第9講 消化道感染細(xì)菌

病原生物學(xué)大連大學(xué)醫(yī)學(xué)院倫永志第一篇細(xì)菌學(xué)第二章第三章第四章第五章第六章第七章第八章第九章細(xì)菌的基本性狀細(xì)菌的遺傳與變異消毒與滅菌細(xì)菌感染抗細(xì)菌感染免疫細(xì)菌感染的診斷化膿性細(xì)菌消化道感染細(xì)菌第十章第十一章第十二章第十三章第十四章第十五章第十六章第十七章呼吸道感染細(xì)菌厭氧性細(xì)菌動(dòng)物源性細(xì)菌放線菌螺旋體支原體立克次體衣原體第一節(jié)埃希菌屬第二節(jié)志賀菌屬第三節(jié)沙門菌屬第四節(jié)克雷伯菌屬第五節(jié)變形桿菌屬第六節(jié)弧菌屬第七節(jié)螺桿菌屬第八節(jié)彎曲菌屬腸桿菌科是一大群寄居于人和動(dòng)物腸道中的生物學(xué)性狀相似的G-無(wú)芽胞桿菌，分布廣泛。多數(shù)為腸道正常菌群（條件致病菌），僅少數(shù)致病。腸桿菌科的主要菌屬有埃希菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬、克雷伯菌屬和變形桿菌屬。概述腸桿菌科共同生物學(xué)性狀形態(tài)結(jié)構(gòu)中等大小。無(wú)芽胞，多數(shù)有鞭毛，致病菌大多有菌毛，少數(shù)有莢膜。培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)要求一般，需氧或兼性厭氧。形成中等大小的灰白色光滑型菌落，部分致病菌在血平板上形成β溶血。概述腸桿菌科共同生物學(xué)性狀生化反應(yīng)活潑，有重要的鑒定意義。致病菌一般不分解乳糖，而非致病菌多數(shù)能夠分解乳糖?？乖瓨?gòu)造種類復(fù)雜①鞭毛（H）抗原其特異性取決于鞭毛蛋白中的多肽鏈上的氨基酸種類及其排列順序。②菌毛抗原概述腸桿菌科共同生物學(xué)性狀抗原構(gòu)造③菌體（O）抗原其特異性取決于細(xì)胞壁脂多糖中 的O-特異多糖側(cè)鏈上的單糖種類及其排列順序。④莢膜抗原位于O抗外層，多糖性質(zhì)。埃希菌屬中 稱為K抗原，沙門菌屬中稱為Vi抗原，志賀菌屬中 稱為B抗原。概述腸桿菌科共同生物學(xué)性狀抵抗力對(duì)理化因素抵抗力不強(qiáng)。60℃30min即被殺死。變異現(xiàn)象S-R變異、H-O變異、耐藥性變異、毒力變異。鑒定形態(tài)相似，難以區(qū)分。初鑒靠生化，確鑒靠抗原。概述埃希菌屬多不致病，其中大腸埃希菌（Escherichiacoli）是本屬的模式菌種，經(jīng)遺傳學(xué)改造后已成為分子生物學(xué)的研究工具。某些血清型菌株屬于致病性大腸埃希菌，可引起腸道或尿路感染。第一節(jié)埃希菌屬概述一、生物學(xué)性狀大腸埃希菌血清型的表示方式按O：K：H排列，如O8：K21（+）：H2。第一節(jié)埃希菌屬第一節(jié)埃希菌屬

EMB

培養(yǎng)基（弱選）

大腸埃希菌（非致病菌）

乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸伊紅結(jié)合美蘭形成紫黑色帶有金屬光澤的乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門菌（致病菌）

乳糖不發(fā)酵伊紅美蘭不能結(jié)合 形成無(wú)色的乳 糖不發(fā)酵菌落第一節(jié)埃希菌屬第一節(jié)埃希菌屬

SS

培養(yǎng)基（強(qiáng)選）

大腸埃希菌乳糖（非致病菌）發(fā)酵產(chǎn)酸中性紅形成粉紅色的乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門菌（致病菌）

