001深圳邁瑞B(yǎng)C-5800原理和臨床應(yīng)用

宜陽縣中醫(yī)院 臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室 文件編號(hào)：2010-WFL001BC-5800原理和臨床應(yīng)用版序：2010-WFL001頁碼：第1頁，共11頁一．深圳邁瑞B(yǎng)C-5800原理及技術(shù)(一)原理本分析儀采用電阻抗法檢測紅細(xì)胞和血小板的數(shù)目以及體積分布；采用比色法測量血紅蛋白濃度；采用半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞技術(shù)獲得白細(xì)胞總數(shù)和五類白細(xì)胞的分類統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)。在此基礎(chǔ)之上，分析儀計(jì)算出其余參數(shù)的結(jié)果。(二)參數(shù)的推導(dǎo)1.白細(xì)胞計(jì)數(shù)白細(xì)胞結(jié)果通過直接計(jì)數(shù)得到。在白細(xì)胞計(jì)數(shù)池，所有大于35fL的細(xì)胞顆粒都被計(jì)數(shù)為白細(xì)胞，雖然紅細(xì)胞大小相似，但已被溶血?jiǎng)┤芙猓“弩w積絕大部分小于35fl下限，可忽略不計(jì)。儀器根據(jù)校正因子計(jì)算并報(bào)告白細(xì)胞結(jié)果。2.血紅蛋白血紅蛋白是直接測量參數(shù)，在白細(xì)胞計(jì)數(shù)池加入紅細(xì)胞溶血?jiǎng)芙饧t細(xì)胞，釋放血紅蛋白，并轉(zhuǎn)化成穩(wěn)定的氰化高鐵血紅蛋白，其濃度與吸光度成正比。在525nm波長下，根據(jù)吸光度值，計(jì)算血紅蛋白濃度。3.紅細(xì)胞(1)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞數(shù)量是直接測量參數(shù)。在紅細(xì)胞/血小板計(jì)數(shù)池中大于或等于36fl的顆粒將被計(jì)數(shù)作紅細(xì)胞。但混合液中包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板，血小板體積較小，通宜陽縣中醫(yī)院 臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室 文件編號(hào)：2010-WFL001BC-5800原理和臨床應(yīng)用版序：2010-WFL001頁碼：第2頁，共11頁過閾值的設(shè)定可將其區(qū)分，混合液里的白細(xì)胞被計(jì)數(shù)在紅細(xì)胞內(nèi)，但白細(xì)胞的含量對(duì)紅細(xì)胞來說是微乎其微的。儀器通過校正后，計(jì)算出紅細(xì)胞數(shù)值。(2)平均紅細(xì)胞體積(MCV)平均紅細(xì)胞體積由紅細(xì)胞直方圖推導(dǎo)，它是紅細(xì)胞直方圖在36fl～360fl范圍內(nèi)所有細(xì)胞體積的平均值，是紅細(xì)胞大小的參數(shù)。(3)紅細(xì)胞分布寬度(RDW)紅細(xì)胞分寬度是反映紅細(xì)胞間體積差異的參數(shù)，由直方圖推導(dǎo)。在直方圖上去除曲線的兩個(gè)極端，由剩余曲線計(jì)算紅細(xì)胞體積大小的CV值。其計(jì)算公式：RDW=SD×100%平均體積(4)紅細(xì)胞比積(Hct)紅細(xì)胞比積是計(jì)算參數(shù)，它是以百分率表示的紅細(xì)胞的近似體積。計(jì)算公式：HCT=RBC×MCV1L(5)平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH)平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量是計(jì)算參數(shù)，表示各個(gè)紅細(xì)胞血紅蛋白含量的平均值。