reln基因起火基因

reln基因起火基因

兒童抑郁是一種發(fā)育障礙，通常在3歲之前。男孩比女孩更常見(jiàn)。它的基本特征是不同程度的言語(yǔ)發(fā)育障礙、人際交往障礙、興趣狹窄和行為方式刻板。孤獨(dú)癥的病因涉及環(huán)境和遺傳因素,家系研究和雙生子研究證實(shí)遺傳因素在孤獨(dú)癥發(fā)病中起關(guān)鍵的作用。RELN基因定位在孤獨(dú)癥的易感基因座位7q22,編碼的reelin蛋白在與腦發(fā)育相關(guān)的神經(jīng)元遷移和定位過(guò)程發(fā)揮重要作用。國(guó)外已進(jìn)行許多該基因與孤獨(dú)癥的關(guān)聯(lián)研究,但有關(guān)研究得出的結(jié)論不一。1數(shù)據(jù)和方法1.1孤獨(dú)癥患兒年齡分布2006年1月～2007年12月佳木斯大學(xué)附屬第三醫(yī)院發(fā)育與行為兒科收治孤獨(dú)癥患兒30例,均為漢族,其中男性24例,女性6例;年齡3～12歲。同期選取佳木斯幼兒園和小學(xué)的健康兒童30例為對(duì)照組,其中男性24例,女性6例;年齡3～12歲。兩組兒童性別及年齡無(wú)顯著性差異(P>0.05)。1.2診斷標(biāo)準(zhǔn)所有患兒符合美國(guó)《精神障礙診斷和統(tǒng)計(jì)手冊(cè)》第4版(DSM-Ⅳ)規(guī)定的兒童孤獨(dú)癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)。1.3標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的包含1.3.1孤獨(dú)癥兒童行為檢查量表(1)年齡3～12歲漢族兒童;(2)完全符合兒童孤獨(dú)癥的診斷標(biāo)準(zhǔn);(3)孤獨(dú)癥兒童行為檢查量表(AutismBehaviorChecklist,ABC)評(píng)分ue08e67分;兒童孤獨(dú)癥評(píng)定量表(CARS)評(píng)分ue08e30分;(4)家長(zhǎng)知情同意。1.3.2病例組兒童血樣的特征(1)年齡3～12歲,與相應(yīng)匹配的病例組兒童的年齡相差不超過(guò)0.5歲;(2)與病例組相應(yīng)匹配兒童的性別相同;(3)漢族;(4)孕期及出生時(shí)正常;(5)與病例組兒童無(wú)血緣關(guān)系;(6)家長(zhǎng)知情同意。1.4排除標(biāo)準(zhǔn)全面體格檢查和神經(jīng)精神檢查后認(rèn)為該名兒童可能存在已知病因的發(fā)育障礙或其他神經(jīng)精神疾病,包括精神發(fā)育遲滯、其他廣泛性發(fā)育障礙。1.5pcr擴(kuò)增及條件每名研究對(duì)象抽取靜脈血2ml置于EDTA抗凝管內(nèi),搖勻后立即-20℃凍存。使用DNA提取試劑盒提取DNA。RELN基因exon6SNP的基因分型采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)。PCR引物如下:正向5′-ACAGCATGTTGGCACTTGTG-3′反向5′-TTGGTGGTAGGAGTCAAAGT-3′用大連寶生物公司的TaKaRaTaqTM試劑盒擴(kuò)增。PCR反應(yīng)液共25μl,內(nèi)含基因組DNA、引物、Taq酶、緩沖液、dNTPs。PCR條件:95℃預(yù)變性10min,繼以94℃變性30s,60℃退火30s,72℃延伸30s,共40個(gè)循環(huán),72℃終末延伸8min。經(jīng)PCR儀擴(kuò)增后產(chǎn)物為135bp,由內(nèi)切酶PvuⅡ酶切后產(chǎn)生79bp和56bp兩個(gè)片斷,組成3種基因型:A/A(135bp/135bp),A/G(135bp/79bp/56bp),G/G(79bp/56bp)。