《復(fù)方中藥對山羊生理生化指標(biāo)的影響實驗探究》6500字

復(fù)方中藥對山羊生理生化指標(biāo)的影響實驗探究目錄TOC\o"1-2"\h\u9377摘要 112483前言 2145391材料與方法 2260131.1試驗動物及處理 2291441.2試驗藥物 3124791.3試驗器材 3138791.4飼養(yǎng)管理 3226481.5生化指標(biāo)的測定 3118151.6數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 4149672結(jié)果與分析 4259502.1飼料中加入復(fù)方中藥山羊血清生理生化指標(biāo)的影響 4197942.2飼料中加入復(fù)方中藥對山羊各種生物酶的影響 548492.3復(fù)方中藥對山羊血常規(guī)指標(biāo)的影響 5254282.4復(fù)方中藥對山羊免疫球蛋白的影響 63473討論 6248063.1飼料中加入復(fù)方中藥對山羊血清生理生化指標(biāo)的影響 681483.2飼料中加入復(fù)方中藥對山羊各種生物酶的影響 8274013.3復(fù)方中藥對山羊血常規(guī)指標(biāo)的影響 8203193.4復(fù)方中藥對山羊免疫球蛋白的影響 9303844結(jié)論 920783【參考文獻】 10摘要本試驗旨在研究復(fù)方中藥對山羊的生理生化指標(biāo)和免疫功能的影響。本實驗選取70日齡，體重25kg左右，身體健康的公山羊做實驗。本試驗將羊隨機分成兩組，一組空白組，一組實驗組，每組30只羊，試驗組用0.5%的復(fù)方中藥拌料飼養(yǎng)，空白組則不加復(fù)方中藥。試驗期30天。結(jié)果表明，試驗組的白蛋白（Alb）、球蛋白（Glb）、總蛋白（T-Pro）的含量顯著高于空白組（P＜0.05），試驗組肌酐（Cre）和尿素氮（Bun）、鈣（Ｃa）和無機磷（Ｇｈ）顯著低于空白組（P＜0.05），試驗組的總膽紅素（TB），葡萄糖（Glu）和總膽固醇（T-Cho）低于空白組但差異不顯著（P＞0.05）；試驗組天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、谷氨?；D(zhuǎn)移酶（GGT）含量顯著低于空白組（P＜0.05），堿性磷酸酶（ALP）和乳酸脫氫酶（LDH）含量低于空白組但差異不顯著（P＞0.05）；試驗組白細(xì)胞（WBC）和淋巴細(xì)胞（LY）等免疫細(xì)胞的含量均高于空白組且差異顯著（P＜0.05）；試驗組紅細(xì)胞（RBC）和血紅蛋白（HGB）的含量均高于空白組且差異顯著（P＜0.05）；試驗組免疫球蛋白lgG、lgA和lgM的含量顯著高于空白組（P＜0.05）。綜上所訴，使用本復(fù)方中藥后的山羊的代謝功能和免疫功能有促進作用，對山羊的血糖和酸堿平衡無毒副作用，為綠色多功能飼料添加劑提供理論依據(jù)，促進中藥飼料添加劑在羊類養(yǎng)殖中的發(fā)展。關(guān)鍵詞：山羊；復(fù)方中藥；生理生化指標(biāo)；血常規(guī)；免疫球蛋白前言自抗生素被發(fā)現(xiàn)以來，一直被用于人類的藥物生產(chǎn)和畜禽養(yǎng)殖中，其作為飼料添加劑對畜牧業(yè)作出了巨大貢獻，大大提高了飼料利用率和動物的生產(chǎn)性能，保障了動物的健康,但也使大量致病菌產(chǎn)生耐藥性。過量抗生素的使用不僅使致病菌產(chǎn)生耐藥性，還會在畜禽體內(nèi)殘留大量藥物，嚴(yán)重危害人們的身體健康。中國是中藥的發(fā)源地，天然草藥種類多，栽培歷史悠久、防病治病應(yīng)用已超過千年。中藥藥材主要采摘于大自然中的天然藥草和礦物質(zhì)，屬于天然產(chǎn)物，無人工合成物質(zhì)，被人們稱為綠色添加劑。自2020年1月1日起，退出除中藥外的所有促生長類藥物飼料添加劑品種；自2020年7月1日起，飼料生產(chǎn)企業(yè)停止生產(chǎn)含有促生長類藥物飼料添加劑（中藥類除外）的商品飼料。近年來，國內(nèi)外大量機構(gòu)的研究發(fā)現(xiàn)，中藥飼料添加劑具有天然性，毒副作用小，無抗藥性等優(yōu)點。中藥作為飼料添加劑在畜禽保健和治療方面的研究已是大趨勢。目前中藥飼料添加劑在豬、禽方面應(yīng)用廣泛，但在反芻動物方面應(yīng)用較少。