流式細胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用

流式細胞術(shù)1精選ppt主要內(nèi)容數(shù)據(jù)的顯示與分析1流式細胞儀的原理2流式細胞儀免疫分析的技術(shù)要求

3流式細胞術(shù)在免疫檢查中的應(yīng)用

42精選ppt流式細胞術(shù)〔flowcytometry，F(xiàn)CM〕是以流式細胞儀作為檢測工具，結(jié)合激光光學、計算機、電子物理學、流體力學、細胞化學和免疫學等學科的理論與技術(shù)，對于處在快速直線流動狀態(tài)中的細胞或生物顆粒同時進行多參數(shù)、快速定量分析和分選的高新技術(shù)研究對象為生物顆粒，如各種細胞、微生物及人工合成微球等3精選ppt第一節(jié)流式細胞術(shù)的分析及分選原理

光學系統(tǒng)測試原理流式細胞儀電子系統(tǒng)液流系統(tǒng)光學原理光電轉(zhuǎn)換原理4精選ppt激光光電倍增管放大電路流式細胞儀是集多種技術(shù)為一體的新型高科技儀器激光技術(shù)單克隆抗體技術(shù)細胞熒光化學技術(shù)光電測量技術(shù)電子物理技術(shù)電子計算機技術(shù)能對于處在快速直線流動狀態(tài)中的細胞或生物顆粒同時進行多參數(shù)、快速定量分析和分選5精選ppt一、流式細胞儀分析的工作原理

熒光顯微鏡技術(shù)單克隆抗體與熒光染料技術(shù)計算機技術(shù)處理光信號激發(fā)光源改為激光提高檢測靈敏度和特異性

提高檢測速度和統(tǒng)計分析精確性

6精選ppt〔一〕流式細胞儀根本結(jié)構(gòu)包括流動室〔flowchamber〕和液流驅(qū)動系統(tǒng)作用：依次傳送待測樣本中的細胞到激光照射區(qū)理想狀態(tài)：細胞逐個傳送到激光束的中心，而且在特定的時間內(nèi)，應(yīng)該只有一個細胞或生物微粒通過激光束。1液流系統(tǒng)7精選ppt流動室和液流驅(qū)動系統(tǒng)

8精選ppt流動室——儀器的核心部件，待測樣品與激光在這里相交，通常由有機玻璃、光學玻璃或石英等制成。流動室內(nèi)充滿了鞘液，使細胞排成單列進入流動室噴嘴口，形成細胞液柱。9精選pptFCM的液流系統(tǒng)〔如何形成單個細胞流〕樣本管鞘液管10精選ppt液流驅(qū)動系統(tǒng)：包括壓縮空氣泵、壓力傳感器、鞘液過濾器和樣本壓力調(diào)節(jié)器等。常用的液流系統(tǒng)中細胞流和鞘液流的驅(qū)動一般采用正壓的方法控制的，保證了鞘液的流速恒定。鞘液以勻速通過流動室，因此整個液流系統(tǒng)運行流速是不變的。11精選ppt包括激發(fā)光源、分光鏡、光束成形器、透鏡組和光電倍增管。流式細胞儀的測定是基于對光信號的檢測來實現(xiàn)的，因此光學系統(tǒng)是流式細胞儀中最為重要的一個系統(tǒng)。2光學系統(tǒng)12精選ppt光學系統(tǒng)13精選ppt采用高壓汞燈，廉價、激發(fā)光譜廣泛，但在單一譜線上能量較弱，且功率不夠穩(wěn)定，應(yīng)用受到一定限制弧光燈

