠依靠它所含有的同其他一切胚胎樣組織相似的微環(huán)境物質(zhì),去改善造血微環(huán)境(HematopoieticInductiveMicroenvironment,HIM)。阿膠的治療作用就是要提供HIM中作用于干細(xì)胞進(jìn)一步增殖分化的誘導(dǎo)物質(zhì)。此學(xué)說尚待在深化研究。2.2.3羧酸類基結(jié)構(gòu)阿膠的藥效與其特有的聚負(fù)離子基(polyanionicgroup)結(jié)構(gòu)有關(guān),負(fù)離子基是指生物大分子中含有的羧基、硫酸酯基、硫酸基、磷?；然鶊F(tuán)。阿膠的這種結(jié)構(gòu)形成和阿膠的成分關(guān)系密切,阿膠中性氨基酸和酸性氨基酸含量高,其中甘氨酸18.83%,脯氨酸9.40%,谷氨酸8.63%,這樣具備了聚負(fù)離子基結(jié)構(gòu)形成的物質(zhì)基礎(chǔ)。阿膠制備過程中疏水性的膠原蛋白在溫度、水分、時(shí)間的作用下變成“親水性膠體”這一結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變,才形成獨(dú)特的聚負(fù)離子基結(jié)構(gòu)。2.2.4其他2.2.4.促進(jìn)正相造血細(xì)胞因子釋放和抑制負(fù)相造血因子分離的需要吳宏忠等報(bào)道,阿膠升高紅、白血球的作用機(jī)制可能與保護(hù)貧血小鼠造血微環(huán)境和造血干、祖細(xì)胞,刺激髓外造血器官相關(guān)造血細(xì)胞因子表達(dá)有關(guān),即與促進(jìn)正相造血細(xì)胞因子釋放和抑制負(fù)相造血因子分泌有關(guān)。在對(duì)阿膠有效組分對(duì)輻射損傷小鼠造血系統(tǒng)的保護(hù)作用研究中,結(jié)果表明阿膠補(bǔ)血、減少輻射對(duì)造血系統(tǒng)的損傷至少涉及了兩個(gè)通路的調(diào)節(jié)過程,即機(jī)體調(diào)節(jié)造血相關(guān)細(xì)胞因子分泌,以促進(jìn)造血系統(tǒng)的恢復(fù);同時(shí)增加了機(jī)體對(duì)骨髓細(xì)胞活性氧(ROS)的清除能力,提高血清內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧物酶(GSH-Px)和肝臟內(nèi)SOD含量,減輕造血組織的損傷。2.2.4.影響肺癌pg細(xì)胞系統(tǒng)表達(dá)水平劉培民等還分別進(jìn)行了阿膠(復(fù)方阿膠漿)含藥血清誘導(dǎo)肺癌PG細(xì)胞凋亡的動(dòng)物試驗(yàn)和阿膠含藥血清對(duì)肺癌PG細(xì)胞株端粒酶表達(dá)水平影響試驗(yàn)。前個(gè)試驗(yàn)結(jié)果表明阿膠(復(fù)方阿膠漿)含藥血清可促使腫瘤細(xì)胞凋亡,并可使細(xì)胞分裂阻滯在G0期,提示阿膠主要通過阻滯細(xì)胞分裂,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡發(fā)揮作用。后者顯示阿膠血清組的端粒酶表達(dá)水平有大幅度降低(P<0.01),而且具有一定的量效相關(guān)性。3關(guān)于阿托納質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究3.1阿托戈斯的真實(shí)面目識(shí)別3.1.1胺凝膠電泳法李峰等采用兩種常用的連續(xù)系統(tǒng)聚丙烯酰胺凝膠電泳法,利用分子量的分布差異對(duì)不同廠家生產(chǎn)的阿膠及2種偽品雜皮膠進(jìn)行了鑒別研究,為阿膠的鑒別提供了新的方法。3.1.2偽品鑒別分析陳振江等人,采用圓盤柱狀凝膠等電聚焦(3.5~10兩性介質(zhì))法,對(duì)1批阿膠及3批偽品進(jìn)行鑒別分析。結(jié)果表明,清晰的電泳譜帶既可用于鑒別藥材真?zhèn)?也可用于確定樣品所含主要蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)(PI),從而為中藥材及其制劑的鑒別、生產(chǎn)、貯藏提供定量參考數(shù)據(jù)。3.1.3結(jié)果的顯著性考察利用部分水解膠原蛋白的高聚物特性,通過對(duì)純驢、豬、黃牛、水牛皮膠、雜皮膠、明膠、加輔料商品阿膠及偽膠的運(yùn)動(dòng)粘度的對(duì)比研究,發(fā)現(xiàn)5種純皮膠的膠濃度與其相應(yīng)的運(yùn)動(dòng)粘度呈良好的線性關(guān)系,并選擇8%膠濃度求出各膠相應(yīng)的運(yùn)動(dòng)粘度(計(jì)37批)。