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第1節(jié)DNA是主要的遺傳物質(zhì)課前自主預(yù)習(xí)案夯基提能?分層突破強(qiáng)化落實(shí)?學(xué)業(yè)達(dá)標(biāo)高效課堂?實(shí)踐運(yùn)用疑難解答?全程培優(yōu)課前自主預(yù)習(xí)案知識(shí)梳理·填準(zhǔn)記牢——自主·預(yù)習(xí)·先知一、對(duì)遺傳物質(zhì)的早期推測(cè)蛋白質(zhì)DNA二、肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)1.肺炎鏈球菌的類型
有無(wú)莢膜菌落特征有無(wú)毒性S型細(xì)菌____表_________R型細(xì)菌___表______________有光滑有無(wú)粗糙無(wú)2.肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)階段(1)格里菲思的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不死亡死亡,分離出S型活細(xì)菌不死亡死亡,分離出S型活細(xì)菌“轉(zhuǎn)化因子”(2)艾弗里的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)R型細(xì)菌DNA三、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)1.噬菌體的結(jié)構(gòu)與代謝蛋白質(zhì)DNA寄生2.實(shí)驗(yàn)方法:________________。3.實(shí)驗(yàn)過(guò)程和現(xiàn)象放射性同位素標(biāo)記法35S32P35S32P高低低高4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論親代噬菌體寄主細(xì)胞內(nèi)子代噬菌體實(shí)驗(yàn)結(jié)論32P標(biāo)記DNA①____②____⑤____是遺傳物質(zhì)35S標(biāo)記蛋白質(zhì)③____④____有有無(wú)無(wú)DNA四、DNA是主要的遺傳物質(zhì)1.RNA是遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)證據(jù)(1)煙草花葉病毒的組成(2)侵染實(shí)驗(yàn)(3)結(jié)論:煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)是________。RNA蛋白質(zhì)不感染病毒感染病毒RNA2.DNA是主要的遺傳物質(zhì)因?yàn)榻^大多數(shù)生物的遺傳物質(zhì)是DNA,因此DNA是____的遺傳物質(zhì)。主要知識(shí)應(yīng)用·強(qiáng)化落實(shí)——效果·檢測(cè)·定向
一、連線二、判斷正誤(正確的打“√”,錯(cuò)誤的打“×”)1.高溫處理過(guò)的S型細(xì)菌的蛋白質(zhì)因變性而不能與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)。(
)2.格里菲思和艾弗里分別用不同的方法證明DNA是遺傳物質(zhì)。(
)3.艾弗里實(shí)驗(yàn)中S型菌的DNA加入R型菌的培養(yǎng)基上,最后生存的細(xì)菌都是S型菌。(
)提示:×蛋白質(zhì)高溫變性的原因是空間結(jié)構(gòu)遭到破壞,肽鍵依然存在,而雙縮脲試劑與蛋白質(zhì)發(fā)生紫色反應(yīng)的實(shí)質(zhì)是與肽鍵反應(yīng)。提示:×格里菲思沒(méi)有證明DNA是遺傳物質(zhì),只證明了加熱殺死的S型菌中含有某種轉(zhuǎn)化因子。提示:×艾弗里實(shí)驗(yàn)中S型菌的DNA+R型菌的培養(yǎng)基上生存的細(xì)菌不都是S型菌,大多數(shù)仍為R型菌。夯基提能?分層突破課程標(biāo)準(zhǔn)概述DNA是主要的遺傳物質(zhì)素養(yǎng)達(dá)成1.掌握肺炎鏈球菌體內(nèi)和體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的過(guò)程和結(jié)論;掌握噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)的方法、過(guò)程及結(jié)論,體驗(yàn)探究生物遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)思路。(科學(xué)探究)2.分析比較本節(jié)三大實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)方法和實(shí)驗(yàn)結(jié)論。(科學(xué)思維)3.查閱相關(guān)資料,深入理解“煙草花葉病毒的感染實(shí)驗(yàn)”,理解DNA是主要遺傳物質(zhì)的結(jié)論。(科學(xué)思維)4.感悟科學(xué)技術(shù)在生命科學(xué)探索過(guò)程中的作用。(社會(huì)責(zé)任)早在公元前3世紀(jì),《呂氏春秋》中就記載著“夫種麥而得麥,種稷而得稷,人不怪也?!币簿褪俏覀兂Uf(shuō)的“種瓜得瓜,種豆得豆?!闭巧锏倪z傳特性,才使生物界的物種的性狀能夠保持相對(duì)穩(wěn)定,那么決定這種遺傳特性的物質(zhì)到底是什么呢?
學(xué)習(xí)主題一肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)任務(wù)一根據(jù)教材P43圖3-2回答下列問(wèn)題:1.第一組和第二組實(shí)驗(yàn)對(duì)照能得到什么結(jié)論?
2.第二組和第三組實(shí)驗(yàn)對(duì)照能得到什么結(jié)論?
提示:R型細(xì)菌無(wú)毒性,S型細(xì)菌有毒性。提示:加熱能使S型細(xì)菌失去毒性。3.從第四組的死亡小鼠中能分離出兩種細(xì)菌嗎?
