第6章 發(fā)酵產(chǎn)物的提取與分離

第6章發(fā)酵產(chǎn)物的提取與精制發(fā)酵液下游加工是指從發(fā)酵產(chǎn)物中分離、純化產(chǎn)品的過程，是利用產(chǎn)物和雜質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)不同提取產(chǎn)物或者從系統(tǒng)中去除雜質(zhì)的操作。6.1概述1．發(fā)酵液的一般特性（1）發(fā)酵產(chǎn)物濃度較低，屬于稀水溶液系統(tǒng)。（2）成分復(fù)雜，含有目的產(chǎn)物、微生物細胞碎片、其他代謝副產(chǎn)物、殘留培養(yǎng)基、無機鹽等。（3）含有色素、熱源物質(zhì)、毒性物質(zhì)等有機雜質(zhì)。（4）發(fā)酵產(chǎn)物穩(wěn)定性低，對熱、酸、堿、有機溶劑、酶、機械力等敏感，不適宜條件下易失活或分解。2．提取和精制提取和精制是為了從發(fā)酵液中獲得高純度的、符合質(zhì)量標(biāo)淮要求的發(fā)酵成品。發(fā)酵產(chǎn)物存在形式不同，用途各異，產(chǎn)品質(zhì)量要求不同，分離純化步驟有所不同。但大多數(shù)包括以下四個步驟：發(fā)酵液預(yù)處理和菌體分離、提取、精制、成品加工。

發(fā)酵產(chǎn)品后處理過程流程圖發(fā)酵液預(yù)處理和菌體分離是采用凝聚和絮凝等技術(shù)，加速固液分離，提高過濾速度。如果是胞內(nèi)產(chǎn)物，首先要進行細胞破碎，再分離細胞碎片。初次純化即提取，主要是除去與目標(biāo)產(chǎn)物性質(zhì)有很大差異的物質(zhì)，濃縮產(chǎn)物，提高產(chǎn)品質(zhì)量。常用方法有沉淀、吸附、萃取等。高度純化即精制，采用對產(chǎn)品有高度選樣性的分離技術(shù)，除去與產(chǎn)物理化性質(zhì)相近的雜質(zhì)。典型的方法有層析、離子交換等。成品加工是為了獲得質(zhì)量合格的產(chǎn)品，常用濃縮、結(jié)晶、干燥等技術(shù)方法。6.2發(fā)酵液的預(yù)處理及菌體分離發(fā)酵液預(yù)處理及菌體分離是下游加工的第一步操作。目的是改善發(fā)酵液的性質(zhì)，去除部分可溶性雜質(zhì)，分離菌體和其他懸浮顆粒，以利于提取和精制工序的操作。預(yù)處理中常用酸化、加熱、加絮凝劑、過濾、離心等方法。1．發(fā)酵液的預(yù)處理雜質(zhì)直接影響產(chǎn)品質(zhì)量和收得率，對提取和精制也有很大影響，特別是高價無機離子和雜蛋白等。高價無機離子會影響樹脂對生化物質(zhì)的交換容量。雜蛋白降低樹脂的交換容量和吸附能力，溶劑萃取時引起乳化，堵塞過濾介質(zhì)，或使濾膜受到污染。（1）高價無機離子的去除：發(fā)酵液中主要的無機離子有Ca2+，Mg2+，F(xiàn)e3+等。鈣離子常使用草酸（草酸鈉）去除。Mg2+可加入三聚磷酸鈉，它和Mg2+形成可溶性絡(luò)合物，可消除對離子交換的影響。F3+離用黃血鹽反應(yīng)生成普魯士監(jiān)沉淀除去。（2）雜蛋白的去除：①沉淀法：利用蛋白質(zhì)等電點進行沉淀，或在酸堿性條件下加入陰離子陽離子進行沉淀，或加入中性鹽破壞蛋白質(zhì)水化層進行沉淀。②變性法：加熱變性、酸堿變性、有機溶劑變性等。③吸附法：吸附劑和沉淀劑的吸附作用。