乳糖不發(fā)酵形成無(wú)色的乳糖不發(fā)酵菌落膽鹽、煌綠抑制G+菌生長(zhǎng)從而提高腸道致病菌的檢出率第一節(jié)埃希菌屬二、致病性與免疫性（一）腸道外感染大腸埃希菌侵入腸道外組織或器官常引起化膿性炎癥，以泌尿系統(tǒng)為主（多見于女性），如尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎等，也可引起燒傷患者繼發(fā)感染、新生兒腦膜炎等。免疫力低下人群可發(fā)生菌血癥、敗血癥。第一節(jié)埃希菌屬二、致病性與免疫性（二）腸道感染腸產(chǎn)毒素型大腸埃希菌（EnterotoxigenicE.coli，ETEC）致病物質(zhì)是定居因子抗原（CFAⅠ/CFAⅡ菌毛）和腸毒素（LT和ST之一，或均產(chǎn)生），編碼兩者的基因常位于同一質(zhì)粒。兒童和旅游者腹瀉的重要致病菌第一節(jié)埃希菌屬胞內(nèi)液體分泌過度，超過腸道再吸收能力，腸腔積液過多而致瀉。第一節(jié)埃希菌屬二、致病性與免疫性（二）腸道感染腸致病型大腸埃希菌（EnteropathogenicE.coli，EPEC）細(xì)菌粘附于腸粘膜上皮細(xì)胞后在小腸內(nèi)大量繁殖，導(dǎo)致腸粘膜刷狀緣絨毛被破壞，使之萎縮、排列紊亂及功能喪失。嬰兒腹瀉主要病原菌，死亡率高，成人少見。第一節(jié)埃希菌屬二、致病性與免疫性（二）腸道感染腸侵襲型大腸埃希菌（EnteroinvasiveE.coli，EIEC）細(xì)菌定位于結(jié)腸，侵襲腸粘膜上皮細(xì)胞，產(chǎn)生內(nèi)毒素破壞細(xì)胞形成炎癥和潰瘍，導(dǎo)致腹瀉。病變類似細(xì)菌性痢疾。主要侵犯較大兒童和成人第一節(jié)埃希菌屬二、致病性與免疫性（二）腸道感染腸出血型大腸埃希菌（EnterohemorrhagicE.coli，EHEC）典型血清型為O157:H7，主要致病物質(zhì)是菌毛和志賀樣毒素SLT（Vero毒素）。侵襲各年齡組人群，引起散發(fā)性或暴發(fā)性出血性結(jié)腸炎，出現(xiàn)嚴(yán)重腹痛和便血。第一節(jié)埃希菌屬二、致病性與免疫性（二）腸道感染腸出血型大腸埃希菌（EnterohemorrhagicE.coli，EHEC）SLT入血后，與內(nèi)毒素協(xié)同損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致微循環(huán)障礙，使腎遠(yuǎn)曲小管與集合管發(fā)生變性并發(fā)溶血性尿毒綜合癥。第一節(jié)埃希菌屬二、致病性與免疫性（二）腸道感染腸集聚型大腸埃希菌（EnteroaggregativeE.coli，EAggEC）細(xì)菌大量聚積于腸粘膜上呈磚塊狀排列，破壞腸道正常吸收、分泌功能。嬰兒頑固性腹瀉病因之一第一節(jié)埃希菌屬標(biāo)本膿汁、血液、糞便、尿等分離培養(yǎng)直接涂片鏡檢革蘭陰性球桿菌