4.四組實(shí)驗(yàn)中哪一組發(fā)生了細(xì)菌轉(zhuǎn)化?對(duì)比之后,你能否得出DNA就是轉(zhuǎn)化因子(遺傳物質(zhì))的結(jié)論?提示:能從死亡小鼠中分離出了S型活細(xì)菌和R型活細(xì)菌。提示:第四組。不能,這只能得出“S型細(xì)菌含有能讓R型細(xì)菌發(fā)生轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)化因子”。5.轉(zhuǎn)化后的S型細(xì)菌與原來(lái)的S型細(xì)菌遺傳物質(zhì)完全相同嗎?提示:不完全相同,轉(zhuǎn)化后的S型細(xì)菌含有R型細(xì)菌和S型細(xì)菌雙方的遺傳物質(zhì)。任務(wù)二請(qǐng)根據(jù)教材P44圖3-3思考下列問(wèn)題:1.哪組發(fā)生了R型菌的轉(zhuǎn)化?發(fā)生轉(zhuǎn)化的原因是什么?
2.在艾弗里第一組(S型細(xì)菌DNA和R型活細(xì)菌混合培養(yǎng))實(shí)驗(yàn)中,所有R型細(xì)菌全部都轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌嗎?
提示:第一組到第四組;R型菌得到了S型菌的遺傳物質(zhì)。提示:沒(méi)有;大多數(shù)后代是R型細(xì)菌,因轉(zhuǎn)化效率很低,只有少數(shù)R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌。3.艾弗里在第五組實(shí)驗(yàn)中,設(shè)計(jì)了R型細(xì)菌與S型細(xì)菌提取物加DNA酶混合培養(yǎng),分析設(shè)計(jì)該組實(shí)驗(yàn)的目的是什么?提示:DNA酶將DNA水解為脫氧核苷酸,水解后的產(chǎn)物不能使R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌,說(shuō)明DNA必須保持完整性,才能完成其功能。同時(shí)證明了DNA是遺傳物質(zhì)。4.從對(duì)照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)角度分析:(1)艾弗里實(shí)驗(yàn)的單一變量是什么?
(2)將可能作為“轉(zhuǎn)化因子”的各種物質(zhì),分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)意圖是什么?
5.第五組和第一組相對(duì)照,為什么能更有力地說(shuō)明DNA是遺傳物質(zhì)?提示:向R型細(xì)菌培養(yǎng)基中加入的S型細(xì)菌提取物及不同的酶。提示:進(jìn)行相互對(duì)照,可對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析,得出結(jié)論,同時(shí)可避免其他物質(zhì)的干擾。提示:第五組中的DNA酶將DNA水解,與第一組對(duì)照,能說(shuō)明DNA是遺傳物質(zhì)。任務(wù)三請(qǐng)分析格里菲思的肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和艾弗里轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的關(guān)系。提示:格里菲思肺炎鏈球菌體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)是艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)是格里菲思體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的延伸。任務(wù)四艾弗里和他的同事在肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中,能夠證明DNA是遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路是什么?提示:在不同實(shí)驗(yàn)組中設(shè)置不同酶處理,將S型細(xì)菌提取物中的相應(yīng)物質(zhì)水解,從而排除該物質(zhì)的作用。1.DNA作為遺傳物質(zhì)的特點(diǎn):①具有穩(wěn)定性;②在細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖過(guò)程中能夠精確地復(fù)制自己,使得前后代保持一定的連續(xù)性;③能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成,從而控制生物的性狀和新陳代謝;④具有貯存大量遺傳信息的能力。2.對(duì)肺炎鏈球菌體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中細(xì)菌數(shù)量變化曲線的解讀在肺炎鏈球菌體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中,將加熱致死的S型細(xì)菌與R型活細(xì)菌混合后注射到小鼠體內(nèi),小鼠體內(nèi)S型活細(xì)菌、R型活細(xì)菌數(shù)量的變化情況如圖所示:(1)R型活細(xì)菌數(shù)量的變化①ab段:小鼠體內(nèi)還沒(méi)有形成大量的抗R型活細(xì)菌的抗體,故該時(shí)間段內(nèi)R型活細(xì)菌數(shù)量增多;②bc段:小鼠體內(nèi)形成大量的抗R型活細(xì)菌的抗體,致使R型活細(xì)菌數(shù)量減少;③cd段:c點(diǎn)對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)之前,已有少量R型活細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型活細(xì)菌,S型活細(xì)菌能降低小鼠的免疫力,使小鼠對(duì)R型活細(xì)菌的殺傷力減弱,導(dǎo)致R型活細(xì)菌大量繁殖,所以cd段R型活細(xì)菌數(shù)量增多。(2)S型活細(xì)菌數(shù)量的變化少量R型活細(xì)菌獲得了S型細(xì)菌的DNA,并轉(zhuǎn)化為S型活細(xì)菌,S型活細(xì)菌有多糖類莢膜的保護(hù),能在小鼠體內(nèi)增殖,且隨著小鼠免疫力的降低,小鼠對(duì)S型活細(xì)菌的殺傷力減弱,S型活細(xì)菌增殖加快、數(shù)目增加。3.肺炎鏈球菌體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)與體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的比較項(xiàng)目體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)細(xì)菌在小鼠體內(nèi)體外培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)對(duì)照R型細(xì)菌與S型細(xì)菌的致病性對(duì)照S型細(xì)菌各成分的作用進(jìn)行對(duì)照巧妙構(gòu)思將加熱致死的S型細(xì)菌注射到小鼠體內(nèi)作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)明確實(shí)發(fā)生了轉(zhuǎn)化用“酶解法”將細(xì)胞提取物中的某一物質(zhì)分解、去掉、直接、單獨(dú)地觀察該種物質(zhì)在實(shí)驗(yàn)中是否起作用實(shí)驗(yàn)結(jié)論S型細(xì)菌體內(nèi)有“轉(zhuǎn)化因子”S型細(xì)菌的DNA是遺傳物質(zhì)聯(lián)系(1)所用材料相同;(2)體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)是體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)是體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的延伸;(3)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)都遵循對(duì)照原則、單一變量原則【重點(diǎn)筆記】1.