分光光度計(jì)操作規(guī)程_第1頁
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分光光度計(jì)操作規(guī)程一、儀器設(shè)備721、723可見分光光度計(jì)、752紫外可見分光光度計(jì)、比色液及標(biāo)準(zhǔn)溶液、濾紙等。二、原 理器測(cè)定的波長(zhǎng)范圍不同,可以依據(jù)自己的需要選擇要使用的儀器?!不蛘咄高^率〕與溶質(zhì)的濃度成正比〔玻爾定律。通過準(zhǔn)確濃度的〔透過率測(cè)定未知濃度的待測(cè)樣品的吸光值〔透過率,與標(biāo)準(zhǔn)曲線相比較就可以得到其濃度。四、適用范圍可廣泛用于醫(yī)學(xué)衛(wèi)生、臨床檢測(cè)、生物化學(xué)、石油化工、環(huán)保檢測(cè)、質(zhì)量掌握等方面作定量、定性分析。具體到我們?cè)囼?yàn)室,可以對(duì)多糖、蛋白、核酸等物質(zhì)進(jìn)展定性、定量UV-3150PC紫外可見近紅外分光光度計(jì)還可以測(cè)量近紅數(shù)據(jù)處理與分析。五、操作步驟我們以UV-3150PC紫外可見近紅外分光光度計(jì)為例表達(dá)光譜儀器的性能和操作方法。1、插上電源,翻開光度計(jì)前面的電源開關(guān)。2UVProbeUVProbeUVProbe中“Connect”圖標(biāo)聯(lián)機(jī),消滅自檢畫面。3、如自檢完全部綠燈亮,則點(diǎn)擊“OK”進(jìn)入系統(tǒng)。假設(shè)消滅紅燈亮,可關(guān)掉光度計(jì)重連接,假設(shè)仍未通過自檢,應(yīng)馬上報(bào)告儀器負(fù)責(zé)教師。4UVProbe菜單欄和工具欄。UVProbe有四大主要模塊,包括光譜掃描模塊、光度測(cè)量模塊、時(shí)間掃描模塊法。5、點(diǎn)下光譜掃描圖標(biāo),消滅光譜掃描界面。6、點(diǎn)擊方法按鈕,消滅方法設(shè)置對(duì)話框。在此可以設(shè)置掃描波長(zhǎng)范3200~190nm??梢栽O(shè)置掃描速度,一般可選中速〔Medium〕或快速〔Fast〕進(jìn)展掃描。采樣間隔表示光度計(jì)nm讀一個(gè)吸光度值,如沒有特別要求,選擇自動(dòng)即可。可選擇是否重復(fù)掃描曲線,假設(shè)重復(fù)則設(shè)置重復(fù)次數(shù)和間隔時(shí)間。7“SamplePreparation”稀釋倍數(shù)和測(cè)量光程等。也可以輸入樣品的其他信息。8、點(diǎn)擊“InstrumentParameters〔儀器參數(shù)〕”設(shè)置測(cè)量方式和儀器的一些參數(shù)。在測(cè)量模式中可選擇“Transmittance〔透過率〕”、吸光度能量和反射其中Reflectance一般用積分球測(cè)定固體樣品時(shí)使用。狹縫設(shè)置在1500~500nm5nm。9、換燈和檢測(cè)器可依據(jù)所測(cè)樣品進(jìn)展設(shè)置,換燈在393~282nm范895~750nm范圍內(nèi)任設(shè)一個(gè)值即可。樣品吸取峰位置以免影響測(cè)定值。10樣的空白溶液,點(diǎn)擊“Baseline”,開頭進(jìn)展基線校正,儀器掃描完成0“Start”0.001,750nm0重進(jìn)展基線掃描。11、基線校正完成后,取出樣品架的空白溶液,放入樣品溶液,點(diǎn)擊“Start”開頭掃描曲線。掃描完成后,消滅保存路徑框和文件名框,設(shè)置好后消滅掃描曲線。12、曲線掃描完成后,在譜圖上點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵,消滅快捷菜單。點(diǎn)擊“AutoScale”“CrossHair>Display”鼠標(biāo)顯示為穿插線,用鼠標(biāo)將穿插線放到曲線上某點(diǎn)即可顯示該點(diǎn)的波長(zhǎng)和吸光度值。13、點(diǎn)擊“Label”可以在譜圖上添加標(biāo)簽,可在其中輸入文本以標(biāo)記“Legend”據(jù),則在左面重疊圖上顯示其曲線。14、假設(shè)從右鍵快捷菜單中選擇“Customize〔自定義〕”,可以自定義曲線顯示顏色還可定義坐標(biāo)軸的數(shù)值。15、得出曲線后可以對(duì)譜圖進(jìn)展一系列的處理。點(diǎn)擊“DataPrint〔顯示數(shù)據(jù)〕”圖標(biāo)可以將譜圖曲線直接顯示為數(shù)值。除空白、倒數(shù)光譜、對(duì)數(shù)光譜等處理。點(diǎn)擊“PeakPoint〔顯示峰值〕”按鈕顯示“波峰”和“波谷”的數(shù)值。點(diǎn)擊“PointPick”圖標(biāo),輸入要顯示的波長(zhǎng)值,馬上顯示出所輸入波特長(zhǎng)的吸光度值。點(diǎn)擊“PeakArea”,設(shè)定峰閾值,即顯示大于此閾值的峰區(qū)域。點(diǎn)擊“Sewingbox〔裁縫〕”圖標(biāo),可以進(jìn)展譜圖的裁剪和縫合。16“SomeSpectrumdatahasnotbeensaved!Doyoustillwanttoexitandlostunsavedchange?〔還有光譜數(shù)據(jù)尚未保存,你是要離開而不保存數(shù)據(jù)嗎?〕”選擇“No”返回主界面保存全部數(shù)據(jù)。六、留意事項(xiàng)1、光度計(jì)燈源壽命有限,假設(shè)長(zhǎng)時(shí)間不測(cè)量,應(yīng)通過UVProbe軟件斷開連接〔,然后關(guān)閉光度計(jì)電源。2、使用分光光度計(jì)時(shí)要保證樣品室確定干凈,留神放入樣品,放入樣品池和光度計(jì)外外表。3、儀

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