選擇培養(yǎng)基

生長(zhǎng)現(xiàn)象生化 血清學(xué)反應(yīng) 鑒定

第一節(jié)埃希菌屬三、微生物學(xué)檢查法三、微生物學(xué)檢查法衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查大腸菌群指數(shù)：每升/千克樣品中的大腸菌群數(shù)我國(guó)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定大腸菌群數(shù)每升飲用水≤3個(gè)，瓶裝汽水、果汁等每100ml≤5個(gè)；細(xì)菌總數(shù)≤100個(gè)/ml。第一節(jié)埃希菌屬四、防治原則加強(qiáng)水和食品的衛(wèi)生學(xué)檢查。菌毛菌苗已在獸醫(yī)界研制成功。治療可選用氟哌酸、慶大霉素、氨芐青霉素等。第一節(jié)埃希菌屬一、生物學(xué)性狀志賀菌屬是人類細(xì)菌性痢疾的病原菌，通稱為痢疾桿菌。無(wú)鞭毛，區(qū)別于其它腸道致病菌的主要特征。對(duì)理化因素的抵抗力較其它腸桿菌科為弱，對(duì)酸尤為敏感。第二節(jié)志賀菌屬第二節(jié)志賀菌屬一、生物學(xué)性狀根據(jù)O抗原，將志賀菌屬分為4群44個(gè)血清型，分別為痢疾志賀菌（Shigelladysenteriae）、福氏志賀菌（S.flexneri）、鮑氏志賀菌、宋內(nèi)志賀菌。除宋內(nèi)志賀菌菌落扁平粗糙，并且緩慢分解乳糖外，其它志賀菌在腸道鑒別/選擇培養(yǎng)基上均形成無(wú)色的乳糖不發(fā)酵菌落。第二節(jié)志賀菌屬第二節(jié)志賀菌屬二、致病性與免疫性（一）致病物質(zhì)侵襲力細(xì)菌通過菌毛粘附于回腸末端和結(jié)腸的粘膜上皮細(xì)胞，繼而侵入上皮細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖，一般在粘膜固有層內(nèi)形成感染灶，引起炎癥反應(yīng)。細(xì)菌較少侵入血流，但必須侵入腸壁才能致病。內(nèi)毒素第二節(jié)志賀菌屬作用于腸壁粘膜 通透性增加促進(jìn)內(nèi)毒素的吸收 內(nèi)毒素血癥

破壞腸粘膜形成炎癥、潰瘍膿血便腸壁植物神經(jīng)系統(tǒng) 腸功能紊亂

腸蠕動(dòng)共濟(jì)失調(diào)、痙攣直腸括約肌痙攣明顯，出現(xiàn)腹痛、里急后重癥狀第二節(jié)志賀菌屬

內(nèi)毒素二、致病性與免疫性（一）致病物質(zhì)外毒素（志賀毒素）由痢疾志賀菌1型和2型產(chǎn)生，它同時(shí)具有三種生物學(xué)活性。神經(jīng)毒性（損傷動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起麻痹、死亡）、細(xì)胞毒性、腸毒性。第二節(jié)志賀菌屬二、致病性與免疫性（二）所致疾病引起細(xì)菌性痢疾，傳染源是患者和帶菌者，主要通過糞-口途徑傳播。急性菌痢典型癥狀有發(fā)熱、腹瀉、膿血便、嚴(yán)重腹痛、里急后重。經(jīng)及時(shí)治療，患者預(yù)后良好。急性中毒性菌痢多見于小兒，死亡率極高。第二節(jié)志賀菌屬二、致病性與免疫性（二）所致疾病慢性菌痢若急性菌痢治療不徹底，可轉(zhuǎn)為慢性菌痢，尤以體質(zhì)較差者易患，病程長(zhǎng)達(dá)2個(gè)月以上。病愈后有人成為健康帶菌者，成為重要傳染源。第二節(jié)志賀菌屬二、致病性與免疫性（三）免疫性非特異性抗感染免疫主要依靠腸道局部sIgA發(fā)揮作用。由于菌型眾多，并且缺乏型間交叉免疫，病后免疫力不牢固。第二節(jié)志賀菌屬

分離培養(yǎng)涂片鏡檢（革蘭陰性短桿菌）

SS平板（無(wú)色菌落） 生化反應(yīng)（雙糖鐵培養(yǎng)基…） 血清學(xué)鑒定（玻片凝集）

快速診斷SPA協(xié)同凝集試驗(yàn)