辨別兩種不同類型的肺炎鏈球菌的方法(1)顯微觀察:制作裝片,光學(xué)顯微鏡下觀察是否有莢膜,有莢膜的為S型細(xì)菌;無(wú)莢膜的為R型細(xì)菌。(2)宏觀觀察:培養(yǎng)形成菌落,根據(jù)培養(yǎng)基中兩種細(xì)菌不斷增殖形成的菌落的形態(tài)進(jìn)行區(qū)分,肉眼即可辨別,S型細(xì)菌形成的菌落表面光滑,R型細(xì)菌形成的菌落表面粗糙。2.自變量控制中的“減法原理”在對(duì)照實(shí)驗(yàn)中,與常態(tài)相比,人為去除某種影響因素稱為“減法原理”。本實(shí)驗(yàn)中,第一組(不加酶)是對(duì)照組,第二至第五組(每組特異性去除了一種物質(zhì))是實(shí)驗(yàn)組。3.加熱的作用原理蛋白質(zhì)和核酸對(duì)于高溫的耐受力是不同的。在80~100℃的溫度范圍內(nèi),蛋白質(zhì)失活,DNA雙鏈解開(kāi);當(dāng)溫度恢復(fù)至室溫后,DNA雙鏈能夠重新恢復(fù),但蛋白質(zhì)的活性無(wú)法恢復(fù)。4.特別提醒(1)這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)都不能說(shuō)明DNA是主要的遺傳物質(zhì)。(2)艾弗里實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵之處是在不同實(shí)驗(yàn)組中設(shè)置不同酶處理,將S型細(xì)菌提取物中的相應(yīng)物質(zhì)水解,從而排除該物質(zhì)的作用。(3)在格里菲思的實(shí)驗(yàn)中,導(dǎo)致小鼠死亡的真正原因是S型活細(xì)菌,而不是其DNA。1.(合格考)肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中,發(fā)現(xiàn)無(wú)致病性R型活細(xì)菌和被加熱致死的有致病性S型細(xì)菌混合后,在小鼠體內(nèi)找到了下列哪些類型的細(xì)菌(
)①有致病性R型細(xì)菌②無(wú)致病性R型細(xì)菌③有致病性S型細(xì)菌④無(wú)致病性S型細(xì)菌A.①②B.③④C.②③D.②④答案:C解析:S型細(xì)菌中存在某種轉(zhuǎn)化因子,能將部分R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌,因此,無(wú)致病性R型活細(xì)菌和被加熱致死的有致病性S型細(xì)菌混合后,在小鼠體內(nèi)能找到無(wú)致病性R型細(xì)菌和有致病性S型細(xì)菌。2.(合格考)如圖所示,在肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中,在培養(yǎng)有R型細(xì)菌的1、2、3、4號(hào)四支試管中,加入相應(yīng)的物質(zhì),經(jīng)過(guò)培養(yǎng),檢查結(jié)果發(fā)現(xiàn)試管內(nèi)仍然有R型細(xì)菌的是(
)A.3和4B.1、3和4C.2、3和4D.1、2、3和4答案:D解析:根據(jù)艾弗里的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)可知,1、3、4號(hào)試管中既有R型細(xì)菌又有S型細(xì)菌,2號(hào)試管只有R型細(xì)菌。因此,4支試管中都存在R型細(xì)菌。3.(等級(jí)考)下列關(guān)于肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是(
)A.在轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中R型細(xì)菌全部轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌B.格里菲思的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)直接證明了DNA是遺傳物質(zhì)C.艾弗里的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明了DNA是主要的遺傳物質(zhì)D.艾弗里的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)利用了自變量控制的減法原理答案:D解析:在轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中R型細(xì)菌有一少部分轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌,A錯(cuò)誤;格里菲思的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明了S型細(xì)菌中存在一種轉(zhuǎn)化因子,可以把R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化成S型細(xì)菌,B錯(cuò)誤;艾弗里的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明了DNA是遺傳物質(zhì),C錯(cuò)誤;在艾弗里的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中,每個(gè)實(shí)驗(yàn)組特異性地去除了一種物質(zhì),從而鑒定出DNA是遺傳物質(zhì),利用了“減法原理”,D正確。4.(等級(jí)考)某科研小組利用小鼠、R型和S型肺炎鏈球菌在格里菲思實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上增加了相關(guān)實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(
)A.該實(shí)驗(yàn)中細(xì)菌甲和乙分別對(duì)應(yīng)R型細(xì)菌和S型細(xì)菌B.經(jīng)過(guò)步驟②后,鼠2血液中含有活菌甲和活菌乙C.加熱致死菌乙中的某種轉(zhuǎn)化因子能使活菌甲轉(zhuǎn)化成活菌乙D.鼠5經(jīng)過(guò)步驟⑤后死亡的原因是死菌甲中某種物質(zhì)使活菌乙轉(zhuǎn)化為活菌甲答案:D解析:注射活菌甲的鼠1存活,說(shuō)明細(xì)菌甲無(wú)致病性,對(duì)應(yīng)R型細(xì)菌;注射活菌乙的鼠4死亡,說(shuō)明細(xì)菌乙有致病性,對(duì)應(yīng)S型細(xì)菌,A正確;步驟②是將活菌甲與加熱致死的細(xì)菌乙混合后注射到小鼠體內(nèi),結(jié)果鼠2死亡,將從鼠2體內(nèi)分離出的活菌乙注射到鼠4體內(nèi),導(dǎo)致鼠4死亡,說(shuō)明有部分活菌甲轉(zhuǎn)化為活菌乙,且轉(zhuǎn)化的性狀能夠遺傳,因此鼠2血液中含有的活菌類型有甲和乙,B正確;結(jié)合對(duì)B選項(xiàng)的分析可推知:死菌乙中某種轉(zhuǎn)化因子能使活菌甲轉(zhuǎn)化成活菌乙,C正確;鼠5經(jīng)過(guò)步驟⑤后死亡的原因是活菌乙能使鼠致死,活菌甲不具有致死效應(yīng),D錯(cuò)誤。學(xué)習(xí)主題二噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)任務(wù)一請(qǐng)你根據(jù)教材P45圖3-6回答下列有關(guān)處理方法的問(wèn)題:1.兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中,為什么要分別用35S和32P標(biāo)記噬菌體?為什么不能用14C或18O或3H進(jìn)行標(biāo)記?