（3）色素及其他物質(zhì)的去除常用的脫色方法有離子交換劑、離子交換纖維、活性炭等材料吸附。2．離心過濾與菌體分離菌體分離通常采用離心分離和過濾兩種方法。離心分離是在離心力場的作用下，將懸浮液中的固相與液相加以分離，多用于顆粒較小的懸俘液和乳濁液的分離。離心方法有差級離心法、密度梯度離心、等密度離心、平衡等密度離心。細菌和酵母菌發(fā)酵液多采用離心分離。霉菌和放線菌多采用過濾分離。過濾的原理是懸浮液通過過濾介質(zhì)時，固態(tài)顆粒與溶液分離。根據(jù)機理，過濾可分為澄清過濾和濾餅過濾。澄清過濾中，過濾介質(zhì)為硅藻土、砂、顆?；钚蕴俊Y(jié)陶瓷、燒結(jié)金屬等，它們填充在過濾器內(nèi)構(gòu)成過濾層，懸浮液通過濾層時，固體顆粒被濾層顆粒阻攔或吸附，濾液得以澄清。濾餅過濾中，過濾介質(zhì)為濾布。懸浮液通過濾布時，固體顆粒被濾布阻擋而逐漸形成濾餅。濾餅至一定厚度時即起過濾作用。（1）影響發(fā)酵液過濾的因素發(fā)酵液屬非牛頓性液體，粘度大，過濾速度慢。過濾速度與菌體細胞體積、發(fā)酵條件、未利用完的培養(yǎng)基濃度、消沫劑、發(fā)酵周期等有關(guān)。（2）改善發(fā)酵液過濾性能的方法發(fā)酵液難過濾時，需改善過濾性能，降低濾餅比阻，提高過濾與分離的速率。改善發(fā)酵液性能的方法有調(diào)酸、熱處理、添加凝聚劑、反應(yīng)劑、助濾劑等。①調(diào)pH：除去蛋白質(zhì)等兩性物質(zhì)，改變易吸附分子的電荷性質(zhì)，減少濾膜堵塞和污染。②凝聚與絮凝：形成較大絮團，減少堵塞。③吸附劑法：將細菌吸附在吸附劑上，形成較大的顆粒，減少堵塞。④助濾劑法：助濾劑如硅藻土吸附細菌細胞改變?yōu)V餅結(jié)構(gòu)，降低過濾阻力，加快過濾速度。⑤反應(yīng)劑法：3．細胞破碎與分離微生物的代謝產(chǎn)物如果是胞內(nèi)物質(zhì)（如有些酶制劑、干擾素、胰島素等），那么首先要收集菌體，進行細胞破碎。（1）微生物細胞壁的組成與結(jié)構(gòu)：①細菌細胞壁：②酵母菌細胞壁比G+菌稍厚，主要成分是葡聚糖、甘露聚糖和蛋白質(zhì)等。③其他真菌細胞壁主要由多糖組成，如幾丁質(zhì)或纖維素強度比細菌和酵母菌高。（2）常用的細胞破碎方法細胞破碎的方法很多，根據(jù)外加作用力的方式可分為機械法和非機械法兩大類。前者有珠磨法、高壓勻漿法、超聲波法、X-press法；后者有酶解法、化學(xué)法、物理法、干燥法等。①機械法：高壓勻漿法是利用高壓使細胞懸液通過針型閥，由于突然減壓和高速沖擊撞擊環(huán)，造成細胞破碎；X-press法或Hughespress法是一種改進的高壓法，其操作方法是將濃縮的菌體懸浮液冷凍至-25℃~-30℃形成冰晶，利用500Mpa以上的高壓沖擊，將冷凍細胞從高壓閥小孔中擠出。由于冰晶體的磨損，造成包埋在冰晶體中的微生物變形而引起細胞破碎。此方法適用范圍廣，破碎率高，細胞碎片的粉碎程度低，活性保留率高。但是不能用于對冷凍融解敏感的生物物質(zhì)。