本試驗用復(fù)方中藥作為飼料添加劑飼喂山羊，測定山羊的生理生化指標(biāo)、血常規(guī)和免疫功能參數(shù)的變化，來研究復(fù)方中藥對山羊的生理生化指標(biāo)和免疫功能的影響，探討中藥添加劑的作用機理，促進中藥在羊類養(yǎng)殖的發(fā)展。1材料與方法1.1試驗動物及處理選擇70日齡體重25kg左右，身體健康的公山羊60只，隨機分配成兩組，對照組與試驗組，每組30只，試驗組在日糧中添加0.5%的復(fù)方中藥。試驗前對羊進行驅(qū)蟲。試驗用羊由西昌市牧樂專業(yè)養(yǎng)殖合作社提供。試驗時間30天。在試驗結(jié)束后，隨機各組選取10只羊頸部靜脈采血15ml用EDTA-2Na抗凝血，3000r/min離心15分鐘，分離血清，置-20℃保存待測。1.2試驗藥物本試驗藥物采購于西昌市某藥店，藥物由某動物基礎(chǔ)實驗室采用超微粉技術(shù)處理制作為散劑。1.3試驗器材采用成都斯瑪特科技有限公司生產(chǎn)的全自動生化分析儀（SMT-120V）和成都普利泰生物科技有限公司生產(chǎn)的生化指標(biāo)定量檢測試劑盤（綜合檢測23項）檢測血液生化指標(biāo)。采用深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司產(chǎn)品，全自動血細(xì)胞分析儀（BC-5000Vet）檢測血常規(guī)指標(biāo)。1.4飼養(yǎng)管理試驗期間，飼養(yǎng)方式采用全舍飼，每日飼喂兩次，分別是早上9:00和下午16:00，自由飲水。試驗期間按3kg/只供給基礎(chǔ)日糧?；A(chǔ)日糧的組成為，玉米35%，豆粕15%，菜粕14%，麩皮9%，食鹽0.5%，磷酸氫鈣0.5%，苜蓿草粉20%，預(yù)混料6%。在每日喂飼料時，充分拌料，以免造成羊產(chǎn)生挑食行為。同時每日進行料槽的清洗，確保無剩料影響實驗結(jié)果。試驗期間不定期打掃圈舍衛(wèi)生并消毒，保持圈舍干凈整潔。1.5生化指標(biāo)的測定1.5.1復(fù)方中藥對山羊血清生化指標(biāo)的影響采用全自動生物化學(xué)分析儀對山羊的球蛋白（Glb）、白蛋白（Alb）、白球比、總蛋白（T-Pro）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶（GGT）、堿性磷酸酶（ALP）、乳酸脫氫酶（LDH）、總膽紅素（TB）、肌酐（Cre）、葡萄糖（Glu）、尿素氮（Bun）、總膽固醇（T-Cho）、鈣（Ｃa）、無機磷（Ｇh）進行檢測。1.5.2復(fù)方中藥對山羊血常規(guī)指標(biāo)的影響采用邁瑞公司的血細(xì)胞分析儀對山羊的中性粒細(xì)胞數(shù)（Gran）、中間細(xì)胞數(shù)（Mid）、白細(xì)胞總數(shù)（WBC）、淋巴細(xì)胞數(shù)（LY）、血紅蛋白（HGB）、淋巴細(xì)胞百分比(LY)、中間細(xì)胞百分比（Mid）、中性粒細(xì)胞百分比（Gran）、紅細(xì)胞總數(shù)（RBC）、紅細(xì)胞體積分布寬度變異系數(shù)（PDW-CV）和紅細(xì)胞體積分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差（RDW-SD）進行檢測。1.5.3復(fù)方中藥對山羊免疫球蛋白的影響采用酶標(biāo)儀測定山羊的lgA、lgG和lgM的含量1.6數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析數(shù)據(jù)先用Excel2016進行初步整理，顯示出初步實驗結(jié)果的數(shù)據(jù)，然后使用SPSS21．0軟件進行獨立樣本T檢驗進行分析，P＜0．05表示差異顯著，P＞0.05差異不顯著。2結(jié)果與分析2.1飼料中加入復(fù)方中藥山羊血清生理生化指標(biāo)的影響結(jié)果見表1。試驗組的Alb、Glb、T-Pro的含量均高于空白組且差異顯著（P＜0.05）；試驗組的Cre和Bun含量低于空白組且差異顯著（P＜0.05）；試驗組的TB、Glu和T-Cho含量均低于空白組，但差異不顯著（P＞0.05）；試驗組的Ｃa和Ｇｈ含量均低于空白組且差異顯著（P＜0.05）。