微生物和微生物學(xué)檢驗(yàn)

<微生物和微生物學(xué)檢驗(yàn)>右江民族醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)系潘國(guó)剛<微生物和微生物學(xué)檢驗(yàn)>緒論一、微生物〔microorganisms〕：概念：一群肉眼看不見(jiàn)的微小生物，包括：細(xì)菌、螺旋體、立克次體、衣原體、支原體、放線菌〔原核〕、病毒〔非細(xì)胞〕、真菌〔真核〕。原核與真核細(xì)胞的區(qū)別：細(xì)胞核的區(qū)別古細(xì)菌：(Archaeobacteria)嵌合進(jìn)化或共生進(jìn)化真細(xì)菌：真核生物：微生物的分類：微生物與人類的關(guān)系：〔1〕大多數(shù)不致病，甚至是對(duì)人、動(dòng)、植物有益和必需的，如：固氮菌；釀酒、制醋、抗生素、腸道正常菌群?！?〕病原微生物:pathogenicmicroorganisms二、微生物學(xué)(microbiology)：微生物的進(jìn)化分類、生命活動(dòng)規(guī)律及與動(dòng)植物、人類、自然相互關(guān)系。按研討對(duì)象分：細(xì)菌、病毒、真菌學(xué)按運(yùn)用領(lǐng)域分：工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)按研討方向分：根底微生物、分子微生物學(xué)、微生態(tài)學(xué)等醫(yī)學(xué)微生物學(xué)(medicalmicrobiology)：與醫(yī)學(xué)有關(guān)病原微生物的生物性狀、致病機(jī)理、免疫性及有關(guān)技術(shù)和實(shí)際的運(yùn)用。臨床微生物學(xué)(clinicalmicrobiology)：測(cè)重研討感染性疾病診斷方法，提供診斷根據(jù)和指點(diǎn)用藥。三、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)開(kāi)展簡(jiǎn)史1、微生物學(xué)的閱歷時(shí)期：〔１〕釀酒、制醋、腌臘等食品消費(fèi)、保管；〔２〕師道南<天愚集>：清乾隆年間，“東死鼠，西死鼠，人見(jiàn)死鼠如見(jiàn)虎。鼠死未幾日，人死如圻堵〞；“三人行未十步路，忽死兩人橫截路〞〔３〕人痘接種法：免疫最早概念。2．實(shí)驗(yàn)微生物學(xué)時(shí)期〔17世紀(jì)始〕：顯微鏡＋培育基〔１〕微生物的發(fā)現(xiàn)：列文虎克、巴斯德〔發(fā)現(xiàn)微生物的作用，創(chuàng)建巴氏消毒法〕、李斯特、郭霍氏〔固體培育、染色技術(shù)〕郭霍氏法那么：①、②、③、④。逐漸被淘汰。新的病原確定方法：核酸確定法〔２〕免疫學(xué)的興起、分別：牛痘、巴斯德〔霍亂、炭疽、狂犬疫苗〕、白喉抗毒素動(dòng)物血清治愈白喉?！玻场晨股氐陌l(fā)現(xiàn)：目前遇到的問(wèn)題：濫用導(dǎo)致耐藥性增高3．現(xiàn)代微生物學(xué)時(shí)期：近二、三十年〔1〕新病原微生物的發(fā)現(xiàn)a．傳統(tǒng)病原卷土重來(lái)；b．新型病原?！?〕致病機(jī)理的深化研討a．采用新技術(shù)；b.各種致病要素的分子機(jī)理及調(diào)控?！?〕診斷技術(shù)的開(kāi)展：三大標(biāo)志技術(shù)各種分子生物學(xué)技術(shù)：核酸雜交，PCR，微量化，自動(dòng)化?！?〕各種新型疫苗的研制傳統(tǒng)疫苗、亞單位疫苗、基因工程疫苗、DNA疫苗。〔5〕免疫學(xué)獨(dú)立遠(yuǎn)遠(yuǎn)超越感染免疫的范疇。思索：〔１〕預(yù)測(cè)微生物學(xué)開(kāi)展下一階段；〔２〕目前科學(xué)界研討熱點(diǎn)？4．基因組微生物學(xué)〔１〕微生物在基因組前時(shí)代在生物學(xué)研討中的位置；〔２〕構(gòu)造簡(jiǎn)單，可做為模型，方式生物；〔３〕在基因組時(shí)代，作為急先鋒；〔４〕微生物基因組的研討勝利，必然極大地改動(dòng)微生物學(xué)科現(xiàn)狀。因此，微生物學(xué)研討正面臨前所未有地機(jī)遇和挑戰(zhàn)。從上看出，醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的開(kāi)展，也是各種技術(shù)方法的開(kāi)展，也是臨床微生物學(xué)的開(kāi)展歷史。四、臨床微生物學(xué)的義務(wù)１．研討感染性疾病的病原體特征：傳統(tǒng)的病原微生物條件致病菌２．提供快速、準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷；３．指點(diǎn)合理運(yùn)用抗生素；目前檢驗(yàn)科的主要義務(wù)。４．對(duì)醫(yī)院感染進(jìn)展監(jiān)控。五、臨微學(xué)習(xí)方法：重要性：與畢業(yè)后任務(wù)嚴(yán)密相關(guān)?！玻薄称匠Ａ粢忸A(yù)習(xí)、復(fù)習(xí)；〔２〕對(duì)內(nèi)容上，緊緊圍繞診斷，診斷又是由各種典型特性建立的方法來(lái)進(jìn)展的抓特性、去共性〔３〕留意新動(dòng)向。第一篇微生物學(xué)

