動物細(xì)胞融合技術(shù)及應(yīng)用 高二生物人教版選擇性必修三

第三節(jié)

動物細(xì)胞工程及應(yīng)用第3課時(shí)

動物細(xì)胞融合技術(shù)及應(yīng)用特異性高：雙抗夾心法保證了抗體交叉反應(yīng)低，從而有效提高了免疫學(xué)方法的特異性，減少假陽性的發(fā)生。第三節(jié)

動物細(xì)胞工程及應(yīng)用第3課時(shí)

動物細(xì)胞融合技術(shù)及應(yīng)用【學(xué)習(xí)目標(biāo)】1.闡述動物細(xì)胞融合技術(shù)的概念、方法、原理2.利用細(xì)胞融合的知識分析單克隆抗體的制備過程、特點(diǎn)3.通過分析新冠抗原試劑盒檢測原理，體會單克隆抗體的應(yīng)用，并能將所學(xué)知識應(yīng)用于社會生產(chǎn)生活實(shí)踐，參與社會事件的探討。探究一

動物細(xì)胞融合技術(shù)【活動一】自主閱讀課本P66-67，填寫學(xué)案內(nèi)容。探究一

動物細(xì)胞融合技術(shù)1.概念：在一定條件下將_______或_______動物細(xì)胞，通過

、

或

方法，結(jié)合形

細(xì)胞的技術(shù)。2.誘導(dǎo)方法：物理方法

化學(xué)方法

等

生物方法

等

兩個(gè)多個(gè)生物物理化學(xué)電融合誘導(dǎo)1個(gè)PEG誘導(dǎo)滅活的病毒探究一

動物細(xì)胞融合技術(shù)【活動一】自主閱讀課本，填寫學(xué)案內(nèi)容。3.融合的結(jié)果：

___________

4.完成的標(biāo)志：

5.融合的原理：

形成雜種細(xì)胞細(xì)胞核融合細(xì)胞質(zhì)膜有一定的流動性【檢測一】判斷：1.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動物細(xì)胞融合技術(shù)誘導(dǎo)融合的原理、方法相同。（

）2.二倍體動物細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞仍是二倍體細(xì)胞。（

）3.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動物細(xì)胞融合技術(shù)的結(jié)果不同。（

）探究一動物細(xì)胞融合技術(shù)XX√探究一動物細(xì)胞融合技術(shù)三、應(yīng)用：在疾病診斷、治療等領(lǐng)域展現(xiàn)出美好的前景。特別是大量制備抗體。傳統(tǒng)制備抗體的方法過程：向小鼠反復(fù)注射某種抗原小鼠產(chǎn)生抗體從血清中分離相應(yīng)抗體缺

點(diǎn)

?資料：1.從血清中獲得相應(yīng)抗體，需要大量小鼠血液。2.動物在生存環(huán)境中會接觸多種抗原，產(chǎn)生數(shù)百萬種以上抗體。傳統(tǒng)制備抗體的方法產(chǎn)量低純度低、特異性差如何獲得產(chǎn)量高、純度高、特異性強(qiáng)的單一抗體呢？1.抗體由

細(xì)胞產(chǎn)生。2.多種不同的抗原刺激B細(xì)胞分化為

種（個(gè)）漿細(xì)胞，

1個(gè)漿細(xì)胞只產(chǎn)生

種特異性抗體。【知識回顧】漿多1【設(shè)計(jì)方案】結(jié)合動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，如何獲得純度高的單一抗體？一般無增殖能力可行嗎？1個(gè)漿細(xì)胞體外培養(yǎng)漿細(xì)胞細(xì)胞群單一抗體產(chǎn)生什么細(xì)胞能無限增殖？癌細(xì)胞單克隆抗體的制備體外大量增殖1個(gè)漿細(xì)胞癌細(xì)胞融合單克隆抗體（克?。┟谞査固箍评罩Z貝爾生理醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)獲得者：單克隆抗體制備過程【任務(wù)二】根據(jù)圖中操作，完成下列填空一、免疫小鼠、誘導(dǎo)融合：漿細(xì)胞單克隆抗體制備過程1.向小鼠體內(nèi)注入

；2.對小鼠免疫處理的目的是

；3.多次免疫刺激的目的是獲得

；4.從小鼠的

部位獲得漿細(xì)胞；一、免疫小鼠、誘導(dǎo)融合：獲得相應(yīng)漿細(xì)胞特定的抗原蛋白大量相應(yīng)漿細(xì)胞脾臟（已免疫的B細(xì)胞）單克隆抗體制備過程5.取出的脾臟組織可剪碎后用