計(jì)算公式：MCH=HGB(g/L)×1012pgRBC(L－1)(6)平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度指測紅細(xì)胞比積時(shí)被壓緊的紅細(xì)胞的血紅蛋白濃度，宜陽縣中醫(yī)院 臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室 文件編號(hào)：2010-WFL001BC-5800原理和臨床應(yīng)用版序：2010-WFL001頁碼：第3頁，共11頁計(jì)算公式：MCHC=HGB/LHct4.血小板(1)血小板計(jì)數(shù)血小板數(shù)量由血小板直方圖推導(dǎo)，在紅細(xì)胞/血小板計(jì)數(shù)池中計(jì)數(shù)2fl～20fl的顆粒，再用電子擬合曲線擬合出0fl～70fl范圍的所有血小板數(shù)量。(2)血小板平均體積(MPV)這一參數(shù)是由血小板直方圖推導(dǎo)的，是血小板體積大小的參數(shù)。宜陽縣中醫(yī)院 臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室 文件編號(hào)：2010-WFL001BC-5800原理和臨床應(yīng)用版序：2010-WFL001頁碼：第4頁，共11頁激光流式細(xì)胞五分類技術(shù)當(dāng)一定量的血細(xì)胞被吸入并經(jīng)過特定量的試劑作用后，血樣經(jīng)噴嘴注入充滿稀釋液的圓錐形流動(dòng)室中。在稀釋液形成的鞘液包裹下，細(xì)胞單個(gè)排列成行地穿過流動(dòng)室的中央。當(dāng)懸浮在鞘液中的血細(xì)胞經(jīng)過二次加速后通過激光檢測區(qū)時(shí)，血細(xì)胞受到激光束的照射，產(chǎn)生的散射光性質(zhì)與細(xì)胞大小、細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的折射率有關(guān)。低角前向散射光反映了細(xì)胞的大小，高角前向散射光則反映細(xì)胞的內(nèi)部精細(xì)結(jié)構(gòu)和顆粒物質(zhì)。光電二極管接收這些散射光信號(hào)并將其轉(zhuǎn)化為電脈沖，根據(jù)采集到的這些電脈沖數(shù)據(jù)，可以得到血細(xì)胞大小及細(xì)胞內(nèi)部信息的二維分布圖，稱為散點(diǎn)圖。橫坐標(biāo)反映細(xì)胞的內(nèi)部復(fù)雜度信息，縱坐標(biāo)反映細(xì)胞的體積。從BIFF通道散點(diǎn)圖可得到淋巴細(xì)胞，單核細(xì)胞，嗜酸性粒細(xì)胞，中性粒細(xì)胞各自占白細(xì)胞總數(shù)的百分比。從BASO通道散點(diǎn)圖可得到白細(xì)胞數(shù)目、嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)目以及嗜堿性粒細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的百分比。宜陽縣中醫(yī)院 臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室 文件編號(hào)：2010-WFL001BC-5800原理和臨床應(yīng)用版序：2010-WFL001頁碼：第5頁，共11頁血細(xì)胞直方圖(一)直方圖的導(dǎo)出在細(xì)胞通過小孔計(jì)數(shù)時(shí)，感應(yīng)器收集脈沖的大小及數(shù)量，轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的細(xì)胞體積和數(shù)量，并在坐標(biāo)上表示出來。坐標(biāo)的橫軸(X)代表體積(fL)，縱軸(Y)代表數(shù)量，將各點(diǎn)用光滑的曲線相連，就是直方圖。