細(xì)菌學(xué)總論一、細(xì)菌(bacterium)的形狀與構(gòu)造〔一〕形狀：個(gè)體微小、形狀各異球菌〔coccus〕桿菌(Bacillus)弧菌與彎曲菌螺旋菌及螺旋體不規(guī)那么形。〔二〕構(gòu)造：

１．根本構(gòu)造：包括胞壁、胞膜、胞漿及核質(zhì)細(xì)胞壁：主要成分――肽聚糖。

Ｎ－乙酰胞壁酸聚糖骨架β－１.4糖苷鍵Ｇ－Ｎ－乙酰葡糖胺四肽側(cè)鏈Ｇ＋

五肽橋〔苷氨酸〕Ｇ＋菌肽聚糖厚、層數(shù)多、立體狀鞏固。圖金黃色葡萄球糖細(xì)胞細(xì)胞壁的肽聚糖構(gòu)造圖大腸桿菌細(xì)胞壁的肽聚糖構(gòu)造

膜磷壁酸Ｇ＋菌細(xì)胞壁壁磷壁酸特殊構(gòu)造外表蛋白：SPA、M蛋白Ｇ－菌細(xì)胞壁磷脂特殊構(gòu)造脂蛋白類脂Ａ：毒性部分(外膜)脂多糖〔LPS，內(nèi)毒素〕：中心多糖：屬和組特異特異多糖：種和型特異Ｇ＋和Ｇ－菌細(xì)胞壁差別：特征革蘭氏陽(yáng)性菌

革蘭氏陰性菌

強(qiáng)度較堅(jiān)韌較疏松厚度厚，20～80nm薄，5～10nm肽聚糖層數(shù)多，可達(dá)50層少，1～3層肽聚糖含量多，可占胞壁干重50～80%少，占胞壁干重10～20%磷壁酸+-外膜-+結(jié)構(gòu)三維空間（立體結(jié)構(gòu)）二維空間（平面結(jié)構(gòu)）Ｌ型細(xì)菌：細(xì)胞壁缺陷型細(xì)菌。高滲培育基中：油煎蛋樣菌落。在臨床上留意Ｌ型帶來(lái)的漏診。2.特殊構(gòu)造莢膜(capsule)：〔１〕維護(hù)作用；〔２〕致病作用：侵襲力；〔３〕免疫原性；〔４〕鑒別與分型。鞭毛(flagellum)：運(yùn)動(dòng)器官，Ｈ抗原。菌毛(Pilus)：〔１〕普通菌毛：粘附素；〔２〕性菌毛：１－４根，長(zhǎng)而粗，Ｆ＋菌轉(zhuǎn)移Ｆ質(zhì)粒，耐藥及毒力質(zhì)粒。芽胞(Spore)：不利環(huán)境中的一種抵抗方式，是休眠體而非繁衍體。二、細(xì)菌的繁衍與新陳代謝：掌握幾個(gè)概念：１．自養(yǎng)菌、異養(yǎng)菌；２．需氧菌、專性厭氧菌、兼性厭氧菌、微需氧菌。專性厭氧菌有氧不生長(zhǎng)，緣由有二：①厭氧菌缺乏細(xì)胞色素與細(xì)胞色素氧化酶，因此不能氧化那些氧化復(fù)原電勢(shì)較高的氧化型物質(zhì)。②厭氧菌缺乏過(guò)氧化氫酶、過(guò)氧化物酶和超氧化物歧化酶,不能去除有氧環(huán)境下所產(chǎn)生的超氧離子〔O2-〕和過(guò)氧化氫〔H2O2〕，因此難以存活。３．群體細(xì)菌的生長(zhǎng)繁衍曲線：