表1復(fù)方中藥對山羊生理生化指標(biāo)的影響項目空白組試驗組P值白蛋白（g/L）27±0.4529.14±0.540.04球蛋白（g/L）37.46±0.4939.38±0.700.04總蛋白（g/L）64.46±0.7668.52±0.960.03白球比（%）0.68±0.010.72±0.020.11總膽紅素（umol/L）3.5±0.402.92±0.400.19肌酐（umol/L）77.08±3.7564.76±1.530.03尿素氮（mmol/L）5.57±0.264.62±0.300.04葡萄糖（mmol/L）3.99±0.343.52±0.250.29總膽固醇（mmol/L）2.32±0.052.15±0.160.37鈣（mmol/L）2.64±0.062.43±0.010.02無機磷（mmol/L）3.44±0.192.72±0.150.022.2飼料中加入復(fù)方中藥對山羊各種生物酶的影響結(jié)果見表2，試驗組的GGT、AST和ALT均低于空白組且差異顯著（P＜0.05）；試驗組的ALP和LDH低于空白組，但差異不顯著（P＞0.05）。表2飼料中加入復(fù)方中藥對山羊各種生物酶的影響項目空白組試驗組P值谷氨?；D(zhuǎn)移酶（U/L）47.2±1.3941.4±1.570.03天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（U/L）149.6±3.61125±8.390.04丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（U/L）32±1.6726.6±1.500.04堿性磷酸酶（U/L）161±12.67142.6±7.310.25乳酸脫氫酶（U/L）354.2±18.53334±11.970.392.3復(fù)方中藥對山羊血常規(guī)指標(biāo)的影響結(jié)果見表3。試驗組的WBC、LY、Mid、Gran、LY（%）、Mid（%）和Gran（%）均高于空白組，差異顯著（P＜0.05）；試驗組的HGB、RBC、PDW-CV和RDW-SD均高于空白組，差異顯著（P＜0.05）。表3復(fù)方中藥對山羊血常規(guī)指數(shù)的影響項目空白組試驗組P值白細(xì)胞總數(shù)(109/L)25.6±0.9830.63±0.500.02淋巴細(xì)胞數(shù)(109/L)1.6±0.162.38±0.110.02中間細(xì)胞數(shù)(109/L)0.56±0.070.92±0.050.02中性粒細(xì)胞數(shù)(109/L)20.36±1.6427.1±1.300.02淋巴細(xì)胞百分比(%)6.6±0.569.17±0.510.03中間細(xì)胞百分比(%)1.96±0.083.36±0.300.03中性粒細(xì)胞百分比(%)84.2±1.3891.47±0.580.02血紅蛋白(g/L)297.0±7.09355.0±13.580.03紅細(xì)胞總數(shù)(1011/L)0.03±0.010.06±0.010.04紅細(xì)胞體積分布寬度變異系數(shù)(%)9.1±0.4712.9±1.000.05紅細(xì)胞體積分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差fL31.2±0.7840.47±2.210.042.4復(fù)方中藥對山羊免疫球蛋白的影響結(jié)果見表4，試驗組的lgG、lgA和lgM含量顯著高于空白組（P＜0.05）表4復(fù)方中藥對山羊免疫球蛋白的影響項目空白組試驗組P值lgG2.20±0.274.46±0.980.04lgA0.19±0.010.22±0.010.03lgM0.18±0.030.23±0.020.033討論3.1飼料中加入復(fù)方中藥對山羊血清生理生化指標(biāo)的影響中藥主打調(diào)理機體機使機體達到自我平衡的狀態(tài)。中藥作用效果長，作為飼料添加劑加在飼料中，能夠增加動物抵抗力。動物的血液生理生化指標(biāo)在反應(yīng)動物生理健康的同時還能作為體現(xiàn)動物機體代謝狀況的指標(biāo)之一。動物生理生化指標(biāo)在研究動物生理狀態(tài)及適應(yīng)性等方面，具有十分重要的地位。