提供單波長、高能量、高穩(wěn)定性的光照，是快速、準確分析細胞微弱光的理想光源?，F(xiàn)代流式細胞儀多采用激光激光

激發(fā)光源14精選ppt光學系統(tǒng)：主要由多組透鏡、濾光片和分光鏡等光學元件組成，將不同波長的光信號送入不同的探測器1〕長通濾片〔longpassfilter，LP)2〕短通濾片〔shortpassfilter，SP)3〕帶通濾片〔bandpassfilter，BP〕濾片15精選ppt長通濾片只允許特定波長以上的光通過，如LP500濾片，只允許500nm以上的光通過短通濾片與長通濾片正好相反，只允許特定波長以下的光通過，如SP500濾片，只允許500nm以下的光通過帶通濾片

只允許相當窄波長范圍內(nèi)的光通過，濾片一般有兩個值，如BP500/50允許通過的波長范圍為475～525nm，中心值為500nm。

16精選ppt組成：光電轉(zhuǎn)換器、放大器和信號處理電路作用：將產(chǎn)生的各種光信號成比例的轉(zhuǎn)換成電信號，進行數(shù)字化處理后轉(zhuǎn)入電子計算機進行數(shù)據(jù)采集和分析。3電子系統(tǒng)17精選ppt高度聚焦激光束

〔二〕根本工作原理單細胞懸液

特異性熒光染料標記抗體染色流動室檢測區(qū)

恒定氣壓鞘液噴出

高壓

細胞單行排列

特異性熒光

+散射光

18精選ppt入射光束與液柱垂直方向前向小角方向熒光信號

側(cè)向散射光信號

前向散射光信號

熒光檢測系統(tǒng)

散射光檢測系統(tǒng)

前向散射光感受器

光信號光信號電信號計算機系統(tǒng)轉(zhuǎn)換

放大

19精選ppt20精選ppt二、細胞分選原理

〔一〕分選的根本原理流式細胞儀的分選是指從細胞群體中別離出感興趣的細胞，檢測的任意參數(shù)都可作為分選時指定的細胞的依據(jù)。分選的方式有捕獲式分選和電荷式分選，目前應(yīng)用最多的是電荷式分選。21精選ppt當單細胞懸液形成液柱通過流動室時，液柱被分割成一連串均勻的液滴。根據(jù)設(shè)定的被分選細胞的某個參數(shù)由邏輯電路判斷是否被分選。電荷式分選1

22精選ppt充電電路對選定細胞液滴充電，使其帶正電荷或負電荷，未被設(shè)定分選參數(shù)的細胞液滴那么不帶電荷。帶電細胞液滴通過靜電場而發(fā)生偏轉(zhuǎn)，落入收集器中，其他液體那么被當作廢液抽吸掉，完成細胞分選的目的。電荷式分選2

23精選ppt〔二〕FCM分選技術(shù)要求細胞分選對儀器的性能要求較高分選是流式細胞儀的重要功能之一分選功能的裝置較為復雜

分選指標分選速度

分選純度

分選收獲率

24精選ppt每秒可別離所要細胞的個數(shù)，一般要求分選速度至少達5000個/秒左右。分選純度2分選速度1分選收獲率3被分選出的細胞所占百分比，分選純度與儀器配置和細胞是否重疊有關(guān)。被分選出來的細胞占應(yīng)被分選的細胞的比例。通常情況下，分選純度和收獲率是相互矛盾。25精選ppt488nm激光+-前向散射光檢測器

熒光檢測器電磁場單個細胞被分類進入檢測管流式細胞儀分選系統(tǒng)26精選ppt第二節(jié)數(shù)據(jù)的顯示與分析一、參數(shù)1、散射光信號：分為前向散射光〔forwardscatter，F(xiàn)SC〕和側(cè)向散射光〔sidescatter，SSC〕。散射光不依賴于任何細胞樣品的制備技術(shù)，被稱為細胞的物理參數(shù)，反映的是細胞的大小的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。2、熒光信號27精選ppt二、散射光的測定前向散射光檢測器

