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《HPLC儀使用要點(diǎn)》PPT課件在這個(gè)課件中，我們將介紹HPLC儀器的基本知識(shí)和使用要點(diǎn)。從什么是HPLC儀器以及它的工作原理開始，到分析中需要注意的組成部分、分離柱的選擇和使用、常見分離技術(shù)，以及操作步驟和故障排除方法。HPLC儀器是什么？HPLC（高效液相色譜）是一種常用的分離技術(shù)，通過液相作為移動(dòng)相，在色譜柱中對(duì)混合樣品進(jìn)行分離和分析。它在藥物、食品、環(huán)境等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。HPLC儀器的工作原理HPLC儀器通過一個(gè)高壓系統(tǒng)，將移動(dòng)相推動(dòng)通過色譜柱，樣品中的化合物被不同的分離機(jī)理在柱中分離，并通過檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)和定量。HPLC儀器的組成部分高壓泵提供恒定的流速和壓力，將溶劑推動(dòng)經(jīng)過柱子。進(jìn)樣器將樣品引入柱子，可以手動(dòng)或自動(dòng)進(jìn)行。色譜柱選擇合適的柱子進(jìn)行分離，不同種類的柱子可以實(shí)現(xiàn)不同的分離機(jī)理。HPLC分離柱的選擇和使用選擇合適的柱子根據(jù)分析目標(biāo)和樣品性質(zhì)選擇合適的柱子，如反相柱、離子交換柱等。柱子的準(zhǔn)備和保養(yǎng)在使用前要進(jìn)行柱子的準(zhǔn)備工作，并定期保養(yǎng)柱子以確保分離效果和柱壽命。常見HPLC分離技術(shù)1.反相色譜：通過非極性固定相和極性溶劑進(jìn)行分離，常用于疏水性化合物的分析。2.離子交換色譜：通過固定相上的離子交換基團(tuán)與溶液中離子間的相互作用進(jìn)行分離，常用于離子性化合物的分析。3.手性色譜：通過手性固定相分離不對(duì)稱分子，常用于藥物中手性異構(gòu)體的分析。4.尺寸排除色譜：通過使用具有不同孔徑大小的固定相，從而排除分子尺寸較大的化合物。5.親和色譜：通過特定的親和基團(tuán)與目標(biāo)化合物的選擇性相互作用進(jìn)行分離，常用于生物樣品的分析。HPLC儀器的操作步驟11.準(zhǔn)備工作檢查HPLC儀器的狀態(tài)、準(zhǔn)備好試劑、校準(zhǔn)儀器。22.樣品制備準(zhǔn)備樣品溶液、過濾樣品、調(diào)整樣品的pH值等。33.樣品進(jìn)樣通過進(jìn)樣器將樣品引入色譜柱。44.Elution過程設(shè)置合適的流速和梯度條件，進(jìn)行樣品的分離。55.結(jié)果分析通過檢測(cè)器獲取結(jié)果，并進(jìn)行解析和定量。常見的HPLC儀器故障及排除方法11.壓力異常可能是進(jìn)樣器堵塞、柱子壓力過高等原因，可以檢查和清洗相應(yīng)部件。22.峰形不對(duì)稱可能是流速不穩(wěn)定、柱子老化等

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