緩慢期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期、衰退期四、消毒與滅菌掌握幾個(gè)概念：消毒〔Disinfection〕：殺滅病原微生物的方法。滅菌〔Sterilization〕：殺滅物體上一切的微生物〔包括病原體和非病原體的繁衍體和芽胞〕的方法。無(wú)菌〔Asepsis〕：物體上或容器內(nèi)無(wú)活菌存在的意思。防腐〔Antisepsis〕：防止或抑制微生物生長(zhǎng)繁衍的方法。五、微生物的遺傳變異〔一〕遺傳變異的物質(zhì)根底染色體質(zhì)粒〔plasmid〕：細(xì)菌存在于染色體外的少部分〔約1～2%〕DNA，可決議細(xì)菌的一些生物學(xué)特性。轉(zhuǎn)位因子：插入順序、轉(zhuǎn)座子、轉(zhuǎn)座噬菌體質(zhì)粒的生物學(xué)性質(zhì)：1．質(zhì)粒并非細(xì)菌生存所必不可少的遺傳物質(zhì)。2．質(zhì)粒的傳送〔轉(zhuǎn)移〕是細(xì)菌遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移的一個(gè)重要方式。3．質(zhì)粒可自行失去或經(jīng)人工處置而消逝。4．質(zhì)?？梢元?dú)立復(fù)制。5．可有幾種質(zhì)粒同時(shí)共存在于一個(gè)細(xì)菌內(nèi)?！捕臣?xì)菌的變異景象形狀與構(gòu)造變異培育特性變異毒力變異耐藥性變異〔三〕細(xì)菌變異的機(jī)制突變基因的轉(zhuǎn)移和重組轉(zhuǎn)化〔transformation〕是受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段，經(jīng)過(guò)與染色體重組，獲得了供體菌的部分遺傳特性。轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)是噬菌體為媒介，把供細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi)，導(dǎo)致后者基因改動(dòng)的過(guò)程。接合(conjugation)是兩個(gè)經(jīng)過(guò)直接接觸，在暫時(shí)的溝通中進(jìn)展基因轉(zhuǎn)移的過(guò)程。(四)遺傳變異研討的實(shí)踐意義在細(xì)菌分類上的運(yùn)用在診斷中的運(yùn)用在預(yù)防中的運(yùn)用在治療中的運(yùn)用檢查致癌物質(zhì)的作用在遺傳工程方面的運(yùn)用六、微生物的致病性與感染〔一〕微生物與宿主的關(guān)系常居菌

正常菌群過(guò)路菌〔１〕抵抗力下降；〔２〕長(zhǎng)期化療、放療、條件致病菌：免疫抑制劑患者；〔３〕外傷；〔４〕菌群失調(diào)：菌群失調(diào)癥。正常菌群的生理意義：〔１〕生物拮抗；〔２〕促進(jìn)機(jī)體免疫；〔３〕與衰老有關(guān)：雙歧桿菌；〔４〕合成維生素和細(xì)菌素?！捕臣?xì)菌的致病物質(zhì)及作用：１．細(xì)菌的外表成分：參與粘附、定植和侵入；２．毒素及毒性蛋白和酶：外毒素：內(nèi)毒素：細(xì)菌外毒素舉例細(xì)菌種類革蘭氏染色引起疾病毒素名稱毒素作用方式白喉?xiàng)U菌+白喉白喉毒素壞死性霍亂弧菌-霍亂腸毒素引起小腸過(guò)度分泌液體鼠疫桿菌-鼠疫鼠疫毒素可能壞死性破傷風(fēng)桿菌+破傷風(fēng)破傷風(fēng)溶血毒素溶血性心臟毒素破傷風(fēng)痙攣毒素引起骨骼肌痙攣產(chǎn)生莢膜桿菌+

氣性壞疽α-毒素溶血性卵磷脂酶，壞死性β-毒素溶血性心臟毒素λ-毒素溶蛋白性外毒素與內(nèi)毒素的主要區(qū)別區(qū)別要點(diǎn)外毒素內(nèi)毒素存在部位由活的細(xì)菌釋放至細(xì)菌體外為細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)成份，菌體崩解后釋出細(xì)菌種類以革蘭氏陽(yáng)性菌多見(jiàn)革蘭氏陰性菌多見(jiàn)化學(xué)組成蛋白質(zhì)（分子量27，000～900，000）磷脂一多糖一蛋白質(zhì)復(fù)合物（毒性主要為類脂A）穩(wěn)定性不穩(wěn)定，60℃以上能迅速破壞耐熱，60℃耐受數(shù)小時(shí)毒性作用強(qiáng)，微量對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有致死作用（以u(píng)g計(jì)量）。各種外毒素有選擇作用，引起特殊病變，不引起宿主發(fā)熱反應(yīng)。抑制蛋白質(zhì)合成，有細(xì)胞毒性、神經(jīng)毒性、紊亂水鹽代謝等稍弱，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致死作用的量比外毒素為大。各種細(xì)菌內(nèi)素的毒性作用大致相同。引起發(fā)熱、彌漫性血管內(nèi)凝血、粒細(xì)胞減少血癥