有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的測(cè)定

有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的測(cè)定

1定性檢驗(yàn)－剛果紅法和紙上斑點(diǎn)法1.1剛果紅法

1.1.1原理利用樣液中的有機(jī)磷農(nóng)藥經(jīng)溴氧化后，與剛果紅作用，生成藍(lán)色化合物，來鑒別樣品是否存在有有機(jī)磷農(nóng)藥。1.1.2操作步驟

取經(jīng)粉碎的樣品用苯浸泡、振搖，用濾紙過濾，取濾液于蒸發(fā)皿上，加入100g／L甘油甲醇溶液1滴，瀝干，加1mL水混勻。將樣液滴于定性濾紙上，揮發(fā)干。將濾紙置于溴蒸氣上熏5min，取出，在通氣處將溴揮發(fā)盡。滴人5g／L剛果紅乙醇溶液，置于濾紙的點(diǎn)樣處，如果濾紙顯示出藍(lán)紫色則表示樣品中有有機(jī)磷存在。呈粉紅色者則為溴的色澤。1.2紙上斑點(diǎn)法1.2.1原理樣液中的硫代磷酸酯類有機(jī)磷與2，6一二溴苯醌氯酰亞胺，在溴蒸氣作用下，形成各種有顏色的化合物，用以鑒定是否存在有機(jī)磷及是哪一種有機(jī)磷。1.2.2操作步驟

(1)2，6一二溴苯醌氯酰亞胺試紙稱取0．05g2，6一二溴苯醌氯酰亞胺，溶于10mL95%(體積分?jǐn)?shù))乙醇中，將定性濾紙浸濕，晾干備用。

(2)檢驗(yàn)

吸取按剛果紅法制備的樣液滴，于2，6一二溴苯醌氯酰亞胺試紙上，稍干，置于溴蒸氣上蒸熏片刻，呈現(xiàn)出不同顏色的斑點(diǎn)，根據(jù)所顯示斑點(diǎn)的顏色鑒別屬于哪種有機(jī)磷農(nóng)藥。試驗(yàn)時(shí)，為防止色素干擾，試紙要臨時(shí)配制。有機(jī)磷農(nóng)藥呈色反應(yīng)如表6-1所示。

表6一l有機(jī)磷農(nóng)藥的呈色反應(yīng)

農(nóng)藥種類反應(yīng)顏色反應(yīng)時(shí)間3911鮮黃，周圍較深5s-3min1605淡黃→紫紅30s-3min1059鮮黃→暗黃30s-3min4049黃→黃棕30s-5min樂果黃→橙黃20s-5minM-74淡土黃→暗紫紅30s-5min三硫磷土黃→杏紅15s-5min1240鮮黃→暗黃30s-3min2.2有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的定量檢測(cè)2.2.1原理

氣相色譜法－將樣品的峰高或峰面積與標(biāo)準(zhǔn)品相比較做定量分析。本法適用于水果、蔬菜、谷類的檢測(cè)。最低檢出量為0.1－0.25ng,2.2.2儀器和試劑

(1)儀器組織搗碎機(jī)，粉碎機(jī)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，氣相色譜儀：附有火焰光度檢測(cè)器(FPD)。

(2)試劑

丙酮，二氯甲烷，助濾劑Celiee545，農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：敵敵畏99％，速滅磷順式60%,久效磷99%，甲拌磷98％，巴胺磷99％，二嗪農(nóng)98％.

2.3操作步驟

(1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

分別準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)品，用二氯甲烷為溶劑，分別配制成1.0mg／mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，儲(chǔ)于冰箱(4℃)中。使用時(shí)用二氯甲烷分別稀釋成1.0ug／mL的標(biāo)準(zhǔn)使用液。

(2)試樣制備取糧食樣品粉碎，過20目篩制成糧食試樣；取水果、蔬菜樣品洗凈，晾干，去掉非可食部分后制成待測(cè)試樣。

(3)提?、俜Q取50.00g水果、蔬菜試樣，置于300mL燒杯中，加入50mL水和100mL丙酮(總體積150mL)。用組織搗碎機(jī)搗1～2min。勻漿液經(jīng)鋪有兩層濾紙和約10gCellte545的布氏漏斗，減壓抽濾。從濾液中分取l00mL，移至500mL分液漏斗中。

②稱取25.00g谷物試樣，置于300mL燒杯中，加入50mL水和100mL丙酮，以下同上一步驟。

(4)凈化向以上兩種濾液中，加人10～15g氯化鈉，使呈飽和狀態(tài)。猛烈振搖2～3min，靜置10min，使丙酮從水相中鹽析出來，水相用50mL二氯甲烷振搖2min，再靜置分層。將丙酮與二氯甲烷提取液合并，并經(jīng)裝有20～30g無水硫酸鈉的玻璃漏斗脫水，濾人250mL圓底燒瓶中。再以約40mL二氯甲烷分?jǐn)?shù)次洗滌容器和無水硫酸鈉，洗滌液也并入燒瓶中。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至約2mL，濃縮液定量轉(zhuǎn)移至5～25mL容量瓶中，加二氯甲烷定容至刻度。

測(cè)定有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量氣相色譜條件色譜柱：a．玻璃柱2.6m×3mm，填裝涂有4.5%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))DC200+2.5％(質(zhì)量分?jǐn)?shù))OV-17的ChromosorbWAWDMCS(80～100目)的擔(dān)體。b．玻璃柱2.6m×3mm(i．d．)，填裝涂有1.5%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))DCOE-1的ChromosorbWAWI)MCS(60～80目)。氣體速度：氮?dú)?N2)50mL／min、氫氣(H2)100mL／min、空氣50mL／min。溫度：柱溫240℃，汽化室260℃，檢測(cè)器270℃。測(cè)定：吸取2～5uL混合標(biāo)準(zhǔn)液及樣品凈化液，色譜儀中，以保留時(shí)間定性。以試樣的峰高或峰面積與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。結(jié)果計(jì)算

Xi=式中xi—i組分有機(jī)磷農(nóng)藥的含量，mg／kgAi—試樣中i組分的峰面積，積分單位

Asi

—混合標(biāo)準(zhǔn)液中i組分的峰面積，積分單位

V1

—試樣提取液的總體積，mLV2

—凈化用