抗心磷脂抗體的檢測(cè)與臨床意義參考課件

抗心磷脂抗體的檢測(cè)

與臨床意義時(shí)景偉2014-04-021

提綱1什么是抗心磷脂抗體2抗心磷脂抗體的檢測(cè)方法3抗心磷脂抗體的臨床意義

（抗磷脂綜合征）22023/12/4什么是抗心磷脂抗體？第一分部32023/12/4抗心磷脂抗體的定義抗心磷脂抗體（anticardiolipin，aCL）是一種以血小板和內(nèi)皮細(xì)胞膜上帶負(fù)電荷的心磷脂作為靶抗原的自身抗體。常見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）及其他自身免疫性疾病。該抗體與血栓形成、血小板減少、習(xí)慣性流產(chǎn)或?qū)m內(nèi)死胎關(guān)系密切。1.自身抗體是指針對(duì)自身組織，器官、細(xì)胞及細(xì)胞成分的抗體；2.人體有完整的自身免疫耐受機(jī)制的維持；3.自身免疫反應(yīng)，產(chǎn)生自身抗體；4.正常人體血液中可以有低滴度的自身抗體。42023/12/4*狼瘡抗凝物（Lupusanticoagulants，LA）*抗心磷脂抗體（Anticardiolipinantibodies，aCL)

*抗

2-糖蛋白I抗體（Anti-

2-glycoprotein-Iantibodies，

a-

2-GPI)抗磷脂抗體52023/12/4抗磷脂抗體抗心磷脂抗體62023/12/4*抗心磷脂抗體(aCL)

屬于IgG/IgM型的自身抗體，通常使用ELISA方法測(cè)定，其中IgG被認(rèn)為與血栓形成和習(xí)慣性流產(chǎn)有很強(qiáng)的相關(guān)性?？剐牧字贵w

72023/12/4抗心磷脂是pangborn1941年從牛的心肌中分離出來的一種具有抗原性的磷脂，并加以命名抗心磷脂抗體的免疫學(xué)分型有IgG和IgA和IgM三類，其發(fā)生率男女無明顯差異?？剐牧字贵w

82023/12/4

研究證實(shí)，許多因素與aCL產(chǎn)生密切相關(guān)，常見的原因有：（1）自身免疫性疾?。喝缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）、硬皮病等；（2）病毒感染：如腺病毒、風(fēng)疹病毒、水痘病毒、腮腺炎病毒等感染；（3）其它疾?。喝缰гw系統(tǒng)疾病等；（4）口服某些藥物：如氯丙嗪、吩噻嗪等；（5）少數(shù)無明顯器質(zhì)性疾病的正常人，特別是老年人?？剐牧字贵w