超聲波法是利用超聲波的空穴作用使細胞破碎，由于這種空穴泡又受到超聲波的迅速沖擊而閉合，從而產(chǎn)生一個極為強烈的沖擊波壓力，由此引起的黏滯性旋渦在介質(zhì)中的懸浮細胞上造成了剪切應(yīng)力，促使細胞內(nèi)液體發(fā)生流動，造成細胞破碎。超聲波振蕩容易引起溫度的劇烈上升，所以操作時可以在細胞懸浮液中投入冰塊或在夾層中通人冷卻水進行冷卻。②非機械法：酶解法是利用酶反應(yīng)分解破壞細胞壁成分的特殊化學(xué)鍵，達到使細胞破碎的目的。分為外加酶法和自溶法（常采用加熱或干燥法）。滲透壓沖擊法是將細胞先放入高滲透壓的介質(zhì)中，在達到平衡后，介質(zhì)被突然稀釋，或?qū)⒓毎D(zhuǎn)入水或緩沖液中，水就會迅速進入細胞內(nèi)，致使細胞膨脹，引起細胞壁的破裂。反復(fù)凍融法是將細胞反復(fù)在低溫下突然冷凍后在室溫下融化，最后引起細胞破碎。低溫冷凍使細胞膜的疏水鍵結(jié)構(gòu)斷裂，增加細胞親水性能；同時胞內(nèi)水結(jié)晶使細胞內(nèi)外溶液濃度發(fā)生變化，引起細胞突然膨脹而破裂?？刹捎么朔ㄌ幚砑毎谳^脆弱的菌體，但通常破碎率較低，有時即使反復(fù)如此處理仍不能提高破碎率。此外還可能引起對凍融敏感的蛋白質(zhì)變性。干燥法可采用空氣于燥、真空干燥、噴霧干燥和冷凍干燥等。干燥過程能使細胞膜滲透性改變，再用丙酮、丁醇或緩沖液等處理時，胞內(nèi)物質(zhì)就容易被抽提出來。（3）細胞碎片的分離：常用離心分離法。近年來利用雙水相萃取法，使生物大分子或細胞碎片在兩相或多相中進行不同的分配，達到分離的目的。另外，向細胞碎片懸濁液中加入某種固體吸附劑，或使懸浮液通過裝有吸附劑的固定床，也可達到去除細胞碎片的目的。6.3發(fā)酵產(chǎn)物的提取和精制1．沉淀法是通過改變條件或加入某種試劑，使發(fā)酵產(chǎn)物離開溶液，生成不溶性顆粒而沉降析出的過程。沉淀法濃縮作用大于純化作用，是初步分離的一種手段。沉淀法具有設(shè)備簡單、成本低、原料易得、收率高、濃縮倍數(shù)高和操作簡單等優(yōu)點，不足之處在于過濾困難、產(chǎn)品質(zhì)量較低、需要重新精制。（1）等電點沉淀法：利用兩性電解質(zhì)在電中性時溶解度最低的原理進行分離純化。在低離子強度下，調(diào)節(jié)至等電點，可使各種兩性電解質(zhì)所帶凈電荷為零，能大大降低其溶解度。不同的兩性電解質(zhì)具有不同的等電點，從而將其分離開。等電點沉淀法優(yōu)點是許多蛋白質(zhì)的等電點都在偏酸性的范圍內(nèi)，而許多無機酸價格低廉，并能為食品標(biāo)準(zhǔn)允許，因此?？蔁o須除掉殘余的酸，而直接進行下一步純化操作。其主要的缺點是酸化時，容易引起蛋白質(zhì)失活。不少蛋白質(zhì)與金屬結(jié)合后等電點會發(fā)生偏移。（2）鹽酸鹽法：在發(fā)解液中加入鹽酸，使氨基酸成為氨基酸鹽酸鹽析出，再加堿中和到氨基酸的等電點，使氨基酸沉淀析出。（3）金屬鹽法：在發(fā)酵液中加入重金屬鹽，使難溶的氨基酸金屬鹽沉淀析出。沉淀經(jīng)溶解后，調(diào)pH值至氨基酸等電點，使氨基酸沉淀析出。①等電點——鋅鹽法：谷氨酸與硫酸鋅(ZnSO4·7H2O)，生成谷氨酸鋅鹽沉淀。②鈣鹽法提取谷氨酸：

等電點鋅鹽法鈣鹽法提取谷氨酸工藝流程（4）有機溶劑沉淀法：許多有機溶劑如丙酮、乙醇、甲醇等能使溶于水的小分子生物物質(zhì)以及核酸、多糖、蛋白質(zhì)等生物大分子發(fā)生沉淀作用。這種沉淀作用主要是由于水溶液介電常數(shù)降低、靜電引力增大，帶電溶質(zhì)互相吸引凝集。具有水化層的生物分子，有機溶劑與水的作用，使得這些分子脫水而相互聚集析出。有機溶劑沉淀法的優(yōu)點是分辨能力比鹽析法高，一種溶質(zhì)只在一個比較窄的有機溶劑范圍內(nèi)沉淀；沉淀不需脫鹽；有機溶劑密度低，與沉淀物密度差大，容易進行固液分離；而且有機溶劑容易蒸發(fā)，不會在成品中殘留，因此適用于食品、藥品的制備。