益智寧神顆粒對兒童注意缺陷多動障礙adhd模型大鼠認知功能的影響

益智寧神顆粒對兒童注意缺陷多動障礙adhd模型大鼠認知功能的影響

兒童應該注意多動障礙。這是學齡兒童中發(fā)病率高的心理行為障礙疾病，可能會嚴重影響兒童的身心健康和學習能力。導師馬融教授開展兒童多動癥專病研究多年,結合豐富的臨證經(jīng)驗,首次提出“益腎填精,寧神益智”的治療法則,并總結出治療ADHD的有效方劑——益智寧神顆粒。本實驗應用目前國際上使用最為廣泛的ADHD動物模型——自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneouslyhypertensiverat,SHR),通過對Morris水迷宮的實驗數(shù)據(jù)進行分析,評價各種藥物對ADHD動物模型認知功能的改善情況。實驗方法1.大鼠智寧神模型將二級健康SHR清潔級雄性幼鼠48只,4周齡,體質(zhì)量(50±10)g,隨機分為6組,益智寧神高劑量組,益智寧神中劑量組,益智寧神低劑量組,靜靈口服液組,利他林組,模型組。將二級健康8只Wistar大鼠,體質(zhì)量(50±10)g,設為正常對照組。試驗大鼠均購自北京維通利華實驗動物技術有限公司。2.模型組及培養(yǎng)時間中藥組按高、中、低給藥劑量分別灌服益智寧神顆粒,給藥劑量分別為37.5g/kg,28.125g/kg,18.75g/kg,每日1次,持續(xù)7d。靜靈口服液組灌服靜靈口服液12.5ml/kg,每日1次,持續(xù)7d。利他林組灌服利他林6.25mg/kg,每日1次,持續(xù)7d。模型組予蒸餾水10m1/kg,每日1次,持續(xù)7d。正常對照組不作處理。3.不同劑量樹,生藥量高,劑量低益智寧神顆粒:由紫河車、熟地黃、遠志、澤瀉、石菖蒲、黃連等組成,江陰天江藥業(yè)有限公司提供,批號:0512。按高、中、低給藥劑量以蒸餾水配成(每次灌胃時當場配置),生藥含量分別為3.750g/ml,2.81253g/ml,1.875g/ml。利他林片:蘇州第一制藥廠生產(chǎn),批號:041225。每次灌胃時當場配置,所配懸濁液濃度0.625mg/ml。靜靈口服液:由熟地黃、山藥、茯苓、牡丹皮、遠志、澤瀉、龍骨、女貞子、黃柏、知母、五味子、石菖蒲等組成,遼寧本溪市中藥廠生產(chǎn),批號:20040506?？芍苯庸辔浮?.菲比水宮殿的實驗4.1水池等的空間事物安排Morris水迷宮及其測試軟件由中國醫(yī)學科學院藥物研究所提供本實驗。由直徑120cm,高50cm的圓形水池(黑色)組成。隨意將水池等分為4個象限(東北,東南,西南和西北象限)。每天實驗水溫保持在(20+-2)℃。圓柱形平臺(黑色)可置于任一象限中央。水池四周存在豐富的空間參照物(門、窗、燈、桌椅及實驗者等),且位置保持不變。一攝像頭置于水迷宮中央的上方,可自動采集和分析逃避潛伏期等數(shù)據(jù)。給藥結束后,進行適應性實驗1d,工作記憶測試4d,排除視覺影響測試1d,以評價各組藥物對大鼠認知功能的影響。4.2適應性實驗4.3平臺內(nèi)定位問題本實驗根據(jù)1999年Wainwright首次提出的應用Morris水迷宮測試大鼠工作記憶即短暫記憶功能的方法,對各組大鼠進行測試。測試共4d,4次/d,平臺位置在每天4次測試中固定不變,但每天更換所在象限。平臺沒于水面下2cm,其中點離池壁30cm。每個象限選一點,共4點作為入水點,訓練時分別從4個入水點將動物面朝池壁輕輕放入水中,記錄大鼠從入水至找到平臺的時間為逃避潛伏期,然后讓大鼠在平臺上停留l0s,再放回籠中。