白蛋白、球蛋白和一些其他物質(zhì)共同組成血清總蛋白，其中白蛋白和球蛋白均由肝臟合成，它們具有維持血管內(nèi)正常膠體滲透壓和酸堿度平衡的重要功能，同時還能運輸脂肪酸、膽紅素以及各種代謝產(chǎn)物，在機體免疫功能上起到了重要的作用。劉瑞生等（2018）報道的在精料中加入中草藥添加劑提高了總蛋白，球蛋白，白蛋白的含量，增加了白球比的比值。孟虹艷等（2008）在日料中加1.5%的中草藥能顯著提高總蛋白和白蛋白的含量。劉志英等（2012）將不同中藥復(fù)方制劑加入云嶺黑山羊日料中發(fā)現(xiàn)試驗組的白蛋白和球蛋白含量均顯著高于對照組。江曉麗（2017）在日料中加入中藥藥渣，提高血清球蛋白含量。本試驗加入的復(fù)方中藥同樣使總蛋白、球蛋白和白蛋白的含量升高，說明本試驗的復(fù)方中藥能增強樂至黑山羊的免疫功能。血清尿素氮是血漿中除蛋白質(zhì)以外的一種含氮化合物，是體內(nèi)氨基酸代謝的最終產(chǎn)物之一，血清尿素濃度在一定程度上反映腎小球濾過功能。肌酐是蛋白質(zhì)的代謝產(chǎn)物，其濃度受到腎小球濾過率和肌肉總量的影響。左曉磊等（2005）將中草藥加入小尾寒羊的日料中，比例在1.5%和2%時尿素氮含量顯著低于對照組。本試驗中試驗組比空白組的尿素氮和肌酐含量低，可以在一定程度上表明，復(fù)方中藥能夠促進樂至黑山羊中的有機氮和肌酐的吸收，可能增強了腎小球的過濾功能。膽紅素是由肝臟，脾臟和骨髓衰老細(xì)胞分解破壞的產(chǎn)物。血糖是動物體內(nèi)能量的主要來源，在維持身體機能上有著重要的作用。反芻動物的血糖主要來源于由胃消化后排入腸道的飼料中的碳水化合物的，然后通各種生理代謝作用產(chǎn)生。血清總膽固醇主要由肝臟和腎上腺等組織合成，可以反映動物機體血液中的脂類代謝情況。劉志英等（2012）研究發(fā)現(xiàn)，在日料中加入中草藥復(fù)方劑，3個試驗組的葡萄糖含量均低于對照組，其中四君子散的血糖濃度顯著低于其余組，試驗組的膽固醇含量均低于對照組。郝智慧等（2012）在云嶺黑山羊日料中中加入強壯散組方，發(fā)現(xiàn)葡萄糖和膽固醇低于對照組。左曉磊等（2005）在小尾寒羊日料中加入中草藥方劑，試驗組的血糖含量低于對照組。本試驗，試驗組的總膽紅素，葡萄糖、總膽固醇和總二氧化碳含量均低于空白組，說明本復(fù)方中藥對樂至黑山羊的血糖吸收和脂類的代謝有促進作用。鈣在機體內(nèi)主要以鈣離子的形式存在，它對于維持細(xì)胞膜兩側(cè)的生物電位，維持正常的\t"/item/%E9%92%99%E7%A6%BB%E5%AD%90/_blank"神經(jīng)傳導(dǎo)有十分重要的作用。鈣離子還參與\t"/item/%E9%92%99%E7%A6%BB%E5%AD%90/_blank"神經(jīng)遞質(zhì)合成與釋放、激素合成與分泌，同時也是是骨骼構(gòu)成的重要物質(zhì)，磷是動物體內(nèi)必須的礦物質(zhì)元素，主要來源于日料中的磷，對于維持肝臟正常機能和傳達神經(jīng)刺激有重要功能。分娩后的動物如果鈣含量不足，就會導(dǎo)致產(chǎn)后癱瘓。養(yǎng)殖動物體內(nèi)的鈣主要來源于飼料中的鈣，反芻動物對鈣的吸收直接反應(yīng)在鈣離子的含量上。本試驗顯示，試驗組的鈣和無機磷含量顯著低于空白組，說明復(fù)方中藥能促進樂至黑山羊?qū)︹}和無機磷的吸收。3.2飼料中加入復(fù)方中藥對山羊各種生物酶的影響羊機體中的酶基本都存在于肝臟、腎臟、骨骼肌和心肌中，上述器官受損則會造成體內(nèi)各種酶含量異常。徐建峰等（2019）在中草藥添加劑對肉羊血清中酶活性影響的研究中發(fā)現(xiàn)加入中草藥后測量肉羊的AST、GGT、ALT和LDH發(fā)現(xiàn)試驗組均低于對照組，但組間差異不顯著，ALP含量，試驗組均高于對照組，組間差異顯著。本試驗中試驗組的GGT、AST和ALT的含量顯著低于空白組，試驗組的ALP和LDH含量與空白組無顯著差異，說明復(fù)方中藥能增強樂至黑山羊肝臟、腎臟、骨骼肌和心肌的功能，來調(diào)節(jié)體內(nèi)酶的含量。3.3復(fù)方中藥對山羊血常規(guī)指標(biāo)的影響白細(xì)胞包括中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。中性粒細(xì)胞有很強的吞噬能力，能吞噬入侵機體的細(xì)菌病毒，還能吞噬壞死和衰老的細(xì)胞；淋巴細(xì)胞主要參與機體的免疫過程。