側(cè)向散射光檢測器

在激光束的正前方，又稱小角散射FSC信號的強弱與細胞的體積大小成正比，檢測的是細胞或其他顆粒的外表屬性在激光束的垂直方向，又稱90°散射SSC信號的強弱與細胞內(nèi)顆粒結(jié)構(gòu)的質(zhì)量成正比，用于檢測細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)屬性28精選ppt前向散射光示意圖細胞大小29精選ppt側(cè)向散射光示意圖結(jié)構(gòu)復雜程度30精選ppt三、熒光測量當熒光抗體或其他染料染色的顆粒通過激光束時，染料吸收光子躍遷到激發(fā)態(tài)，返回基態(tài)時，染料釋放出能量，大局部以光的形式釋放。特異性熒光探針與單克隆抗體結(jié)合后，與細胞膜或細胞內(nèi)的靶抗原結(jié)合，經(jīng)染色后的細胞在激光的照射下，熒光染料發(fā)出比激發(fā)光波長長的熒光，檢測熒光素信號的強弱就可以了解抗原表達量的多少。31精選ppt〔一〕熒光信號測量與放大器線性放大器：輸入與輸出放大倍數(shù)相同，用于信號強度變化較小或具有生物學線性的信號對數(shù)放大器：輸入放大10倍，輸出由1變?yōu)?，用于信號強度變化較大且其光譜信號較復雜的信號〔二〕熒光補償消除重疊信號32精選ppt四、數(shù)據(jù)顯示方式X軸代表一維參數(shù)〔熒光或散射光信號強度〕，以通道(channel)表示，其與光強度之間的關(guān)系〔線性或?qū)?shù)〕依放大器的性質(zhì)而定，通道右側(cè)信號的光強度明顯高于左側(cè)，越靠右側(cè)光亮度越強?！惨弧硢螀?shù)直方圖33精選pptY軸代表顆粒計數(shù)〔Count〕，反映相同熒光或散射光強度的顆粒相對數(shù)量的多少，可用于定性、定量資料的分析。單參數(shù)分析只能表達具有相同特性細胞數(shù)量與光信號強度的關(guān)系，對復雜表型分析時單參數(shù)分析結(jié)果的準確性會受到諸多因素的干擾。34精選ppt雙參數(shù)直方圖是一種細胞與雙測量參數(shù)的圖形，X軸與Y軸分別代表一種參數(shù)。雙參數(shù)信號常采用對數(shù)信號，最常用的根本表示法是用點密圖來顯示。如果把一個散點圖分別投影到X軸和Y軸，可得到兩個單參數(shù)直方圖。臨床實踐中常以多個散點圖聯(lián)合分析?！捕畴p參數(shù)直方圖35精選ppt點圖由二維參數(shù)構(gòu)成，根據(jù)顆粒密度來反映相同光信號的顆粒數(shù)量的多少1、點圖

2、二維等高圖

等高圖(contourplot)是一種可以同時表達兩個檢測參數(shù)和細胞頻度的方式，其本質(zhì)也是雙參數(shù)直方圖36精選pptX軸反映SSC的信號強弱Y軸反映FSC的信號強弱

X軸反映FITC熒光信號強弱Y軸反映PE熒光信號強弱

點圖37精選ppt把代表相同細胞數(shù)目的點依次連接起來形成密閉曲線，越在里面的曲線代表的細胞數(shù)目越多，越密集的區(qū)域也就是細胞數(shù)目變化最快的區(qū)間。等間距等高線適用于細胞數(shù)目變化不大的情況對數(shù)間距等高線適用于細胞數(shù)目變化較大的情況二維等高圖38精選ppt三維坐標均為參數(shù)〔散射光或熒光〕而非細胞數(shù)對復雜的細胞亞群觀察更為直觀、準確，但對其數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析較難〔三〕三參數(shù)直方圖39精選pptFCM常常需要分析三個以上的參數(shù)，但軟件技術(shù)能夠無法顯示四維空間結(jié)構(gòu)。隨著FCM多色熒光信號檢測的開展，所得到的熒光信號和散射光信號需根據(jù)需要進行組合分析以獲得所需的信息。多參數(shù)分析能夠同時比較各種細胞的不同抗原表達水平，可以統(tǒng)計出多種數(shù)據(jù)?！菜摹扯鄥?shù)組合分析40精選ppt指同一張單參數(shù)或雙參數(shù)直方圖中根據(jù)信號的強弱來劃定分析區(qū)域，從而計算分析區(qū)域內(nèi)的細胞數(shù)量。Gate設(shè)置2Region設(shè)置