其缺點是容易引起蛋白質(zhì)變性失活，并且有機溶劑易燃、易爆，對安全要求較高。鹽析法：在蛋白質(zhì)溶液中加入一定量的中性鹽后，鹽離子在水中發(fā)生水化，使蛋白質(zhì)脫去水化膜層，暴露出琉水區(qū)域，疏水區(qū)域相互作用使蛋白質(zhì)沉淀；同時中性鹽的解離，中和蛋白質(zhì)所帶電荷，使蛋白質(zhì)分子間排斥作用減弱而相互聚集。中性鹽有硫酸銨、硫酸鎂、硫酸鈉、氯化鈉等，生產(chǎn)上常用硫酸銨。其優(yōu)點是成本低、操作簡單、安全和對許多生物活性物質(zhì)具有穩(wěn)定作用。

（6）非離子型多聚物沉淀：可用于選擇性沉淀從而純化蛋白質(zhì)，應(yīng)用最多的是聚乙二醇(PEG)。作用機制有幾種假設(shè)：多聚物與有機溶劑相似，能降低水化度使蛋白質(zhì)沉淀；與大分子形成復(fù)合物，發(fā)生共沉淀作用等。非離子型多聚物沉淀法操作條件溫和，不易引起生物大分子變性，沉淀效果好，沉淀后的多聚物容易除去，廣泛應(yīng)用于核酸、蛋白質(zhì)、細菌和病毒等的分離純化。2．膜分離技術(shù)其實質(zhì)是物質(zhì)通過膜的傳遞速度不同而得到分離。其優(yōu)點是：過程一般較簡單，操作方便，費用較低，效率較高，無相變，可在常溫下操作，既節(jié)能又特別適用于熱敏性物質(zhì)的分離純化。（1）膜分離技術(shù)分類①透析：是利用膜兩側(cè)濃度差，使溶質(zhì)從濃度高的一側(cè)，通過膜孔擴散到濃度低的一側(cè)，從而實現(xiàn)分離的過程。②電滲析：是一種以電位差為推動力，利用離子交換膜選擇性地使陰離子或陽離子通過的性質(zhì)，達到從溶液中分離電解質(zhì)目的的膜分離操作。③微濾：微孔過濾，利用孔徑0.025μm~14μm的多孔膜，過濾含有微粒的溶液，將微粒從溶液中除去，達到凈化、分離和濃縮的目的。推動力為壓力差，通常為0.1MPa~0.5MPa。④超濾：濾膜孔徑為lnm~20nm，用于過濾含有微粒和大分子的溶液。以壓力差為推動力，通常為0.1MPa~0.6MPa。⑤反滲透：用反滲透膜(孔徑0.1nm~1nm)，對溶液施加壓力，使溶劑通過反滲透膜，截留所有可溶物而得到分離的操作。反滲透也是以壓力差為推動力，操作壓達3MPa~10MPa。⑥納米過濾：以壓力是為推動力，用納米過濾膜(孔徑約2nm)，從溶液中分離出相對分子質(zhì)量300~1000的物質(zhì)的膜分離過程。特點是：在過濾分離過程中，能截留小分子有機物，同時透析出鹽，達到濃縮和透析目的；操作壓力低，節(jié)約動力。（2）離子交換膜電滲析法：是利用可解離基團，在外加電場作用下，經(jīng)有選擇透過性的高分子膜，使各種帶電性物質(zhì)分離的技術(shù)。膜的種類很多，根據(jù)結(jié)構(gòu)可分為非均相、半均相和均相離子交換膜；按作用可分為陽離子交換膜、陰離子交換膜和具有特種性能的離子交換膜；根據(jù)應(yīng)用可分為電滲透濃縮用膜、電滲透脫鹽用膜、電解隔膜、對特定離子具有選擇透過性的離子交換膜、擴散滲透用離子交換膜、反滲透用離子交換膜。利用離子交換膜的選擇透過性，進行抗生素、檸檬酸和氨基酸等產(chǎn)物的提純。工業(yè)用離子交換膜應(yīng)具備離子透過性高，導(dǎo)電性好，電解質(zhì)擴散量小，水遷移量小，有一定機械強度，化學(xué)穩(wěn)定性好，膜結(jié)構(gòu)均勻一致，表面光潔，膨脹性小，價格便宜等特點。