1.6統(tǒng)計(jì)方法應(yīng)用統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS11.5計(jì)算不同基因型在不同組間的分布情況。2結(jié)果2.1pvu酶切后產(chǎn)物的表達(dá)A等位基因PCR產(chǎn)物不含PvuⅡ酶切位點(diǎn),只有一個(gè)長(zhǎng)度為135bp的片段。G等位基因PCR產(chǎn)物含PvuⅡ酶切位點(diǎn),酶切后產(chǎn)生長(zhǎng)度分別為79bp和56bp的片段。根據(jù)電泳結(jié)果,exon6SNPA/A基因型為一條長(zhǎng)135bp的條帶,A/G基因型為3條長(zhǎng)度為135bp、79bp和56bp的條帶,G/G基因型為兩條長(zhǎng)79bp和56bp的條帶(圖1)。2.2合h-w平衡法則χ2檢驗(yàn)顯示基因型及等位基因頻率分布符合H-W平衡法則。兒童孤獨(dú)癥組與對(duì)照組exon6SNP基因型和等位基因頻率存在顯著性差異(P<0.05)。見(jiàn)表1。2.3顯著性差異單因素方差分析顯示,不同基因型孤獨(dú)癥兒童ABC總分及交往因子得分存在非常顯著性差異(P<0.01);經(jīng)進(jìn)一步LSD分析,在基因型為A/A和A/G、A/A和G/G孤獨(dú)癥兒童之間,交往因子存在顯著性差異(P<0.05),基因型為A/G和G/G之間ABC總分存在顯著性差異(P<0.05)。見(jiàn)表2。2.4嚴(yán)重程度與幾代人的關(guān)系重度與輕中度孤獨(dú)癥組exon6SNP基因型及等位基因分布存在顯著性差異(P<0.05)。見(jiàn)表3。2.5lsd分析單因素方差分析顯示,不同基因型的孤獨(dú)癥兒童模仿、聽(tīng)覺(jué)反應(yīng)、非語(yǔ)言和總分存在顯著性差異(P<0.05);LSD分析,在基因型為A/A、G/G的孤獨(dú)癥兒童之間在模仿、聽(tīng)覺(jué)反應(yīng)和CARS總分存在顯著性差異(P<0.05);在基因型為A/A和A/G、A/A和G/G的孤獨(dú)癥兒童之間,非語(yǔ)言存在顯著性差異(P<0.01)。見(jiàn)表4。3reoln基因突變基因組篩查和細(xì)胞遺傳學(xué)研究顯示,7q存在孤獨(dú)癥易感基因座位。RELN基因定位在7q22,其表達(dá)產(chǎn)物reelin蛋白為3461個(gè)氨基酸殘基組成的巨大基質(zhì)外糖蛋白,與神經(jīng)元的正確遷移以及大腦皮層、小腦皮層和海馬等分層結(jié)構(gòu)的正確形成有關(guān)。研究表明,與reelin蛋白有關(guān)的任一自然突變或定向突變會(huì)影響小鼠大腦皮層分層結(jié)構(gòu)的形成,導(dǎo)致胚胎腦的發(fā)育異常。RELN基因突變導(dǎo)致reelin表達(dá)異常。研究發(fā)現(xiàn),孤獨(dú)癥患者腦組織和血中reelin水平比對(duì)照下降。孤獨(dú)癥患者存在海馬、內(nèi)嗅皮質(zhì)、杏仁核、扣帶回皮質(zhì)神經(jīng)解剖異常,包括神經(jīng)元大小和數(shù)目的改變。海馬回負(fù)責(zé)學(xué)習(xí)和記憶,孤獨(dú)癥患兒的社會(huì)行為退縮、強(qiáng)迫行為、不知危險(xiǎn)、不能從記憶庫(kù)存中提取信息、不能調(diào)節(jié)自己以適應(yīng)新環(huán)境均與海馬回受損有關(guān);損傷海馬回的動(dòng)物可以出現(xiàn)刻板行為、自我刺激行為和多動(dòng)行為。本研究提示,exon6SNP與兒童孤獨(dú)癥的嚴(yán)重程度有關(guān):攜帶基因型為G/G的患兒比攜帶基因型A/A的患兒模仿和聽(tīng)覺(jué)反應(yīng)能力差,攜帶基因型為G/G、A/G的患兒比攜帶基因型A/A的患兒有更嚴(yán)重的非語(yǔ)言交流障礙。Weeber等報(bào)道,RELN和ApoER2基因共同作用提