表明用運(yùn)動(dòng)粘度來判別膠制品的優(yōu)劣結(jié)果準(zhǔn)確、誤差較小,經(jīng)阿膠與其它各類膠運(yùn)動(dòng)粘度的差別的顯著性測(cè)驗(yàn),表明阿膠與純豬、黃牛、水牛皮膠、雜皮膠、3批商品阿膠、明膠和5批偽膠運(yùn)動(dòng)粘度的差別有非常顯著意義,與3批商品阿膠運(yùn)動(dòng)粘度的差別無顯著的意義。19批偽膠運(yùn)動(dòng)粘度的數(shù)據(jù)在大于3.00×10-6m2·S-1和小于2.30×10-6m2·S-1以下者,均可判為非驢皮膠,并對(duì)產(chǎn)生的原因進(jìn)行了初步的分析與討論。證明偽膠運(yùn)動(dòng)粘度普遍較高,是由于在制膠時(shí)摻加了雜皮、毛和骨所致。3.1.4骨膠的x射線衍射通過對(duì)山東阿膠、九天阿膠、周口阿膠、北方阿膠、上海阿膠等多種真品,和山東省藥檢所收集的若干種阿膠真?zhèn)纹?、安慶偽品阿膠、山東古井偽品阿膠,以及上海中醫(yī)學(xué)院提供的豬皮膠、牛皮膠、骨膠等樣品進(jìn)行衍射分析,發(fā)現(xiàn)均顯示非晶相為主體,僅骨膠的衍射圖形較為特殊。骨膠對(duì)X射線的吸收較明顯,在相同衍射條件下,衍射線隆起高度遠(yuǎn)低于其他阿膠真?zhèn)纹?。上述結(jié)果表明,X線衍射分析方法有可能從阿膠真?zhèn)纹分蟹直娉龉悄z,但對(duì)其余樣品的鑒別比較困難。3.1.5tg與dsc實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)合常林開等用熱重(TG)及微分熱重(DTG)法系統(tǒng)地對(duì)中藥阿膠的熱降解全過程進(jìn)行分析研究,結(jié)合阿膠的結(jié)構(gòu)特征和熱降解機(jī)理對(duì)各溫度段分別進(jìn)行分析和歸屬。提出了應(yīng)用TG曲線的2個(gè)特征區(qū)和7個(gè)特征參數(shù)對(duì)阿膠的真?zhèn)芜M(jìn)行鑒別的方法,并結(jié)合DSC實(shí)驗(yàn)結(jié)果,提高了判斷的可靠性,為阿膠真?zhèn)舞b別提供了較簡(jiǎn)便、快速、可行的新方法。通過對(duì)46種膠樣進(jìn)行鑒別,正確率達(dá)到89.1%,如果將TG和DSC實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)合起來,進(jìn)行綜合分析判斷,則可使鑒別的正確率進(jìn)一步提高。實(shí)踐表明熱分析為中藥阿膠的科學(xué)鑒別提供了快速簡(jiǎn)便的新方法。3.1.6碳化社會(huì)上一種明顯的負(fù)性康頓效應(yīng)翟乙娟等根據(jù)膠原分子的二級(jí)結(jié)構(gòu)差異,運(yùn)用圓二色譜(CD)法可以將阿膠、鹿角膠、龜甲膠及其偽劣品區(qū)分開,并建立標(biāo)準(zhǔn)圖譜及數(shù)據(jù)。阿膠在220~240nm處有非常明顯的負(fù)性康頓效應(yīng),并且在康頓效應(yīng)最明顯的230nm附近裂分出明顯的3個(gè)小峰,形成三重峰,整個(gè)峰形較寬,峰面積較大,摩爾橢圓度也就越大。并在245nm左右有一突出的小負(fù)性康頓效應(yīng),其圓二色譜在227、230、233nm處有明顯的三重峰,峰形完整,對(duì)稱性好,無噪音。在33件阿膠樣品中,具阿膠圓二色譜特征典型者3件,如山東東阿、河南周口及山西榆社產(chǎn)的阿膠;較好者9件;一般者6件;不合格者2件。8件混偽品阿膠中,屬偽品者5件;混有阿膠特征者3件。3.1.7核心膠的ft-ir圖許長(zhǎng)華等采用傅立葉變換紅外光譜法(FT-IR)和二維相關(guān)紅外光譜技術(shù)(2D-IR)對(duì)幾種阿膠進(jìn)行了真?zhèn)舞b別,結(jié)果表明,偽品阿膠和黃明膠與東阿阿膠的FT-IR圖較為相似,不同廠家的正品阿膠的FT-IR圖更為相似,難以區(qū)分開,但借助于2D-IR,發(fā)現(xiàn)黃明膠、偽品阿膠在1648cm處蛋白質(zhì)C-O吸收峰強(qiáng)于東阿阿膠,而后者在1656cm處蛋白質(zhì)C-O吸收峰強(qiáng)于前者,說明黃明膠、偽品阿膠的蛋白質(zhì)成分及其含量和東阿阿膠有明顯不同。