黃體酮陰道環(huán)的藥理學研究

黃體酮陰道環(huán)的藥理學研究

黃酮是卵巢病毒感染引起的一種天然懷孕。黃酮類化合物不僅可以改善黃帝的功能，保護胎兒，而且可以用來避免產(chǎn)后遺懷孕?？拱d癇藥物的作用與ctu380相似。黃體酮陰道環(huán)用于哺乳期避孕,可使閉經(jīng)時間延長,但對乳汁分泌及乳汁成份、嬰兒發(fā)育及哺乳期婦女骨密度和骨代謝均無影響。本研究旨在比較兩種含不同劑量黃體酮陰道環(huán)和黃體酮注射劑在家兔的藥代動力學特點,從而為研制可供哺乳期婦女避孕的黃體酮陰道環(huán)提供藥代動力學依據(jù)。1材料和方法1.1動物致死量scxk成年新西蘭家兔,雌性18只,體重2.5±0.5kg,由上海市車墩實驗動物良種場提供(動物合格證:SCXK(滬)2002-0013)。隨機分為3組,每組6只。分別為:陰道環(huán)低劑量組(175mg/只,A組)和高劑量組(350mg/只,B組),及對照組(一次性肌注黃體酮,660μg/只C組)1.2黃體酮注射液含黃體酮的硅橡膠陰道環(huán)(高劑量環(huán):350mg/只,體外日釋放量為660μg;低劑量環(huán):175mg/只,體外日釋放量為330μg)(上海市計劃生育研究所緩釋實驗室提供批號20041012);黃體酮注射液(10mg/支)(天津金耀氨基酸有限公司);黃體酮試劑盒(北京倍愛康生物技術(shù)有限公司,批號:20040810);SEROZYMEⅠ型內(nèi)分泌定量測定系統(tǒng)(加拿大BiochemImmunosystems公司)。1.3測試方法1.3.1c組動物的肌注黃體酮采集戊巴比妥(1ml/kg)腹腔注射麻醉后置于手術(shù)臺上,剪去手術(shù)野兔毛,消毒,開腹,切除雙側(cè)卵巢,結(jié)扎雙側(cè)卵巢動脈后關(guān)腹。A、B組動物于去卵巢術(shù)后2周,用3%戊巴比妥(1ml/kg)腹腔注射麻醉后置于手術(shù)臺上,沿陰道生理弧度將陰道環(huán)置入,直至陰道后穹隆,將陰道環(huán)用縫線固定于陰道。C組動物則同期肌注黃體酮。1.3.2樣品采集及處理分別于放環(huán)(或肌注黃體酮)前0.5h,放環(huán)(或肌注黃體酮)后0.5h,1h,2h,4h,8h,24h,72h,1周,2周,3周,4周,6周,8周在耳緣靜脈取血各1ml(共14次);所采全血,室溫下放置2h,離心(3000r/min)15min,取血清,-20℃保存,待測黃體酮濃度。1.3.3準確性和稀釋效應(yīng)采用競爭法酶聯(lián)免疫分析系統(tǒng)與磁性微粒分離技術(shù)相結(jié)合的測定方法,由SEROZYMEⅠ型內(nèi)分泌定量測定系統(tǒng)直接讀出所測血清中黃體酮的濃度。本方法的準確性:回收率為95.4%-108.0%;稀釋效應(yīng):回收率為94.8%-106.0%;批內(nèi)變異系數(shù)<3.9,批間變異系數(shù)<10.8;靈敏度:<0.15ng/ml。1.4藥-時曲線下數(shù)據(jù)分析所測血藥數(shù)據(jù)輸入計算機,用PK-Graph程序進行處理,并計算藥代動力學參數(shù):吸收速率常數(shù)(Ka)、消除速率常數(shù)(Ke)、達峰時間(Tmax)、達峰濃度(Cmax)、消除半衰期(T1/2)、藥-時曲線下面積(AUC)、表觀分布容積(Vc/F)、清除率[Cl(s)/F]。PK-Graph程序:Windows版1.0,國家版權(quán)局計算機軟件著作權(quán)登記號:2003SR2759,經(jīng)過比較,PK-Graph程序與DAS程序計算結(jié)果無明顯差異。使用SPSS11.0進行統(tǒng)計分析,方差分析進行組間兩兩比較。2結(jié)果2.1血藥濃度測定由表1可見,和C組相比,雖然放環(huán)組在放環(huán)后血藥濃度上升很快,但消除緩慢。