3．萃取法萃取是將某種溶劑加入到液體混合物中，根據(jù)混合物中不同組分在溶劑中溶解度的不同，將所需要的組分分離出來。液-液萃取也稱溶劑萃取，其優(yōu)點是：比化學(xué)沉淀法分離程度高；比離子交換法選擇性好、傳質(zhì)快，比蒸餾法能耗低，生產(chǎn)能力大，周期短，便于連續(xù)操作，容易實現(xiàn)自動化控制等。（1）溶劑萃?。菏抢幂腿∧繕?biāo)物質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑中溶解度的不同，使其從一種溶劑轉(zhuǎn)入另一種溶劑從而實現(xiàn)分離。在溶劑萃取中，被提取的溶液稱為料液，從料液中提取出來的物質(zhì)稱為溶質(zhì)，用來進行萃取的溶劑稱為萃取劑，溶質(zhì)轉(zhuǎn)移到萃取劑中與萃取劑形成的溶液為萃取液，而被萃取出溶質(zhì)的料液稱為萃余液。萃取步驟包括：混合→分離→回收溶劑。萃取操作流程分為單級萃取和多級萃取，多級萃取又分為多級錯流萃取和多級逆流萃取①單級萃?。褐皇褂靡粋€混合器和一個分離器的萃取。流程最簡單，單收率不高。②多級錯流萃?。好考壎技尤胄迈r萃取溶劑，溶劑消耗多，萃取液產(chǎn)物平均濃度較稀，但萃取較完全。③多級逆流萃取：料液走向與萃取走向相反，萃取劑只在最后一級加入，萃取劑消耗少，萃取液產(chǎn)物平均濃度高，產(chǎn)物收率最高。多級錯流萃?。‵料液；S溶劑；L萃取液；R萃余液；）多級逆流萃取乳化和去乳化：乳化是一種液體分散在另一種不相混溶液體中的現(xiàn)象。造成乳化的原因主要是蛋白質(zhì)的存在。破壞乳濁液的方法有：過濾、離心分離、加熱、稀釋法、吸附法、加電解質(zhì)等。

（2）超臨界流體萃?。菏菍⒊R界流體作為萃取劑，從固體或液體中萃取出某些高沸點或熱敏性成分，達到分離和提純目的。超臨界流體是物質(zhì)處于臨界溫度、臨界壓力之上的一種流體狀態(tài)，兼有氣體、液體兩重性的特點，即密度接近液體，而黏度和擴散系數(shù)與氣體相似。因此它不僅具有與液體溶劑相當(dāng)?shù)妮腿∧芰Γ揖哂袀髻|(zhì)擴散速度快的優(yōu)點。

超臨界流體萃取中，主要是溶劑(超臨界流體狀態(tài))密度的大幅度增加，導(dǎo)致溶劑對溶質(zhì)的作用力增大，從而形成了溶解物質(zhì)的能力。在臨界點附近，壓力或溫度的變化會引起超臨界流體密度的大幅度變化，而溶劑萃取能力主要取決于其密度，因此，通過調(diào)節(jié)壓力和溫度，改變?nèi)軇┟芏?，進而改變其對物質(zhì)的溶解能力。利用不同密度的溶劑對物質(zhì)溶解能力的差異，實現(xiàn)萃取和分離的操作。其過程由萃取階段與分離階段組成。超臨界萃取典型流程①等溫法：等溫條件下，萃取相減壓、膨脹，溶質(zhì)從分離槽下部取出。氣體經(jīng)壓縮機加壓后返回萃取槽。②等壓法：等壓條件下，萃取相加熱、升溫，氣體和溶質(zhì)分離。溶質(zhì)從分離槽下部取出，氣體冷卻、壓縮后回到萃取槽。③吸附法：溶質(zhì)被分離槽中的吸附劑吸附，氣體壓縮后回到分離槽。等溫法（T1=T2，P1＞P2）等壓法（T1＜T2，P1=P2）吸附法（T1=T2，P1=P2）（3）雙水相萃?。菏抢梦镔|(zhì)在互不相溶的兩水相間分配系數(shù)的差異來進行萃取的方法，可用于分離和純化酶、核酸、生長素、病毒、干擾素等。