李春燕等（2013）在日料中加入中草藥添加劑，能極顯著的提高白細(xì)胞的數(shù)量，顯著提高中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞百分率。劉瑞生等（2018）在肉羊的日料中加入中草藥，發(fā)現(xiàn)試驗組的白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和淋巴細(xì)胞百分率均高于空白組。本試驗中試驗組的白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞數(shù)、中間細(xì)胞數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞百分比、中間細(xì)胞百分比、中性粒細(xì)胞百分比均顯著高于空白組。表明本復(fù)方中藥能夠增加白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等的含量，從而增強機體免疫力。血紅蛋白、紅細(xì)胞總數(shù)、紅細(xì)胞體積分布寬度變異系數(shù)和紅細(xì)胞體積分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差在臨床檢測中的意義主要與機體貧血有關(guān)。血紅蛋白是紅細(xì)胞的內(nèi)含物，紅細(xì)胞主要的功能是運輸氧和二氧化碳。郝智慧等（2012）在精料中添加中草藥復(fù)方制劑對紅細(xì)胞數(shù)量有顯著提高。劉志英等（2012）的研究中發(fā)現(xiàn)復(fù)方紫錐菊提取物組和四君子散組的紅細(xì)胞含量顯著高于對照組。本試驗中試驗組紅蛋白、紅細(xì)胞總數(shù)、紅細(xì)胞體積分布寬度變異系數(shù)和紅細(xì)胞體積分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差均顯著高于空白組。表明本試驗的復(fù)方中藥能提高機體免疫力，增加機體造血功能。3.4復(fù)方中藥對山羊免疫球蛋白的影響lgG是體液免疫的主要免疫球蛋白，主要由脾臟和淋巴結(jié)中的漿細(xì)胞產(chǎn)生，球蛋白中含量最高，lgA具有抗菌、抗病毒和抗毒素的作用，lgM是體液面議應(yīng)答早期階段主要免疫球蛋白。汪水平等（2013）在日料中加入中草藥復(fù)方，發(fā)現(xiàn)復(fù)方Ⅰ組和Ⅱ組的lgG、lgA和lgM含量均顯著高于空白組。王明海等（2009）在湖羊日料中加入中草藥發(fā)現(xiàn)隨著中草藥含量升高lgG、lgA和lgM的含量也隨著升高。劉志英等（2012）在云嶺黑山羊的日料中加入強壯散和復(fù)方錐菊提取物都能使lgG、lgA和lgM的含量升高。本試驗中試驗組lgG、lgA和lgM含量均顯著高于空白組，表明本中藥復(fù)方能夠提高機體免疫力。4結(jié)論通過本試驗得出，在生理生化方面本復(fù)方中藥能增加白蛋白（Alb）、球蛋白（Glb）、總蛋白（T-Pro）的含量，降低肌酐（Cre）、尿素氮（Bun）、總膽紅素（TB）、葡萄糖（Glu）、總膽固醇（T-Cho）、鈣（Ｃa）和無機磷的含量；在血常規(guī)方面能夠增加白細(xì)胞總數(shù)（WBC）、淋巴細(xì)胞數(shù)（LY）、中間細(xì)胞數(shù)（Mid）、中性粒細(xì)胞數(shù)（Gran）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞總數(shù)（RBC）的含量，紅細(xì)胞體積分布寬度變異系數(shù)（PDW-CV）和紅細(xì)胞體積分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差（RDW-SD）的含量，表明本復(fù)方中藥能夠增強肝臟、脾臟和腎臟的功能，從而提高機體的免疫能力和機體造血能力，在腎小球過濾能力方面也有一定的提升。本試驗的研究對復(fù)方中藥在羊類養(yǎng)殖提供了理論依據(jù)，促進復(fù)方中藥在羊類養(yǎng)殖中的發(fā)展。

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