提示:35S和32P可以分別標(biāo)記噬菌體的蛋白質(zhì)外殼和DNA,用不同的放射性同位素標(biāo)記噬菌體,可以探究是何種成分侵染大腸桿菌。因?yàn)槭删w的蛋白質(zhì)和DNA中都含有C、H、O,結(jié)果無(wú)法區(qū)分,所以不能用這三種元素進(jìn)行標(biāo)記。2.?dāng)嚢韬碗x心的目的分別是什么?
3.請(qǐng)根據(jù)噬菌體的代謝特點(diǎn),分析能否直接利用分別含放射性同位素35S和32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)噬菌體。
提示:攪拌的目的是使吸附在細(xì)菌表面的噬菌體與細(xì)菌分離。離心的目的是讓上清液中析出重量較輕的T2噬菌體外殼,而離心管的沉淀物中留下被感染的大腸桿菌。提示:不能。因?yàn)椴《緹o(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu),其體內(nèi)缺少完整的獨(dú)立生活的酶系統(tǒng),專營(yíng)活細(xì)胞內(nèi)寄生生活,病毒在普通培養(yǎng)基上無(wú)法生存。任務(wù)二請(qǐng)你根據(jù)教材P45圖3-6回答下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析的問(wèn)題:1.兩個(gè)分組實(shí)驗(yàn)的結(jié)果中,對(duì)放射性分布的描述是放射性“有、無(wú)”還是“高、低”?
2.噬菌體侵染大腸桿菌實(shí)驗(yàn),除了能證明DNA是遺傳物質(zhì)外,還能得出哪些結(jié)論?提示:高、低。提示:本實(shí)驗(yàn)還能間接證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個(gè)特點(diǎn):①DNA使前后代保持一定的連續(xù)性(即DNA復(fù)制);②DNA能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成,從而控制生物的新陳代謝過(guò)程和性狀?!局攸c(diǎn)筆記】同位素標(biāo)記法在噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用分析(1)用哪種標(biāo)記元素。若用32P和35S,則分別標(biāo)記了DNA和蛋白質(zhì),若用C、H、O等,則同時(shí)標(biāo)記了DNA和蛋白質(zhì),無(wú)法將二者區(qū)分開(kāi)。(2)注意標(biāo)記對(duì)象是噬菌體還是細(xì)菌,標(biāo)記對(duì)象不同對(duì)應(yīng)結(jié)果不同,具體見(jiàn)下表:
噬菌體細(xì)菌子代噬菌體DNA32P31P32P(少數(shù))、31P(全部)蛋白質(zhì)35S32S32SDNA和蛋白質(zhì)14C、3H、18O、15N12C、1H、16O、14NC、H、O、N的兩種同位素都有名師提醒標(biāo)記T2噬菌體的三個(gè)“不能”(1)不能用培養(yǎng)基直接培養(yǎng)來(lái)獲得含放射性同位素標(biāo)記的T2噬菌體,因?yàn)椴《局荒茉谒拗骰罴?xì)胞中進(jìn)行代謝、增殖,故應(yīng)先通過(guò)培養(yǎng)獲得含放射性同位素標(biāo)記的大腸桿菌,再用這些大腸桿菌來(lái)培養(yǎng)T2噬菌體。(2)不能用35S和32P標(biāo)記同一T2噬菌體,因?yàn)榉派湫詸z測(cè)時(shí)只能檢測(cè)到是否具有放射性,不能確定是何種元素的放射性。1.實(shí)驗(yàn)思路S是蛋白質(zhì)特有的元素,P幾乎都存在于噬菌體DNA分子中,用放射性同位素32P和35S分別標(biāo)記噬菌體的DNA和蛋白質(zhì),直接地、單獨(dú)地觀察它們各自的作用。2.噬菌體侵染細(xì)菌的過(guò)程3.噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)過(guò)程、現(xiàn)象及結(jié)論項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)組別一二實(shí)驗(yàn)過(guò)程①標(biāo)記大腸桿菌含35S標(biāo)記的培養(yǎng)基+無(wú)標(biāo)記的大腸桿菌→含35S標(biāo)記的大腸桿菌含32P標(biāo)記的培養(yǎng)基+無(wú)標(biāo)記的大腸桿菌→含32P標(biāo)記的大腸桿菌②標(biāo)記噬菌體無(wú)標(biāo)記的T2噬菌體→侵染含35S標(biāo)記的大腸桿菌→含35S標(biāo)記的T2噬菌體無(wú)標(biāo)記的T2噬菌體→侵染含32P標(biāo)記的大腸桿菌→含32P標(biāo)記的T2噬菌體③噬菌體侵染細(xì)菌含35S標(biāo)記的T2噬菌體+無(wú)標(biāo)記的大腸桿菌→混合培養(yǎng)(攪拌后離心)含32P標(biāo)記的T2噬菌體+無(wú)標(biāo)記的大腸桿菌→混合培養(yǎng)(攪拌后離心)實(shí)驗(yàn)結(jié)果上清液放射性很高,沉淀物放射性很低上清液放射性很低,沉淀物放射性很高實(shí)驗(yàn)分析T2噬菌體侵染大腸桿菌時(shí),含32P標(biāo)記的T2噬菌體DNA進(jìn)入了大腸桿菌體內(nèi),而含35S標(biāo)記的T2噬菌體蛋白質(zhì)外殼并未進(jìn)入大腸桿菌體內(nèi)結(jié)論直接證明:DNA是T2噬菌體的遺傳物質(zhì)間接證明:①DNA能夠自我復(fù)制,使生物體前后代保持一定的連續(xù)性,維持遺傳性狀的穩(wěn)定性;②DNA能控制蛋白質(zhì)的生物合成,從而控制生物體的代謝和性狀4.噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)的三次涉及大腸桿菌、兩個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)