1指在某一張選定參數(shù)的直方圖上根據(jù)該圖的細胞群分布選定要分析的特定細胞群，并要求該樣本的所有其他參數(shù)組合的直方圖只表達該群細胞的分布情況。41精選pptRegion設(shè)置

Gate設(shè)置

42精選ppt五、流式細胞術(shù)的特點

①速度快

對單個細胞或生物顆粒進行快速、逐個檢測，測量速度可以到達每秒數(shù)千個甚至上萬個細胞②靈敏度高

每個細胞上只需帶有1000～3000個熒光分子即能檢測出來③多參數(shù)多色熒光染色同時分析單個細胞或生物顆粒的多種特征

④精度高

在細胞懸液中檢測細胞，比其他技術(shù)的變異系數(shù)更小，分辨率更高

⑤純度高

可以把指定特征的細胞分選出來，分選細胞的純度可到達99%以上⑥無害性

能保持細胞不被破壞，進行無害性定性或定量分析和分選

43精選ppt六、流式細胞術(shù)定量分析的本卷須知流式細胞儀的應(yīng)用已從科研進入了臨床，在進行科研和臨床檢驗定量分析過程中，應(yīng)明確各項工作環(huán)節(jié)的影響因素并對儀器性能進行嚴格的質(zhì)量控制，以保證檢測數(shù)據(jù)的準確性和可靠性。44精選ppt確保標本上機檢測前細胞濃度滿足儀器檢測要求。熒光抗體染色后需充分洗滌，注意混勻、低速離心，減少重疊細胞和細胞碎片。避光染色，保證細胞免疫熒光的穩(wěn)定。必須根據(jù)具體實驗目的設(shè)置必要的對照，確保實驗結(jié)果的準確性和客觀性，消除非特異性熒光的影響。判定結(jié)果時，應(yīng)注意減去本底熒光，可應(yīng)用計算機程序軟件，使定量分析更精確。本卷須知45精選ppt能否制備出合格的單細胞懸液是關(guān)系最終分析結(jié)果準確與否的關(guān)鍵。單細胞懸液大多來自生物樣品，不同組織來源的樣本制備方法也不同。第三節(jié)流式細胞儀免疫分析的技術(shù)要求一、FCM單細胞標本的制備

46精選ppt流式細胞術(shù)主要是以某一類細胞群為檢測對象，減少檢測時的干擾因素。新鮮的外周血是天然的單細胞懸液。單次密度梯度離心法是最常用于別離制備單個核細胞懸液，采用淋巴細胞別離液別離外周血中的單個核細胞?！惨弧惩庵苎獑渭毎麘乙褐苽?7精選ppt〔二〕培養(yǎng)細胞的單細胞懸液制備懸浮生長

