在線富集-高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法快速分析水中除草劑

在線富集-高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法快速分析水中除草劑

隨著環(huán)境中良劑留在環(huán)境中的毒性作用的增加，為了準(zhǔn)確識(shí)別不同環(huán)境和生物材料中的雜草，我們需要進(jìn)一步的方法。在許多國(guó)家，飲用水和其他食品中的雜草的允許濃度都有限制。目前，檢測(cè)草坪的常用方法有氣相色譜質(zhì)量分析聯(lián)合法（gc-ms）法和高效液相色譜法（hplc）和液相色譜法的聯(lián)合應(yīng)用。其中，高效液相鉻線蓮質(zhì)譜法被廣泛應(yīng)用于環(huán)境領(lǐng)域和食品領(lǐng)域的測(cè)定和定量分析殺螨劑和殘留物。然而，這種方法通常需要進(jìn)行大量的在線樣品和高成本預(yù)縮法，以實(shí)現(xiàn)國(guó)家和國(guó)際當(dāng)局制定的嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)和低檢測(cè)限制的要求。使用一個(gè)或兩個(gè)10個(gè)通道，通過(guò)在線閥進(jìn)行更換，以收集、清洗、分離和再生樣品。該方法可以顯著提高分析檢測(cè)靈敏度，具有良好的精度，并進(jìn)行快速和高流量分析。1實(shí)驗(yàn)部分1.1aglent-masshaxspb-aq色譜柱Agilent1260UHPLC高效液相色譜系統(tǒng).具體配置如下:二元泵(用于色譜分離),四元泵(用于進(jìn)樣),自動(dòng)進(jìn)樣器(配備大體積進(jìn)樣環(huán)),兩位十通閥,AgilentZorbaxSB-Aq柱芯(4.6mm×12.5mm,5μm,×2,用于樣品富集),AgilentZorbaxSB-Aq色譜柱(2.1mm×100mm,3.5μm,用于色譜分離).Agilent6430三重串聯(lián)四極桿質(zhì)譜;AgilentMassHunter質(zhì)譜數(shù)據(jù)軟件;AgilentChemstation化學(xué)工作站軟件.1.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制草甘膦、溴氰菊酯、呋喃丹、阿特拉津、滅草松及2,4-D的標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)自中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院,用水配制成所需濃度的標(biāo)準(zhǔn)品混合溶液.以水稀釋分別配制成0.1\,0.2\,0.4\,1\,2\,4\,10\,20\,40\,100\,200\,400ng·g-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列.甲酸銨(NH4COOH,99%DIKMA),乙腈(色譜純,DIKMA),超純水(UPW,18MΩ·cm)取自Milli-Q純水機(jī)(Millipore,Bedford,MA).1.3色譜條件的確定利用兩位十通閥實(shí)現(xiàn)在線樣品富集及分離的原理示意圖如圖1.以圖中兩根SPE柱左側(cè)的那根為例,說(shuō)明在線樣品富集與分離的原理流程.當(dāng)閥處于位置1時(shí),樣品由上樣泵通過(guò)自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)入左側(cè)的SPE小柱.由于樣品基質(zhì)為水相,樣品溶液中的化合物被反相的SB-Aq小柱所吸附,從而實(shí)現(xiàn)大體積進(jìn)樣下的富集效果.當(dāng)閥處于位置2時(shí),由分析泵驅(qū)動(dòng)梯度流動(dòng)相反向經(jīng)過(guò)富集后的SPE小柱,化合物被順序洗脫并進(jìn)入分離色譜柱進(jìn)行分離并進(jìn)入質(zhì)譜得到檢測(cè).在色譜梯度的末尾,富集柱與分離柱都被重新平衡.與此同時(shí),下一個(gè)樣品由上樣泵通過(guò)自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)入右側(cè)的SPE小柱進(jìn)行富集.為下一次閥切換至位置1時(shí)得到洗脫與分離做準(zhǔn)備.1.4液體層析條件1.4.1梯度條件a:乙腈.運(yùn)行時(shí)間aSPE柱芯:SB-Aq4.6mm×12.5mm,5μm(P.N.820950-933);進(jìn)樣量:900μL;流量:1mL·min-1;流動(dòng)相:A:水,B:乙腈.運(yùn)行時(shí)間:20min.梯度條件:0.00min,0%B,0.5mL·min-1;3.00min,0%B,0.5mL·min-1;4.00min,0%B,1.0mL·min-1;5.00min,90%B,1.0mL·min-1;6.00min,90%B,1.0mL·min-1;7.00min,0%B,1.0mL·min-1;16.00min,0%B,1.0mL·min-1;17.00min,0%B,0.5mL·min-1.1.4.2梯度條件2.2流動(dòng)相:A:10mmol·L-1甲酸銨水溶液,B:乙腈.分離色譜柱:AgilentZORBAXSB-Aq2.1mm×100mm,3.5μm(P.N.61753-914).柱溫:25℃.流量:0.3mL·min-1.運(yùn)行時(shí)間:20min.梯度條件:0.00min,0%B;2.00min,0%B;5.00min,50%B;8.00min,50%B;9.00min,75%B;10.00min,90%B;11.00min,90%B;12.00min,0%B.1.4.3兩位10位官員的配置2min后切換下一個(gè)位置,運(yùn)行結(jié)束后切換回當(dāng)前位置.1.5離子化模式電路設(shè)計(jì)API-ES模式干燥氣流量:10L·min-1;干燥氣溫度:350℃;霧化器壓力:45psi;毛細(xì)管電壓(pos/neg):4000V/4000V.掃描類(lèi)型:MRM;離子化模式ESI;切換閥ToMS;DeltaEMV400.2結(jié)果與討論2.1溴氰菊酯溶液圖2為混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的TIC與MRM圖譜(包括時(shí)間段1與2).(濃度分別為草甘膦0.5ppm;溴氰菊酯20ppb;阿特拉津0.2ppb;其它化合物2ppb)2.2方法的靈敏度由于大體積進(jìn)樣與富集,方法的靈敏度能夠輕松滿足國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的要求.結(jié)果見(jiàn)表3.2.3線性范圍的確定在前述的實(shí)驗(yàn)條件下,分別測(cè)定不同濃度的6種除草劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液.校準(zhǔn)曲線如圖3所示.由于富集作用的存在,靈敏度得到了大幅度的提升,因此除去靈敏度相對(duì)較低的草甘膦與溴氰菊酯,其他4種除草劑的線性范圍都在ppb數(shù)量級(jí)以下.當(dāng)濃度增高時(shí),因?yàn)樾盘?hào)過(guò)強(qiáng)而超出了質(zhì)譜的線性響應(yīng)范圍.2.4測(cè)定化合物的重現(xiàn)性對(duì)連續(xù)6次進(jìn)樣的重現(xiàn)性進(jìn)行了考察.6種化合物的保留時(shí)間與峰面積的重現(xiàn)性結(jié)果如下:除了草甘膦由于極性較強(qiáng),在色譜柱上保留較弱外,其它5種化合物均獲得了良好的重現(xiàn)性(表4).2.5計(jì)算回收率試驗(yàn)向空白自來(lái)水中添加配制成含草甘膦3mg·L-1,阿特拉津0.3ng·L-1,溴氰菊酯300ng·L-1,滅草松,呋喃丹與2,4-D均為3ppb的樣品.平行分析3次,計(jì)算回收率在70%—100%之間且結(jié)果重現(xiàn)性良好.3使用法.方法特點(diǎn)本文建立