(1)三次涉及大腸桿菌(2)兩個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)——“保溫”與“攪拌”①保溫時(shí)間要合適——T2噬菌體被32P標(biāo)記的一組實(shí)驗(yàn)中,保溫時(shí)間過(guò)短或過(guò)長(zhǎng)都會(huì)使上清液中放射性偏高:a.保溫時(shí)間過(guò)短,含32P標(biāo)記的T2噬菌體DNA沒(méi)有進(jìn)入大腸桿菌;b.保溫時(shí)間過(guò)長(zhǎng),大腸桿菌裂解,釋放出了組裝好的子代T2噬菌體,離心后子代T2噬菌體分布于上清液中。②攪拌要充分——攪拌的目的是使吸附在大腸桿菌上的T2噬菌體、蛋白質(zhì)外殼與大腸桿菌分離,攪拌不充分,35S標(biāo)記的T2噬菌體及蛋白質(zhì)外殼沒(méi)有和大腸桿菌分離而隨大腸桿菌到了沉淀物中,這樣會(huì)造成沉淀物放射性偏高。1.(合格考)有關(guān)32P標(biāo)記的T2噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn),敘述正確的是(
)A.該實(shí)驗(yàn)中T2噬菌體的DNA是用32P直接標(biāo)記的B.?dāng)嚢璧哪康氖亲屔锨逡何龀鲋亓枯^輕的T2噬菌體C.離心的目的是使吸附在細(xì)菌上的噬菌體與細(xì)菌分離D.保溫時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短都會(huì)導(dǎo)致上清液放射性偏高答案:D解析:噬菌體是病毒,不能在培養(yǎng)基上獨(dú)立生存,因此不能用含32P的培養(yǎng)基直接標(biāo)記噬菌體,應(yīng)該先用含32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌,再用被32P標(biāo)記的大腸桿菌培養(yǎng)噬菌體,A錯(cuò)誤;噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中,攪拌的目的是使吸附在細(xì)菌上的噬菌體外殼與細(xì)菌分離;離心的目的是使培養(yǎng)液分層,形成上清液和沉淀物,B、C錯(cuò)誤;用32P標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌,保溫時(shí)間過(guò)短,部分噬菌體沒(méi)有侵染到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi),經(jīng)離心后分布于上清液中,使上清液出現(xiàn)放射性;保溫時(shí)間過(guò)長(zhǎng),噬菌體在大腸桿菌內(nèi)增殖后釋放子代,經(jīng)離心后分布于上清液中,也會(huì)使上清液的放射性含量升高,D正確。2.(合格考)某研究人員模擬赫爾希和蔡斯的T2噬菌體侵染大腸桿菌實(shí)驗(yàn),進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):①用32P標(biāo)記的噬菌體侵染未標(biāo)記的大腸桿菌;②用未標(biāo)記的噬菌體侵染35S標(biāo)記的大腸桿菌;③用3H標(biāo)記的噬菌體侵染未標(biāo)記的大腸桿菌。一段時(shí)間后進(jìn)行離心,檢測(cè)到放射性存在的主要部位依次是(
)A.沉淀物、上清液、沉淀物和上清液B.沉淀物、沉淀物、沉淀物和上清液C.沉淀物、上清液、沉淀物D.上清液、上清液、沉淀物和上清液答案:B解析:在該實(shí)驗(yàn)中,沉淀物的主要成分是細(xì)菌,上清液的主要成分為噬菌體外殼。①用32P只能標(biāo)記噬菌體的DNA,在該實(shí)驗(yàn)中,噬菌體的DNA會(huì)進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi),放射性主要出現(xiàn)在沉淀物中;②直接標(biāo)記細(xì)菌,放射性主要出現(xiàn)在沉淀物中;③用3H可以標(biāo)記噬菌體的蛋白質(zhì)外殼和DNA,在該實(shí)驗(yàn)中,噬菌體的蛋白質(zhì)外殼不會(huì)進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi),而DNA進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi),故放射性會(huì)同時(shí)出現(xiàn)在上清液和沉淀物中。3.(等級(jí)考)赫爾希和蔡斯的T2噬菌體侵染大腸桿菌實(shí)驗(yàn)證實(shí)了DNA是遺傳物質(zhì),下列關(guān)于該實(shí)驗(yàn)的敘述正確的是(