處理制備單細(xì)胞懸液。6.用

技術(shù)培養(yǎng)小鼠的

細(xì)胞，7.將

細(xì)胞和

細(xì)胞誘導(dǎo)

；若融合，只考慮兩兩融合，結(jié)果培養(yǎng)液中共

種細(xì)胞。一、免疫小鼠、誘導(dǎo)融合：胰蛋白酶或膠原蛋白酶動物細(xì)胞培養(yǎng)骨髓瘤漿骨髓瘤融合5單克隆抗體制備過程如何篩選？雜交瘤細(xì)胞漿細(xì)胞一、免疫小鼠、誘導(dǎo)融合：單克隆抗體制備過程二、第一次篩選：【活動三】根據(jù)資料2討論在培養(yǎng)液中添加什么物質(zhì)可以

篩選出雜交瘤細(xì)胞，并說明理由。選擇培養(yǎng)基單克隆抗體制備過程二、第一次篩選：HAT選擇培養(yǎng)基漿細(xì)胞漿-漿骨髓瘤細(xì)胞骨-骨雜交瘤細(xì)胞DSDDS不能增殖而死亡不能合成DNA而死亡通過S途徑合成DNA，大量增殖注：培養(yǎng)液中還需要添加次黃嘌呤（H）、胸腺嘧啶（T）。單克隆抗體制備過程二、第一次篩選：HAT選擇培養(yǎng)基漿細(xì)胞漿-漿骨髓瘤細(xì)胞骨-骨雜交瘤細(xì)胞DSDDS不能增殖而死亡不能合成DNA而死亡通過S途徑合成DNA，大量增殖思考：得到的雜交瘤細(xì)胞合成并分泌的抗體都是同一種嗎？單克隆抗體制備過程漿細(xì)胞1種抗原蛋白上有不同種抗原表位，每一種抗原表位都可刺激產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。不同的抗原表位多種不同單克隆抗體制備過程三、第二次篩選：目的？選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞【活動四】小組活動，結(jié)合稀釋涂布平板法和單個(gè)菌

落的來源，討論問題

1

和

2單克隆抗體制備過程稀釋加到最多1個(gè)細(xì)胞?多孔培養(yǎng)板三、第二次篩選：單克隆抗體制備過程方法：抗體檢測法陽性孔(1)怎樣篩選出所需的雜交瘤細(xì)胞？原理是什么？三、第二次篩選：原理：抗原和抗體特異性結(jié)合單克隆抗體制備過程細(xì)胞增殖，獲得單一細(xì)胞群陽性孔(2)第二次篩選時(shí)，克隆化培養(yǎng)的目的是什么？三、第二次篩選：【思考】單位時(shí)間內(nèi)，熒光現(xiàn)象越明顯，說明什么？雜交瘤細(xì)胞合成并分泌抗體能力強(qiáng)單克隆抗體制備過程四、大規(guī)模生產(chǎn)：雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備既能無限增殖、又能分泌單一抗體改進(jìn)：鼠-人嵌合抗體、全人源抗體。單克隆抗體制備過程【構(gòu)建概念模型】1.

每個(gè)小組根據(jù)所給卡片和箭頭構(gòu)建制備單克隆抗體的流程（用膠帶黏貼）;2.

標(biāo)出過程中進(jìn)行篩選的環(huán)節(jié)；3.思考應(yīng)用了哪些細(xì)胞工程技術(shù)。小組活動：【解決實(shí)際問題】

應(yīng)用1.診斷疾?。盒鹿诳乖瓩z測試劑盒單克隆抗體應(yīng)用1.診斷疾病：

新冠抗原檢測試劑盒核衣殼蛋白(N)包膜蛋白(E)刺突蛋白(S)膜糖蛋白(M)RNA包膜檢測原理？【活動六】請結(jié)合圖示，小組討論學(xué)案問題。單克隆抗體應(yīng)用單克隆抗體應(yīng)用一1.制備抗體1和T線抗體時(shí)給動物注射什么？

檢測的原理是什么？

新冠病毒N蛋白新冠病毒N蛋白與抗體特異性結(jié)合與N蛋白不同抗原表位結(jié)合雙抗夾心法降低交叉反應(yīng)這兩種單克隆抗體與N蛋白的相同抗原表位結(jié)合嗎？單克隆抗體應(yīng)用2.新冠抗原檢測陽性時(shí)為什么會出現(xiàn)兩色顯色帶，陰性時(shí)為什么只出現(xiàn)一條顯色