(二)紅細(xì)胞直方圖紅細(xì)胞的直方圖上，X軸體積的顯示范圍從24fl～360fl，儀器將大于36fl的顆粒計(jì)數(shù)為紅細(xì)胞，24fl～36fl一段用于監(jiān)測有否36fl以下的小紅細(xì)胞被漏計(jì)。在紅細(xì)胞直方圖上可以看到兩個(gè)細(xì)胞群體：一個(gè)是紅細(xì)胞主群，從50fl開始，是一個(gè)兩側(cè)對(duì)稱、呈現(xiàn)倒扣鐘狀的正態(tài)分布曲線；另一個(gè)是小細(xì)胞群，位于主群右側(cè)，約分布在130fl～185fl區(qū)域，又稱“足趾部”，是一些紅細(xì)胞的二聚體、三聚體、多聚體及白細(xì)胞的混合物。在紅細(xì)胞七個(gè)參數(shù)中，有兩個(gè)參數(shù)的檢測與紅細(xì)胞直方圖有關(guān)，是MCV和RDW。MCV表示紅細(xì)胞平均體積，它與紅細(xì)胞峰頂落在X軸的位置有關(guān)，MCV變大，紅細(xì)胞峰右移；MCV變小，紅細(xì)胞峰左移。RDW是一個(gè)反映紅細(xì)胞大小變異性的參數(shù)，名稱是紅細(xì)胞分布寬度。它的統(tǒng)計(jì)學(xué)實(shí)質(zhì)是紅細(xì)胞大小的變異系數(shù)(CV)，在MCV相似的情況下，RDW越大，紅細(xì)胞峰就越寬。臨床上可根據(jù)MCV和RDW來對(duì)紅細(xì)胞疾病進(jìn)行分類。宜陽縣中醫(yī)院 臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室 文件編號(hào)：2010-WFL001BC-5800原理和臨床應(yīng)用版序：2010-WFL001頁碼：第6頁，共11頁(三)血小板直方圖典型的血小板直方圖，呈現(xiàn)對(duì)數(shù)正態(tài)分布，通常包含兩條曲線：一條是2fl～20fl的原始數(shù)據(jù)曲線；另一條是0fl～70fl的擬合曲線。血小板的大小分布在0fl～70fl范圍，但絕大多數(shù)血小板在2fl～20fl范圍，而血小板計(jì)數(shù)的干擾主要來自2fl以下的噪音和細(xì)菌的干擾及20fl以上的裂紅細(xì)胞、小紅細(xì)胞和白細(xì)胞的干擾。故而儀器計(jì)數(shù)2fl～20fl的血小板，再擬合出一條0fl～70fl的曲線，將少部分的小血小板和大血小板統(tǒng)計(jì)在內(nèi)，有效排除干擾。但擬合曲線的給出有4個(gè)條件：1.血小板計(jì)數(shù)20×1012/L；2.直方圖呈現(xiàn)正態(tài)分布；3.直方圖的峰值在3fl～15fl范圍；4.PDW20%。旗標(biāo)和代碼的臨床意義樣本結(jié)果后會(huì)出現(xiàn)旗標(biāo)和代碼，旗標(biāo)常出現(xiàn)在結(jié)果數(shù)值后，而代碼常代替結(jié)果。常見的旗標(biāo)有：*(代表儀器計(jì)數(shù)閾值處受干擾)、R(代表結(jié)果須復(fù)核)、+(結(jié)果超出線性范圍)、H(代表結(jié)果高于H/L范圍上限)、L(結(jié)果低于H/L范圍下限)；常見的代碼有：…..(代表不完全計(jì)數(shù)或吸樣錯(cuò)誤)、-----(代表三次計(jì)數(shù)不統(tǒng)一)、P(代表部分吸樣)、+++++(代表結(jié)果超出操作范圍)、:::::(代表流式通道有阻塞)。1.*(多見于白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果后)含義：說明白細(xì)胞在35fl處的檢測受到干擾。在白細(xì)胞計(jì)數(shù)孔有35fl大小的顆粒通過并被當(dāng)作白細(xì)胞計(jì)數(shù)，且超過一定數(shù)量，觸發(fā)報(bào)警。在白細(xì)胞直方圖上看，曲線在35fl處上抬。