92023/12/4抗心磷脂綜合征與aCL抗磷脂綜合征（anti-phospholipidsyndrome,APS）是指由抗磷脂抗體（APL抗體）引起的一組臨床征象的總稱，主要表現(xiàn)為血栓形成，習(xí)慣性流產(chǎn)，血小板減少等。在同一患者可僅有上述一種表現(xiàn)，也可同時(shí)有多種表現(xiàn)。APS是一種自身免疫性疾病，目前公認(rèn)的診斷標(biāo)準(zhǔn)是病人具有下列臨床特點(diǎn)之一：全身各臟器動(dòng)、靜脈血栓：復(fù)發(fā)性流產(chǎn)；胎兒死亡以及由于胎兒宮內(nèi)窘迫提前分娩致新生兒死亡；自身免疫性血小板減少，上述臨床表現(xiàn)同時(shí)伴有病人血清中出現(xiàn)抗心磷脂抗體（aCL）和/或狼瘡凝血因子（LA）。在臨床上由于抗心磷脂抗體的特異性更強(qiáng)，與上述臨床表現(xiàn)關(guān)系更密切，因而也稱為抗心磷脂綜合征（anti-cardiolipinsyndrome,ACS)。102023/12/4第一部分小結(jié)抗心磷脂抗體（aCL）①自身抗體②抗磷脂抗體③與一些疾病相關(guān)抗磷脂綜合征抗心磷脂綜合征≈112023/12/4抗心磷脂抗體的檢測(cè)第二部分122023/12/4方法學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)采用ELISA法，分為IgG、IgM和IgA型132023/12/4檢測(cè)流程血清1:201倍稀釋酶結(jié)合物1:10倍稀釋取100微升稀釋后血清加入反應(yīng)孔溫浴30min洗板3次加入稀釋后的酶結(jié)合物100微升溫浴30min洗板3次加入TMB底物液100微升避光溫浴15min加入終止液100微升酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)讀取吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，報(bào)結(jié)果142023/12/4注意事項(xiàng)1.樣本：血清或EDTA、肝素、檸檬酸鹽抗凝的血漿2.酶結(jié)合物使用前需混勻，稀釋后需在4小時(shí)內(nèi)使用3.所有試劑使用前需在室溫（18-25℃）平衡30min4.底物液對(duì)光敏感，需避光顯色152023/12/4結(jié)果判讀162023/12/4結(jié)果判讀半定量：按照以下公式將對(duì)照血清或患者樣本的吸光度值比上標(biāo)準(zhǔn)品2的吸光度值，通過比值半定量估計(jì)結(jié)果。比值＝對(duì)照或患者樣本的吸光度值標(biāo)準(zhǔn)品2的吸光度值歐蒙建議按照以下原則解釋結(jié)果：比值＜1.0陰性比值≥1.0陽性172023/12/4結(jié)果判讀定量檢測(cè)：分別以3份標(biāo)準(zhǔn)血清濃度和其吸光度為橫、縱坐標(biāo)，以點(diǎn)對(duì)點(diǎn)的方式繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出患者血清中的抗體濃度。歐蒙建議對(duì)結(jié)果做如下解釋：＜12陰性≥12陽性182023/12/4結(jié)果判讀關(guān)于單位：心磷脂抗體IgA/G/MRU/ml心磷脂抗體IgMPL-IgM-U/ml心磷脂抗體IgGPL-IgG-U/ml心磷脂抗體IgAPL-IgA-U/ml相對(duì)單位百分位經(jīng)親和層析從標(biāo)準(zhǔn)血清純化得到1微克/ml抗心磷脂IgA抗體結(jié)合心磷脂的活性192023/12/4抗心磷脂抗體的臨床意義第三部分202023/12/4所有發(fā)生自發(fā)性靜脈血栓病變者對(duì)于小于50歲的人群或沒有其他明顯危險(xiǎn)因素的老年人，發(fā)生中風(fēng)或者外周動(dòng)脈栓塞事件者SLE或其他自身免疫疾病并發(fā)血栓病變者反復(fù)流產(chǎn)或伴有早產(chǎn)的妊娠并發(fā)癥的患者不明原因的血小板減少患者aPL實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的適應(yīng)癥212023/12/4

動(dòng)靜脈均可形成血栓，尤以靜脈血栓居多。靜脈血栓發(fā)生率70%，動(dòng)脈血栓30%，動(dòng)靜脈血栓5%。靜脈血栓以下肢深靜脈血栓為最多見。其他還有多種臟器、組織內(nèi)血栓形成。1.血栓形成臨床表現(xiàn)222023/12/4靜脈血栓多累積下肢深靜脈（水腫）、腎臟、肝臟、視網(wǎng)膜動(dòng)脈血栓多累積腦部（腦卒中）、上下肢（缺血性壞疽）、腎臟、腸系膜、冠狀動(dòng)脈（心肌梗死）232023/12/4動(dòng)、靜脈血栓*aPL抗體與血栓之間有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性*Love和Santoro對(duì)SLE發(fā)生血栓栓塞性意外的綜合報(bào)道242023/12/4

胎盤血管的血栓形成導(dǎo)致胎盤功能不全，可引起宮內(nèi)發(fā)育遲滯、反復(fù)流產(chǎn)。其發(fā)生率可達(dá)10%-25%，一般發(fā)生在妊娠10周以后。在第34周或之前還可發(fā)生先兆子癇或妊高癥以及嚴(yán)重的胎盤功能不足所致的早產(chǎn)。2.產(chǎn)科表現(xiàn)臨床表現(xiàn)252023/12/43.血液系統(tǒng)表現(xiàn)：

血小板減少有25%~50%的病例出現(xiàn)，但程度較輕，常在90x109/L以上，機(jī)制尚不清楚

溶血性貧血臨床表現(xiàn)262023/12/44.APS相關(guān)腎病

腎動(dòng)脈血栓/狹窄、腎臟缺血壞死、腎性高血壓、深靜脈血栓、微血管閉塞性腎病和相關(guān)的終末期腎病統(tǒng)稱為APS相關(guān)腎病臨床表現(xiàn)272023/12/44.其他類型的APS

網(wǎng)狀青斑（80%）

心臟瓣膜病變（晚期）

神經(jīng)精神癥狀——偏頭痛、舞蹈病、癲癇、

格林巴利綜合癥等

缺血性骨壞死（少見）臨床表現(xiàn)282023/12/4292023/12/4302023/12/4在抗磷脂抗體檢測(cè)結(jié)果的判讀上，應(yīng)該與臨床資料相結(jié)