貼壁生長

反復吹打

分散細胞

常規(guī)洗滌

低速離心

蛋白酶消化

機械吹打

細胞脫落

低速離心

漂洗重懸

單細胞懸液

培養(yǎng)細胞一般是以懸浮或貼壁的方式生長。48精選ppt將新鮮實體組織進行單細胞懸液的制備是一項困難而復雜的技術(shù)。理想的狀態(tài)是既要到達別離細胞的目的又要不損傷細胞。最常用的方法是酶消化法、機械法、化學處理法和外表活性劑處理法等。不管是哪種方法都不可防止的會對細胞外表膜結(jié)構(gòu)、細胞活性和功能等造成不同程度的損傷?！踩承迈r實體組織單細胞懸液制備49精選ppt該制備方法的建立擴大了流式細胞術(shù)的應(yīng)用范圍，有利于進行臨床回憶性研究和利用。常用的方法有二甲苯脫蠟法、組織清潔劑脫蠟法和甲氧-雙氧水處理法。對石蠟切片的要求較嚴格?！菜摹呈灠窠M織單細胞懸液制備50精選ppt活檢標本及各種內(nèi)鏡取材標本也克制備成單細胞懸液。一般要求鏡檢取材標本至少取3塊以上。制備方法與新鮮實體組織根本相同。〔五〕活檢標本單細胞懸液制備51精選ppt脫落細胞應(yīng)去除取材伴隨的雜質(zhì)后，再制備單細胞懸液。脫落細胞用流式細胞術(shù)檢測，是一種更為客觀的檢測手段，對臨床診斷和治療很有意義?！擦趁撀浼毎膯渭毎麘乙褐苽?2精選pptFCM主要的信號參數(shù)包括散射光信號和熒光信號，熒光染色是保證熒光信號產(chǎn)生的關(guān)鍵步驟。目前間接免疫熒光染色已較少用；直接免疫熒光染色以雙色以上分析較為常用。單色免疫熒光多用于單克隆抗體特異性較高、單一細胞群的抗原檢測，多色免疫表型分析宜采用同一品牌的試劑。二、FCM樣品的熒光染色

53精選ppt直接免疫熒光染色法是熒光抗體技術(shù)最根本、最簡單的方法，多用于細胞外表標志的染色分析。〔一〕直接免疫熒光染色法優(yōu)點

操作簡單，方法簡便、快速特異性強，與其他抗原交叉染色較少反響中只有兩種因素〔細胞與抗體〕參與，結(jié)果判斷較簡單54精選ppt〔二〕間接免疫熒光染色法未標記的特異性抗體〔一抗〕與待測抗原反響，再用熒光素標記的抗免疫球蛋白抗體〔二抗〕進行標記染色，通過對熒光素標記的二抗所發(fā)射的熒光信號進行檢測，對標本中待測抗原進行鑒定。一抗二抗55精選ppt優(yōu)點

敏感性高具有更廣的通用性缺點

操作步驟繁瑣，干擾因素較多易產(chǎn)生非特異性染色，結(jié)果判斷有時比較困難56精選ppt多色流式細胞儀的開發(fā)促進了新的熒光染料的合成及抗體標記物的開展。多色標記簡便、省時、節(jié)約本錢，但對操作人員的要求較高。試劑的選擇還需結(jié)合儀器的配置考慮?！踩扯鄥?shù)分析時熒光抗體的組合標記57精選ppt自發(fā)熒光：未經(jīng)熒光標記的細胞受到激光照射后所發(fā)出的熒光。每種細胞群都有不同水平的自發(fā)熒光，如淋巴細胞、中性粒細胞、嗜酸性粒細胞等。自發(fā)熒光易引起信號干擾，出現(xiàn)假陽性結(jié)果，在實際臨床檢驗工作中應(yīng)注意區(qū)別?！菜摹匙园l(fā)熒光58精選ppt〔五〕FCM常見熒光染料的種類和特性盡可能高的光子產(chǎn)量，以提高信號強度對激發(fā)光有較強的吸收，以降低背景噪音激發(fā)光譜與發(fā)射光譜之間要有盡可能大的間隔，以減少背景信號對熒光信號的干擾

易于與被標記的抗原、抗體或其他生物物質(zhì)結(jié)合，而不會影響被標記物的特性理想熒光染料59精選ppt常用的染料有以下幾種：異硫氰基熒光素〔FITC〕藻紅蛋白〔PE〕別藻青蛋白〔APC〕藻紅蛋白偶聯(lián)物PE-Cy5