宜陽縣中醫(yī)院 臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室 文件編號(hào)：2010-WFL001BC-5800原理和臨床應(yīng)用版序：2010-WFL001頁碼：第7頁，共11頁導(dǎo)致出現(xiàn)的原因：小白細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、冷球蛋白、抗溶紅細(xì)胞、小巨核細(xì)胞、紅細(xì)胞聚集、大血小板、血小板聚集、溶血?jiǎng)┹斔拖到y(tǒng)故障等。2.RDW后出現(xiàn)R含義：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)儀器計(jì)數(shù)24fl～360fl的顆粒，繪出直方圖，正常紅細(xì)胞直方圖應(yīng)為兩端封閉、單峰、呈高斯分布的曲線。RDW反應(yīng)紅細(xì)胞大小分布的偏離情況，其意義相當(dāng)于CV%(變異系數(shù))。RDW后出現(xiàn)R說明紅細(xì)胞直方圖出現(xiàn)異常，如直方圖非正態(tài)分布、出現(xiàn)雙峰等。導(dǎo)致出現(xiàn)的原因：輸血、紅細(xì)胞凝集、紅細(xì)胞碎片、大血小板、血小板凝集成塊等。3.PLT結(jié)果后出現(xiàn)R含義：儀器進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)時(shí)，計(jì)數(shù)2fl～20fl大小的血小板顆粒數(shù)量，再擬合出一條0fl～70fl的曲線，將小部分小血小板及大血小板包含進(jìn)去，目的是為了排除計(jì)數(shù)干擾。但擬合曲線的給出是有條件的(詳見血小板直方圖的說明)，條件不滿足時(shí)儀器不能給出擬合曲線，這時(shí)候血小板數(shù)值后出現(xiàn)R。導(dǎo)致出現(xiàn)的原因：小紅細(xì)胞或紅細(xì)胞碎片、白細(xì)胞碎片、冷球蛋白、大血小板、血小板凝集、衛(wèi)星血小板、血小板大小不一(輸血后)、電磁波或噪音干擾小孔計(jì)數(shù)等。4.+++++含義：結(jié)果超出儀器的操作范圍，對(duì)白細(xì)胞而言計(jì)數(shù)值大于500×109/L；對(duì)血小板而言計(jì)數(shù)值大于2500×109/L。5.+含義：結(jié)果超出儀器的線性范圍，對(duì)白細(xì)胞而言大于140×109/L；對(duì)血小板而言大于1500×109/L。宜陽縣中醫(yī)院 臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室 文件編號(hào)：2010-WFL001BC-5800原理和臨床應(yīng)用版序：2010-WFL001頁碼：第8頁，共11頁6．-----含義：代表三次計(jì)數(shù)不統(tǒng)一。血球儀將對(duì)細(xì)胞的計(jì)數(shù)進(jìn)行三次計(jì)數(shù)，如果三次計(jì)數(shù)值統(tǒng)一，儀器將取平均值報(bào)告最后結(jié)果；如果三次中有兩個(gè)結(jié)果統(tǒng)一而另一次相差較大，儀器將取兩次的平均值；如果三次結(jié)果都不統(tǒng)一，儀器將報(bào)告-----。導(dǎo)致出現(xiàn)的原因：小孔堵塞或部分堵塞、標(biāo)本有凝塊或絲狀纖維蛋白、白細(xì)胞聚集,紅細(xì)胞凝集、大血小板,血小板凝集、標(biāo)本稀釋后未氣泡混勻等。7．……含義：出現(xiàn)表示數(shù)據(jù)不完整，不完全計(jì)數(shù)。通常當(dāng)一個(gè)參數(shù)由于三次計(jì)數(shù)不統(tǒng)一或超過范圍得不到確切數(shù)值時(shí)，其衍生參數(shù)后將出現(xiàn)……,如WBC后出現(xiàn)+++++，則其衍生參數(shù)NE#、LY#、MO#、EO#、BA#后將出現(xiàn)…..?！詣?dòng)進(jìn)樣時(shí)也可表示吸樣錯(cuò)誤，當(dāng)發(fā)生吸樣錯(cuò)誤時(shí)，所有參數(shù)的結(jié)果后都會(huì)帶有……。