)A.實(shí)驗(yàn)中可用15N代替32P標(biāo)記DNAB.噬菌體外殼蛋白是大腸桿菌編碼的C.噬菌體DNA的合成原料來(lái)自大腸桿菌D.實(shí)驗(yàn)證明了大腸桿菌的遺傳物質(zhì)是DNA答案:C解析:N在噬菌體外殼蛋白與DNA中都存在,本實(shí)驗(yàn)要標(biāo)記DNA的特有元素,故不能用15N代替32P,A錯(cuò)誤;噬菌體外殼蛋白是由噬菌體的遺傳物質(zhì)編碼的,B錯(cuò)誤;噬菌體侵染大腸桿菌后,以自身DNA為模板,利用大腸桿菌中的4種脫氧核苷酸為原料,合成子代DNA,C正確;本實(shí)驗(yàn)證明噬菌體的遺傳物質(zhì)是DNA,D錯(cuò)誤。4.(等級(jí)考)(不定項(xiàng))下列有關(guān)噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)的敘述,不正確的是(
)A.將噬菌體接種在含有32P的培養(yǎng)基中可獲得32P標(biāo)記的噬菌體B.與被標(biāo)記的噬菌體混合的細(xì)菌也要用放射性同位素標(biāo)記C.實(shí)驗(yàn)一中,培養(yǎng)時(shí)間過(guò)短會(huì)影響上清液中放射性物質(zhì)的含量D.實(shí)驗(yàn)二中,培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)影響上清液中放射性物質(zhì)的含量答案:ABC解析:噬菌體是病毒,沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu),不能在培養(yǎng)基上獨(dú)立生存,因此將噬菌體接種在含有32P的培養(yǎng)基中不能獲得32P標(biāo)記的噬菌體,A錯(cuò)誤;與被標(biāo)記的噬菌體混合的細(xì)菌不能用放射性同位素標(biāo)記,B錯(cuò)誤;實(shí)驗(yàn)一中,35S標(biāo)記的是噬菌體的蛋白質(zhì)外殼,噬菌體侵染細(xì)菌時(shí)蛋白質(zhì)外殼沒(méi)有進(jìn)入細(xì)菌,經(jīng)過(guò)攪拌后與細(xì)菌分開(kāi),再經(jīng)過(guò)離心后分布在上清液中,因此培養(yǎng)時(shí)間過(guò)短不會(huì)影響上清液中放射性物質(zhì)的含量,C錯(cuò)誤;實(shí)驗(yàn)二中,培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致子代噬菌體釋放,會(huì)影響上清液中放射性物質(zhì)的含量,D正確。學(xué)習(xí)主題三DNA是主要的遺傳物質(zhì)任務(wù)一病毒中分別有幾種核酸、核苷酸、五碳糖和堿基?病毒的遺傳物質(zhì)是否都是RNA?提示:一種、四種、一種和四種;不一定,如噬菌體的遺傳物質(zhì)是DNA。任務(wù)二細(xì)胞中含有幾種核酸、核苷酸、五碳糖及堿基?細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)是DNA,那么細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)是DNA還是RNA?提示:兩種、八種、兩種和五種;細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)也是DNA。任務(wù)三為什么說(shuō)DNA是主要的遺傳物質(zhì)?提示:因?yàn)榇蟛糠稚锏倪z傳物質(zhì)是DNA,所以DNA是主要的遺傳物質(zhì)。任務(wù)四小麥根尖細(xì)胞中的“核酸”和“遺傳物質(zhì)”是否含義相同?為什么?
提示:不相同,因?yàn)樾←湼饧?xì)胞中有DNA和RNA兩種核酸,但遺傳物質(zhì)僅指DNA。任務(wù)五
HIV和噬菌體中的堿基種類有何區(qū)別?提示:HIV中含尿嘧啶(U),不含胸腺嘧啶(T),而噬菌體中含胸腺嘧啶(T),不含尿嘧啶(U)?!局攸c(diǎn)筆記】1.對(duì)“DNA是主要的遺傳物質(zhì)”的理解“DNA是主要的遺傳物質(zhì)”是對(duì)整個(gè)生物界而言的。因?yàn)榻^大多數(shù)生物的遺傳物質(zhì)是DNA,只有極少數(shù)病毒(RNA病毒)的遺傳物質(zhì)是RNA,所以說(shuō)DNA是主要的遺傳物質(zhì)。對(duì)某一生物來(lái)說(shuō),其遺傳物質(zhì)只能是一種,即DNA或RNA。2.誤區(qū)警示遇到判斷生物的遺傳物質(zhì)的試題時(shí),需要注意問(wèn)題的角度:看清是問(wèn)哪一種或哪一類生物的遺傳物質(zhì)還是問(wèn)整個(gè)生物界生物的遺傳物質(zhì)。如果是某種生物,那么其遺傳物質(zhì)是DNA或RNA。有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物和DNA病毒的遺傳物質(zhì)都是DNA,只有RNA病毒的遺傳物質(zhì)才是RNA。而整個(gè)生物界生物的遺傳物質(zhì)則主要是DNA。1.不同生物的遺傳物質(zhì)生物細(xì)胞生物非細(xì)胞生物類型真核生物原核生物多數(shù)病毒少數(shù)病毒實(shí)例真菌、原生生物、所有動(dòng)植物細(xì)菌、藍(lán)細(xì)菌、放線菌等噬菌體、乙肝病毒、天花病毒等HIV、SARS病毒、煙草花葉病毒等核酸種類DNA和RNADNA和RNADNARNA遺傳物質(zhì)DNADNADNARNA結(jié)果:絕大多數(shù)生物的遺傳物質(zhì)是DNA,只有少部分病毒的遺傳物質(zhì)是RNA結(jié)論:DNA是主要的遺傳物質(zhì)2.生物的遺傳物質(zhì)總結(jié)(1)生物的遺傳物質(zhì)是DNA或RNA。(2)既含有DNA,又含有RNA的生物和只含有DNA的生物,其遺傳物質(zhì)是DNA。(3)只含RNA的病毒中,RNA才作為遺傳物質(zhì)。(4)由于絕大多數(shù)生物的遺傳物質(zhì)是DNA,所以說(shuō)DNA是主要的遺傳物質(zhì)。(5)染色體不是遺傳物質(zhì),但卻是遺傳物質(zhì)的主要載體。3.探究遺傳物質(zhì)的三種方法1.(合格考)下列有關(guān)遺傳物質(zhì)的敘述,正確的是(