第二節(jié)志賀菌屬三、微生物學(xué)檢查法

新鮮膿血便/肛拭子 及時(shí)送檢/暫用30%甘油緩沖鹽水保存四、防治原則加強(qiáng)糞便、水源管理及食品衛(wèi)生監(jiān)督以切斷傳播途徑。特異性預(yù)防采用口服鏈霉素依賴（StrD）株或福氏2a變異株減毒活菌苗。治療選用氨芐青霉素、黃連素、環(huán)丙沙星等。第二節(jié)志賀菌屬根據(jù)致病性，沙門菌屬分為三類：僅對(duì)人致?。簜抽T菌（Salmonellatyphi）、副傷寒沙門菌（S.paratyphi）。對(duì)人和動(dòng)物均致?。菏髠抽T菌、腸炎沙門菌、豬霍亂沙門菌。僅對(duì)動(dòng)物致?。弘u痢沙門菌、雞傷寒沙門菌等。第三節(jié)沙門菌屬概述一、生物學(xué)性狀除雞、雛沙門菌外，其它菌株均有周身鞭毛。菌型繁多，血清型已超過2400個(gè)。生化反應(yīng)對(duì)本菌屬鑒定有重要意義。第三節(jié)沙門菌屬第三節(jié)沙門菌屬一、生物學(xué)性狀抗原構(gòu)造O抗原分組依據(jù)，刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM。H抗原分型依據(jù)，刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG。Vi抗原（毒力抗原）僅在新分離培養(yǎng)的傷寒沙門菌和丙型副傷寒沙門菌中存在，抗原性弱，血清抗體效價(jià)低。第三節(jié)沙門菌屬二、致病性與免疫性引起腸熱癥、急性胃腸炎、菌血癥，傳染源是患者、帶菌者或病畜、帶菌動(dòng)物，主要通過糞-口途徑傳播。主要致病物質(zhì)包括：①侵襲力：菌毛、侵襲素、Vi抗原②內(nèi)毒素③外毒素（腸毒素）第三節(jié)沙門菌屬二、致病性與免疫性（一）腸熱癥（傷寒與副傷寒）細(xì)菌隨污染的食物或水進(jìn)入消化道后，借助菌毛粘附于小腸粘膜上皮細(xì)胞，并編碼侵襲素穿過腸粘膜上皮細(xì)胞侵入腸壁淋巴組織。一部分細(xì)菌經(jīng)淋巴管到達(dá)腸系膜淋巴結(jié)中大量繁殖，經(jīng)胸導(dǎo)管進(jìn)入血流，引起第一次菌血癥（病程第1周）。第三節(jié)沙門菌屬二、致病性與免疫性（一）腸熱癥（傷寒與副傷寒）細(xì)菌隨血流擴(kuò)散至骨髓、肝、脾、腎、膽囊、皮膚等處，被其中的吞噬細(xì)胞吞噬，生長(zhǎng)繁殖后再次入血形成第二次菌血癥（病程第2-3周）。進(jìn)入腸道的一部分膽囊細(xì)菌再次侵入腸壁淋巴組織，使已致敏的組織發(fā)生超敏反應(yīng)Ⅳ，引起局部壞死和潰瘍，嚴(yán)重者可發(fā)生腸出血和腸穿孔。第三節(jié)沙門菌屬二、致病性與免疫性（二）急性胃腸炎（食物中毒）大量攝入鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、豬霍亂沙門菌污染的食物所致，多為集體食物中毒。潛伏期不超過24h，臨床癥狀表現(xiàn)為發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。一般3-5d內(nèi)可完全恢復(fù)，偶爾出現(xiàn)低熱持續(xù)、腹瀉不止。第三節(jié)沙門菌屬二、致病性與免疫性（三）菌血癥主要由丙型副傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌引起，患者多為兒童或免疫力低下的成人。細(xì)菌侵入腸道后迅速入血，隨血流擴(kuò)散到組織器官中引起感染，腸道癥狀反而不明顯。第三節(jié)沙門菌屬二、致病性與免疫性（四）免疫性傷寒沙門菌或副傷寒沙門菌為胞內(nèi)寄生菌，因此機(jī)體防御傷寒或副傷寒主要依靠細(xì)胞免疫，病愈后免疫力牢固。因細(xì)菌一般不侵入血流，故急性胃腸炎恢復(fù)與腸道局部sIgA有關(guān)。第三節(jié)沙門菌屬三、微生物學(xué)檢查法（一）分離培養(yǎng)與鑒定標(biāo)本采取腸熱癥第1-2周取血液，第2-3周取糞便、尿，各期均可取血液與骨髓液。急性胃腸炎取糞便、嘔吐物、可疑食物。敗血癥取血液分離鑒定第三節(jié)沙門菌屬分離培養(yǎng)直接涂片鏡檢革蘭陰性短桿菌