大多數(shù)親水性聚合物水溶液與第二種親水性聚合物混合，達到一定濃度時，會產(chǎn)生兩相，兩種高聚物分別溶于互不相溶的兩相中。高聚物之間的不相溶性，使得它們無法相互滲透，不能形成均一相，從而具有相分離的傾向，在一定條件下，即能分為兩相。聚合物與鹽類溶液也能形成兩相，這是由于鹽析作用，如PEG與堿性磷酸鹽或硫酸鹽形成的兩相。溶質(zhì)在兩水相間的分配主要由其表面性質(zhì)所決定，通過在兩相的選擇性分配而得到分離。分配能力的大小可用分配系數(shù)K表示。分配系數(shù)與溶質(zhì)的濃度和相體積比無關(guān)，主要取決于相系統(tǒng)的性質(zhì)、被萃取物質(zhì)的表面性質(zhì)和溫度。4．樹脂法離子交換技術(shù)是根據(jù)物質(zhì)的酸堿度、極性和分子大小的差異予以分離的技術(shù)。它所使用的離子交換劑是能和其他物質(zhì)發(fā)生離子交換的物質(zhì)，分為無機離子交換劑和有機離子交換劑(離子交換樹脂)。離子交換樹脂法具有成本低、操作方便、設(shè)備簡單、提煉效率高、節(jié)約大量有機溶劑等優(yōu)點。（1）離子交換原理：具有一定孔隙度的高分子化合物，其親水性質(zhì)使溶劑分子擴散到樹脂顆粒內(nèi)部，它具有酸性或堿性功能團，能交換陽、陽離子。交換過程是：①離子吸附或擴散到樹脂表面；②離子穿過樹脂表面，吸附或擴散至樹脂內(nèi)部的活性中心；③離子與樹脂中自由離子交換；④交換出來的離子從活性中心擴散到樹脂表面；⑤離子再由樹脂表面擴散至溶液中。（2）離子交換樹脂的結(jié)構(gòu)與分類

結(jié)構(gòu)分為兩部分，一部分是不能移動的、多價高分子基團，構(gòu)成樹脂的骨架，使樹脂具有不溶解性和化學(xué)穩(wěn)定的件質(zhì)；另一部分是可移動離子，構(gòu)成樹脂的活性基團。根據(jù)樹脂官能團的性質(zhì)將其分為：陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂、選擇性離子交換樹脂、兩性離子交換樹脂、吸附樹脂和電子交換樹脂。①陽離子交換樹脂：有強酸性（-SO3H）、中強酸性（-PO3H2、-HPO2H）、弱酸性（-COOH）。②陰離子交換樹脂：有強堿性（-N(CH3)3）、弱堿性（-NH2、-NHR、-NR2）。③選擇性離子交換樹脂：又稱螯合性離子交換樹脂，與金屬離子形成螯合物的基團，對某些離子具有特殊選擇性的樹脂。④兩性離子交換樹脂：同時含有酸性、堿性基團，有強堿-弱酸[-N(CH3)-COOH)]和弱堿-弱酸（NH2-COOH）。⑤吸附樹脂：又稱“脫色樹脂”。有較大表面積，多孔性，吸附能力強，交換離子的能力很小。⑥電子交換樹脂：又稱氧化還原樹脂。其作用是電子轉(zhuǎn)移，起到氧化還原作用。（3）樹脂和操作條件的選擇：強堿性離子一般選用弱酸性樹脂，如用強酸性樹脂，會造成解吸困難。弱堿性離子宜用強酸性樹脂，如果用弱酸性樹脂，不易吸附。強酸性離子選用弱堿性樹脂，弱酸性離子用強堿性樹脂。如果要吸附大分子離子，選擇交聯(lián)度較低的樹脂，以便大分子擴散到樹脂內(nèi)部。

操作條件需考慮：①pH滿足在產(chǎn)物穩(wěn)定范圍內(nèi)、產(chǎn)物離子化以及樹脂能解離三個條件；②樹脂類型：弱酸性和弱堿性樹脂采用鈉型或氯型；強酸性和強堿性樹脂可采用任何類型。③產(chǎn)物濃度：低價離子濃度增加有利于交換上樹脂，而高價離子稀釋時