)A.DNA是所有生物的遺傳物質(zhì)B.酵母菌的遺傳物質(zhì)主要是DNAC.艾滋病病毒的遺傳物質(zhì)是DNA或RNAD.病毒的遺傳物質(zhì)是DNA或RNA答案:D解析:具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物遺傳物質(zhì)都是DNA,不具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的病毒的遺傳物質(zhì)是DNA或RNA,一種生物體內(nèi)的核酸可能有兩種,但遺傳物質(zhì)只有一種。2.(等級(jí)考)下列實(shí)驗(yàn)及結(jié)果中,能作為直接證據(jù)說(shuō)明“核糖核酸是遺傳物質(zhì)”的是(
)A.紅花植株與白花植株雜交,F(xiàn)1為紅花,F(xiàn)2中紅花∶白花=3∶1B.病毒甲的RNA與病毒乙的蛋白質(zhì)混合后感染煙草只能得到病毒甲C.加熱殺死的S型細(xì)菌與R型活細(xì)菌混合培養(yǎng)后可分離出S型活細(xì)菌D.用放射性同位素標(biāo)記T2噬菌體外殼蛋白,在子代噬菌體中檢測(cè)不到放射性答案:B解析:紅花植株與白花植株雜交,F(xiàn)1為紅花,F(xiàn)2中紅花∶白花=3∶1,并不能直接證明核酸是遺傳物質(zhì),A錯(cuò)誤;病毒甲的RNA與病毒乙的蛋白質(zhì)混合后感染煙草只能得到病毒甲,可證明RNA(核糖核酸)是遺傳物質(zhì),B正確;加熱殺死的S型細(xì)菌與R型活細(xì)菌混合培養(yǎng)后可分離出S型活細(xì)菌,只能證明加熱殺死的S型細(xì)菌中含有某種促使R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌的“轉(zhuǎn)化因子”,并不能證明該轉(zhuǎn)化因子是何種物質(zhì),C錯(cuò)誤;用放射性同位素標(biāo)記T2噬菌體外殼蛋白,在子代噬菌體中檢測(cè)不到放射性,由于外殼蛋白沒(méi)有進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi),不能證明遺傳物質(zhì)是何種成分,D錯(cuò)誤。強(qiáng)化落實(shí)?學(xué)業(yè)達(dá)標(biāo)網(wǎng)絡(luò)建構(gòu)主干落實(shí)1.S型肺炎鏈球菌有莢膜,有毒;R型肺炎鏈球菌無(wú)莢膜,無(wú)毒。2.在肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中,只有S型細(xì)菌的DNA才能使R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌,即轉(zhuǎn)化因子是DNA。3.T2噬菌體由蛋白質(zhì)和DNA組成,僅蛋白質(zhì)分子中含有硫,磷幾乎都存在于DNA分子中。4.肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)都證明了DNA是遺傳物質(zhì)。5.煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)是RNA。6.由于絕大多數(shù)生物的遺傳物質(zhì)是DNA,因此說(shuō)DNA是主要的遺傳物質(zhì)。高效課堂?實(shí)踐運(yùn)用1.探索遺傳物質(zhì)的過(guò)程是漫長(zhǎng)的,直到20世紀(jì)初期,人們?nèi)云毡檎J(rèn)為蛋白質(zhì)是遺傳物質(zhì)。當(dāng)時(shí)人們作出判斷的理由不包括(
)A.不同生物的蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)上存在差異B.蛋白質(zhì)與生物的性狀密切相關(guān)C.蛋白質(zhì)比DNA具有更高的熱穩(wěn)定性,并且能夠自我復(fù)制D.蛋白質(zhì)中氨基酸的不同排列順序可能蘊(yùn)含大量遺傳信息答案:C解析:不同生物的蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)上存在差異,蛋白質(zhì)的不同結(jié)構(gòu)可能對(duì)應(yīng)不同的遺傳信息,A正確;作為遺傳物質(zhì),要能控制生物的性狀,而蛋白質(zhì)與生物的性狀密切相關(guān),B正確;蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性沒(méi)有DNA高,且不能自我復(fù)制,C錯(cuò)誤;作為遺傳物質(zhì)要能儲(chǔ)存大量的遺傳信息,而蛋白質(zhì)中氨基酸的不同排列順序可能蘊(yùn)含大量遺傳信息,D正確。2.肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中,發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)菌和含轉(zhuǎn)化因子的細(xì)菌分別是(
)A.R型細(xì)菌和S型細(xì)菌
B.R型細(xì)菌和R型細(xì)菌C.S型細(xì)菌和S型細(xì)菌