表明2D-IR能夠獲取物質(zhì)微觀結(jié)構(gòu)信息,提高圖譜分辨率,從而直觀有效地鑒別阿膠。3.1.8菌株鑒定及定量分析巨等綜合運(yùn)用紅外、紫外、原子吸收光譜、氨基酸自動(dòng)分析色譜、PC、TLC、HPLC及SDS電泳法研究中藥阿膠、鹿角膠和龜甲膠的理化性質(zhì),尋求各自內(nèi)在特征,進(jìn)行定性鑒別。結(jié)果顯示3種膠的UV光譜圖、HPLC指紋圖及SDS電泳分析的分子量分布差別顯著,可作為鑒別3種膠真?zhèn)蝺?yōu)劣的依據(jù)。同時(shí)在此文中提出了阿膠HPLC指紋圖譜的概念。3.1.9hplc指紋圖譜的建立王曉坤等采用反相高效液相色譜法對(duì)阿膠水溶性成分進(jìn)行了指紋圖譜研究。選用SHIMADZUVP-DS(4.6mm×250mm,5μm)色譜柱,以乙腈-H2O為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫;柱溫25℃;分析時(shí)間為95min;檢測(cè)波長(zhǎng)205nm。結(jié)果是以28個(gè)主要共有峰為評(píng)價(jià)指標(biāo),建立了阿膠水溶性成分的HPLC指紋圖譜,同時(shí)標(biāo)定了5個(gè)色譜峰。該方法操作簡(jiǎn)單,精密度、穩(wěn)定性和重現(xiàn)性良好,為阿膠鑒別和質(zhì)量控制提供了一定的依據(jù)。3.1.1皮膠-人丙種球蛋白的免疫部分張華遠(yuǎn)等用驢皮膠通過偶聯(lián)劑與丙種球蛋白聯(lián)接,免疫青紫藍(lán)灰兔,使產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,經(jīng)對(duì)流免疫電泳檢查,該抗體與驢皮膠-人丙種球蛋白發(fā)生良好的免疫應(yīng)答,而7批其它動(dòng)物皮膠或偽膠均無免疫應(yīng)答反應(yīng)。用本法鑒別阿膠真?zhèn)尉哂徐`敏、特異與有效的優(yōu)點(diǎn)。3.1.11運(yùn)用神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)識(shí)別阿膠。屈凌波等對(duì)阿膠及豬皮膠、黃牛皮膠、馬騾皮膠、骨膠、混雜皮膠進(jìn)行了旋光度和CD的測(cè)定,利用BP型人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)對(duì)各類阿膠進(jìn)行模式識(shí)別,可以建立起阿膠的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模式識(shí)別方法。3.1.1pcr檢測(cè)試驗(yàn)山東東阿阿膠股份有限公司通過尋找牛、驢、馬、豬的種屬特異性SINE序列,設(shè)計(jì)合成引物,又用獨(dú)創(chuàng)的方法提取阿膠中的DNA,采用PCR擴(kuò)增技術(shù)成功鑒別阿膠的真?zhèn)巍Ｓ职汛隧?xiàng)技術(shù)成功推廣到龜甲膠和鹿角膠的真?zhèn)舞b別上。3.2測(cè)定了中阿基苯的含量3.2.1紫外分光光度法李麗等采用過二硫酸鉀堿性氧化-紫外分光光度法測(cè)定阿膠的總氮量,在pH13、125℃,消化時(shí)間30min,阿膠中絕大多數(shù)含氮化合物都能定量地轉(zhuǎn)化為可供紫外分光光度法測(cè)定的硝酸鹽,樣品測(cè)定n=5,RSD為0.84%,平均回收率為99.12%,實(shí)驗(yàn)結(jié)果和《中國(guó)藥典》1990年版方法無顯著性差異P>0.05。3.2.2年版方法的一致性用紅外線快速烘干法測(cè)定阿膠水分,與《中國(guó)藥典》1990年版方法(電熱烘干箱105℃干燥5h測(cè)定水分)一致性較強(qiáng),且快速便捷。從而解決了阿膠生產(chǎn)過程中質(zhì)量監(jiān)控點(diǎn)快速檢測(cè)問題,必將對(duì)保證阿膠質(zhì)量,防止次品產(chǎn)生起到一定的作用。3.2.3導(dǎo)數(shù)火焰原子吸收法王朝暉等人,運(yùn)用導(dǎo)數(shù)火焰原子吸收法測(cè)定阿膠中微量銅、鋅、錳,其檢出值分別為:10.48、12.38、18.09。導(dǎo)數(shù)火焰原子吸收法較常規(guī)火焰原子吸收法,銅、鋅、錳的靈敏度分別提高了15、18和13倍,檢出限均降低了10倍左右,并且其精密度也有不同程度的提高。因此導(dǎo)數(shù)火焰原子吸收法