得州紅〔Texasred〕藻紅蛋白偶聯(lián)物PE-Cy7

60精選ppt常用熒光染料的特性和應(yīng)用熒光染料激發(fā)光(nm)發(fā)射光(nm)顏色應(yīng)用FITC488525綠色免疫熒光PE（RDI）488575橙色免疫熒光PE-Cy5488670紅色

免疫熒光PE-Cy7488755深紅色免疫熒光ECD488620橙紅色免疫熒光PI488620橙紅色DNA染色APC633670紅色61精選ppt三、免疫膠乳顆粒技術(shù)的應(yīng)用液相芯片技術(shù)：利用膠乳顆粒的載體特性，結(jié)合熒光標記和FCM，實現(xiàn)對多種可溶性物質(zhì)的分析。

低樣本量、多參數(shù)、更高檢測效率62精選ppt四、流式細胞儀的質(zhì)量控制〔一〕單細胞懸液制備的質(zhì)量控制材料新鮮、防止細胞膜損傷溶血劑由于低滲液，嚴格掌握低滲時間機械法優(yōu)于化學法或酶法，控制力度溫度：25-37℃，PH7.0-7.263精選ppt〔二〕免疫熒光染色的質(zhì)量控制高溫熒光淬滅的可能性增大對熒光染色結(jié)果影響顯著，一般要求溫度在20℃以下溫度

pH值改變那么會造成熒光光譜改變，影響熒光強度pH值

非特異性熒光強弱代表非特異性結(jié)合水平，不消除將使檢測結(jié)果假性升高非特異熒光細胞濃度低、溶劑的性質(zhì)等其他固定劑與細胞的某些物質(zhì)結(jié)合后，干擾了熒光染料與細胞成分的結(jié)合，造成熒光強度改變固定劑64精選ppt〔三〕儀器操作技術(shù)的質(zhì)量控制光路與流路校正PMT校準絕對計數(shù)的校準65精選ppt〔四〕免疫檢驗的質(zhì)量控制在流式細胞術(shù)實驗過程中，實驗的每一個環(huán)節(jié)都會存在很多不穩(wěn)定的因素，因此必須嚴格做好質(zhì)量控制工作，從而保證實驗的科學性和可靠性。66精選ppt環(huán)境要求

一般要求環(huán)境溫度在20～25℃之間，實驗室內(nèi)盡量減少灰塵和煙塵，光源要有良好的屏蔽作用。儀器校正

每天校正，定期進行光路和流路校準，還需進行不同儀器間和不同實驗室間的比對。

樣本要求

合格的單細胞懸液是分析成功的關(guān)鍵，保證待測標本新鮮，防止細胞損傷等。12367精選ppt設(shè)置對照

最重要的是設(shè)置同型對照和全程質(zhì)控，將質(zhì)控品與待測標本一起操作，以保證檢測結(jié)果的準確性數(shù)據(jù)的獲取和分析獲取實驗數(shù)據(jù)前，應(yīng)先調(diào)節(jié)儀器；分析實驗數(shù)據(jù)時，要根據(jù)實驗目的來決定分析模型。4568精選ppt淋巴細胞亞群的檢測已成為某些疾病診斷、療效評價和免疫功能檢測的常規(guī)手段。不同淋巴細胞亞群用普通光學顯微鏡、血細胞分析儀無法鑒別，其在分化成熟過程中表達的CD抗原特性也不同，利用流式細胞儀結(jié)合單克隆抗體技術(shù)能夠準確分類計數(shù)淋巴細胞亞群。第四節(jié)流式細胞術(shù)在免疫學檢查中的應(yīng)用