D.S型細(xì)菌和R型細(xì)菌答案:A解析:肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明已經(jīng)加熱殺死的S型細(xì)菌,含有某種促使R型活細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型活細(xì)菌的活性物質(zhì)——轉(zhuǎn)化因子。3.在噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中,下列對(duì)噬菌體外殼蛋白質(zhì)合成的描述中,正確的是(
)A.氨基酸原料和酶來(lái)自細(xì)菌B.氨基酸原料和酶來(lái)自噬菌體C.氨基酸原料來(lái)自細(xì)菌,酶來(lái)自噬菌體D.氨基酸原料來(lái)自噬菌體,酶來(lái)自細(xì)菌答案:A解析:噬菌體屬于病毒,沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu),在侵染細(xì)菌的過(guò)程中,噬菌體在自身遺傳物質(zhì)的作用下,利用細(xì)菌體內(nèi)的核糖體、酶和氨基酸原料等合成自身的組成成分,實(shí)現(xiàn)大量增殖。4.下列有關(guān)生物的遺傳物質(zhì)的敘述,錯(cuò)誤的是(
)A.真核生物的遺傳物質(zhì)是DNAB.原核生物的遺傳物質(zhì)是RNAC.病毒的遺傳物質(zhì)是DNA或RNAD.沒(méi)有哪一個(gè)實(shí)驗(yàn)?zāi)茏C明DNA是主要的遺傳物質(zhì)答案:B解析:真核生物的遺傳物質(zhì)是DNA,A正確;原核生物的遺傳物質(zhì)是DNA,B錯(cuò)誤;病毒只含有一種核酸,其遺傳物質(zhì)是DNA或RNA,C正確;DNA是主要的遺傳物質(zhì)是多個(gè)實(shí)驗(yàn)綜合分析得出的,D正確。5.下圖表示科研人員探究煙草花葉病毒(TMV)遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)過(guò)程,由此可以判斷(
)A.水和苯酚的作用是分離病毒的蛋白質(zhì)和RNAB.TMV的蛋白質(zhì)沒(méi)有進(jìn)入煙草細(xì)胞中C.侵入煙草細(xì)胞的RNA含有A、T、G、C四種堿基D.RNA是TMV的主要遺傳物質(zhì)答案:A解析:從圖示可知,水和苯酚的作用是分離病毒的蛋白質(zhì)和RNA,A正確;能將TMV的蛋白質(zhì)接種到正常煙草葉片細(xì)胞內(nèi),即TMV的蛋白質(zhì)進(jìn)入了煙草細(xì)胞中,B錯(cuò)誤;RNA含有A、U、G、C四種堿基,C錯(cuò)誤;本實(shí)驗(yàn)證明RNA是TMV的遺傳物質(zhì),而不能證明RNA是TMV的主要遺傳物質(zhì),D錯(cuò)誤。6.(不定項(xiàng))用32P標(biāo)記的噬菌體侵染未被標(biāo)記的大腸桿菌,侵染一段時(shí)間后攪拌、離心得到上清液和沉淀物,檢測(cè)上清液中放射性32P約占初始標(biāo)記噬菌體放射性的30%。在實(shí)驗(yàn)時(shí)間內(nèi),被侵染細(xì)菌的存活率接近100%。下列相關(guān)敘述正確的是(
)A.離心后大腸桿菌主要分布在沉淀物中B.沉淀物的放射性主要來(lái)自噬菌體的DNAC.上清液具有放射性的原因是保溫時(shí)間過(guò)長(zhǎng)D.噬菌體遺傳特性的傳遞過(guò)程中起作用的是DNA答案:ABD解析:由題干“在實(shí)驗(yàn)時(shí)間內(nèi),被侵染細(xì)菌的存活率接近100%”可知,被侵染的大腸桿菌還沒(méi)有裂解,故離心后大腸桿菌主要分布在沉淀物中,A正確;32P標(biāo)記的是噬菌體的DNA,故沉淀物的放射性主要來(lái)自噬菌體的DNA,B正確;該實(shí)驗(yàn)中上清液具有放射性的原因是保溫時(shí)間過(guò)短,有部分標(biāo)記的噬菌體還未來(lái)得及侵染大腸桿菌,C錯(cuò)誤。7.下圖是赫爾希和蔡斯做的T2噬菌體侵染大腸桿菌實(shí)驗(yàn)的部分圖解,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)35S標(biāo)記的是噬菌體的_____________,對(duì)該噬菌體進(jìn)行標(biāo)記的具體方法步驟是________________________________________________________________________。(2)正常情況下,上清液的放射性____(填“高”或“低”);如果攪拌不充分,會(huì)導(dǎo)致________出現(xiàn)放射性。(3)噬菌體侵染細(xì)菌之后,合成子代噬菌體需要噬菌體提供的___________和細(xì)菌提供的________________。(選填“DNA模板”、“脫氧核苷酸”、“氨基酸”)(4)圖中所示實(shí)驗(yàn)并不能證明噬菌體的遺傳物質(zhì)是DNA,要證明噬菌體的遺傳物質(zhì)是DNA,還需要設(shè)置另外一組實(shí)驗(yàn),即用____標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌,預(yù)測(cè)在正常情況下該組實(shí)驗(yàn)中放射性較高的部位是________(填“上清液”或“沉淀物”)。蛋白質(zhì)(外殼)
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