如果90s內(nèi)找不到平臺,潛伏期記為90s,并將大鼠引導至平臺上并停留l0s,前3次連續(xù)不尋找平臺的大鼠篩除。以潛伏期作為這一天的成績進行統(tǒng)計分析。4.4入水點對動物的影響調(diào)節(jié)水面高度,使平臺高于水面2cm,將潛伏期<10s的大鼠分別從3個入水點將動物面朝池壁輕輕放入水中,進行測試。以潛伏期作為這次的測試成績進行統(tǒng)計分析,以排除視覺影響。5.小組精神處理工作記憶測試前1d,先讓動物在不含平臺的水池中自由游泳2min,使其熟悉迷宮環(huán)境。所有數(shù)據(jù)用表示,并用spss10.0統(tǒng)計軟件進行處理。P<0.05為顯著差異。結果1.對認知功能的影響見表1-表4,圖1。第3天第1次測試時,正常對照組與模型組即開始出現(xiàn)顯著差異(P<0.05),說明模型組大鼠的認知功能明顯降低。從第3天第3次測試開始,益智寧神高劑量組與模型組比較有顯著差異(P<0.05);第4天第1次測試開始,益智寧神中、低劑量組,靜靈口服液組與模型組比較亦有顯著差異(P<0.05),且以上差異均能持續(xù)到最后1次測試,說明益智寧神各劑量組、靜靈口服液組可以持續(xù)性地顯著改善認知功能,且益智寧神高劑量組起效時間早于其他治療組。利他林組始終與模型組無顯著差異,說明該種西藥對認知功能無明顯作用。除利他林組外,其余各治療組之間,組間比較P>0.05,說明在改善認知功能方面無明顯差異。2.排除視覺影響測試各組最后1天測試潛伏期<10s的大鼠,上臺時間無顯著差異,說明潛伏期的顯著變化與視覺無關。見表5。智寧神顆?！懻揂DHD是兒童中常見的以活動過度和注意力缺陷為主要特征的一種行為障礙綜合征。導師馬融教授結合臨證經(jīng)驗,認為本病以腎精虧虛為主要特點,因為腎為先天之本,生命之根,主藏精,腎精所化生之腎氣,通過三焦巡行全身,是機體各種生命活動的原動力,可以調(diào)節(jié)人體各個臟腑、經(jīng)絡等組織器官的生理功能,所以患兒常見的臨床癥狀表現(xiàn),如肝腎陰虛、脾虛肝旺、心脾不足等方面證候,實際是由于腎精虧虛引起的。所以導師針對腎精虧虛,首次提出“益腎填精,寧神益智”的治療法則,并總結出治療ADHD的有效方劑——益智寧神顆粒。方中紫河車,味甘、咸、溫,入腎經(jīng),養(yǎng)血益精;熟地黃,甘、微溫,入肝、腎經(jīng),滋陰補血。兩者共為君藥,可“益腎填精”,以達治動之本。石菖蒲、遠志共為臣藥,其中石菖蒲,辛、微溫,入心肝經(jīng),開竅、豁痰、理氣、活血;遠志,辛溫,入心腎兩經(jīng),功可安神益智,解郁。兩藥相和,可寧神益智,以達治動之標。澤瀉,甘寒,入腎經(jīng),有瀉熱之效,為佐藥,可佐諸藥之辛溫,以免溫燥太過。黃連為使藥,性味苦寒,入心肝經(jīng),可瀉心肝之火熱。綜觀全方,共奏“益腎填精,寧神益智”之功,最終標本兼治,使臨床癥狀得到改善。ADHD兒童智力大多正?；蚪咏?但由于存在多動、注意力集中困難、沖動等癥,給學習帶來困難,但記憶力往往正常。在測試中,正常對照組大鼠的逃避潛伏期隨訓練天數(shù)的增加而縮短,學習成績每天均有較明顯的進步;模型組沒有表現(xiàn)出這種趨勢,整個訓練過程中其逃避潛伏期均維持在較高的水平,說明模型組大鼠的學習過程明顯延長,其學習獲取能力即認知功能明顯低于正常大鼠。從第3天開始益智寧神高劑量組,第4天開始益智寧神中、低劑量組,靜靈口服液組可以持續(xù)性地顯著縮短逃避潛伏期,改善認知功能,且益智寧神高劑量組起效時間早于其他治療組。利他林組雖有縮