一、淋巴細胞亞群分析69精選ppt采用三色標記的單克隆熒光抗體，可對T細胞亞群進行分類。Th細胞表達CD3+CD4+CD8-Tc細胞表達CD3+CD4-CD8+〔一〕T淋巴細胞及亞群分析70精選ppt成熟B細胞主要表達CD19、CD20、CD21、CD22分子，同時檢測CD25分子，可進一步觀察B細胞活化狀態(tài)?！捕矪淋巴細胞及亞群分析〔三〕NK細胞分析目前臨床上常采用三色熒光抗體標記將CD3-CDl6+CD56+淋巴細胞定為自然殺傷細胞〔Natutalkillercell，NK細胞〕。71精選ppt項目百分率(%)絕對數(shù)(個/μl)比值總T淋巴細胞(CD3+CD19-)50～84955～2860總B淋巴細胞(CD3-CD19+)5～1890～560輔助/誘導性T淋巴細胞(CD3+CD4+)27～51550～1440抑制/細胞毒性T淋巴細胞(CD3+CD8+)15～44320～1250輔助/抑制性T淋巴細胞比值(CD3+CD4+/CD3+CD8+)0.71～2.78NK細胞(CD3-CD16+CD56+)7～40150～1100T淋巴細胞+B淋巴細胞+NK細胞95～1001530～3700注：每個實驗室宜建立本室的參考范圍，不同人群、不同試劑、不同地區(qū)可能有差異健康成年人外周血淋巴細胞亞群分析的參考區(qū)間72精選ppt細胞介導細胞毒實驗：淋巴細胞與靶細胞共培養(yǎng)，參加碘化丙啶〔PI，滲透到死亡細胞致其染紅色〕，細胞內(nèi)細胞因子測定：同時測定多種CK二、淋巴細胞功能分析

73精選pptFCM在血液病診斷、治療和預后判斷方面，具有非常重要的價值。三、白血病免疫表型分析

正確區(qū)別急性髓細胞性白血病〔AML〕和急性淋巴細胞性白血病〔ALL〕。正確鑒別AML中的M0、M6、M7型。正確診斷雙系列型或雙表型白血病。正確診斷少見、疑難白血病。發(fā)現(xiàn)僅表達個別次要非本系列相關(guān)抗原的白血病。74精選ppt正常血細胞在分化發(fā)育成熟過程中，某些抗原的表達與否可作為鑒別和分類血細胞的標記。白血病細胞可用造血細胞分化抗原類標記檢測。FCM結(jié)合單克隆抗體的應(yīng)用可以提高白血病分類診斷的符合率，是一種客觀的檢測手段。FCM對白血病復發(fā)的主要根源，微小殘留病灶〔MRD〕的檢測具有高敏感性和特異性，早期檢出MRD防止疾病復發(fā)。75精選pptFAB分類CD13CD33CD11bCD14HLA-DRCD34CD117MPOM0++/---++++M1++-/+-++++M2++--++/-++M3++----++M4+++++/-+/-++M5a+++/-+/-+/-+-/+M5b++++++-/+M6+/-+/-+或--+/--+M7-+/---++?-典型AML的免疫表型特點76精選ppt獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的特征是CD4+T淋巴細胞數(shù)量和功能的進行性破壞,從而引起全身繼發(fā)嚴重感染和癌變。FCM可以快速檢測外周血CD4+T和CD8+T淋巴細胞相對數(shù)和絕對數(shù)的變化，同時也可以檢測CD4+T細胞的功能變化。四、艾滋病的診斷與治療

77精選pptFCM是當前血小板研究中不可缺少的檢測工具，可用于檢測血小板的多項指標。對血小板相關(guān)的多種疾病診斷、治療和預防，以及抗血小板活化藥物的研究、評價及治療監(jiān)測等方面具有重要意義和研究價值。血小板分析一般通過SSC和FSC散射光對數(shù)取樣設(shè)門。五、血小板分析78精選ppt根本原理：用某種熒光染料與網(wǎng)織紅細胞內(nèi)的RNA結(jié)合，再通過流式細胞術(shù)檢測被染色的網(wǎng)織紅細胞數(shù)目。噻唑橙(thiazoleorange，TO)是目前用于FCM法分析網(wǎng)織紅細胞最理想的一種染料。六、網(wǎng)織紅細胞分析

79精選ppt陣發(fā)性睡眠性血紅蛋