至放環(huán)后24h,A、B組血藥濃度分別為:15.70±4.67ng/ml;和35.52±13.92ng/ml,而C組僅為0.05ng/ml。2.2血藥濃度結(jié)果由表2可見,陰道環(huán)組(A組和B組)的Cmax均顯著低于肌注組(C組),A組的AUC(56d)明顯低于B組,說明高劑量組可維持有效血藥濃度的時間更長;由于A、B組劑型相同,故此兩組T1/2間無明顯差異。2.3各組藥物時間曲線圖2.3.1環(huán)組藥物時間曲線8周如圖1所示:放置黃體酮陰道環(huán)后,藥物迅速釋放,很快達到峰濃度(放環(huán)后2h),隨后呈現(xiàn)緩慢釋放趨勢。2.3.2血藥濃度結(jié)果由圖2可見:肌注黃體酮后,血藥濃度迅速上升,其峰濃度(Cmax)明顯高于A、B組,然后迅速消除,24h后C組幾乎測不到,而A、B組仍維持一定的血藥濃度(A組和B組分別為:15.70±4.67ng/ml和35.52±13.92ng/ml)。3黃體酮陰道環(huán)的藥代動力學特征黃體酮作為一種天然激素,在哺乳期有潛在的避孕優(yōu)勢。一些研究表明:黃體酮經(jīng)陰道給藥(陰道環(huán))是非常有效的避孕方法。并且迄今尚未觀察到其對哺乳及嬰兒生長的副作用。若干報道顯示:國外研制的黃體酮硅橡膠陰道環(huán)是一種無副作用,避孕效果好,對哺乳及嬰兒的生長和發(fā)育無影響的避孕方法。陰道環(huán)是近三十多年來發(fā)展起來的一種長效藥物釋放系統(tǒng)。黃體酮經(jīng)陰道給藥可通過陰道黏膜吸收,并以較高濃度分布于生殖系統(tǒng)。1998年Miles等證實,陰道給藥與肌注途徑相比,雖血清黃體酮濃度較低,但子宮內(nèi)膜黃體酮濃度較高。陰道環(huán)作為緩釋制劑較其它給藥方式具有有效作用時間長、避免“首過效應(yīng)”,且不需要任何專門取放設(shè)備、使用者自己方便取放等優(yōu)點,故易被廣大婦女所接受。由于臨床使用的黃體酮多為注射劑,注射用黃體酮的安全性已得到廣泛證實。為了解黃體酮硅橡膠陰道環(huán)的安全性及其優(yōu)越性,本研究選用一次性注射黃體酮作為對照組。在藥代動力學參數(shù)方面,本研究結(jié)果顯示,陰道環(huán)兩組相比:A組的AUC(56d)為16115.11±8398.88ng·ml-1·h-1,明顯低于B組(28751.95±7151.95ng·ml-1·h-1)(P<0.05),說明高劑量組維持有效血藥濃度的時間更長,為臨床研制有效期限為三個月的陰道環(huán)提供了劑量依據(jù)。另外A組的Cmax為47.64±23.58ng·ml-1,明顯低于B組(74.04±24.57ng/ml),顯示出劑量相關(guān)性。但是由于個體差異比較大及樣本量較小,統(tǒng)計學上無顯著性差異。由于放環(huán)組2組只是劑量不同,劑型完全相同,故此2組的其他藥代動力學參數(shù)[Tmax、T1/2、Vc/F、Cl(s)/F、Ka和Ke]都無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。肌注組(C組)T1/2為:2.55±0.89h,明顯低于A組(818.08±511.77h)和B組(730.31±306.49h)(P<0.01),體現(xiàn)了黃體酮陰道環(huán)的緩釋特點。至于Cmax,C組為138.88±60.96ng/ml,明顯高于A組(47.64±23.58ng/ml)和B組(74.04±24.57ng/ml)(P<0.05),體現(xiàn)了黃體酮陰道環(huán)的安全性較好。藥-時曲線和藥代動力學參數(shù)值均顯示黃體酮肌注(C組)吸收迅速,消除亦快。在肌注后24h,血藥濃度已小于0.05ng/ml;而黃體酮