選擇培養(yǎng)基

生長(zhǎng)現(xiàn)象生化 血清學(xué)反應(yīng) 診斷

第三節(jié)沙門菌屬三、微生物學(xué)檢查法

標(biāo)本三、微生物學(xué)檢查法（二）血清學(xué)診斷（肥達(dá)反應(yīng)，WidalTest） 原理用已知的傷寒沙門菌O、H抗原和引起副傷 寒的沙門菌H抗原與不同稀釋度的待檢血清作定量 凝集試驗(yàn)，檢測(cè)待檢血清中有無(wú)相應(yīng)抗體及其含 量多少，作為臨床輔助診斷的依據(jù)。第三節(jié)沙門菌屬三、微生物學(xué)檢查法（二）血清學(xué)診斷（肥達(dá)反應(yīng)，WidalTest） 正?？贵w水平一般O凝集效價(jià)≥1：80，H凝集效 價(jià)≥1：160，副傷寒H凝集效價(jià)≥1：80有意義。 動(dòng)態(tài)觀察凝集效價(jià)逐周遞增或恢復(fù)期凝集效價(jià)比 急性期增加4倍以上有意義。第三節(jié)沙門菌屬三、微生物學(xué)檢查法（二）血清學(xué)診斷（肥達(dá)反應(yīng)，WidalTest） 抗體診斷意義IgMO抗出現(xiàn)早，持續(xù)約半年，消 失后不易重現(xiàn)；IgGH抗出現(xiàn)晚，持續(xù)長(zhǎng)達(dá)數(shù)年， 消失后易重現(xiàn)。少數(shù)病例臨床癥狀明顯，但肥達(dá)試驗(yàn)結(jié)果始終陰性，可能是大量應(yīng)用抗生素治療，抑制了機(jī)體免疫功能或免疫功能本身低下所致。第三節(jié)沙門菌屬三、微生物學(xué)檢查法（三）傷寒帶菌者的檢出若血清學(xué)診斷發(fā)現(xiàn)可疑者Vi抗體效價(jià)≥1：10，必須取糞便等標(biāo)本反復(fù)進(jìn)行分離培養(yǎng)。第三節(jié)沙門菌屬四、防治原則患者應(yīng)盡早隔離治療，并及時(shí)處理排泄物。定期對(duì)從事餐飲保育工作的人員進(jìn)行健康體檢，及時(shí)檢出帶菌者。特異性預(yù)防采用Vi莢膜多糖菌苗。治療選用氨芐青霉素、復(fù)方三甲氧烯胺、環(huán)丙沙星等。第三節(jié)沙門菌屬克雷伯菌無(wú)鞭毛、有肥厚莢膜、有菌毛。在普通培養(yǎng)基上形成較大的灰白色粘液型菌落。肺炎克雷伯菌（Klebsiellapneumoniae）正常寄居于人類呼吸道、腸道，是克雷伯菌屬的模式菌種，簡(jiǎn)稱肺炎桿菌。第四節(jié)克雷伯菌屬概述肺炎克雷伯菌目前已成為除大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌之外最常見的條件致病菌，可引起包括肺炎在內(nèi)的多種感染，是醫(yī)院感染的重要細(xì)菌。第四節(jié)克雷伯菌屬概述變形桿菌無(wú)莢膜、有鞭毛、有菌毛。在普通培養(yǎng)基上出現(xiàn)遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象。變形桿菌中某些特殊菌株如X19、X2及XK（O抗原）可代替立克次體抗原與患者血清做凝集反應(yīng)用于輔助診斷，稱為外斐反應(yīng)（Weil-Felixreaction）。第五節(jié)變形桿菌屬概述第五節(jié)變形桿菌屬普通變形桿菌（Proteusvulgaris）是變形桿菌屬的模式菌種，屬于人類正常菌群，可成為條件致病菌，引起以泌尿系統(tǒng)感染為主的多種感染。第五節(jié)變形桿菌屬概述弧菌屬是一類菌體短小，需氧或兼性厭