導(dǎo)致出現(xiàn)的原因：樣本有凝塊,堵塞吸樣針、樣本量不夠、樣本的RBC和HGB濃度過低(嚴(yán)重貧血病人標(biāo)本),血樣探測器檢測失敗、儀器吸樣系統(tǒng)堵塞。8．:::::含義：在白細(xì)胞五項(xiàng)分類及網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)中，當(dāng)流式通道堵塞產(chǎn)生:::::代碼，在散點(diǎn)分布圖上可有三種堵塞報(bào)警：FC表示流式通道完全堵塞(無檢測)；PC1表示流式通道檢測時(shí)間延長；PC2表示流式通道檢測時(shí)間縮短。導(dǎo)致出現(xiàn)的原因：(1)FC：完全堵塞；(2)PC1：流式通道或標(biāo)本通道部分堵塞導(dǎo)致分類時(shí)間延長；(3)PC2：紅細(xì)胞未完全溶解導(dǎo)致分類時(shí)間縮短，或鞘液系統(tǒng)問題。臨床上高膽固醇和高甘油三酯血癥、血紅蛋白病、藥物治療后、進(jìn)行性肝病等都可導(dǎo)致PC2。宜陽縣中醫(yī)院 臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室 文件編號(hào)：2010-WFL001BC-5800原理和臨床應(yīng)用版序：2010-WFL001頁碼：第9頁，共11頁懷疑性旗標(biāo)和限定性旗標(biāo)出現(xiàn)在散點(diǎn)圖下方的旗標(biāo)框內(nèi)，針對(duì)白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板出現(xiàn)不同的旗標(biāo)。1.白細(xì)胞懷疑性旗標(biāo)(1)NEBlasts(原始粒細(xì)胞)、LYBlasts(原始淋巴細(xì)胞)、MOBlasts(原始單核細(xì)胞)(2)ImmNE1(未成熟粒細(xì)胞1)(3)ImmNE2(未成熟粒細(xì)胞2)(4)VariantLymphs(異型淋巴細(xì)胞)(5)ReviewSlide(涂片復(fù)檢)2.白細(xì)胞限定性旗標(biāo)(1)Leukopenia(白細(xì)胞減少)：白細(xì)胞計(jì)數(shù)低于設(shè)定的下限(2)Leukocytosis(白細(xì)胞增多)：白細(xì)胞計(jì)數(shù)高于設(shè)定的上限；(3)Neutropenia(中性粒細(xì)胞減少)：中性粒細(xì)胞的數(shù)值或百分比低于設(shè)定的下限；(4)Neutrophilia(中性粒細(xì)胞增多)：中性粒細(xì)胞的數(shù)值或百分比高于設(shè)定的上限；(5)Lymphopenia(淋巴細(xì)胞減少)：淋巴細(xì)胞的數(shù)值或百分比低于設(shè)定的下限；(6)Lymphocytosis(淋巴細(xì)胞增多)：淋巴細(xì)胞的數(shù)值后百分比高于設(shè)定的上限；(7)Monocytosis(單核細(xì)胞增多)：單核細(xì)胞的數(shù)值或百分比高于設(shè)定的上限；(8)Eosinophilia(嗜酸細(xì)胞增多)：嗜酸細(xì)胞的數(shù)值或百分比高于設(shè)定的上限；(9)Basophilia(嗜堿細(xì)胞增多)：嗜堿細(xì)胞的數(shù)值或百分比高于設(shè)定的上限。宜陽縣中醫(yī)院 臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室 文件編號(hào)：2010-WFL001BC-5800原理和臨床應(yīng)用版序：2010-WFL001頁碼：第10頁，共11頁3.紅細(xì)胞懷疑性旗標(biāo)(1)NRBCs(有核紅細(xì)胞)(2)DimorphicRBCPop(紅細(xì)胞雙峰)(3)MicroRBCs/RBCFragments(小紅細(xì)胞/紅細(xì)胞碎片)(4)RBCAgglutination(紅細(xì)胞聚集)4.紅細(xì)胞限定性旗標(biāo)(1)Anemia(貧血)：紅細(xì)胞數(shù)值或血